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编号:10281778
ACD全血及红细胞MAP的质量分析与保存研究
http://www.100md.com 《医学文选》 1999年第4期
     作者:李聚林

    单位:广西血液中心(柳州市 545005)

    关键词:全血(WB);红细胞(RBC);血小板(PLT);平均红;细胞容积(MCV);枸橼酸-枸橼酸钠-葡萄糖(ACD);甘露醇-腺嘌呤-磷酸盐(MAP);血红蛋;白(HGB)

    医学文选990401

    【摘要】 目的 充分了解ACD全血和红细胞MAP的质量及其保 存效果,推广成份输血。方法 ①取ACD全血及红细胞MAP各2人份各 分成 6小袋进行2~30天的血糖、钾、钠、酸碱度、白细胞、红细胞、血小板与红细胞平均容积的 动态观察;②结合质控活动,对ACD全血和红细胞MAP中的血糖、蛋白质、钾、钠、比重、白细胞、红细胞、血小板、红细胞平均容积血、血红蛋白和红细胞压积等进行随机检测与分析。 结果 ①红细胞MAP中的血比重、白细胞、红细胞、血小板、红细胞压积、血红蛋白及血糖明显高于ACD全血,而血浆蛋白、钠离子与酸碱度明显低;②血液在2 ~30天的保存期间,白细胞、红细胞、血小板、红细胞平均容积均无改变;③酸碱度、钾、钠离子随保存期而明显变化,钾与钠离子的日变化量在红细胞MAP比在ACD全血中明显。结论 全血保存在ACD或红细胞混悬于MAP保存液中是安全与可行的,红细胞MAP的内容物与ACD全血不同,红细胞MAP在失血和贫血病人中的应用值得关注并应 予推广。
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    Quality analysis and preservation studies of WB-ACD and Rc-M AP

    Li Julin

    Guangxi blood center, Liuzhou 545005

    【Abstract】 Objective To recognize the quality and pr eservation effectiveness of WB-ACD and Rc-MAP. Methods ①WB-ACD of 2 subjects and Rc-MAP of 2 subjects and single human into 6 pa ck were dynamic observation of the blood glucose、K+、Na+、pH、WBC、Rc、PLT and Mcv in 2 to 30 days. ②Accompanied with quality control activity, randomly detection and analysis of the blood glucose、protein、K+、Na+、density、WBC 、Rc、PLT、MCV、HGB、HCT in WB-ACD and in Rc-MAP. Results ①The blood desity、WBC、Rc、PLT、HCT、HGB and blood glucose were signific a ntly higher in the Rc-MAP than those in the WB-ACD. The plasma protein、Na+ and pH were significantly Lower in the Rc-MAP than those in the WB-ACD.②Blo od during storage in 2 to 30 days, WBC、Rc、PLT、MCV、are of stable quantitative expressi on in WB-ACD and in Rc-MAP. ③pH、K+ and Na+ had remarkable changes accompan ied by the stage of storage. The quantity of everyday changes of K+ and Na+ were remarkable in Rc-MAP than in WB-ACD, had staistic meaning. Conclusion It is safe and effective for whole blood stored in ACD and red cell suspension in MAP medium, But the contents of Rc-MAP differ from WB- ACD, Rc-MAP is worthwhile for the patients of hemorrhage and Anemia, and it ha s high development Value.
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    【Key words】 Whole blood(WB) red blood cell(RBC) plate let(PLT) acid-citrate-dextrose(ACD) mannitol-adenine-phosphate(MAP) hemog lobin(HGB) mean corpuscular volume(MCV)

    ACD全血与Rc-MAP随保存时间的延长,其多种成份产生相应的变化,但由于生产方式与环境、保存条件以及各献血员血液的个体差异,变化却不尽相同。根据质检抽样作随机性统计分析,结合对pH、K+、Na+、MCV、血糖浓度、细胞计数等指标的动态观察,对有关结果整理报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 ACD全血 由ACD-B保存液(由上海市血液中心及广州华南医疗用品有限公司提供,效期为2年)1份与4份健康献血员的静脉血混合而成[1],在(4±2)℃的条件下,保存效期为21天。200毫升血为1单位。
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    1.2 红细胞MAP 取ACD血袋连同转移袋一起离心,500×g,7分钟,温度(4±2)℃[2]。然后将血浆挤入转移袋中,每袋血(1或2个单位)只保留原血浆层10%左右的血浆[3],于无菌状态下加入50毫升/每单位血液的MAP添加剂,混匀,保存条件与保存期同ACD全血。该制剂又名添加剂红细胞[4]

    1.3 样品的处理 直接抽取ACD全血及Rc-MAP成品,作为动态观察者,每种各取2份,各分成6袋,于成品保存的相同条件下保存至一定时候再行检测。所有受检样品,检测前均分为3份,1份作pH及密度分析,1份作细胞计数,1份测K+、Na+、血糖等。

    1.4 样品的检测

    1.4.1 血浆蛋白含量 双缩脲法,试剂由广州标准科技有限公司提供(批号60529),蛋白标准液由上海市医学化验所提供(批号为970101批),722光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂生产)比色。
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    1.4.2 血糖含量测定 用葡萄糖氧化酶(GOD)法,试剂由保定长城临床试剂公司提供。

    1.4.3 密度测试 液体比重仪(上海第二天平仪器厂P2--5型)法。

    1.4.4 K+、Na+离子测定 火焰光度法。6400A型火焰光度计,上海分析仪器厂生产。标准液由上海生物制品研究所提供。

    1.4.5 pH测定 Φ71型pH计,美国贝克曼公司生产,分度值为0.001。标准缓冲液亦为该公司提供。

    1.4.6 细胞计数及MCV、HGB测试 用HC-822型血球计数计,美国丹能公司产品,质控品均为该公司提供(批号6246-N),其它仪器用液由深圳迈瑞电子有限公司提供。
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    上述仪器经计量部门审验合格,效期内使用。

    2 结 果

    2.1 ACD全血与红细胞MAP效期内检测结果比较,见表1。

    表1 ACD全血与红细胞MAP效期内检测结果比较 项目

    红细胞MAP

    ACD全血

    t(u)

    p

    n±SD

    n±SD
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    血浆蛋白(g/L)

    32

    20.33±4.23

    70

    60.83±5.64

    (40.30)

    <0.0005

    血糖(mmol/L)

    11

    20.65±2.20

    10

    18.00±1.15
, 百拇医药
    3.312

    <0.01

    密度(g/ml)

    13

    1.0547±0.0046

    19

    1.0466±0.0032

    5.786

    <0.001

    pH

    13

    6.517±0.049
, 百拇医药
    18

    6.715±0.124

    5.500

    <0.001

    K+(mmol/L)

    22

    18.1±6.25

    27

    13.5±4.01

    3.112

    <0.005

    Na+(mmol/L)
, 百拇医药
    24

    103.1±10.32

    28

    132.1±7.17

    12.04

    <0.001

    WBC(×109/L)

    50

    6.07±2.79

    59

    5.09±1.45

    (2.24)
, 百拇医药
    <0.05

    Rc(×1012/L)

    47

    6.22±1.02

    63

    4.33±0.69

    (10.96)

    <0.01

    HGB(g/L)

    46

    161.0±20.3

    71
, 百拇医药
    108.0±16.8

    (14.51)

    <0.01

    HCT(%)

    45

    51.26±6.01

    73

    37.3±6.27

    (12.05)

    <0.01

    MCV(fl)

    41

, 百拇医药     84.6±6.88

    75

    85.5±9.00

    (0.60)

    >0.05

    PLT(×109/L)

    48

    285.0±124.3

    62

    189.0±73.3

    (4.75)

    <0.01
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    2.2 ACD全血与红细胞MAP阶段性pH、K+、Na+检测结果比较,见表2。表2 ACD全血与红细胞MAP阶段性pH、K+、Na+检测结果比较 保存时间

    (天)

    pH ±SD(n)

    K+ ±SD(n)

    Na+ ±SD(n)

    红细胞MAP
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    ACD全血

    红细胞MAP

    ACD全血

    红细胞MAP

    ACD全血

    8~14

    6.517±0.049(13)

    6.715±0.124(18)

    17.68±5.84(6)

    13.74±3.45(9)

    107.33±12.08(6)

    132.29±8.17(9)
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    15~21

    6.431±0.099(7)

    6.707±0.146(14)

    20.69±4.87(13)

    14.55±6.42(10)

    98.43±7.66(14)

    127.17±17.95(19)

    22~28

    6.366±0.096(10)

    6.649±0.194(26)

    26.52±4.40(7)
, 百拇医药
    15.51±3.60(21)

    94.67±10.15(6)

    120.88±14.47(20)

    29~40

    6.293±0.090(6)

    6.563±0.054(5)

    32.70±9.47(4)

    21.57±7.285(7)

    92.17±8.70(6)

    109.30±13.59(7)

    t
, 百拇医药
    12.97

    4.48

    9.64

    P

    <0.001

    <0.05

    <0.005

    2.3 ACD全血与红细胞MAP保存第2天与第30天细胞计数及MCV比较,见表3。表3 ACD全血与红细胞MAP保存第2天与第30天细胞计数及MCV比较 保存时间

    (天)

    WBC(×109/L)

    RBC(×1012/L)
, 百拇医药
    PLT(×109/L)

    MCV(fl)

    ①

    ②

    ①

    ②

    ①

    ②

    ①

    ②

    2

    A

    M
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    3.3

    3.6

    3.55

    6.13

    3.61

    5.76

    4.22

    4.89

    270

    491

    391

    417

    83.2
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    85.9

    85.5

    86.7

    30

    A

    M

    3.4

    6.9

    3.53

    6.15

    3.67

    5.63

    4.33
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    4.92

    292

    497

    360

    437

    82.7

    85.7

    87.2

    87.1

    注:①②代表2份样品。A代表ACD全血,M代表红细胞MAP。

    2.4 ACD全血与红细胞MAP的pH、K+、Na+及血糖浓度日变化量动态分析结果,见表4。
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    表4 ACD全血与红细胞MAP的pH、K+、Na+及血糖浓度日变化量动态分析结果(±SD) 项目

    ACD全血

    红细胞MAP

    t

    P

    pH

    0.017±0.0094

    0.029±0.0152

    2.000

    >0.05
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    K+(mmol/L)

    0.482±0.264

    1.075±0.313

    3.828

    <0.005

    Na+(mmol/L)

    0.347±0.127

    0.770±0.349

    2.994

    <0.02

    血糖(mmol/L)
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    0.444±0.220

    0.526±0.251

    0.651

    >0.05)

    3 讨 论

    3.1 pH、K+、Na+、血糖浓度的变化,反映了血细胞的质量及活性状态,细胞计数与MCV则表明细胞的多寡与形态,在这些指标上,ACD全血与红细胞MAP表现了各自的特征,并有较好的稳定性与重现性。随着保存期的延长,ACD全血与红细胞MAP均出现K+升高,Na+、pH与血糖浓度逐步降低,其幅度以红细胞MAP较为明显,原因乃由于Rc-MAP的细胞量较大,在制备过程中又移去了90%原血浆中的磷酸盐、血浆蛋白质、磷酸氢盐等缓冲物质,因此导致血液酸碱度的相对易变性从而促进了细胞内外K+、Na+离子的交换,所以在Rc-MAP中K+、Na+离子的变化显得比较突出。Rc-MAP的pH及K+还与白细胞与血小板多少有关[2,4]
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    3.2 保存2周的血液血浆K+将高出正常的4倍以上,3周末可达32mmol/l[4]。通常情况是,在保存效期内绝大多数K+小于30mmol/L,即使是Rc-MAP也如此(见表1)。有人以为输注贮存血易罹高血钾症,但实际却并非如此。有资料表明,输10~20单位ACD血后,受血者血钾比输血前约降0.7~1.0mmol/L,理由是:①在贮存中丢失钾的红细胞在输入人体后,将重新吸钾排钠,血浆中的K+离子大量移入细胞内;②在ACD或MAP保养液中的枸橼酸钠在代谢中产生碳酸氢钠,输入后可引起一时性代谢性碱中毒,此时将有K+进入细胞内以换取H+进入血浆,经肾小管细胞随尿排出[5]。当然,对原先有钾潴留的病人(如休克、肾功能不全、大面积肌肉损伤、酸血症等),即使输入不多的保存血,也可能发生高钾血症。

    3.3 ACD保存液自1943年开始使用[4],其输血安全性早已为人们所肯定。Rc-MAP于1992年由日本赤十字社许可,1993年大阪赤十字血液中心开始使用[6],至今亦已广泛用于临床。该制剂含晶体盐,具有补充红细胞和扩充血容量的双重作用,是目前认为比较好的红细胞添加剂[4]。Rc-MAP的细胞计数与MCV指标稳定,血糖与ACD全血的浓度近似,钾离子也基本满足如ACD全血的要求(<30mmol/L),粘度低,输注流畅,在制备过程中移去90%左右的血浆,使一血多用,又有效地减少了存在于血液中的代谢产物以及可能有的病毒及细菌对人体的危害,同时,由于该制剂含细胞数较多,同体积输注其效果将优于ACD全血,若增加同样的血红蛋白浓度,其输注量将比ACD全血减少30%~40%,如一个60公斤的人血液中每增加10g/L的血红蛋白,需输注ACD全血500毫升,若使用Rc-MAP,只需335毫升左右,对心肺功能不全的贫血患者更为合适。但由于制剂中含有腺嘌呤、甘露醇,肾功能异常患者应慎重使用,另外,偶见过敏反应、移植物抗宿主病(GVHD)与低钙血症[6]
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    临床上需要输血的患者,有80%以上需补充红细胞[3],因此,红细胞制剂将日益受到人们的关注。

    参考文献

    1 柏乃庆,编著.近代输血.第1版.北京:科学出版社,1989:74

    2 肖星甫,主编.输血技术手册.第1版.四川科学技术出版社,1992:169~182

    3 杨天楹,杨成民,田兆嵩,主编.临床输血学.第1版.北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1993:151~152

    4 田兆嵩,主编.临床输血学.第1版.北京:人民卫生出版社,1998:16~158

    5 张之南,郦筱能,著.输血及输血反应.第1版.北京:华夏出版社,1988:71

    6 孔令宜,赵桂珍,刘凤玲,等.红细胞MAP.中国输血杂志,1996,9(2):105, http://www.100md.com