纳洛酮和丹参合用对感染性休克兔的肺保护作用
作者：陶富盛 顾虎 曹世宏 王丹丹 施荣山 孙景军
单位：江苏省中医院麻醉科，南京市(210029)
关键词：感染性休克；纳洛酮；丹参
临床麻醉学杂志000309
摘要 目的：观察纳洛酮和丹参合用 处理兔感染性休克模型后的循环、代谢及肺标本的 光镜和电镜下的病理改变。方法：选择30只健康家兔，随机分为五组，通过结扎盲肠末端并 造成穿 孔，复制与临床类似的家兔感染性休克模型后，给予相应的治疗。4小时后经颈总动脉置管 测MA P，并抽血测定乳酸盐、丙二醛及动脉血气；18小时后活杀动物取肺标本。结果：纳洛酮组 、纳 洛酮丹参合用组可明显地升高MAP，并可明显降低休克模型的血乳酸盐、花生四烯酸的代谢 产物丙二醛的水平。治疗组的肺水含量明显低于对照组。光镜见纳洛酮丹参合用组的肺淤血较轻，炎细胞浸润亦明显轻于对照组及纳洛酮组。电镜观察见 该组的线粒体膜仍保持完好，未见破裂或空泡化；而对照组及纳洛酮组的线粒体膜则 有明显的断裂、解体及线粒体的空泡化。结论：纳洛酮或纳洛酮丹参合用均可明显改善感染 性休克的代谢变化，保护脏器功能。因此纳洛酮和丹参合用在改善肺组织的病理形态学方 面远较单纯纳洛酮为好，疗效更佳。
, http://www.100md.com
Protective Effects of Naloxone Plus Dansheng on the Lung in Septic Shock Rabbits
Tao Fusheng, Gu Hu, Cao Shihong, et al
(Anesthesiology Department， Jiangsu Provincial Traditional Chinese Medicine Hospital,Nanjing 210029)
Abstract Objective:To observe the changes in ci rculation,metabolism and pat hology of the lung preparation in septic shock rabbits treated with naloxone plu s dansheng.Methods:30 rabbits were randomly devided into five groups and septic shock model was made by surgical ligation and perforation of the caecum end.The animals were treated with different drugs and placebo in control group.MAP,blood lactate,MDA and blood gas were measured at 4h after and the lung preparation was taken by killing the animal at 18h after the treatment.Results:MAP was incre ased significantly and blood lactate and MDA were decreased markedly in the anim als treated with naloxone plus dansheng.Lung water was remarkably lower in the t reated groups than that in control group and mitochondria mambrane was kept comp lete observed under electron microscope in the treated groups.Conclusion:A combi nation of naloxone with dansheng can improve the changes in circulation and meta bolism of the septic shock rabbits,which is better than that of the septic shock ed animal treated with naloxone alone.
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Key words Septic shock Naloxone Dansheng
感染性休克发病凶险，往往导致多个内脏器官的功能损害，其中尤以急性肺损伤(ALI)最为多见。本研究在感染性休克的动物模型中观察了复合应用纳洛酮和丹参对肺的保护作用。
材料与方法
方法与步骤 新西兰大白兔30只，雌雄不拘，体重2.4±1.1kg，采用乌拉坦麻醉，随机分组为五组，每组6只。A组为假手术对照组，其余均先结扎盲肠末端并造成穿孔以复制感染性休克模型[1]；B组为对照组，休克8～10小时后静注生理盐水10ml.kg-1.h-1；C组为常规治疗组，休克8～10小时后给予抗炎、升压、补液治疗；D组为纳洛酮组，休克8～10小时后静注纳洛酮0.4mg/kg；E组为纳洛酮+丹参组，休克8～10小时后静注纳洛酮0.4mg/kg和静滴丹参(四川华西医科大学制药厂制)5g/kg(加入5%葡萄糖盐液)。
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指标测定 各组均在乌拉坦麻醉下行颈内动脉穿刺，接RM-6000型多导生理仪测MAP，以A组作为正常对照，其余各组均在治疗4～6小时后抽血作乳酸(LACT)及丙二醛(MDA)的测定及动脉血气分析。治疗12～18小时后处死动物，取肺作光镜及电镜切片检查，随后作肺的干/湿重比(D/W%)。
统计分析 所得数据均采用
±s表示，两组间比较用配对的t检验，多个样本的均数比较用方差分析。
结果
各组治疗后测定结果见表1。
表1 家兔休克模型治疗后的各项指标比较(±s) 组别
, 百拇医药 MAP(mmHg)
LACT(mmol/L)
MDA(mmol/L)
A-aDO(kPa)
PaO2
D/W(%)
A
97.0±8.03
1.56±1.35
5.05±0.66
4.87±1.01
12.12±0.64
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25.23±3.44
B
73.4±11.41
4.10±2.21
10.07±2.94
15.23±2.34
7.56±1.02
15.03±2.89
C
70.6±13.44
2.84±0.76
4.99±0.55
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14.15±1.42
8.17±0.91
12.31±4.71
D
89.8±9.65*
1.51±0.88*
3.16±0.94*
5.24±0.35*
11.72±2.14*
24.71±3.16*
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E
93.8±17.89*
1.31±0.72*
2.51±0.71*
6.35±1.24*
10.31±0.52*
32.13±4.51*
与B组及C组比较，*P<0.05
MAP D组、E组均有效地提升MAP，与B组或C组比较，差异显著(P<0.05)，但D组、E组之间无明显差异。
, 百拇医药
LACT 在治疗后4～6小时后，D组、E组与B组比较，均有显著差异(P<0.05)，但D组、E组之间无明显差异。
MDA 在治疗后4～6小时后，D组、E组与B组比较，均有明显差异(P<0.05)，D组、E组之间无显著差异，但E组似乎改善更显著。
动脉血气的变化 在治疗后4小时，D组、E组与B组及C组比较，A-aDO2及PaO2均有显著差异(P<0.05)，D组、E组之间无明显差异。
D/W% D组、E组与B组及C组比较，有显著差异(P<0.01)，D组、E组之间无明显差异。但E组似乎改善更显著。
光镜所见 A组呈现正常肺组织形态；B组可见肺内充血，炎症呈弥漫状，间质因炎细胞浸润而增宽，肺泡萎陷，有些肺泡腔充满水肿液，肺内小血管扩张，可见红白血栓；C组见肺内充血，间质中性粒细胞中等度浸润，肺泡内见水肿液；D组可见肺泡隔毛细血管扩张、充血，间质中性粒细胞轻中度浸润，肺泡腔内水肿液较少，多数肺泡呈现正常形态；E组改变较D组为轻，可见少数肺泡隔毛细血管轻度充血，间质中性粒细胞轻度浸润。
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电镜所见 B组、C组见肺泡Ⅱ型上皮细胞中度增生，毛细血管基底膜不完整，多数线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化。D组见肺泡Ⅱ型上皮细胞轻度增生，一些线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化，中性粒细胞浸润。E组未见肺泡Ⅱ型上皮细胞增生，毛细血管基底膜完整，未见线粒体膜的断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化(图1～4)。
图1 A组，肺泡上皮细胞可见正常线粒体结构(2万倍)
图2 B组，肺泡上皮细胞内多数线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线体空泡化(2万倍)
图3 D组，肺泡上皮细胞一些线粒体肿胀，可出现膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化(2万倍)
, 百拇医药
图4 E组，肺泡上皮细胞未见线粒体膜的断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化，基本结构似A组(2万倍)
讨论
David等[1，2]认为机体应激时产生大量内阿片肽并抑制了延髓头端腹外侧区(RVLM)的压力反射从而导致低血压，即应用阿片受体阻断剂纳洛酮治疗感染性休克，发现其确能提升模型动物的MAP，但对于模型动物的肺脏及胃肠道却几乎无保护作用[3]。郭子健等[4]发现中药丹参能够显著减轻感染性休克动物的肺水肿，并证实丹参通过清除氧自由基而实现对肺的保护的。从本研究的实验结果可以看出，纳洛酮组、纳洛酮丹参合用组的MAP升高均较明显，且这两组均能降低模型动物的血乳酸盐含量，改善休克状态。已有报道[5]血乳配盐水平与休克程度相关，并可预报感染性休克的预后。治疗组非常明显地降低血MDA的含量，表明丹参有较强的抗氧化性，能减少脂质过氧化的中间产物丙二醛的产生，从而保护细胞膜的完整性，维护脏器的功能。另外，丹参抗休克还有其他作用机制：丹参有直接的抗炎、抗免疫作用，可对抗内毒素(LPS)的损伤作用[6]；可以减少肿瘤坏死因子(TNF)的合成[7]。病理解剖学提示纳洛酮丹参合用组的肺水肿情况明显较纳洛酮组为轻，电镜观察发现线粒体膜比较完整，即该处理维持了线粒体的稳定性，而纳洛酮组出现较多的线粒体的肿胀、空泡化以及膜的断裂、解体、嵴粒消失等。由于纳洛酮改善代谢状态是通过提升MAP而发挥作用的，而纳洛酮丹参合用不但能提升MAP，纠正休克状态，而且对肺脏有较好的保护作用，故我们认为纳洛酮丹参合用能改善感染性休克，并能减轻脏器的损伤，尤其是肺脏的缺氧性损伤，从而改善预后。参考文献
, http://www.100md.com
1，David M，Drolet G，Chalmers T.Cardio vasc ular effects of opiod antagonist naloxon e in rostral ventrolateral medulla of ra bbits.Am J Physiol，1990，258：R325-331.
2，Gurll J.Nelson神经肽.见：Fry Donald，eds.Mul tiple system organ failure.上海科学技术出版社，199 6.176-183.
3，马超英，江光明，万兰清，等.717复方制剂对小白鼠盲肠结扎穿孔术后所致感染性 休克的影响.中国危重病医学，1996，8：10-11.
4，郭子健，朱元玉.中药764-3对内毒素所致离体大鼠灌流肺损伤的保护作用探 讨.中国应用生理学杂志，1995，11：225-228.
, 百拇医药
5，Bakker J，Gris P，Coffernils M.Serial bl ood lactate levels can predict the devel opment of multiple organ failure followi ng septic shock.Am J Surg，1996，171：221-2 26.
6，杜成友，沈文律，李可洲，等.丹参对犬感染性休克内毒素的作用.华西医学杂志，1 997，12：87-88.
7，杨镛，吴伟，张立艺，等.内毒素休克免肿瘤坏死因子和自由基变化及复方丹参液作用 的实验研究.昆明医学院学报，1997，18：59.
(收稿：1999-06-18), http://www.100md.com
单位：江苏省中医院麻醉科，南京市(210029)
关键词：感染性休克；纳洛酮；丹参
临床麻醉学杂志000309
摘要 目的：观察纳洛酮和丹参合用 处理兔感染性休克模型后的循环、代谢及肺标本的 光镜和电镜下的病理改变。方法：选择30只健康家兔，随机分为五组，通过结扎盲肠末端并 造成穿 孔，复制与临床类似的家兔感染性休克模型后，给予相应的治疗。4小时后经颈总动脉置管 测MA P，并抽血测定乳酸盐、丙二醛及动脉血气；18小时后活杀动物取肺标本。结果：纳洛酮组 、纳 洛酮丹参合用组可明显地升高MAP，并可明显降低休克模型的血乳酸盐、花生四烯酸的代谢 产物丙二醛的水平。治疗组的肺水含量明显低于对照组。光镜见纳洛酮丹参合用组的肺淤血较轻，炎细胞浸润亦明显轻于对照组及纳洛酮组。电镜观察见 该组的线粒体膜仍保持完好，未见破裂或空泡化；而对照组及纳洛酮组的线粒体膜则 有明显的断裂、解体及线粒体的空泡化。结论：纳洛酮或纳洛酮丹参合用均可明显改善感染 性休克的代谢变化，保护脏器功能。因此纳洛酮和丹参合用在改善肺组织的病理形态学方 面远较单纯纳洛酮为好，疗效更佳。
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Protective Effects of Naloxone Plus Dansheng on the Lung in Septic Shock Rabbits
Tao Fusheng, Gu Hu, Cao Shihong, et al
(Anesthesiology Department， Jiangsu Provincial Traditional Chinese Medicine Hospital,Nanjing 210029)
Abstract Objective:To observe the changes in ci rculation,metabolism and pat hology of the lung preparation in septic shock rabbits treated with naloxone plu s dansheng.Methods:30 rabbits were randomly devided into five groups and septic shock model was made by surgical ligation and perforation of the caecum end.The animals were treated with different drugs and placebo in control group.MAP,blood lactate,MDA and blood gas were measured at 4h after and the lung preparation was taken by killing the animal at 18h after the treatment.Results:MAP was incre ased significantly and blood lactate and MDA were decreased markedly in the anim als treated with naloxone plus dansheng.Lung water was remarkably lower in the t reated groups than that in control group and mitochondria mambrane was kept comp lete observed under electron microscope in the treated groups.Conclusion:A combi nation of naloxone with dansheng can improve the changes in circulation and meta bolism of the septic shock rabbits,which is better than that of the septic shock ed animal treated with naloxone alone.
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Key words Septic shock Naloxone Dansheng
感染性休克发病凶险，往往导致多个内脏器官的功能损害，其中尤以急性肺损伤(ALI)最为多见。本研究在感染性休克的动物模型中观察了复合应用纳洛酮和丹参对肺的保护作用。
材料与方法
方法与步骤 新西兰大白兔30只，雌雄不拘，体重2.4±1.1kg，采用乌拉坦麻醉，随机分组为五组，每组6只。A组为假手术对照组，其余均先结扎盲肠末端并造成穿孔以复制感染性休克模型[1]；B组为对照组，休克8～10小时后静注生理盐水10ml.kg-1.h-1；C组为常规治疗组，休克8～10小时后给予抗炎、升压、补液治疗；D组为纳洛酮组，休克8～10小时后静注纳洛酮0.4mg/kg；E组为纳洛酮+丹参组，休克8～10小时后静注纳洛酮0.4mg/kg和静滴丹参(四川华西医科大学制药厂制)5g/kg(加入5%葡萄糖盐液)。
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指标测定 各组均在乌拉坦麻醉下行颈内动脉穿刺，接RM-6000型多导生理仪测MAP，以A组作为正常对照，其余各组均在治疗4～6小时后抽血作乳酸(LACT)及丙二醛(MDA)的测定及动脉血气分析。治疗12～18小时后处死动物，取肺作光镜及电镜切片检查，随后作肺的干/湿重比(D/W%)。
统计分析 所得数据均采用
±s表示，两组间比较用配对的t检验，多个样本的均数比较用方差分析。结果
各组治疗后测定结果见表1。
表1 家兔休克模型治疗后的各项指标比较(
±s) 组别, 百拇医药 MAP(mmHg)
LACT(mmol/L)
MDA(mmol/L)
A-aDO(kPa)
PaO2
D/W(%)
A
97.0±8.03
1.56±1.35
5.05±0.66
4.87±1.01
12.12±0.64
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25.23±3.44
B
73.4±11.41
4.10±2.21
10.07±2.94
15.23±2.34
7.56±1.02
15.03±2.89
C
70.6±13.44
2.84±0.76
4.99±0.55
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14.15±1.42
8.17±0.91
12.31±4.71
D
89.8±9.65*
1.51±0.88*
3.16±0.94*
5.24±0.35*
11.72±2.14*
24.71±3.16*
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E
93.8±17.89*
1.31±0.72*
2.51±0.71*
6.35±1.24*
10.31±0.52*
32.13±4.51*
与B组及C组比较，*P<0.05
MAP D组、E组均有效地提升MAP，与B组或C组比较，差异显著(P<0.05)，但D组、E组之间无明显差异。
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LACT 在治疗后4～6小时后，D组、E组与B组比较，均有显著差异(P<0.05)，但D组、E组之间无明显差异。
MDA 在治疗后4～6小时后，D组、E组与B组比较，均有明显差异(P<0.05)，D组、E组之间无显著差异，但E组似乎改善更显著。
动脉血气的变化 在治疗后4小时，D组、E组与B组及C组比较，A-aDO2及PaO2均有显著差异(P<0.05)，D组、E组之间无明显差异。
D/W% D组、E组与B组及C组比较，有显著差异(P<0.01)，D组、E组之间无明显差异。但E组似乎改善更显著。
光镜所见 A组呈现正常肺组织形态；B组可见肺内充血，炎症呈弥漫状，间质因炎细胞浸润而增宽，肺泡萎陷，有些肺泡腔充满水肿液，肺内小血管扩张，可见红白血栓；C组见肺内充血，间质中性粒细胞中等度浸润，肺泡内见水肿液；D组可见肺泡隔毛细血管扩张、充血，间质中性粒细胞轻中度浸润，肺泡腔内水肿液较少，多数肺泡呈现正常形态；E组改变较D组为轻，可见少数肺泡隔毛细血管轻度充血，间质中性粒细胞轻度浸润。
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电镜所见 B组、C组见肺泡Ⅱ型上皮细胞中度增生，毛细血管基底膜不完整，多数线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化。D组见肺泡Ⅱ型上皮细胞轻度增生，一些线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化，中性粒细胞浸润。E组未见肺泡Ⅱ型上皮细胞增生，毛细血管基底膜完整，未见线粒体膜的断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化(图1～4)。
图1 A组，肺泡上皮细胞可见正常线粒体结构(2万倍)
图2 B组，肺泡上皮细胞内多数线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线体空泡化(2万倍)
图3 D组，肺泡上皮细胞一些线粒体肿胀，可出现膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化(2万倍)
, 百拇医药
图4 E组，肺泡上皮细胞未见线粒体膜的断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化，基本结构似A组(2万倍)
讨论
David等[1，2]认为机体应激时产生大量内阿片肽并抑制了延髓头端腹外侧区(RVLM)的压力反射从而导致低血压，即应用阿片受体阻断剂纳洛酮治疗感染性休克，发现其确能提升模型动物的MAP，但对于模型动物的肺脏及胃肠道却几乎无保护作用[3]。郭子健等[4]发现中药丹参能够显著减轻感染性休克动物的肺水肿，并证实丹参通过清除氧自由基而实现对肺的保护的。从本研究的实验结果可以看出，纳洛酮组、纳洛酮丹参合用组的MAP升高均较明显，且这两组均能降低模型动物的血乳酸盐含量，改善休克状态。已有报道[5]血乳配盐水平与休克程度相关，并可预报感染性休克的预后。治疗组非常明显地降低血MDA的含量，表明丹参有较强的抗氧化性，能减少脂质过氧化的中间产物丙二醛的产生，从而保护细胞膜的完整性，维护脏器的功能。另外，丹参抗休克还有其他作用机制：丹参有直接的抗炎、抗免疫作用，可对抗内毒素(LPS)的损伤作用[6]；可以减少肿瘤坏死因子(TNF)的合成[7]。病理解剖学提示纳洛酮丹参合用组的肺水肿情况明显较纳洛酮组为轻，电镜观察发现线粒体膜比较完整，即该处理维持了线粒体的稳定性，而纳洛酮组出现较多的线粒体的肿胀、空泡化以及膜的断裂、解体、嵴粒消失等。由于纳洛酮改善代谢状态是通过提升MAP而发挥作用的，而纳洛酮丹参合用不但能提升MAP，纠正休克状态，而且对肺脏有较好的保护作用，故我们认为纳洛酮丹参合用能改善感染性休克，并能减轻脏器的损伤，尤其是肺脏的缺氧性损伤，从而改善预后。参考文献
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1，David M，Drolet G，Chalmers T.Cardio vasc ular effects of opiod antagonist naloxon e in rostral ventrolateral medulla of ra bbits.Am J Physiol，1990，258：R325-331.
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3，马超英，江光明，万兰清，等.717复方制剂对小白鼠盲肠结扎穿孔术后所致感染性 休克的影响.中国危重病医学，1996，8：10-11.
4，郭子健，朱元玉.中药764-3对内毒素所致离体大鼠灌流肺损伤的保护作用探 讨.中国应用生理学杂志，1995，11：225-228.
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(收稿：1999-06-18), http://www.100md.com