促凝剂试验法Rh血型鉴定227例结果分析
作者：粟明丽
单位：粟明丽(桂林医学院附属医院输血科,广西桂林市 541001)
关键词：促凝剂；Rh血型
华夏医学000494 中图分类号：R446.11 文献标识码：B 文章编号：1008-2409(2000)04-0534-02
红细胞血型系统Rh血型不合引起的输血反应和新生儿溶血病偶尔有过报道，我国Rh阴性的人不到1%，而输血或妊娠接受D抗原的机会为99%以上，因此有必要做好Rh血型的鉴定工作。常用的鉴定Rh血型的方法是酶法和抗人球蛋白法，此两种方法费时，不利于急诊抢救患者。笔者采用促凝剂试验法与前两种方法做对比，分别对227例患者做Rh血型鉴定，取得了一致的效果，结果报告如下。
1 材料与方法
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1.1 试剂 促凝剂试剂由南京生物医学工程研究所提供，菠萝酶自制，多特异性抗人球蛋白血清由上海血液中心国家血型参比实验室提供。
1.2 检测对象 216例患者为本院1998年1月入院的患者，11例为全年用抗人球蛋白法鉴定Rh血型查出的Rh阴性患者，总共227例。
1.3 方法
1.3.1 促凝剂试验法：①取小试管标明检测管，阴性、阳性对照各1管;②各管中分别加入抗D血清1滴，检测管加待检RBC 1滴，阳性对照管加阳性RBC 1滴，阴性对照管加阴性RBC 1滴；③各管分别加该试剂2滴；④混匀后，1500rpm离心1min,去上清液后加生理盐水2滴；⑤灯下读结果，轻摇不散的凝集为阳性，否则为阴性。阴性结果做镜检，所用RBC浓度为2%～5%。
1.3.2 菠萝酶法和抗人球蛋白法：按照《血站(库)实用管理手册》[1]操作。
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2 结果
见表1，从表1中看出促凝剂试验法与菠萝酶法和抗人球蛋白法三种方法结果均一致，鉴定结果阳性例数为216例，阴性例数为11例，经统计学处理P>0.05，无显著性差异。酶法操作时间为30min，抗人球蛋白法为40min，而促凝剂试验法仅为3～4min，时间大为缩短。
表1 227例患者促凝剂试验法Rh血型鉴定结果 方法
被检者RBC与抗D血清反应
反应条件
操作时间
(min)
Rh阳性
例数
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Rh阴性
例数
合计
菠萝酶法
216
11
227
37℃
30
抗人球蛋白法
216
11
227
, 百拇医药
37℃
40
促凝剂试验法
216
11
227
离心/min
室温/37℃
3～4
3 讨论
Rh血型系统是红细胞系统中较复杂的血型系统，Rh血型抗原有40种以上。多数情况下，Rh领域中99%以上的临床问题限于5个主要抗原D、E、e、C、c及其特异性抗体，其中D的抗原性仅次于A和B抗原，Rh阴性的人接受单一的Rh阳性血液单位后，50%～70%的人能产生预期的抗D。D抗体的形成几乎总是通过输血或妊娠免疫而产生[2]。对接受过输血者和产妇，特别是有新生儿溶血病患儿的母亲均应作Rh血型鉴定，因Rh阴性妇女血清中有抗体的百分率初产妇为0.5%，经产妇为20%。这些抗体在分娩后增高，甚至数年之后还有可检出者[3]，因此Rh血型的鉴定工作在临床上具有重要的意义。
, http://www.100md.com
促凝剂试验法主要用于快速测定不完全抗体。不完全抗体是一种小分子球蛋白，结合了不完全抗体的RBC称为致敏RBC，在生理盐水介质中不显示凝集反应。促凝剂中含有鱼精蛋白，它是有多个阳离子基团的大分子，它与表面带负电荷的RBC由于静电作用，在离心机的机械作用下发生凝聚，继而不完全抗体分子能产生凝集作用，再用带有负电荷的枸橼酸中和鱼精蛋白分子上的正负电荷，即可消除假凝集现象[1]。鉴定Rh血型用的抗D血清为不完全抗体，与被检RBC在盐水介质中不发生凝集反应，必须在酶介质或抗人球蛋白的作用下才能发生反应，促凝剂的作用机制与其类似，且具有操作简便、快速、敏感等优点，笔者同时用其来做交叉配血试验，严格按照操作规程和注意事项进行操作，同样取得了满意的效果。既可对ABO血型和Rh血型不相容的患者急救输血争取宝贵的时间，还可以为临床输血提供安全保障。
参考文献
[1] 安欣良主编.血站(库)实用管理手册[M].苏州：苏州大学出版社，1993.57～58.
[2] 肖星甫译.美国血库协会技术手册委员会编[M].输血技术手册.北京：人民卫生出版社，1985.171.
[3] 华岳琳，岳树森主编.输血专业知识问答[M].沈阳：辽宁科学技术出版社，1996.235.
(收稿日期： 2000-02-17), http://www.100md.com
单位：粟明丽(桂林医学院附属医院输血科,广西桂林市 541001)
关键词：促凝剂；Rh血型
华夏医学000494 中图分类号：R446.11 文献标识码：B 文章编号：1008-2409(2000)04-0534-02
红细胞血型系统Rh血型不合引起的输血反应和新生儿溶血病偶尔有过报道，我国Rh阴性的人不到1%，而输血或妊娠接受D抗原的机会为99%以上，因此有必要做好Rh血型的鉴定工作。常用的鉴定Rh血型的方法是酶法和抗人球蛋白法，此两种方法费时，不利于急诊抢救患者。笔者采用促凝剂试验法与前两种方法做对比，分别对227例患者做Rh血型鉴定，取得了一致的效果，结果报告如下。
1 材料与方法
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1.1 试剂 促凝剂试剂由南京生物医学工程研究所提供，菠萝酶自制，多特异性抗人球蛋白血清由上海血液中心国家血型参比实验室提供。
1.2 检测对象 216例患者为本院1998年1月入院的患者，11例为全年用抗人球蛋白法鉴定Rh血型查出的Rh阴性患者，总共227例。
1.3 方法
1.3.1 促凝剂试验法：①取小试管标明检测管，阴性、阳性对照各1管;②各管中分别加入抗D血清1滴，检测管加待检RBC 1滴，阳性对照管加阳性RBC 1滴，阴性对照管加阴性RBC 1滴；③各管分别加该试剂2滴；④混匀后，1500rpm离心1min,去上清液后加生理盐水2滴；⑤灯下读结果，轻摇不散的凝集为阳性，否则为阴性。阴性结果做镜检，所用RBC浓度为2%～5%。
1.3.2 菠萝酶法和抗人球蛋白法：按照《血站(库)实用管理手册》[1]操作。
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2 结果
见表1，从表1中看出促凝剂试验法与菠萝酶法和抗人球蛋白法三种方法结果均一致，鉴定结果阳性例数为216例，阴性例数为11例，经统计学处理P>0.05，无显著性差异。酶法操作时间为30min，抗人球蛋白法为40min，而促凝剂试验法仅为3～4min，时间大为缩短。
表1 227例患者促凝剂试验法Rh血型鉴定结果 方法
被检者RBC与抗D血清反应
反应条件
操作时间
(min)
Rh阳性
例数
, http://www.100md.com
Rh阴性
例数
合计
菠萝酶法
216
11
227
37℃
30
抗人球蛋白法
216
11
227
, 百拇医药
37℃
40
促凝剂试验法
216
11
227
离心/min
室温/37℃
3～4
3 讨论
Rh血型系统是红细胞系统中较复杂的血型系统，Rh血型抗原有40种以上。多数情况下，Rh领域中99%以上的临床问题限于5个主要抗原D、E、e、C、c及其特异性抗体，其中D的抗原性仅次于A和B抗原，Rh阴性的人接受单一的Rh阳性血液单位后，50%～70%的人能产生预期的抗D。D抗体的形成几乎总是通过输血或妊娠免疫而产生[2]。对接受过输血者和产妇，特别是有新生儿溶血病患儿的母亲均应作Rh血型鉴定，因Rh阴性妇女血清中有抗体的百分率初产妇为0.5%，经产妇为20%。这些抗体在分娩后增高，甚至数年之后还有可检出者[3]，因此Rh血型的鉴定工作在临床上具有重要的意义。
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促凝剂试验法主要用于快速测定不完全抗体。不完全抗体是一种小分子球蛋白，结合了不完全抗体的RBC称为致敏RBC，在生理盐水介质中不显示凝集反应。促凝剂中含有鱼精蛋白，它是有多个阳离子基团的大分子，它与表面带负电荷的RBC由于静电作用，在离心机的机械作用下发生凝聚，继而不完全抗体分子能产生凝集作用，再用带有负电荷的枸橼酸中和鱼精蛋白分子上的正负电荷，即可消除假凝集现象[1]。鉴定Rh血型用的抗D血清为不完全抗体，与被检RBC在盐水介质中不发生凝集反应，必须在酶介质或抗人球蛋白的作用下才能发生反应，促凝剂的作用机制与其类似，且具有操作简便、快速、敏感等优点，笔者同时用其来做交叉配血试验，严格按照操作规程和注意事项进行操作，同样取得了满意的效果。既可对ABO血型和Rh血型不相容的患者急救输血争取宝贵的时间，还可以为临床输血提供安全保障。
参考文献
[1] 安欣良主编.血站(库)实用管理手册[M].苏州：苏州大学出版社，1993.57～58.
[2] 肖星甫译.美国血库协会技术手册委员会编[M].输血技术手册.北京：人民卫生出版社，1985.171.
[3] 华岳琳，岳树森主编.输血专业知识问答[M].沈阳：辽宁科学技术出版社，1996.235.
(收稿日期： 2000-02-17), http://www.100md.com