循环内皮细胞、内皮素及一氧化氮对创伤大白兔伤情的评估作用
作者：杨春华 林水金 冯素珍
单位：杨春华(广州军区广州总医院ICU 510010)；林水金(重庆市大坪医院战创伤救治培训基地 400042)；冯素珍(重庆市大坪医院战创伤救治培训基地 400042)
关键词：创伤；循环内皮细胞；内皮素；一氧化氮；兔
广东医学000212 【摘要】 目的 探讨循环内皮细胞(CEC)、内皮素(ET)及一氧化氮(NO)在创伤大白兔外周血中的变化规律及意义。方法 实验动物分为创伤组、治疗组及对照组；分别观察各组中CEC，ET及NO的变化及伤情。结果 ①创伤组外周血中ET，NO含量早期急剧升高，后期又急剧下降，变化波动极大，其多脏器功能不全综合征(MODS)的发生率及病死率显著高于其他两组；在血管内皮细胞(VEC)损伤的前期或早期，即在ET，NO含量升高以前或早期应用细胞保护剂处理的治疗组，外周血中ET，NO含量变化较小，且MODS发病率及病死率显著降低。②外周血中CEC计数随伤情的加重而增多；外周血中ET，NO含量随伤情的加重先升而后降，并随伤情的恢复而恢复。结论 ①外周血中ET，NO含量变化在MODS的发病机制中及对MODS的预诊和防治有着重要的意义。②外周血中CEC的计数、ET、NO含量变化与创伤伤情关系密切，并可作为创伤伤情的评估指标。
, 百拇医药
Measurement of circulation endothelial cell, endothelin and nitric oxide in trauma rabbits
Yang Chunhua, Lin Shuijin, Feng Suzhen
(Department of Intensive Care Unit, General Hospital of Guangzhou Command of PLA, Guangzhou 510010)
【Abstract】 Objective To explore the significance and change of CEC, NO and ET in the peripheral blood of injured rabbits.Methods The animals were divided into three groups: the traumatic group, the therapy group and the normal group. The number of CEC and concentration of ET and NO in the peripheral blood and the status of trauma was observed.Results ①The change in amplitude of the concentration of ET and NO in the traumatic group was much greater than that in the therapy group and the incidence and mortality of MODS were also higher. ②The number of CEC increased as injury aggravated. The concentration of ET and NO increased after injury but decreased as trauma and aggravated and returned to normal with improvement of injury. Conclusion ①ET and No are wery important in the pathogenesis, prophylaxis and early diagnosis of MODS.②The number of CEC and concentration of ET and NO may be useful in the evaluation of trauma.
, 百拇医药
【Key words】 Endothelin Nitric oxide Circulating endothelial cells Rabbits Trauma
循环内皮细胞(CEC)是脱落入血的血管内皮细胞(VEC)，一氧化氮(NO)、内皮素(ET)主要是由VEC合成、分泌的一对血管活性物质，具有多种功能。CEC，ET及NO还是观察VEC损伤的指标，但作为创伤伤情的评估指标文献报道较少。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 日本长耳大白兔55只，体重22～30 kg，雌雄不拘，随机分成创伤组(20只)、治疗组(20只)及对照组(15只)。
1.2 实验方法 本实验动物模型是以盛志勇多脏器功能不全综合征(MODS)动物模型及葛庆华挤压伤综合征动物模型为指导而建立的。创伤组即用上述方法致伤；治疗组分别于休克末及伤后d 1静注654-2 1 mg/kg；对照组无创伤。具体方法及MODS诊断标准详见参考文献[1]。CEC计数参考文献[2]的方法，NO含量测定参考文献[3]的方法。ET测定采用ET放射免疫药盒(北京东亚免疫技术研究所提供)，按其操作说明书操作。
, 百拇医药
1.3 统计学方法 不等例双因素方差分析及χ2检验。
2 结果
2.1 外周血CEC计数 如表1所示：创伤组伤后各时限点CEC计数均显著高于其他两组(P<0.01)，且伤后7 d显著高于其他时限点(P<0.05)；治疗组伤后1，3 d外周血CEC计数显著高对对照组(P<0.01)，但伤后7～10 d恢复正常。
表1 外周血CEC计数个/0.9 μl 分组
伤前
伤后
1 d
3 d
7 d
, 百拇医药
10 d
创伤组
4.3±0.93
9.3±1.10△
8.6±1.50△
16.4±2.75△▲
10.8±2.20△
治疗组
4.4±0.87
7.8±1.09
6.4±0.90
, 百拇医药
5.0±0.89
4.7±0.84
对照组
4.2±0.93
4.5±0.80
4.4±0.60
4.0±0.60
4.4±0.70
注：△与治疗组、对照组相同时限点比较P<0.01，与对照组相同时限点比较P<0.01，▲与组内其他时限点比较P<0.05
2.2 外周血ET含量 如表2所示：创伤组外周血ET含量于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，且以1 d升高最为显著，于伤后3～10 d显著低于其他两组(P<0.01)；治疗组于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，于伤后3～10 d恢复正常。
, 百拇医药
2.3 外周血NO含量 如表3所示：创伤组外周血NO含量小于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，与治疗组差异无显著性(P>0.05)，于伤后3～10 d显著低于其他两组(P<0.01)；治疗组于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，于伤后3～10 d恢复正常。表2 外周血ET含量pg/ml 分组
伤前
伤后
6 h
1 d
3 d
7 d
10 d
创伤组
, 百拇医药
92.7±18.3
239.1±34.5△
270.3±41.6△
66.5±17.1△
50.4±17.2△
54.7±10.2△
治疗组
88.1±15.2
212.7±26.1
175.1±28.9
, http://www.100md.com
101.4±23.5
98.7±18.3
93.2±16.4
对照组
94.2±19.7
109.1±18.9
87.3±15.2
86.1±11.8
87.3±13.4
96.8±18.2
注：△与治疗组、对照组同一时限点比较P<0.01，与对照组同一时限点比较P<0.01表3 外周血NO含量μg/ml 分组
, 百拇医药
伤前
伤后
6 h
1 d
3 d
7 d
10 d
创伤组
1.12±0.22
1.96±0.24
1.69±0.24
0.44±0.11
, http://www.100md.com
0.40±0.12
0.38±0.13
治疗组
1.10±0.20
1.84±0.26
1.58±0.26
1.21±0.24
1.13±0.21
1.18±0.18
对照组
1.10±0.17
, 百拇医药
1.31±0.24
1.15±0.23
1.12±0.14
1.20±0.18
1.17±0.19
注：与对照组相应时限点比较P<0.01
2.4 发生MODS及死亡情况 创伤组于伤后7 d，10分别有6只和12只发生MODS，10 d内死亡17只；治疗组伤后7 d，10 MODS例数分别为2只和3只，显著低于创伤组(P<0.05)，10 d内死亡5只，亦显著低于创伤组(P<0.05)。对照组无MODS及死亡发生。3 讨论
严重创伤、感染等疾病的最终死因多为MODS。而MODS的根本在于各器官细胞的损伤，细胞损伤的根本又在于细胞供血的微循环障碍，微循环障碍的根本又在于血管内皮细胞(VEC)的损伤及中性粒细胞与VEC在多种粘附分子和各种炎性介质作用下而产生的粘附连锁反应。作为VEC损伤的重要标志物ET及NO，它们即可作为一对重要的血管张力调节物质而调节改善组织的微循环，但其分泌失调时亦可引起严重的组织细胞缺血缺氧性损害[4]。本实验结果显示：MODS发生率及病死率极高的创伤组，其外周血ET，NO含量先显著升高，而后又显著下降，变化波动极大；在ET，NO含量升高前或升高的早期，即在VEC损伤前或早期利用细胞保护剂处理的治疗组，其ET，NO含量变化较小，且可显著降低MODS的发生率及病死率。表明：VEC损伤后所引起的ET及NO分泌失调在创伤后MODS的发生发展中有着重要的作用；外周血ET，NO含量测定对MODS的预诊及防治有一定的指导意义。
, http://www.100md.com
严重创伤及危重病患者的病情和预后评估是ICU研究中的重点课题。国内外学者对此进行了不懈的努力，并提出了各种各样的评估方法和系统。但均因存在这样或那样的缺陷，其临床应用和推广均受到一定限制。目前国内外普遍采用的创伤评分系统为ISS评分法及由此发展而来的TRISS法，前者的缺陷为伤员的严重度评分与预后估计的线性关系不够理想，后者除了前者的缺点外，还有年龄分段过于简单的不足[5]。国内外ICU较普遍采用的另一评估系统——APACHE系统，其参数太多且繁杂，并受年龄及伤前慢性病的影响；同时有研究发现[6]：APACHE系统对MODS的预测结果明显不准。本研究发现：外周血CEC计数随伤情的加重而增加；外周血ET，NO含量随伤情的加重先升高，而随伤情的进一步加重显著下降，并随伤情的恢复而恢复。表明外周血CEC计数、ET及NO含量的测定与创伤伤情关系密切，并可作为创伤伤情的评估指标。
参考文献
1，杨春华，林水金，杨映波.创伤后大白兔重要脏器的结构及功能损害.广东医学，1996，17(12)：838
, 百拇医药
2，杨春华，林水金，冯素珍.NO在VEC早期损伤中的预诊意义.中华实验外科杂志，1996，14：98
3，Green LC, Wanger DA. Analysis of nitrate and nitrite in biological fields. J Biochem, 1982, 126:131
4，屈振亮，渠江海，杨春明.重症胰腺炎并发MODS时内皮素和一氧化氮的变化及药物治疗作用.中国危重病急救医学，1998，10(10)：199
5，朱佩芳.进一步推进我国创伤评分工作的开展.中华创伤杂志，1998，14(3)：132
6，侯百东，刘大为.APACHE-Ⅱ评分在危重病患者中的应用及意义.中国危重病急救医学，1997，9(12)：735
(收稿日期：1999-10-18), 百拇医药
单位：杨春华(广州军区广州总医院ICU 510010)；林水金(重庆市大坪医院战创伤救治培训基地 400042)；冯素珍(重庆市大坪医院战创伤救治培训基地 400042)
关键词：创伤；循环内皮细胞；内皮素；一氧化氮；兔
广东医学000212 【摘要】 目的 探讨循环内皮细胞(CEC)、内皮素(ET)及一氧化氮(NO)在创伤大白兔外周血中的变化规律及意义。方法 实验动物分为创伤组、治疗组及对照组；分别观察各组中CEC，ET及NO的变化及伤情。结果 ①创伤组外周血中ET，NO含量早期急剧升高，后期又急剧下降，变化波动极大，其多脏器功能不全综合征(MODS)的发生率及病死率显著高于其他两组；在血管内皮细胞(VEC)损伤的前期或早期，即在ET，NO含量升高以前或早期应用细胞保护剂处理的治疗组，外周血中ET，NO含量变化较小，且MODS发病率及病死率显著降低。②外周血中CEC计数随伤情的加重而增多；外周血中ET，NO含量随伤情的加重先升而后降，并随伤情的恢复而恢复。结论 ①外周血中ET，NO含量变化在MODS的发病机制中及对MODS的预诊和防治有着重要的意义。②外周血中CEC的计数、ET、NO含量变化与创伤伤情关系密切，并可作为创伤伤情的评估指标。
, 百拇医药
Measurement of circulation endothelial cell, endothelin and nitric oxide in trauma rabbits
Yang Chunhua, Lin Shuijin, Feng Suzhen
(Department of Intensive Care Unit, General Hospital of Guangzhou Command of PLA, Guangzhou 510010)
【Abstract】 Objective To explore the significance and change of CEC, NO and ET in the peripheral blood of injured rabbits.Methods The animals were divided into three groups: the traumatic group, the therapy group and the normal group. The number of CEC and concentration of ET and NO in the peripheral blood and the status of trauma was observed.Results ①The change in amplitude of the concentration of ET and NO in the traumatic group was much greater than that in the therapy group and the incidence and mortality of MODS were also higher. ②The number of CEC increased as injury aggravated. The concentration of ET and NO increased after injury but decreased as trauma and aggravated and returned to normal with improvement of injury. Conclusion ①ET and No are wery important in the pathogenesis, prophylaxis and early diagnosis of MODS.②The number of CEC and concentration of ET and NO may be useful in the evaluation of trauma.
, 百拇医药
【Key words】 Endothelin Nitric oxide Circulating endothelial cells Rabbits Trauma
循环内皮细胞(CEC)是脱落入血的血管内皮细胞(VEC)，一氧化氮(NO)、内皮素(ET)主要是由VEC合成、分泌的一对血管活性物质，具有多种功能。CEC，ET及NO还是观察VEC损伤的指标，但作为创伤伤情的评估指标文献报道较少。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 日本长耳大白兔55只，体重22～30 kg，雌雄不拘，随机分成创伤组(20只)、治疗组(20只)及对照组(15只)。
1.2 实验方法 本实验动物模型是以盛志勇多脏器功能不全综合征(MODS)动物模型及葛庆华挤压伤综合征动物模型为指导而建立的。创伤组即用上述方法致伤；治疗组分别于休克末及伤后d 1静注654-2 1 mg/kg；对照组无创伤。具体方法及MODS诊断标准详见参考文献[1]。CEC计数参考文献[2]的方法，NO含量测定参考文献[3]的方法。ET测定采用ET放射免疫药盒(北京东亚免疫技术研究所提供)，按其操作说明书操作。
, 百拇医药
1.3 统计学方法 不等例双因素方差分析及χ2检验。
2 结果
2.1 外周血CEC计数 如表1所示：创伤组伤后各时限点CEC计数均显著高于其他两组(P<0.01)，且伤后7 d显著高于其他时限点(P<0.05)；治疗组伤后1，3 d外周血CEC计数显著高对对照组(P<0.01)，但伤后7～10 d恢复正常。
表1 外周血CEC计数个/0.9 μl 分组
伤前
伤后
1 d
3 d
7 d
, 百拇医药
10 d
创伤组
4.3±0.93
9.3±1.10△
8.6±1.50△
16.4±2.75△▲
10.8±2.20△
治疗组
4.4±0.87
7.8±1.09
6.4±0.90
, 百拇医药
5.0±0.89
4.7±0.84
对照组
4.2±0.93
4.5±0.80
4.4±0.60
4.0±0.60
4.4±0.70
注：△与治疗组、对照组相同时限点比较P<0.01，与对照组相同时限点比较P<0.01，▲与组内其他时限点比较P<0.05
2.2 外周血ET含量 如表2所示：创伤组外周血ET含量于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，且以1 d升高最为显著，于伤后3～10 d显著低于其他两组(P<0.01)；治疗组于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，于伤后3～10 d恢复正常。
, 百拇医药
2.3 外周血NO含量 如表3所示：创伤组外周血NO含量小于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，与治疗组差异无显著性(P>0.05)，于伤后3～10 d显著低于其他两组(P<0.01)；治疗组于伤后6 h及1 d显著高于对照组(P<0.01)，于伤后3～10 d恢复正常。表2 外周血ET含量pg/ml 分组
伤前
伤后
6 h
1 d
3 d
7 d
10 d
创伤组
, 百拇医药
92.7±18.3
239.1±34.5△
270.3±41.6△
66.5±17.1△
50.4±17.2△
54.7±10.2△
治疗组
88.1±15.2
212.7±26.1
175.1±28.9
, http://www.100md.com
101.4±23.5
98.7±18.3
93.2±16.4
对照组
94.2±19.7
109.1±18.9
87.3±15.2
86.1±11.8
87.3±13.4
96.8±18.2
注：△与治疗组、对照组同一时限点比较P<0.01，与对照组同一时限点比较P<0.01表3 外周血NO含量μg/ml 分组
, 百拇医药
伤前
伤后
6 h
1 d
3 d
7 d
10 d
创伤组
1.12±0.22
1.96±0.24
1.69±0.24
0.44±0.11
, http://www.100md.com
0.40±0.12
0.38±0.13
治疗组
1.10±0.20
1.84±0.26
1.58±0.26
1.21±0.24
1.13±0.21
1.18±0.18
对照组
1.10±0.17
, 百拇医药
1.31±0.24
1.15±0.23
1.12±0.14
1.20±0.18
1.17±0.19
注：与对照组相应时限点比较P<0.01
2.4 发生MODS及死亡情况 创伤组于伤后7 d，10分别有6只和12只发生MODS，10 d内死亡17只；治疗组伤后7 d，10 MODS例数分别为2只和3只，显著低于创伤组(P<0.05)，10 d内死亡5只，亦显著低于创伤组(P<0.05)。对照组无MODS及死亡发生。3 讨论
严重创伤、感染等疾病的最终死因多为MODS。而MODS的根本在于各器官细胞的损伤，细胞损伤的根本又在于细胞供血的微循环障碍，微循环障碍的根本又在于血管内皮细胞(VEC)的损伤及中性粒细胞与VEC在多种粘附分子和各种炎性介质作用下而产生的粘附连锁反应。作为VEC损伤的重要标志物ET及NO，它们即可作为一对重要的血管张力调节物质而调节改善组织的微循环，但其分泌失调时亦可引起严重的组织细胞缺血缺氧性损害[4]。本实验结果显示：MODS发生率及病死率极高的创伤组，其外周血ET，NO含量先显著升高，而后又显著下降，变化波动极大；在ET，NO含量升高前或升高的早期，即在VEC损伤前或早期利用细胞保护剂处理的治疗组，其ET，NO含量变化较小，且可显著降低MODS的发生率及病死率。表明：VEC损伤后所引起的ET及NO分泌失调在创伤后MODS的发生发展中有着重要的作用；外周血ET，NO含量测定对MODS的预诊及防治有一定的指导意义。
, http://www.100md.com
严重创伤及危重病患者的病情和预后评估是ICU研究中的重点课题。国内外学者对此进行了不懈的努力，并提出了各种各样的评估方法和系统。但均因存在这样或那样的缺陷，其临床应用和推广均受到一定限制。目前国内外普遍采用的创伤评分系统为ISS评分法及由此发展而来的TRISS法，前者的缺陷为伤员的严重度评分与预后估计的线性关系不够理想，后者除了前者的缺点外，还有年龄分段过于简单的不足[5]。国内外ICU较普遍采用的另一评估系统——APACHE系统，其参数太多且繁杂，并受年龄及伤前慢性病的影响；同时有研究发现[6]：APACHE系统对MODS的预测结果明显不准。本研究发现：外周血CEC计数随伤情的加重而增加；外周血ET，NO含量随伤情的加重先升高，而随伤情的进一步加重显著下降，并随伤情的恢复而恢复。表明外周血CEC计数、ET及NO含量的测定与创伤伤情关系密切，并可作为创伤伤情的评估指标。
参考文献
1，杨春华，林水金，杨映波.创伤后大白兔重要脏器的结构及功能损害.广东医学，1996，17(12)：838
, 百拇医药
2，杨春华，林水金，冯素珍.NO在VEC早期损伤中的预诊意义.中华实验外科杂志，1996，14：98
3，Green LC, Wanger DA. Analysis of nitrate and nitrite in biological fields. J Biochem, 1982, 126:131
4，屈振亮，渠江海，杨春明.重症胰腺炎并发MODS时内皮素和一氧化氮的变化及药物治疗作用.中国危重病急救医学，1998，10(10)：199
5，朱佩芳.进一步推进我国创伤评分工作的开展.中华创伤杂志，1998，14(3)：132
6，侯百东，刘大为.APACHE-Ⅱ评分在危重病患者中的应用及意义.中国危重病急救医学，1997，9(12)：735
(收稿日期：1999-10-18), 百拇医药