粉防已碱对肾型高血压左室肥厚大鼠心肌ATP酶活性的影响*
作者：陆泽安 李庆平 饶曼人 余细勇 林曙光
单位：陆泽安 李庆平 饶曼人 (南京医科大学心血管药理研究室，南京 210029)；余细勇 林曙光 广东省心血管病研究所，广州 510080
关键词：粉防己碱;；肾型高血压;；左室肥厚；Na+,K+-ATP酶； Ca2+-ATP酶
中国药理学通报990416
摘要 目的 观察粉防己碱对肾型高血压左室肥厚大鼠心肌ATP酶活性的影响。方法 采用二肾一夹肾型高血压形成大鼠左室肥厚，用光电比色、无机磷显色法测定心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性。结果 左室肥厚组大鼠心肌细胞ATP酶活性明显降低，粉防己碱50mg.kg-1.d-1ig连续给药8 wk可逆转左室肥厚,显著增加心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Ca2+-ATP酶活性。结论 粉防己碱因其钙拮抗作用，在降低血压、逆转左室肥厚的同时，可使细胞膜钠泵活性、线粒体钙泵活性恢复。
, http://www.100md.com
中国图书分类号 R 284.1； R544.14； R 972.4
文献标识码 A 文章编号 1001-1978(1999)04-0340-03
Effects of tetrandrine on myocardial ATPase activities in
renovascular hypertensive rats with left ventricular hypertrophy
LU Ze-An, LI Qing-Ping, RAO Man-Ren,(Department of Cardiovascular Pharmacology, Nanjing Medical University, Nanjing 210029)
YU Xi-Yong, LIN Shu-Guang
, 百拇医药
Institute for Cardiovascular Diseases of Guangdong Province, Guangzhou 510080
ABSTRACT AIM Myocardial ATPase activities were assayed in tetrandrine treated two-kidney, one clip renovascular hypertensive(RH) rats with left ventricular hypertrophy(LVH). METHOD Colorimetric method was used to measure the cardiomyocytic membrane Na+, K+-ATPase and mitochondrial Ca2+-ATPase activities. RESULTS In RH-LVH rats, the cardiomyocytic membrane Na+,K+-ATPase and the mitochondrial Ca2+-ATPase showed reduced activities. Tetrandrine 50mg.kg-1.d-1 ig for 8 weeks elevated those two enzymatic activities significantly at the same time of reversing LVH. CONCLUSION Tetrandrine, as a calcium channel blockers, can reverse LVH induced by RH and elevate the cardiomyocytic membrane sodium pump and mitochondrial calcium pump activities.
, 百拇医药
KEY WORDS tetrandrine; renovascular hypertension; left ventricular hypertrophy; Na+,K+-ATPase; Ca2+-ATPase
细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Na+，K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶在维持心肌细胞内钙平衡的过程中起着较为重要的作用。高血压常并发左室肥厚(Left ventricular hypertrophy， LVH)，国际上已将LVH列为心血管疾病的一个独立的危险因子。 LVH时心肌细胞常有钙超载，而心肌细胞钙超载又可加剧心肌肥厚的发展而形成恶性循环[1]。本室以往的研究表明，钙拮抗剂间硝苯地平可明显增加肾型高血压LVH大鼠心肌细胞钠泵及钙泵活性[2]。粉防己碱(tetrandrine，Tet)亦系一种钙拮抗剂[3]，本实验以肾型高血压LVH大鼠为模型，观察其对心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 动物 雄性SD大鼠，清洁级，体重200～220g，购自南京医科大学实验动物中心。
1.2 肾型高血压左室肥厚大鼠病理模型[4] 动物麻醉后行左腰切口，暴露肾脏，分离肾动脉起始部，将一内径为0.2 mm的银夹夹住肾动脉，右肾不触及，缝合皮肤。术后每2周测定1次尾动脉血压，测定方法用RM-6200C四道生理记录仪(成都仪器厂)联用HX-Ⅱ型清醒小动物检压计(湖南医科大学生理教研室研制)测定清醒尾动脉收缩压。在术后4wk收缩压>20 kPa者视为已形成高血压。
1.3 药物 Tet购自成都高新植物原料药厂(批号980316，纯度98.4%)，依那普利(enalapril, Ena)由常州制药厂赠送，两药均为白色粉末。其它试剂均为市售分析纯。
1.4 给药方法 根据郑辉等[5]和Kuwajima等[4]的观察，大鼠在术后第8周即已形成明显左室肥厚，为观察药物对RH-LVH的逆转作用，取已形成高血压LVH的动物，自术后第9周起开始以灌胃法给药，每日给药1次，连续给药共8wk，自由饮用自来水。药物剂量：Tet 50mg.kg-1.d-1，Ena 6mg.kg-1.d-1。共分3组，即：Tet组，Ena组，左室肥厚组(RH-LVH),另取假手术组(只分离肾动脉而不上银夹)动物作为对照组(control)。RH-LVH组及control组灌服同体积生理盐水。
, 百拇医药
1.5 心肌细胞膜及线粒体制备 治疗期满，处死动物，剖开胸腔，取出心脏，冰生理盐水冲洗干净，剪去心房及大血管，沿室间隔剪开左右心室，以滤纸吸干水分后分别称量左心室(含室间隔)及右心室重量，计算心室湿重/体重指数(LVWW/BW及RVWW/BW)。根据以往本室经验,该指数可用以表示心肌肥厚程度。取心室肌约500mg，剪碎，加入缓冲液Ⅰ10ml(内含mmol.L-1:蔗糖250，组氨酸5.0，Na2-EDTA 5.0，去氧胆酸钠2.8，pH 6.8)，用组织匀浆器制成匀浆，双层纱布过滤，滤液离心(750×g，15min，4℃)后弃去沉淀，上清液经离心(9000×g，30 min，4℃)后，沉淀即为线粒体。上清液再经离心(40000×g，45 min，4℃)后，沉淀即为细胞膜。所得标本均用缓冲液Ⅱ(内含mmol.L-1:蔗糖250，组氨酸5.0，Na2-EDTA 1.0， pH 7.3)悬浮，置-75℃条件下保存备测。
, 百拇医药
Tab 1 Effect of Tet on the systolic blood pressure (SBP) and ventricle weight in renovascular hypertensive rats with LVH(
±s，n=6) Group
SBP/kPa
LVWW/BW
/mg.g-1
RVWW/BW
/mg.g-1
8 weeks after operation
, 百拇医药
with drugs for 8 weeks
Control
15.0±0.8
14.9±0.7
1.80±0.15
0.53±0.15
RH-LVH
25.5±2.4**
26.2±3.6**
2.84±0.33*
0.58±0.19
, 百拇医药
Tet
24.9±1.6**
14.7±1.6##
2.20±0.26#
0.59±0.07
Ena
25.8±2.2**
13.8±1.8##
2.03±0.50#
0.52±0.05
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LVWW: left ventricle wet weight; RVWW: right ventricle wet weight; *P<0.05，**P <0.01，vs control; #P<0.05，##P<0.01，vs RH-LVH.1.6 ATP酶活性的测定[6,7] 用无机磷显色、光电比色法测定Na+,K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性。Na+,K+-ATP酶活性为存在或缺乏哇巴因时的酶活性之差，Ca2+-ATP酶活性为存在或缺乏Ca2+及Na2-EDTA时的酶活性之差。蛋白定量用考马斯亮蓝法，以牛血清白蛋白为标准品(Sigma产品)；酶活性单位用μmol Pi.mg-1 Pro.h-1表示。
, 百拇医药
1.7 统计方法 所有数据均以±s表示，统计分析用t检验。
2 结果
2.1 对大鼠清醒尾动脉收缩压的影响 见表1。各组用于实验的动物数均为6只。给药前，对照组血压在正常范围内；其它3组血压均>24 kPa，各组间无差异。给药8 wk后，与给药前血压相比，对照组、RH-LVH组、Tet组及Ena组各组血压分别比给药前降低了0.01%，-0.03%，40.96%和46.51%，表明Tet和Ena均可明显降低血压。
2.2 对左室湿重的影响 从表1可见，RH-LVH组左室重量指数明显增高，为对照组的1.58倍；而Tet组，Ena组LVWW/BW比RH-LVH组分别降低22.5%和28.5%, 二药均可逆转左室肥厚。RVWW/BW各组间均无差异性。
, 百拇医药
2.3 对心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性的影响 对照组大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性为(19.63±2.41) μmol Pi.mg-1 Pro.h-1，RH-LVH组酶活性比对照组降低49.9%；Tet组、Ena组酶活性分别比RH-LVH组增高42.5%和50.2%。说明RH-LVH时Na+,K+-ATP酶活性降低，药物逆转性治疗后酶活性有不同程度的恢复(表2)。
2.4 对线粒体ATP酶活性的影响 对照组大鼠线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性分别为(12.93±2.71)和(15.43±3.01) μmol Pi.mg-1 Pr.h-1，RH-LVH组二种酶活性分别比对照组降低22.4%，45.6%。Tet组、Ena组Na+,K+-ATP酶活性分别比RH-LVH组增高32.9%和68.4%；Ca2+-ATP酶活性则分别比RH-LVH组增高71.9%和94.3%(见表2)。
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Tab 2 Effects of Tet on the cardiomyocytic ATPase
activities in renovascular hypertensive rats with LVH
(±s，n=6，μmol Pi.mg-1 Pr.h-1) Group
Na+,K+-ATPase
Ca2+-ATPase
mitochondrial
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membrane
mitochondrial
Control
19.63±2.41
12.93±2.71
15.43±3.01
RH-LVH
9.83±2.26*
10.04±2.03*
8.40±1.32*
, 百拇医药
Tet
17.09±2.73#
13.35±2.68#
14.44±2.14#
Ena
19.71±4.39#
16.91±1.25*#
16.32±3.05##
*P <0.05，**P<0.01， vs control; #P<0.05，##P<0.01， vs RH-LVH3 讨论
, 百拇医药
Ca2+与LVH的形成和发展有着密切的关系[8]。细胞膜Na+,K+-ATP酶通过泵入Na+、泵出Ca2+以维持细胞钙平衡，该酶活性降低可导致[Ca2+]i升高，[Ca2+]i增高后又可在膜内侧面与Mg2+竞争结合位点而抑制该酶的活性[9]。本实验结果表明，高血压合并LVH时，该酶活性明显降低，经Tet治疗后可使该酶活性明显增高，有助于减轻细胞钙超载。一般认为，高血压时钠泵活性降低除可能属于遗传性膜缺陷外(尤其是盐敏感性高血压的发生)[10]，还可能是受到分泌增加的内源性洋地黄样物质的抑制所致[11]；此外，由于心肌肥厚时心肌处于相对缺血状态，使钠泵活动所需的ATP减少，也是其活性降低的因素之一[13]。Tet为一种钙拮抗剂，用药后扩张外周血管降低心脏后负荷使心肌耗氧量降低，加之可扩张冠状动脉、改善心肌的能量代谢[12]，加上血压降低后内源性洋地黄样物质的分泌受抑制，因而可增加该酶活性。
, 百拇医药
线粒体作为参与调节细胞内Ca2+平衡的重要细胞器，通过膜上的Ca2+-ATP酶将胞液中的Ca2+向基质中转送，其活性的降低使线粒体摄钙减少。本实验结果显示RH-LVH组大鼠心肌细胞线粒体Ca2+-ATP酶活性比对照组低45.6%。经Tet治疗后，酶活性明显增加，有助于减轻细胞钙负荷，其作用机制可能与其降低血压、改善心肌缺血使线粒体呼吸趋向正常有关。
*广东省自然科学基金资助课题，No 960560
作者简介:陆泽安，男，37岁，博士研究生；
饶曼人，女，69岁，教授，博士生导师，研究室主任, 主要从事高血压左室肥厚的药物防治研究
参考文献
, 百拇医药 1 Inoue I, Matsuura H, Shingu T et al. Role of intracellular cation abnormalities in development of left ventricular hypertrophy. J Cardiovasc Pharmacol, 1991;17(suppl 2):S107～S109
2 奚 涛，饶曼人. 间硝苯地平对老龄肾性高血压大鼠心肌和脑微粒体Na+,K+-ATP酶，Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性的影响. 药学学报, 1994;29:809～13
3 Liu QY， Karpinski E， Pang PKT. Tetrandrine inhibits both T and L calcium channel currents in ventricular cells. J Cardiovasc Pharmacol, 1992;20(4):513～9
, 百拇医药
4 Kuwajima I，Kardon MB，Pegram BL et al. Regression of left ventricular hypertrophy in two-kidney, one clip goldblatt hypertension. Hypertension, 1982;4(Suppl Ⅱ): Ⅱ113～Ⅱ118
5 郑 辉, 潘敬运, 李洪义, 朱小南. 大鼠肾性高血压发生过程中α和β肌球蛋白重链基因表达的变化. 生理学报, 1997;49(2):344～8
6 Kim DH, Akera T, Brody TM. Inotropic actions of doxorubicin in isolated guinea-pig atria: evidence for lack of involvement of Na+,K+-adenosine triphosphatase. J Pharmacol Exp Ther, 1980;214:368～74
, 百拇医药
7 张源鑫, 符云峰, 窦淑筠. 大鼠心肌线粒体Ca2+-ATP酶的制备及活性测定. 生物化学与生物物理进展, 1989;16(4):317～9
8 Marban E, Koretsune Y. Cell calcium, oncogenes, and hypertrophy. Hypertension, 1990;15:652～8
9 Araoye MA,Khatri IM, Yao LL. Leukocyte intracellular cations in hypertension: effects of antihypertensive drugs. Am Heart J, 1978;76:731～8
10 Shimkets RA, Warnock DG, Bositis CM et al. Liddles syndrome: heritable human hypertension caused by mutations in the β subunit of the epithelial sodium channel. Cell, 1994;79:407～14
11 Blaustein MP. Physiological effects of endogenous ouabain: control of intracellular Ca2+ stores and cell responsiveness. Am J Physiol, 1993;264:C1 367～C1 387
12 方达超.钙拮抗剂. 见: 陈 修主编. 心血管药理学. 北京; 人民卫生出版社, 1989:196～7
1999-04-22收稿，1999-06-30修回, 百拇医药
单位：陆泽安 李庆平 饶曼人 (南京医科大学心血管药理研究室，南京 210029)；余细勇 林曙光 广东省心血管病研究所，广州 510080
关键词：粉防己碱;；肾型高血压;；左室肥厚；Na+,K+-ATP酶； Ca2+-ATP酶
中国药理学通报990416
摘要 目的 观察粉防己碱对肾型高血压左室肥厚大鼠心肌ATP酶活性的影响。方法 采用二肾一夹肾型高血压形成大鼠左室肥厚，用光电比色、无机磷显色法测定心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性。结果 左室肥厚组大鼠心肌细胞ATP酶活性明显降低，粉防己碱50mg.kg-1.d-1ig连续给药8 wk可逆转左室肥厚,显著增加心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Ca2+-ATP酶活性。结论 粉防己碱因其钙拮抗作用，在降低血压、逆转左室肥厚的同时，可使细胞膜钠泵活性、线粒体钙泵活性恢复。
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中国图书分类号 R 284.1； R544.14； R 972.4
文献标识码 A 文章编号 1001-1978(1999)04-0340-03
Effects of tetrandrine on myocardial ATPase activities in
renovascular hypertensive rats with left ventricular hypertrophy
LU Ze-An, LI Qing-Ping, RAO Man-Ren,(Department of Cardiovascular Pharmacology, Nanjing Medical University, Nanjing 210029)
YU Xi-Yong, LIN Shu-Guang
, 百拇医药
Institute for Cardiovascular Diseases of Guangdong Province, Guangzhou 510080
ABSTRACT AIM Myocardial ATPase activities were assayed in tetrandrine treated two-kidney, one clip renovascular hypertensive(RH) rats with left ventricular hypertrophy(LVH). METHOD Colorimetric method was used to measure the cardiomyocytic membrane Na+, K+-ATPase and mitochondrial Ca2+-ATPase activities. RESULTS In RH-LVH rats, the cardiomyocytic membrane Na+,K+-ATPase and the mitochondrial Ca2+-ATPase showed reduced activities. Tetrandrine 50mg.kg-1.d-1 ig for 8 weeks elevated those two enzymatic activities significantly at the same time of reversing LVH. CONCLUSION Tetrandrine, as a calcium channel blockers, can reverse LVH induced by RH and elevate the cardiomyocytic membrane sodium pump and mitochondrial calcium pump activities.
, 百拇医药
KEY WORDS tetrandrine; renovascular hypertension; left ventricular hypertrophy; Na+,K+-ATPase; Ca2+-ATPase
细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Na+，K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶在维持心肌细胞内钙平衡的过程中起着较为重要的作用。高血压常并发左室肥厚(Left ventricular hypertrophy， LVH)，国际上已将LVH列为心血管疾病的一个独立的危险因子。 LVH时心肌细胞常有钙超载，而心肌细胞钙超载又可加剧心肌肥厚的发展而形成恶性循环[1]。本室以往的研究表明，钙拮抗剂间硝苯地平可明显增加肾型高血压LVH大鼠心肌细胞钠泵及钙泵活性[2]。粉防己碱(tetrandrine，Tet)亦系一种钙拮抗剂[3]，本实验以肾型高血压LVH大鼠为模型，观察其对心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶及线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响。
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1 材料和方法
1.1 动物 雄性SD大鼠，清洁级，体重200～220g，购自南京医科大学实验动物中心。
1.2 肾型高血压左室肥厚大鼠病理模型[4] 动物麻醉后行左腰切口，暴露肾脏，分离肾动脉起始部，将一内径为0.2 mm的银夹夹住肾动脉，右肾不触及，缝合皮肤。术后每2周测定1次尾动脉血压，测定方法用RM-6200C四道生理记录仪(成都仪器厂)联用HX-Ⅱ型清醒小动物检压计(湖南医科大学生理教研室研制)测定清醒尾动脉收缩压。在术后4wk收缩压>20 kPa者视为已形成高血压。
1.3 药物 Tet购自成都高新植物原料药厂(批号980316，纯度98.4%)，依那普利(enalapril, Ena)由常州制药厂赠送，两药均为白色粉末。其它试剂均为市售分析纯。
1.4 给药方法 根据郑辉等[5]和Kuwajima等[4]的观察，大鼠在术后第8周即已形成明显左室肥厚，为观察药物对RH-LVH的逆转作用，取已形成高血压LVH的动物，自术后第9周起开始以灌胃法给药，每日给药1次，连续给药共8wk，自由饮用自来水。药物剂量：Tet 50mg.kg-1.d-1，Ena 6mg.kg-1.d-1。共分3组，即：Tet组，Ena组，左室肥厚组(RH-LVH),另取假手术组(只分离肾动脉而不上银夹)动物作为对照组(control)。RH-LVH组及control组灌服同体积生理盐水。
, 百拇医药
1.5 心肌细胞膜及线粒体制备 治疗期满，处死动物，剖开胸腔，取出心脏，冰生理盐水冲洗干净，剪去心房及大血管，沿室间隔剪开左右心室，以滤纸吸干水分后分别称量左心室(含室间隔)及右心室重量，计算心室湿重/体重指数(LVWW/BW及RVWW/BW)。根据以往本室经验,该指数可用以表示心肌肥厚程度。取心室肌约500mg，剪碎，加入缓冲液Ⅰ10ml(内含mmol.L-1:蔗糖250，组氨酸5.0，Na2-EDTA 5.0，去氧胆酸钠2.8，pH 6.8)，用组织匀浆器制成匀浆，双层纱布过滤，滤液离心(750×g，15min，4℃)后弃去沉淀，上清液经离心(9000×g，30 min，4℃)后，沉淀即为线粒体。上清液再经离心(40000×g，45 min，4℃)后，沉淀即为细胞膜。所得标本均用缓冲液Ⅱ(内含mmol.L-1:蔗糖250，组氨酸5.0，Na2-EDTA 1.0， pH 7.3)悬浮，置-75℃条件下保存备测。
, 百拇医药
Tab 1 Effect of Tet on the systolic blood pressure (SBP) and ventricle weight in renovascular hypertensive rats with LVH(
±s，n=6) GroupSBP/kPa
LVWW/BW
/mg.g-1
RVWW/BW
/mg.g-1
8 weeks after operation
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with drugs for 8 weeks
Control
15.0±0.8
14.9±0.7
1.80±0.15
0.53±0.15
RH-LVH
25.5±2.4**
26.2±3.6**
2.84±0.33*
0.58±0.19
, 百拇医药
Tet
24.9±1.6**
14.7±1.6##
2.20±0.26#
0.59±0.07
Ena
25.8±2.2**
13.8±1.8##
2.03±0.50#
0.52±0.05
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LVWW: left ventricle wet weight; RVWW: right ventricle wet weight; *P<0.05，**P <0.01，vs control; #P<0.05，##P<0.01，vs RH-LVH.1.6 ATP酶活性的测定[6,7] 用无机磷显色、光电比色法测定Na+,K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性。Na+,K+-ATP酶活性为存在或缺乏哇巴因时的酶活性之差，Ca2+-ATP酶活性为存在或缺乏Ca2+及Na2-EDTA时的酶活性之差。蛋白定量用考马斯亮蓝法，以牛血清白蛋白为标准品(Sigma产品)；酶活性单位用μmol Pi.mg-1 Pro.h-1表示。
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1.7 统计方法 所有数据均以
±s表示，统计分析用t检验。2 结果
2.1 对大鼠清醒尾动脉收缩压的影响 见表1。各组用于实验的动物数均为6只。给药前，对照组血压在正常范围内；其它3组血压均>24 kPa，各组间无差异。给药8 wk后，与给药前血压相比，对照组、RH-LVH组、Tet组及Ena组各组血压分别比给药前降低了0.01%，-0.03%，40.96%和46.51%，表明Tet和Ena均可明显降低血压。
2.2 对左室湿重的影响 从表1可见，RH-LVH组左室重量指数明显增高，为对照组的1.58倍；而Tet组，Ena组LVWW/BW比RH-LVH组分别降低22.5%和28.5%, 二药均可逆转左室肥厚。RVWW/BW各组间均无差异性。
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2.3 对心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性的影响 对照组大鼠心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性为(19.63±2.41) μmol Pi.mg-1 Pro.h-1，RH-LVH组酶活性比对照组降低49.9%；Tet组、Ena组酶活性分别比RH-LVH组增高42.5%和50.2%。说明RH-LVH时Na+,K+-ATP酶活性降低，药物逆转性治疗后酶活性有不同程度的恢复(表2)。
2.4 对线粒体ATP酶活性的影响 对照组大鼠线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性分别为(12.93±2.71)和(15.43±3.01) μmol Pi.mg-1 Pr.h-1，RH-LVH组二种酶活性分别比对照组降低22.4%，45.6%。Tet组、Ena组Na+,K+-ATP酶活性分别比RH-LVH组增高32.9%和68.4%；Ca2+-ATP酶活性则分别比RH-LVH组增高71.9%和94.3%(见表2)。
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Tab 2 Effects of Tet on the cardiomyocytic ATPase
activities in renovascular hypertensive rats with LVH
(
±s，n=6，μmol Pi.mg-1 Pr.h-1) GroupNa+,K+-ATPase
Ca2+-ATPase
mitochondrial
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membrane
mitochondrial
Control
19.63±2.41
12.93±2.71
15.43±3.01
RH-LVH
9.83±2.26*
10.04±2.03*
8.40±1.32*
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Tet
17.09±2.73#
13.35±2.68#
14.44±2.14#
Ena
19.71±4.39#
16.91±1.25*#
16.32±3.05##
*P <0.05，**P<0.01， vs control; #P<0.05，##P<0.01， vs RH-LVH3 讨论
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Ca2+与LVH的形成和发展有着密切的关系[8]。细胞膜Na+,K+-ATP酶通过泵入Na+、泵出Ca2+以维持细胞钙平衡，该酶活性降低可导致[Ca2+]i升高，[Ca2+]i增高后又可在膜内侧面与Mg2+竞争结合位点而抑制该酶的活性[9]。本实验结果表明，高血压合并LVH时，该酶活性明显降低，经Tet治疗后可使该酶活性明显增高，有助于减轻细胞钙超载。一般认为，高血压时钠泵活性降低除可能属于遗传性膜缺陷外(尤其是盐敏感性高血压的发生)[10]，还可能是受到分泌增加的内源性洋地黄样物质的抑制所致[11]；此外，由于心肌肥厚时心肌处于相对缺血状态，使钠泵活动所需的ATP减少，也是其活性降低的因素之一[13]。Tet为一种钙拮抗剂，用药后扩张外周血管降低心脏后负荷使心肌耗氧量降低，加之可扩张冠状动脉、改善心肌的能量代谢[12]，加上血压降低后内源性洋地黄样物质的分泌受抑制，因而可增加该酶活性。
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线粒体作为参与调节细胞内Ca2+平衡的重要细胞器，通过膜上的Ca2+-ATP酶将胞液中的Ca2+向基质中转送，其活性的降低使线粒体摄钙减少。本实验结果显示RH-LVH组大鼠心肌细胞线粒体Ca2+-ATP酶活性比对照组低45.6%。经Tet治疗后，酶活性明显增加，有助于减轻细胞钙负荷，其作用机制可能与其降低血压、改善心肌缺血使线粒体呼吸趋向正常有关。
*广东省自然科学基金资助课题，No 960560
作者简介:陆泽安，男，37岁，博士研究生；
饶曼人，女，69岁，教授，博士生导师，研究室主任, 主要从事高血压左室肥厚的药物防治研究
参考文献
, 百拇医药 1 Inoue I, Matsuura H, Shingu T et al. Role of intracellular cation abnormalities in development of left ventricular hypertrophy. J Cardiovasc Pharmacol, 1991;17(suppl 2):S107～S109
2 奚 涛，饶曼人. 间硝苯地平对老龄肾性高血压大鼠心肌和脑微粒体Na+,K+-ATP酶，Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性的影响. 药学学报, 1994;29:809～13
3 Liu QY， Karpinski E， Pang PKT. Tetrandrine inhibits both T and L calcium channel currents in ventricular cells. J Cardiovasc Pharmacol, 1992;20(4):513～9
, 百拇医药
4 Kuwajima I，Kardon MB，Pegram BL et al. Regression of left ventricular hypertrophy in two-kidney, one clip goldblatt hypertension. Hypertension, 1982;4(Suppl Ⅱ): Ⅱ113～Ⅱ118
5 郑 辉, 潘敬运, 李洪义, 朱小南. 大鼠肾性高血压发生过程中α和β肌球蛋白重链基因表达的变化. 生理学报, 1997;49(2):344～8
6 Kim DH, Akera T, Brody TM. Inotropic actions of doxorubicin in isolated guinea-pig atria: evidence for lack of involvement of Na+,K+-adenosine triphosphatase. J Pharmacol Exp Ther, 1980;214:368～74
, 百拇医药
7 张源鑫, 符云峰, 窦淑筠. 大鼠心肌线粒体Ca2+-ATP酶的制备及活性测定. 生物化学与生物物理进展, 1989;16(4):317～9
8 Marban E, Koretsune Y. Cell calcium, oncogenes, and hypertrophy. Hypertension, 1990;15:652～8
9 Araoye MA,Khatri IM, Yao LL. Leukocyte intracellular cations in hypertension: effects of antihypertensive drugs. Am Heart J, 1978;76:731～8
10 Shimkets RA, Warnock DG, Bositis CM et al. Liddles syndrome: heritable human hypertension caused by mutations in the β subunit of the epithelial sodium channel. Cell, 1994;79:407～14
11 Blaustein MP. Physiological effects of endogenous ouabain: control of intracellular Ca2+ stores and cell responsiveness. Am J Physiol, 1993;264:C1 367～C1 387
12 方达超.钙拮抗剂. 见: 陈 修主编. 心血管药理学. 北京; 人民卫生出版社, 1989:196～7
1999-04-22收稿，1999-06-30修回, 百拇医药