K562细胞中氯化血红素诱导性表达基因的研究

http://www.100md.com 中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心 410078长沙 陈汉春；孟巧

细胞系|K562|氯化血红素|抑制性消减杂交

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     中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心 410078长沙 陈汉春；孟巧

    关键词：细胞系；K562；氯化血红素；抑制性消减杂交

    摘要：目的 鉴定K5 6 2细胞中氯化血红素 (hemin)诱导性表达基因。方法 分别提取经hemin诱导培养的K5 6 2细胞 (tester)和未加诱导剂培养的K5 6 2细胞 (driver)mRNA ,逆转录合成双链cDNA。采用抑制性消减杂交 (SSH)技术构建正向消减cDNA文库。筛选出阳性克隆。PCR扩增阳性克隆插入片段。反向Northern点杂交确定hemin诱导后表达上调的cDNA片段并测序后与GenBank序列进行Blast同源性比较分析。结果 发现 15个cDNA片段在hemin诱导后表达上调 ,其中大部分与GenBank中已知功能蛋白质的mRNA序列同源 ,包括珠蛋白epsilon 1(globinε1) ,类谷胱甘肽巯基转移酶Omega

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