薄层扫描法测定盐酸麻黄碱合剂中盐酸麻黄碱含量
作者：吴新荣 苏如雄
单位：广州军区总医院 广州510010
关键词：盐酸麻黄碱；薄层扫描法；合剂
中国医院药学杂志980111 摘要 以薄层扫描法对盐酸麻黄碱合剂中盐酸麻黄碱进行了含量测定。用碱性硅胶GF层析板,以氯仿-正丁醇-乙醇(1∶1∶1.5)上行展开,斑点经显色后,采用反射式锯齿形扫描测定,计算出样品中盐酸麻黄碱含量。回归方程C=2.728×10-4S+1.537×10-2,r=0.9979。
Quantitative determination of ephedrine hydrochloride in mixtrue by TLC
Wu Xinrong,Su Ruxiong(Departement of Pharmacy,General Hospital of Guangzhou Armed Forces,Guangzhou 510010)
, 百拇医药
A method for TLC determination of ephedrine hydrochloride in mixtrue had been established.The spots were scanned with CS-9000 scanner at λs=235nm λr=330nm.The developer was cloroform∶n-butanol∶alcohol (1∶1∶1.5).The scanning method were dual wavelength and ZigZag.There was a linear relation between concentration and area in 0.5～2.5μg.The average recovery wes 100.45%±2.96%,RSD=2.95%.
Key words ephedrine hydrochloride,TLC,determination
, http://www.100md.com
盐酸麻黄碱合剂由盐酸麻黄碱、橙皮酊、远志酊、氯化铵、聚山梨酯80、对羟基苯甲酸乙酯、单糖浆等成分组成,用于治疗哮喘、支气管炎等。含量测定用萃取滴定法,因处方中含有聚山梨酯80,常使两相乳化而无法分离。复方制剂中盐酸麻黄碱的定量分析,文献报道有紫外分光光度法[1]、导数分光光度法[2]、酸性染料比色法[3]等,均因处方中对羟基苯甲酸乙酯的紫外吸收与盐酸麻黄碱很接近并且有大于盐酸麻黄碱几十倍的吸收值,无法排除其干扰,用薄层扫描法测定效果较好,有较理想的Rf值(Rf为0.46)和Rs值(Rs为16)。
1 仪器和试药
盐酸麻黄碱对照品(卫生部药品生物制品检定所,8501);盐酸麻黄碱合剂(广州军区总医院药剂科配制);其它所用试剂均为AR级;硅胶GF预制板(江苏常熟市福山生化制剂厂,871120);CS-9000薄层扫描仪(日本岛津),SPV-1自动喷雾仪(日本岛津),定量毛细管(日本岛津)。
, http://www.100md.com
2 方法和结果
2.1 点样前的准备
2.1.1 盐酸麻黄碱对照品溶液 精密称取盐酸麻黄碱对照品10mg,用蒸馏水定量转移至10ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀,备用。
2.1.2 盐酸麻黄碱阴性样品溶液 根据处方组成剂量,除不加盐酸麻黄碱外,其它组分按操作规程配制,备用。
2.1.3 盐酸麻黄碱阳性样品溶液 根据处方组成剂量,去除其它成分,将盐酸麻黄碱配制成阳性样品溶液。
2.1.4 层析板 取10×20cm硅胶GF预制板置于自动喷雾仪上,用氢氧化钠(0.5mol.L-1)喷雾碱化,室温放置,自然凉干,用前于鼓风干燥箱内110℃活化30min,备用。
, 百拇医药
2.2 条件选择
2.2.1 展开剂 参照文献报道[4～7]及Glajch和Youngstrom提出的“7种溶剂实验方案”[8],用上述对照品溶液和样品溶液直接点样,实验结果表明用氯仿-正丁醇-乙醇(1∶1∶1.5)的溶剂系统展开有较理想的Rf值(Rf 0.46)和Rs值(Rs 16)。
2.2.2 显色方法 用碘蒸气熏8min,置室温下待碘挥发后,再用0.5%茚三酮乙醇溶液喷雾,于110℃加热15min,盐酸麻黄碱斑点为桃红色。
2.2.3 测定波长的选择 通过差示法进行光谱扫描,可见背景于300nm以上吸收较大,但在330nm处扣除背景的样本吸收最小;样品于235nm处有最大吸收,因而选择λS=235nm,λR=330nm进行双波长薄层扫描。
, http://www.100md.com
2.2.4 扫描参数 测定方式:反射吸收;扫描方式:锯齿形、双波长自动通道扫描;光束:0.4×0.4mm;背景调平:8;数据调平:7。
2.3 标准曲线制备 分别取盐酸麻黄碱对照品溶液0.5,1,1.5,2,2.5μl,用定量毛细管点于同一薄层板上,待溶剂挥干后,在展开槽中饱和薄层板,上行展开至前沿12cm,取出晾干,显色,于鼓风干燥箱内加热15min,取出冷却后,进行双波长扫描测定。点样量在0.57～2.87μg范围内呈良好的线性关系,得回归方程为:C=2.728×10-4S+1.537×10-2,r=0.9979。
2.4 回收率试验 含0.1%盐酸麻黄碱的样品制剂中,加入一定量的盐酸麻黄碱对照品制成混合品,与对照品及已知含量样品一同点于同一薄层板上,每一样品2点,共6点,按样品测定方法进行回收率试验,结果见表1。
表 1 回收率实验结果 编号
, 百拇医药
对照品
(μg)
面 积
积分值
测得值
(μg)
回收率
(%)
±s
(%)
1
0.546
3287.454
, 百拇医药
0.5746
105.24
2
0.546
4012.328
0.5546
101.58
3
0.892
9551.778
0.8929
100.13
4
, 百拇医药
0.892
5641.453
0.8706
97.67
100.4±3.0
5
0.892
4736.328
0.9232
103.55
6
1.092
8457.419
, http://www.100md.com
1.1277
103.27
7
1.092
6925.497
1.0730
98.26
2.5 稳定性试验 取一薄层板,点盐酸麻黄碱对照品溶液2μl,展开后每隔1h扫描测定1次,结果表明展开5h内均可进行测定。
2.6 样品测定 采用外标两点法测定。取样品溶液(含0.1%盐酸麻黄碱)3批各1.0μl、对照品溶液1.0,1.5μl,各2点,点于同一薄层板上,共10点,如此重复三次,按上述方法展开,显色,扫描测定,取各板平均值由随行对照品计算盐酸麻黄碱的含量,结果见表2。表 2 盐酸麻黄碱合剂样品测定结果 批 号
, http://www.100md.com
面积积分值
含量(%)
RSD(%)
960312
1988.586
102.10
3.24
960404
2075.992
104.55
2.98
960508
, 百拇医药 1962.586
101.01
4.61
3 讨论
3.1 从标准曲线可看出,盐酸麻黄碱在0.57～2.87μg的范围内与面积积分值的线性关系比较理想,校正曲线为Y=ax+b型,r=0.9979。
3.2 回收率较好,本法可用作该制剂的质量控制。
3.3 稳定性实验表明,5h内进行斑点扫描结果均不受影响。
3.4 用本法测定盐酸麻黄碱,展开系统粘度较大,展开时间较长(约1h),有待于进一步改进和完善。
参考文献
, 百拇医药
1 梁 祈,余煜棉等.CPA矩阵紫外分光光度法同时测定息喘灵片中各组分的含量.中国药科大学学报,1992,23(2):124
2 崔颜萍,刘珊珊.导数光谱法测定小儿化痰止咳冲剂中土根碱和盐酸麻黄碱的含量.中成药,1994,16(5):17
3 朗 朗,范晓哲.中药复方制剂小青龙冲剂中盐酸麻黄碱的含量测定.中成药,1988,2:14
4 乌 兰,王进元.薄层扫描法测定蟾龙定喘液中盐酸麻黄碱含量.中成药,1988,8:13
5 程 怡,冯 青.薄层扫描法测定麻黄汤冲剂中盐酸麻黄碱含量的研究.中成药,1990,12(6):15
6 李诗梅.薄层扫描法测定三拗汤中盐酸麻黄碱和苦杏仁甙的含量.中成药,1992,14(7):11
7 黄秉廉.薄层扫描法测定止咳青果合剂中盐酸麻黄碱的含量.中成药,1992,14(6):17
8 章育中,郭希圣.薄层层析法和薄层扫描法.中国医药科技出版社,1990:134
(1997年1月16日收稿), 百拇医药
单位：广州军区总医院 广州510010
关键词：盐酸麻黄碱；薄层扫描法；合剂
中国医院药学杂志980111 摘要 以薄层扫描法对盐酸麻黄碱合剂中盐酸麻黄碱进行了含量测定。用碱性硅胶GF层析板,以氯仿-正丁醇-乙醇(1∶1∶1.5)上行展开,斑点经显色后,采用反射式锯齿形扫描测定,计算出样品中盐酸麻黄碱含量。回归方程C=2.728×10-4S+1.537×10-2,r=0.9979。
Quantitative determination of ephedrine hydrochloride in mixtrue by TLC
Wu Xinrong,Su Ruxiong(Departement of Pharmacy,General Hospital of Guangzhou Armed Forces,Guangzhou 510010)
, 百拇医药
A method for TLC determination of ephedrine hydrochloride in mixtrue had been established.The spots were scanned with CS-9000 scanner at λs=235nm λr=330nm.The developer was cloroform∶n-butanol∶alcohol (1∶1∶1.5).The scanning method were dual wavelength and ZigZag.There was a linear relation between concentration and area in 0.5～2.5μg.The average recovery wes 100.45%±2.96%,RSD=2.95%.
Key words ephedrine hydrochloride,TLC,determination
, http://www.100md.com
盐酸麻黄碱合剂由盐酸麻黄碱、橙皮酊、远志酊、氯化铵、聚山梨酯80、对羟基苯甲酸乙酯、单糖浆等成分组成,用于治疗哮喘、支气管炎等。含量测定用萃取滴定法,因处方中含有聚山梨酯80,常使两相乳化而无法分离。复方制剂中盐酸麻黄碱的定量分析,文献报道有紫外分光光度法[1]、导数分光光度法[2]、酸性染料比色法[3]等,均因处方中对羟基苯甲酸乙酯的紫外吸收与盐酸麻黄碱很接近并且有大于盐酸麻黄碱几十倍的吸收值,无法排除其干扰,用薄层扫描法测定效果较好,有较理想的Rf值(Rf为0.46)和Rs值(Rs为16)。
1 仪器和试药
盐酸麻黄碱对照品(卫生部药品生物制品检定所,8501);盐酸麻黄碱合剂(广州军区总医院药剂科配制);其它所用试剂均为AR级;硅胶GF预制板(江苏常熟市福山生化制剂厂,871120);CS-9000薄层扫描仪(日本岛津),SPV-1自动喷雾仪(日本岛津),定量毛细管(日本岛津)。
, http://www.100md.com
2 方法和结果
2.1 点样前的准备
2.1.1 盐酸麻黄碱对照品溶液 精密称取盐酸麻黄碱对照品10mg,用蒸馏水定量转移至10ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀,备用。
2.1.2 盐酸麻黄碱阴性样品溶液 根据处方组成剂量,除不加盐酸麻黄碱外,其它组分按操作规程配制,备用。
2.1.3 盐酸麻黄碱阳性样品溶液 根据处方组成剂量,去除其它成分,将盐酸麻黄碱配制成阳性样品溶液。
2.1.4 层析板 取10×20cm硅胶GF预制板置于自动喷雾仪上,用氢氧化钠(0.5mol.L-1)喷雾碱化,室温放置,自然凉干,用前于鼓风干燥箱内110℃活化30min,备用。
, 百拇医药
2.2 条件选择
2.2.1 展开剂 参照文献报道[4～7]及Glajch和Youngstrom提出的“7种溶剂实验方案”[8],用上述对照品溶液和样品溶液直接点样,实验结果表明用氯仿-正丁醇-乙醇(1∶1∶1.5)的溶剂系统展开有较理想的Rf值(Rf 0.46)和Rs值(Rs 16)。
2.2.2 显色方法 用碘蒸气熏8min,置室温下待碘挥发后,再用0.5%茚三酮乙醇溶液喷雾,于110℃加热15min,盐酸麻黄碱斑点为桃红色。
2.2.3 测定波长的选择 通过差示法进行光谱扫描,可见背景于300nm以上吸收较大,但在330nm处扣除背景的样本吸收最小;样品于235nm处有最大吸收,因而选择λS=235nm,λR=330nm进行双波长薄层扫描。
, http://www.100md.com
2.2.4 扫描参数 测定方式:反射吸收;扫描方式:锯齿形、双波长自动通道扫描;光束:0.4×0.4mm;背景调平:8;数据调平:7。
2.3 标准曲线制备 分别取盐酸麻黄碱对照品溶液0.5,1,1.5,2,2.5μl,用定量毛细管点于同一薄层板上,待溶剂挥干后,在展开槽中饱和薄层板,上行展开至前沿12cm,取出晾干,显色,于鼓风干燥箱内加热15min,取出冷却后,进行双波长扫描测定。点样量在0.57～2.87μg范围内呈良好的线性关系,得回归方程为:C=2.728×10-4S+1.537×10-2,r=0.9979。
2.4 回收率试验 含0.1%盐酸麻黄碱的样品制剂中,加入一定量的盐酸麻黄碱对照品制成混合品,与对照品及已知含量样品一同点于同一薄层板上,每一样品2点,共6点,按样品测定方法进行回收率试验,结果见表1。
表 1 回收率实验结果 编号
, 百拇医药
对照品
(μg)
面 积
积分值
测得值
(μg)
回收率
(%)
±s(%)
1
0.546
3287.454
, 百拇医药
0.5746
105.24
2
0.546
4012.328
0.5546
101.58
3
0.892
9551.778
0.8929
100.13
4
, 百拇医药
0.892
5641.453
0.8706
97.67
100.4±3.0
5
0.892
4736.328
0.9232
103.55
6
1.092
8457.419
, http://www.100md.com
1.1277
103.27
7
1.092
6925.497
1.0730
98.26
2.5 稳定性试验 取一薄层板,点盐酸麻黄碱对照品溶液2μl,展开后每隔1h扫描测定1次,结果表明展开5h内均可进行测定。
2.6 样品测定 采用外标两点法测定。取样品溶液(含0.1%盐酸麻黄碱)3批各1.0μl、对照品溶液1.0,1.5μl,各2点,点于同一薄层板上,共10点,如此重复三次,按上述方法展开,显色,扫描测定,取各板平均值由随行对照品计算盐酸麻黄碱的含量,结果见表2。表 2 盐酸麻黄碱合剂样品测定结果 批 号
, http://www.100md.com
面积积分值
含量(%)
RSD(%)
960312
1988.586
102.10
3.24
960404
2075.992
104.55
2.98
960508
, 百拇医药 1962.586
101.01
4.61
3 讨论
3.1 从标准曲线可看出,盐酸麻黄碱在0.57～2.87μg的范围内与面积积分值的线性关系比较理想,校正曲线为Y=ax+b型,r=0.9979。
3.2 回收率较好,本法可用作该制剂的质量控制。
3.3 稳定性实验表明,5h内进行斑点扫描结果均不受影响。
3.4 用本法测定盐酸麻黄碱,展开系统粘度较大,展开时间较长(约1h),有待于进一步改进和完善。
参考文献
, 百拇医药
1 梁 祈,余煜棉等.CPA矩阵紫外分光光度法同时测定息喘灵片中各组分的含量.中国药科大学学报,1992,23(2):124
2 崔颜萍,刘珊珊.导数光谱法测定小儿化痰止咳冲剂中土根碱和盐酸麻黄碱的含量.中成药,1994,16(5):17
3 朗 朗,范晓哲.中药复方制剂小青龙冲剂中盐酸麻黄碱的含量测定.中成药,1988,2:14
4 乌 兰,王进元.薄层扫描法测定蟾龙定喘液中盐酸麻黄碱含量.中成药,1988,8:13
5 程 怡,冯 青.薄层扫描法测定麻黄汤冲剂中盐酸麻黄碱含量的研究.中成药,1990,12(6):15
6 李诗梅.薄层扫描法测定三拗汤中盐酸麻黄碱和苦杏仁甙的含量.中成药,1992,14(7):11
7 黄秉廉.薄层扫描法测定止咳青果合剂中盐酸麻黄碱的含量.中成药,1992,14(6):17
8 章育中,郭希圣.薄层层析法和薄层扫描法.中国医药科技出版社,1990:134
(1997年1月16日收稿), 百拇医药