蜂胶有效成分的分离与鉴定
作者：吴平谷 叶立扬
单位：吴平谷(浙江省卫生防疫站，杭州 310009)；叶立扬(浙江大学食品科技系)
关键词：蜂胶；毛细管气相色谱-质谱法
摘 要摘 要：蜂胶是蜜蜂采集的一种树脂状物质，蜂胶主要成分有酚类、醇类、酸类以及黄酮类化合物。为了对蜂胶有效成分进行鉴定，以进一步研究蜂胶的生物学功效。先用不同有机溶剂对蜂胶进行分离，得到4种提取物，然后用毛细管气相色谱-质谱法对蜂胶不同提取物进行分离、鉴定。共得到80多种化合物，并鉴定出38种生物活性物质，其中醇类6种、酚类5种、酸类6种、黄酮类8种和其他13种成分。
分类号：S896.6 TS207.3 文献标识码：B
文章编号：1000-8020(2000)02-0123-02
Determination of effective components in propolis
Wu Pinggu Ye Liyang
(Zhejiang Sanitary and Anti-epidemic Station，Hangzhou 310009，China)
Abstract：Propolis is a resinous hive product collected by bees. Propolis is a complex mixture of phenols， acids， alcohol and flavonoids. The aim of the present work is to study the effective components present in propolis and to confirm its biological activities. Four extracts from propolis were obtained by using different organic solutions. Further separation and identification were carried out by capillary gas chromatography and mass spectrometry(CGC/MS). The CGC/MS analysis on propolis extracted by different solvents resulted in more than 80 compounds being separated. Another 38 bioactive materials，including 6 alcohol，5 phenols， 6 acids，6 flavonoids and 13 others，have been identified.
Key words：propolis，capillary gas chromatography/mass spectrometry
蜂胶具有很强的抗菌、消炎和增强机体免疫能力，在药品、化妆品和食品方面具有广阔的应用前景。作者曾对蜂胶有效成分进行分级分离，得到4种组分[1]。本文在此基础上，采用毛细管气相色谱-质谱法，对蜂胶的醇、酸、酚、挥发油以及部分黄酮进行分析鉴定，为进一步研究蜂胶的生物学功效提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
蜂胶(杭州市场购置)，乙醇(AR)。
1.2 方法
1.2.1 蜂胶浸膏的部位分离[1] 得到分级组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
1.2.2 CGC/MS色谱分析 惠普HP6890GC/5973MS色质联用仪、HP-5MS交联弹性毛细管石英柱30m×0.25mm×0.25μm。色谱条件：载气He流速0.9ml/min，柱温60℃(保持3min)，10℃/min升温到250℃(保持15min)，进样口温度280℃，不分流进样，进样量1.0μl。质谱条件：离子源温度230℃、EI电子能量70eV、扫描方式SCAN、质量范围50～500amu。
1.2.3 样品处理 各组分(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)称取0.1g，加无水乙醇超声溶解，5 000r/min离心，取上清液1.0μl进样分析。
2 结果与分析
组分Ⅳ总黄酮含量相对高于组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，其主要含黄酮甙类、糖类等一些不挥发性成分[1]，因此不宜直接用GC/MS分析，需要经过水解、衍生后再进行分析。以下分析结果采用惠普公司提供的nbs75k.1谱库，对各离子峰进行检索，与标准图谱进行比较，按匹配率大于0.75进行定性。
根据蜂胶浸膏的部位分离方法。组分Ⅰ主要是一些中性物质，表1中包括醇、醛、酮以及少量酚，该类物质构成蜂胶的香气(挥发油)，蜂胶具有止咳、平喘、镇痛等效果多是这些物质所起的作用。
表1 蜂胶组分Ⅰ分析结果
No.
t/min
名称
No.
t/min
名称
1
8.95
苯甲醇
9
14.82
1，7-二甲基萘
2
10.26
苯乙醇
10
15.85
2，6-三特丁基对甲酚
3
11.95
2，3-二氢-苯并呋喃
11
17.65
2-十氢萘醇
4
13.28
1-(3-甲氧基苯酚)-乙酮
12
19.43
β-桉醇
5
13.35
2，3，4，6-四甲基-苯酚
13
23.74
十七烷烃
6
13.53
2，5-二乙基-苯酚
14
25.36
十九烷烃
7
13.95
异丁基油酚
15
25.63
4，6-二羟基-二氢黄酮
8
14.51
苯甲醛
16
26.96
二十烷烃
组分Ⅱ主要是酸性物质和部分黄酮。该类物质具有抗菌、消炎、防腐作用，蜂胶能抑制多种细菌、霉菌和某些病毒，具有广谱抗菌素的效用，见表2。
表2 蜂胶组分Ⅱ分析结果
No.
t/min
名称
No.
t/min
名称
1
11.12
苯甲醇
11
19.99
异阿魏酸
2
13.68
苯丙酸
12
20.31
细辛脑
3
13.94
异丁基油酚
13
20.69
十六烷酸
4
5
14.51
14.92
苯甲醛
苯丙烯酸
14
24.84
2，6-二羟基-4-甲氧基-查耳酮
6
15.85
2，6-三特丁基对甲酚
15
24.96
氮蒽
7
16.94
愈创木醇
16
25.64
4，6-二羟基-二氢黄酮
8
17.54
β-蛇床烯
17
26.43
4-甲氧基-6-羟基-黄酮
9
18.30
对羟基桂皮酸
18
35.82
1-二十二烷醇
10
19.44
β-桉醇
组分Ⅲ分析产物主要是黄酮甙元类化合物，蜂胶中含有大量黄酮类化合物，其总黄酮含量达12.5%[1]。黄酮类化合物有防高血压、降血脂等作用，蜂胶对高脂血症有明显的疗效，其做降血脂药有实用价值，见表3。表3 蜂胶组分Ⅲ分析结果
No.
t/min
名称
1
16.97
愈创木醇
2
23.14
咖啡碱
3
23.59
4-乙酰氧基-3-甲氧基-苯丙烯酸
4
24.84
2，6-二羟基-4-甲氧基-查耳酮
5
25.63
4，6-二羟基-二氢黄酮
6
26.42
4-甲氧基—6-羟基-黄酮
7
26.76
4-甲氧基—4’，6-二羟基-黄酮
8
27.10
5，7，4’-三羟基-二氢黄酮(柚皮素)
9
27.34
4，6—二羟基-黄酮(白杨黄素)
10
27.64
4’-甲氧基—4，6-二羟基-黄酮(刺槐黄素)
11
27.81
3，5，7-三羟基-黄酮醇
12
31.57
1-二十二烯烃
3 结论
本文对蜂胶分级组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ进行CGC/MS分析，共检出80余种化合物，共鉴定出38种。
作者简介：吴平谷，男，硕士，主管技师
参考文献：
[1]吴平谷，叶立扬.蜂胶有效成分的初步研究.食品工业科技，1998，(2)：15
[2]何五田.蜂胶提取工艺的研究.蜜蜂杂志，1988，(4)：11
[3]Bankova V，Christov R，Stoev G，et al. Determination of pheno from propolis by capillary gas chromatography.J Chr，1992，607:150
[4]肖崇厚主编.中药化学.上海：上海科学技术出版社，1987
收稿日期：1999-10-08
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