平行检测血清和尿液中循环抗原诊断日本血吸虫病的研究
作者：刘晓明 王之怀 王勇 尹晓梅 汪昊 季虹 吴维铎
单位：安徽省血吸虫病防治研究所 芜湖 241000
关键词：平行检测；循环抗原；日本血吸虫病；McAb-Dot-ELISA
实用寄生虫病杂志990205 提要 应用McAb-Dot-ELISA平行检测血吸虫病人的血清和尿样(浓缩20倍)中日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。81例急性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性率分别为96.30%和66.67%,而血清和尿样组合检测的阳性检出率提高至100%。109例慢性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性检出率分别为77.06%和10.09%,组合检测的阳性检出率没有提高。100份健康人的血清和尿样的假阳性率均为0%。54例华支睾吸虫病患者的血清和尿样的交叉反应率分别为9.43%和0%。48例钩虫病患者的血清和尿样的交叉反应率均为0%。
, http://www.100md.com
DIAGNOSIS OF SCHISTOSOMIASIS JAPONICA BY PARALLEL TESTING
CIRCULATING ANTIGENS IN SERUM AND URINE
Liu Xiaoming et al.
CIRCULATING ANTIGENS IN SERUM AND URINE
Liu Xiaoming et al.
Anhui Provincial Institute of Parasitic Diseases, Wuhu 241000
ABSTRACT
The levels of schistosome circulating cathodic antigen (CCA) in serum and urine were detected parallelly by McAb-Dot-ELISA. In 81 acute cases, the positive rates in serum and urine were 96.30% and 66.67% (P<0.01) but the combined positive (positive in serum and/or in urine) rate reached 100%, while in 109 chronic cases, they were 77.06% and 10.09% (P<0.01) but the combined positive rate was not increased. In 100 healthy individuals from non-endemic areas, no positives were detected in serum and urine with false positive rate of 0%. The cross reaction rates in serum and urine of 51 cases with clonorchiasis were 9.43% and 0% but all were 0% in 48 cases with ancylostomiasis.
, 百拇医药
Key words:Parallel testing, circulating antigren, schistosomiasis japonica,McAb-Dot-ELISA
近年来,关于检测血清中循环抗原诊断日本血吸虫病的研究较多。国外亦有检测血清和尿中循环抗原互补诊断曼氏、埃及和间插血吸虫病的研究[1-4]。但迄今,国内外尚未见在同一组病例中平行检测日本血吸虫病患者血清和尿液中循环抗原的报道。我们在检测日本血吸虫病患者尿循环抗原的同时,对同一对象的血清样本用McAb-Dot-ELISA平行检测,比较单组和两组组合的检测结果。
1 材料与方法
1.1 样本来源 ①81例急性血吸虫病患者(初次感染)均为芜湖市血吸虫病防治站住院病人,有明显的疫水接触史,不同程度的发热(37.8℃-42℃)。环卵沉淀试验阳性,环沉率3%-48%。81例中Kato-Katz法三张涂片虫卵阳性42例(51.85%)。全部病例经吡喹酮(总量120mg/kg,6日疗法)治疗均有效。②109例慢性血吸虫病人均用Kato-Katz三张涂片确诊,每克粪便含虫卵数(EPG)8-696个,其中EPG<100者占80.73%。③100例正常人来自血吸虫病非疫区蒙城县中小学生并用Kato-Katz法排除其它肠道寄生虫感染。④用Kato-Katz法确定的53例单纯华支睾吸虫感染者和48例单纯钩虫感染者均来自血吸虫病非疫区。对同一受试对象同时采集血清和尿样。
, 百拇医药
1.2 尿样本的处理 每例取尿样30ml加叠氮钠-20℃冷冻后,置室温融化。当融化1/2时,去冰块,将融化的尿样(已浓缩1倍)置76℃烘箱加热蒸发2h,使尿样再浓缩10倍。
1.3 McAb-Dot-ELISA 抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体3D8A由中国预防医科院寄生虫病研究所严自助提供。操作按严氏法(1990)[5]进行。
2 结果与讨论 应用McAb-Dot-ELISA平行检测了血吸虫病人的血清和尿样中日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。81例急性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性率分别为96.30%和66.67%,两者间差异有非常显著性意义(P<0.01),而血清和尿样组合检测的阳性检出率提高至100%。109例慢性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性检出率分别为77.06%和10.09%,两者间差异有非常显著性意义(P<0.01),组合检测的阳性检出率没有提高。100份健康人的血清和尿样的假阳性率均为0%。53例华支睾吸虫病患者的血清和尿样的交叉反应率分别为9.43%和0%。48例钩虫病患者的血清和尿样的交叉反应率均为0%(见附表)。
, 百拇医药
附表.McAb-Dot-ELISA平行检测日本血吸虫病患者血清和尿循环抗原的结果
Table.Results of detecting CAg in serum and urine of schistosomiasis japonica by McAb-Dot-ELISA 病例
Case
检查例数
No. case
examined
阳性例数
No. positive case(%)
血清
, 百拇医药
Serum
尿
Urine
急性血吸虫病患者
Acute schistosomiasis
81
78(96.30)
54(66.67)
慢性血吸虫病患者
Chronic schistosomiasis
109
84(77.06)
, 百拇医药
11(10.09)
健康人
Healthy individual
100
0(0)
0(0)
华支睾吸虫病患者
Clonorchiasis
53
5(9.43)
0(0)
钩虫病患者
, 百拇医药
Ancylostomiasis
48
0(0)
0(0)
由于尿液中循环抗原的含量相对较少,故检测尿抗原的效果明显低于测血清抗原的效果。但检测急性血吸虫感染者尿样的效果(66.67%)则明显高于Kato-Katz法(51.85%),两者间差异有显著性意义(P<0.05)。显示测尿中循环抗原诊断急性血吸虫感染的可行性。本次研究显示急性血吸虫病患者的血清和尿样组合检测较单组检测血清的效果有所提高,对慢性血吸虫病的检测则无此效能。另外,对急性血吸虫病患者的血清和尿样的检测效果均明显高于慢性血吸虫病的原因,显然与体液中循环抗原水平有关。
3 参考文献
1 Lieshout LV, et al. Improved diagnostic performance of circulating antigen assay in human schistosomiasis by parallel testing for circulating anodic and cathodic antigens in serum and urine. Am J Trop Med Hyg 1992;46∶4463-4469.
, 百拇医药
2 Lieshout LV, et al. Monitoring the efficacy of different dose of praziquantel by quantification of circulating antigens in serum and urine of schistosomiasis patients. Parasitol 1994;108(5)∶519-526.
3 Kremsner PG, et al. Quantitative determination of circulating anodic and cathodic antigens in serum and urine of individuals infected with Schistosoma intercalatum. Trans R Soc Trop Med Hyg 1993; 87∶167-169.
4 Deelder AM. Quantitative diagnosis of Schistosoma infections by measurement of circulating antigens in serum and urine. Trop Geog Med 1994; 46(4)∶233-238.
5 严自助，等.单克隆抗体斑点试验检测血吸虫虫卵抗原.上海免疫学杂志 1990；10(2)∶113., http://www.100md.com
单位：安徽省血吸虫病防治研究所 芜湖 241000
关键词：平行检测；循环抗原；日本血吸虫病；McAb-Dot-ELISA
实用寄生虫病杂志990205 提要 应用McAb-Dot-ELISA平行检测血吸虫病人的血清和尿样(浓缩20倍)中日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。81例急性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性率分别为96.30%和66.67%,而血清和尿样组合检测的阳性检出率提高至100%。109例慢性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性检出率分别为77.06%和10.09%,组合检测的阳性检出率没有提高。100份健康人的血清和尿样的假阳性率均为0%。54例华支睾吸虫病患者的血清和尿样的交叉反应率分别为9.43%和0%。48例钩虫病患者的血清和尿样的交叉反应率均为0%。
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DIAGNOSIS OF SCHISTOSOMIASIS JAPONICA BY PARALLEL TESTING
CIRCULATING ANTIGENS IN SERUM AND URINE
Liu Xiaoming et al.
CIRCULATING ANTIGENS IN SERUM AND URINE
Liu Xiaoming et al.
Anhui Provincial Institute of Parasitic Diseases, Wuhu 241000
ABSTRACT
The levels of schistosome circulating cathodic antigen (CCA) in serum and urine were detected parallelly by McAb-Dot-ELISA. In 81 acute cases, the positive rates in serum and urine were 96.30% and 66.67% (P<0.01) but the combined positive (positive in serum and/or in urine) rate reached 100%, while in 109 chronic cases, they were 77.06% and 10.09% (P<0.01) but the combined positive rate was not increased. In 100 healthy individuals from non-endemic areas, no positives were detected in serum and urine with false positive rate of 0%. The cross reaction rates in serum and urine of 51 cases with clonorchiasis were 9.43% and 0% but all were 0% in 48 cases with ancylostomiasis.
, 百拇医药
Key words:Parallel testing, circulating antigren, schistosomiasis japonica,McAb-Dot-ELISA
近年来,关于检测血清中循环抗原诊断日本血吸虫病的研究较多。国外亦有检测血清和尿中循环抗原互补诊断曼氏、埃及和间插血吸虫病的研究[1-4]。但迄今,国内外尚未见在同一组病例中平行检测日本血吸虫病患者血清和尿液中循环抗原的报道。我们在检测日本血吸虫病患者尿循环抗原的同时,对同一对象的血清样本用McAb-Dot-ELISA平行检测,比较单组和两组组合的检测结果。
1 材料与方法
1.1 样本来源 ①81例急性血吸虫病患者(初次感染)均为芜湖市血吸虫病防治站住院病人,有明显的疫水接触史,不同程度的发热(37.8℃-42℃)。环卵沉淀试验阳性,环沉率3%-48%。81例中Kato-Katz法三张涂片虫卵阳性42例(51.85%)。全部病例经吡喹酮(总量120mg/kg,6日疗法)治疗均有效。②109例慢性血吸虫病人均用Kato-Katz三张涂片确诊,每克粪便含虫卵数(EPG)8-696个,其中EPG<100者占80.73%。③100例正常人来自血吸虫病非疫区蒙城县中小学生并用Kato-Katz法排除其它肠道寄生虫感染。④用Kato-Katz法确定的53例单纯华支睾吸虫感染者和48例单纯钩虫感染者均来自血吸虫病非疫区。对同一受试对象同时采集血清和尿样。
, 百拇医药
1.2 尿样本的处理 每例取尿样30ml加叠氮钠-20℃冷冻后,置室温融化。当融化1/2时,去冰块,将融化的尿样(已浓缩1倍)置76℃烘箱加热蒸发2h,使尿样再浓缩10倍。
1.3 McAb-Dot-ELISA 抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体3D8A由中国预防医科院寄生虫病研究所严自助提供。操作按严氏法(1990)[5]进行。
2 结果与讨论 应用McAb-Dot-ELISA平行检测了血吸虫病人的血清和尿样中日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。81例急性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性率分别为96.30%和66.67%,两者间差异有非常显著性意义(P<0.01),而血清和尿样组合检测的阳性检出率提高至100%。109例慢性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性检出率分别为77.06%和10.09%,两者间差异有非常显著性意义(P<0.01),组合检测的阳性检出率没有提高。100份健康人的血清和尿样的假阳性率均为0%。53例华支睾吸虫病患者的血清和尿样的交叉反应率分别为9.43%和0%。48例钩虫病患者的血清和尿样的交叉反应率均为0%(见附表)。
, 百拇医药
附表.McAb-Dot-ELISA平行检测日本血吸虫病患者血清和尿循环抗原的结果
Table.Results of detecting CAg in serum and urine of schistosomiasis japonica by McAb-Dot-ELISA 病例
Case
检查例数
No. case
examined
阳性例数
No. positive case(%)
血清
, 百拇医药
Serum
尿
Urine
急性血吸虫病患者
Acute schistosomiasis
81
78(96.30)
54(66.67)
慢性血吸虫病患者
Chronic schistosomiasis
109
84(77.06)
, 百拇医药
11(10.09)
健康人
Healthy individual
100
0(0)
0(0)
华支睾吸虫病患者
Clonorchiasis
53
5(9.43)
0(0)
钩虫病患者
, 百拇医药
Ancylostomiasis
48
0(0)
0(0)
由于尿液中循环抗原的含量相对较少,故检测尿抗原的效果明显低于测血清抗原的效果。但检测急性血吸虫感染者尿样的效果(66.67%)则明显高于Kato-Katz法(51.85%),两者间差异有显著性意义(P<0.05)。显示测尿中循环抗原诊断急性血吸虫感染的可行性。本次研究显示急性血吸虫病患者的血清和尿样组合检测较单组检测血清的效果有所提高,对慢性血吸虫病的检测则无此效能。另外,对急性血吸虫病患者的血清和尿样的检测效果均明显高于慢性血吸虫病的原因,显然与体液中循环抗原水平有关。
3 参考文献
1 Lieshout LV, et al. Improved diagnostic performance of circulating antigen assay in human schistosomiasis by parallel testing for circulating anodic and cathodic antigens in serum and urine. Am J Trop Med Hyg 1992;46∶4463-4469.
, 百拇医药
2 Lieshout LV, et al. Monitoring the efficacy of different dose of praziquantel by quantification of circulating antigens in serum and urine of schistosomiasis patients. Parasitol 1994;108(5)∶519-526.
3 Kremsner PG, et al. Quantitative determination of circulating anodic and cathodic antigens in serum and urine of individuals infected with Schistosoma intercalatum. Trans R Soc Trop Med Hyg 1993; 87∶167-169.
4 Deelder AM. Quantitative diagnosis of Schistosoma infections by measurement of circulating antigens in serum and urine. Trop Geog Med 1994; 46(4)∶233-238.
5 严自助，等.单克隆抗体斑点试验检测血吸虫虫卵抗原.上海免疫学杂志 1990；10(2)∶113., http://www.100md.com