射线对犬味觉组织影响的研究
作者：陈旺 王中和 陆顺娟 王瑛 唐卫忠
单位：唐卫忠(第二军医大 学长海医院口腔科，上海 200433)；陈旺(浙江医科大学附属二院口腔科，浙江杭州 310009)；王中和(上海市第二医科大学附属第九人民医院)；陆顺娟(上海市第二医科大学附属第九人民医院)；王瑛(上海市第二医科大学附属第九人民医院)
关键词：γ射线；味蕾；丝状乳头；菌状乳头
摘 要摘 要：目的:研究γ射线对味觉组织的影响,探讨射线照射引起味觉改变的机制。方法:对犬口腔行60Co γ射线常规剂量照射,实验分两组:对照组(3只)和实验组(9只),实验组犬分别于照射后1，3，6个月处死并进行组织学观察。结果:照射后味蕾变化主要为味蕾细胞排列不规则,味细胞减少,而味蕾形态无变化;菌状乳头变化不明显;丝状乳头变化较大,尤其照射后1个月损伤最明显,以后逐渐恢复。结论:常规剂量照射引起的味觉组织损伤是可恢复的,但完全恢复需要较长时间。照射对味觉组织的损伤作用可能是放疗患者味觉改变的主要原因。
, 百拇医药
分类号：R 781.5 文献标识码：A
文章编号：0258-879X(2000)02-0177-03
Effect of γ-ray on dog′s gustatory tissues
TANG Wei-Zhong
(Department of Stomatology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China)
CHEN Wang
(Department of Stomatology, Second Affiliated Hospital of Zhejiang Medical University,Hangzhou 310009, China)
, 百拇医药
WANG Zhong-He
(The Ninth People′s Hospital, Shanghai Second Medical University)
LU Shun-Juan
(The Ninth People′s Hospital, Shanghai Second Medical University)
WANG Ying
(The Ninth People′s Hospital, Shanghai Second Medical University)
ABSTRACT：Objective:To study the radiation effect of γ-ray on gustatory tissues.Methods:we observed the dog′s gustatory tissues change following γ-ray radiation by light microscope. The experiment included 2 groups:control group(3 dogs) and exposure group(9 dogs).Results:There were changes of the dark cells number per bud instead of the number of buds per fungiform papilla,the number of cells per bud. Fungiform papilla height and width and the number of fungiform papillae per slice had no change. But filiform papilla height and filiform papilla density were damaged.They were damaged mostly between 1 months and 3 months irradiated.Conclusions: The gustatory tissues damage is the main reason for radiation induced taste loss,and gustatory tissues change could recover but need long time.
, 百拇医药
KEY WORDS：γ-ray; taste bud; fungiform papilla; filiform papilla▲
味觉改变是头颈部肿瘤放射治疗早期反应之一,这一现象于1955年首次报道,以后各国学者对这一现象进行了临床和实验研究[1～4]。但放射引起味觉改变的机制尚未明确。本研究观察放射引起犬味觉组织变化，了解放射对味觉组织的影响及味觉组织的恢复情况,探讨味觉改变的机制。
1 材料和方法
1.1 动物及分组 选用健康普通杂种犬12只,年龄1～2岁,雌雄不限,体质量9～13 kg,平均11 kg。实验分两组:口腔照射组,9只;对照组,3只。
1.2 照射方法 实验犬采用2.5%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射全身麻醉,取侧卧位行远距离治疗机(Theratron 780 C型,加拿大产)60Co照射,以下颌骨为中心的左右双侧平行照射野,大小为6.5 cm×6.5 cm,包括全舌。每次双侧对照,SSD=80 cm。每野照射空气剂量为4.2 Gy,每日1次,共4次,舌的等效常规剂量为66 Gy。对照组不照射。
, 百拇医药
1.3 组织学标本制作 口腔放射组动物分别于放射后1,3,6个月处死取材。取舌前组织，置10%甲醛溶液固定48 h。组织固定后,切取1 cm长组织块(距舌尖0.5 cm),分切5块,即5个标本,每块长0.2 cm,石蜡包埋,切片，苏木精-伊红(HE)染色。
1.4 组织学观察 在光镜下观察丝状乳头、菌状乳头及味蕾的形态学变化，并行味蕾细胞及味细胞计数。每组观察10个味蕾并计数,所观察味蕾为接近正中切面(图1)，一极接近菌状乳头表面,另一极与乳头结缔组织相连。这样可得到每个味蕾该切面所含的总细胞数和味细胞数。
图1 对照组味蕾
Fig 1 Bud in control group (×100)
, http://www.100md.com
2 结 果
2.1 味蕾的变化 对照组见味蕾呈卵圆形,位于菌状乳头顶部上皮层内。味蕾由味细胞和支持细胞组成,排列有序。味细胞分布于支持细胞之间,位于味蕾中央,呈梭形，核居中央,呈柱状,染色深且均匀一致。 放射组见细胞排列混乱,味细胞减少;而味蕾的大小、形态及细胞数无显著变化(表1)。照射后3个月影响较大,照射后6个月已逐渐恢复。
表1 照射不同时间后味蕾细胞及味细胞计数的变化
Tab 1 The change of dark cells number and taste
buds after different irradiating time
Group
Number of buds
, http://www.100md.com
(per bud and slice)
Number of dark cells
(per bud and slice)
Control
18.2±3.7
3.6±1.2
Post irradiating
1 month
18.7±2.8
3.3±1.4
3 month
, 百拇医药
16.7±2.7
1.9±0.5**
6 month
18.4±2.5
3.1±0.7
**P<0.01 vs control, 1 and 6 month2.2 菌状乳头的变化 对照组见菌状乳头呈菌状,头大颈细,上皮层较薄,无明显角化层。菌状乳头散在分布于丝状乳头之间。 放射组见照射后1,3,6个月菌状乳头形态上仍呈菌状,大小无明显差异(图1，2)。
2.3 丝状乳头的变化 对照组见分布均匀且密,排列有序,尖端朝向一致。单个丝状乳头高、形态完整,呈锥体型,乳头表面有透明角化层。 放射组见丝状乳头受损,尤其放射后1个月,丝状乳头低平,呈丘状,数目明显减少,分布不均,排列无序(图2)。照射后3个月,可见组织增生,上皮棘细胞层增厚,丝状乳头高度增加,数目明显增加但仍然排列无序。照射后6个月,可见丝状乳头高度明显增加,呈梯形,也有呈锥体形,丝状乳头形态与密度与对照组相似,排列也较有序。
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图2 照射后1个月丝状乳头
和菌状乳头的改变(×40)
Fig 2 Filiform and fungiform papillae
after radiation 1 month (×40)
3 讨 论
3.1 放射对味觉组织的影响 本实验观察到照射后味蕾细胞排列混乱、味细胞减少,在照射后3个月最明显,以后又恢复,6个月时与对照组比较无差异;味蕾和菌状乳头形态无明显变化。丝状乳头在照射后观察到明显损伤,尤其照射后1个月最明显,乳头呈低平,整体密度明显减少,排列无序。随着时间的延续丝状乳头密度恢复较快。照射引起味觉组织改变主要表现在味蕾细胞排列混乱、味细胞减少、丝状乳头低平和稀少。损伤表现较早,从整个过程看，照射后1～3个月间损伤最明显,以后逐渐恢复,到6个月时已基本恢复。作者对这一过程同时进行了组织学定量研究,观察到了同样的过程[5]。这表明常规剂量照射引起味觉组织损伤是可复的,但完全恢复需较长时间,这与文献报道结果一致[1]。
, 百拇医药
从实验结果还可看到味蕾、丝状乳头对放射敏感性较大,菌状乳头明显较小。Mossman[4]曾对牛的味蕾细胞细胞膜进行了游离放射研究,以乳头上皮细胞细胞膜作对照,结果发现味蕾细胞膜的放射敏感性明显高于乳头上皮细胞细胞膜,与本研究结果相吻合。
3.2 放射引起味觉改变的可能机制 本实验观察到放射引起味觉组织改变主要表现在味蕾细胞排列混乱、味细胞减少、丝状乳头形态和数量改变。头颈部肿瘤放疗,舌、涎腺及神经大多同时处在放射野中,大多数学者认为味觉改变可能是射线直接损伤味蕾所致,也可能射线引起涎腺损伤导致唾液质和量的改变,继发味蕾损伤引起,或两者兼而有之[2～4]。Conger等[1]认为射线对味觉组织产生影响,如变性、坏死等,但不可能在短期内导致味蕾及味蕾细胞数迅速减少。据报道，放射(X射线,1.5 Gy)引起鼠味蕾损伤在放射后9 d表现最明显,20 d左右恢复,这与舌神经切断后表现类似,因而认为放射损伤支配味蕾的神经末梢,进而导致味蕾及味细胞大量减少，但神经的放射敏感性较味觉组织低。从现有资料分析,推测味蕾损伤可能是味觉功能改变的原因,而唾液及神经在味觉改变中也起一定作用，但需进一步作相关性研究。
, http://www.100md.com
作者简介：陈旺(1969～)，男(汉族)，硕士，主治医师
参考文献：
[1]Conger AD,Wells MA. Radiation and ageing effect on taste structure and function[J]. Radiat Res,1969,37(1):31-35.
[2]Shatzman AR,Mossman KL.Radiation effects on bovine taste bud membranes[J]. Radiat Res,1982,92(4):353-357.
[3]Tomita Y, Osaki T.Gustatory impairment and salivary gland pathophysiology in relation to oral cancer treatment[J].Int J Oral Maxillofac Surg,1990,19(3):299-304.
[4]Mossman KL. Frequent short-term oral complications of head and neck radiotherapy[J]. JADA,1994,73(4):318-322.
[5]陈 旺，王中和，陆顺娟，等.γ射线对味觉组织影响的定量研究[J].中华放射肿瘤学杂志,1998,7(1):33-36.
收稿日期：1999-07-15
修稿日期：1999-10-20, http://www.100md.com
单位：唐卫忠(第二军医大 学长海医院口腔科，上海 200433)；陈旺(浙江医科大学附属二院口腔科，浙江杭州 310009)；王中和(上海市第二医科大学附属第九人民医院)；陆顺娟(上海市第二医科大学附属第九人民医院)；王瑛(上海市第二医科大学附属第九人民医院)
关键词：γ射线；味蕾；丝状乳头；菌状乳头
摘 要摘 要：目的:研究γ射线对味觉组织的影响,探讨射线照射引起味觉改变的机制。方法:对犬口腔行60Co γ射线常规剂量照射,实验分两组:对照组(3只)和实验组(9只),实验组犬分别于照射后1，3，6个月处死并进行组织学观察。结果:照射后味蕾变化主要为味蕾细胞排列不规则,味细胞减少,而味蕾形态无变化;菌状乳头变化不明显;丝状乳头变化较大,尤其照射后1个月损伤最明显,以后逐渐恢复。结论:常规剂量照射引起的味觉组织损伤是可恢复的,但完全恢复需要较长时间。照射对味觉组织的损伤作用可能是放疗患者味觉改变的主要原因。
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分类号：R 781.5 文献标识码：A
文章编号：0258-879X(2000)02-0177-03
Effect of γ-ray on dog′s gustatory tissues
TANG Wei-Zhong
(Department of Stomatology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China)
CHEN Wang
(Department of Stomatology, Second Affiliated Hospital of Zhejiang Medical University,Hangzhou 310009, China)
, 百拇医药
WANG Zhong-He
(The Ninth People′s Hospital, Shanghai Second Medical University)
LU Shun-Juan
(The Ninth People′s Hospital, Shanghai Second Medical University)
WANG Ying
(The Ninth People′s Hospital, Shanghai Second Medical University)
ABSTRACT：Objective:To study the radiation effect of γ-ray on gustatory tissues.Methods:we observed the dog′s gustatory tissues change following γ-ray radiation by light microscope. The experiment included 2 groups:control group(3 dogs) and exposure group(9 dogs).Results:There were changes of the dark cells number per bud instead of the number of buds per fungiform papilla,the number of cells per bud. Fungiform papilla height and width and the number of fungiform papillae per slice had no change. But filiform papilla height and filiform papilla density were damaged.They were damaged mostly between 1 months and 3 months irradiated.Conclusions: The gustatory tissues damage is the main reason for radiation induced taste loss,and gustatory tissues change could recover but need long time.
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KEY WORDS：γ-ray; taste bud; fungiform papilla; filiform papilla▲
味觉改变是头颈部肿瘤放射治疗早期反应之一,这一现象于1955年首次报道,以后各国学者对这一现象进行了临床和实验研究[1～4]。但放射引起味觉改变的机制尚未明确。本研究观察放射引起犬味觉组织变化，了解放射对味觉组织的影响及味觉组织的恢复情况,探讨味觉改变的机制。
1 材料和方法
1.1 动物及分组 选用健康普通杂种犬12只,年龄1～2岁,雌雄不限,体质量9～13 kg,平均11 kg。实验分两组:口腔照射组,9只;对照组,3只。
1.2 照射方法 实验犬采用2.5%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射全身麻醉,取侧卧位行远距离治疗机(Theratron 780 C型,加拿大产)60Co照射,以下颌骨为中心的左右双侧平行照射野,大小为6.5 cm×6.5 cm,包括全舌。每次双侧对照,SSD=80 cm。每野照射空气剂量为4.2 Gy,每日1次,共4次,舌的等效常规剂量为66 Gy。对照组不照射。
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1.3 组织学标本制作 口腔放射组动物分别于放射后1,3,6个月处死取材。取舌前组织，置10%甲醛溶液固定48 h。组织固定后,切取1 cm长组织块(距舌尖0.5 cm),分切5块,即5个标本,每块长0.2 cm,石蜡包埋,切片，苏木精-伊红(HE)染色。
1.4 组织学观察 在光镜下观察丝状乳头、菌状乳头及味蕾的形态学变化，并行味蕾细胞及味细胞计数。每组观察10个味蕾并计数,所观察味蕾为接近正中切面(图1)，一极接近菌状乳头表面,另一极与乳头结缔组织相连。这样可得到每个味蕾该切面所含的总细胞数和味细胞数。
图1 对照组味蕾
Fig 1 Bud in control group (×100)
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2 结 果
2.1 味蕾的变化 对照组见味蕾呈卵圆形,位于菌状乳头顶部上皮层内。味蕾由味细胞和支持细胞组成,排列有序。味细胞分布于支持细胞之间,位于味蕾中央,呈梭形，核居中央,呈柱状,染色深且均匀一致。 放射组见细胞排列混乱,味细胞减少;而味蕾的大小、形态及细胞数无显著变化(表1)。照射后3个月影响较大,照射后6个月已逐渐恢复。
表1 照射不同时间后味蕾细胞及味细胞计数的变化
Tab 1 The change of dark cells number and taste
buds after different irradiating time
Group
Number of buds
, http://www.100md.com
(per bud and slice)
Number of dark cells
(per bud and slice)
Control
18.2±3.7
3.6±1.2
Post irradiating
1 month
18.7±2.8
3.3±1.4
3 month
, 百拇医药
16.7±2.7
1.9±0.5**
6 month
18.4±2.5
3.1±0.7
**P<0.01 vs control, 1 and 6 month2.2 菌状乳头的变化 对照组见菌状乳头呈菌状,头大颈细,上皮层较薄,无明显角化层。菌状乳头散在分布于丝状乳头之间。 放射组见照射后1,3,6个月菌状乳头形态上仍呈菌状,大小无明显差异(图1，2)。
2.3 丝状乳头的变化 对照组见分布均匀且密,排列有序,尖端朝向一致。单个丝状乳头高、形态完整,呈锥体型,乳头表面有透明角化层。 放射组见丝状乳头受损,尤其放射后1个月,丝状乳头低平,呈丘状,数目明显减少,分布不均,排列无序(图2)。照射后3个月,可见组织增生,上皮棘细胞层增厚,丝状乳头高度增加,数目明显增加但仍然排列无序。照射后6个月,可见丝状乳头高度明显增加,呈梯形,也有呈锥体形,丝状乳头形态与密度与对照组相似,排列也较有序。
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图2 照射后1个月丝状乳头
和菌状乳头的改变(×40)
Fig 2 Filiform and fungiform papillae
after radiation 1 month (×40)
3 讨 论
3.1 放射对味觉组织的影响 本实验观察到照射后味蕾细胞排列混乱、味细胞减少,在照射后3个月最明显,以后又恢复,6个月时与对照组比较无差异;味蕾和菌状乳头形态无明显变化。丝状乳头在照射后观察到明显损伤,尤其照射后1个月最明显,乳头呈低平,整体密度明显减少,排列无序。随着时间的延续丝状乳头密度恢复较快。照射引起味觉组织改变主要表现在味蕾细胞排列混乱、味细胞减少、丝状乳头低平和稀少。损伤表现较早,从整个过程看，照射后1～3个月间损伤最明显,以后逐渐恢复,到6个月时已基本恢复。作者对这一过程同时进行了组织学定量研究,观察到了同样的过程[5]。这表明常规剂量照射引起味觉组织损伤是可复的,但完全恢复需较长时间,这与文献报道结果一致[1]。
, 百拇医药
从实验结果还可看到味蕾、丝状乳头对放射敏感性较大,菌状乳头明显较小。Mossman[4]曾对牛的味蕾细胞细胞膜进行了游离放射研究,以乳头上皮细胞细胞膜作对照,结果发现味蕾细胞膜的放射敏感性明显高于乳头上皮细胞细胞膜,与本研究结果相吻合。
3.2 放射引起味觉改变的可能机制 本实验观察到放射引起味觉组织改变主要表现在味蕾细胞排列混乱、味细胞减少、丝状乳头形态和数量改变。头颈部肿瘤放疗,舌、涎腺及神经大多同时处在放射野中,大多数学者认为味觉改变可能是射线直接损伤味蕾所致,也可能射线引起涎腺损伤导致唾液质和量的改变,继发味蕾损伤引起,或两者兼而有之[2～4]。Conger等[1]认为射线对味觉组织产生影响,如变性、坏死等,但不可能在短期内导致味蕾及味蕾细胞数迅速减少。据报道，放射(X射线,1.5 Gy)引起鼠味蕾损伤在放射后9 d表现最明显,20 d左右恢复,这与舌神经切断后表现类似,因而认为放射损伤支配味蕾的神经末梢,进而导致味蕾及味细胞大量减少，但神经的放射敏感性较味觉组织低。从现有资料分析,推测味蕾损伤可能是味觉功能改变的原因,而唾液及神经在味觉改变中也起一定作用，但需进一步作相关性研究。
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作者简介：陈旺(1969～)，男(汉族)，硕士，主治医师
参考文献：
[1]Conger AD,Wells MA. Radiation and ageing effect on taste structure and function[J]. Radiat Res,1969,37(1):31-35.
[2]Shatzman AR,Mossman KL.Radiation effects on bovine taste bud membranes[J]. Radiat Res,1982,92(4):353-357.
[3]Tomita Y, Osaki T.Gustatory impairment and salivary gland pathophysiology in relation to oral cancer treatment[J].Int J Oral Maxillofac Surg,1990,19(3):299-304.
[4]Mossman KL. Frequent short-term oral complications of head and neck radiotherapy[J]. JADA,1994,73(4):318-322.
[5]陈 旺，王中和，陆顺娟，等.γ射线对味觉组织影响的定量研究[J].中华放射肿瘤学杂志,1998,7(1):33-36.
收稿日期：1999-07-15
修稿日期：1999-10-20, http://www.100md.com