膀胱移行细胞癌rasP21和P53表达的临床意义
作者：蔡文清 黎玮 张勇 张祥宏 程庆龙
单位：050000 石家庄，河北医科大学第二医院泌尿外科(蔡文清、黎玮、张勇)，病理科(张祥宏)；河北医科院附属医院外科 (程庆龙)
关键词：膀胱肿瘤；流式细胞术；基因；ras 蛋白质P53
New Page 2 【摘 要】 目的 探讨rasP21和P53表达与膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期、复发、肿瘤大小及患者年龄的关系。方法 采用免疫流式细胞光度术与病理学相结合的方法对47例膀胱移行细胞癌细胞rasP21和P53蛋白表达进行检测分析。结果 rasP21和P53阳性表达率随病理分级升高而渐升高(P<0.05)。T2～T4期rasP21、P53的阳性表达率高于T1期(P<0.05)。rasP21阳性者复发率为51.6%(16/31)，阴性者12.5%(2/16)，P53阳性者复发率为45.7%(16/35)，阴性者16.6%(2/12)。rasP21、P53的阳性表达率与肿瘤大小及患者的年龄无统计学差异。结论 rasP21和P53的表达可反映膀胱移行细胞癌的恶性程度和预后，可作为临床上有价值的指标。
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【中图号】 R737.14
Clinical significance of rasP21 and P53 oncoprotein expression in
transitional cell carcinomas of bladder
CAI Wenqing, LI Wei,ZHANG Yong,et al.Department of Urology,Second Hospital,Hebei Medical University,Shijiazhuang,Hebei 050000
【Abstract】 Objective To elucidate rasP21 and P53 expression in bladder transitional carcinoma and their relationship with pathological grade,clinical stage,recurrence,tumor size and patients′ ages.Methods rasP21 and P53 expression at protein level were studied in 47 cases of bladder transitional carcinoma with flow cytometric(FCM)and pathological methods.Results With the differentiation of the bladder cancer,rasP21 and P53 positive expressions were significantly increased.There were statistical significance on grade Ⅰand Ⅱ as compared with grade Ⅲ (P<0.05),rasP21 and P53 positive expressions were higher in stage T2 to T4 as compared with T1(P<0.05).Recurrence rate of rasP21 and P53 positive cases was 51.6%(16/31)and 45.7%(16/35),respectively,while recurrence rate of rasP21 and P53 negative cases was 12.5%(2/16) and 16.6%(2/12),respectively.rasP21 and P53 positive expression had no statistical significance with tumor size and patients′ ages.Conclusion rasP21 and P53 expression may be a valuable marker in evaluation of malignant degree of bladder transitional carcinoma.
, 百拇医药
【Key words】 Bladder neoplasms Flow cytometry Genes,ras Protein P53
癌基因ras的激活和抑癌基因P53的突变在恶性肿瘤的发生中发挥着重要的作用[1,2]。膀胱移行细胞癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一。本研究以免疫流式细胞光度术对47例膀胱移行细胞癌rasP21和P53蛋白表达进行检测分析。
1 材料和方法
选用我院1988年～1995年间,手术切除并经病理证实的膀胱移行细胞癌的石蜡包埋组织材料共47例，男41例，女6例，年龄24～78岁，其中<50岁者13例；肿瘤直径<3.0 cm者25例，复发18例。全部组织经重新切片复查，按照武汉医学院和中山医学院《外科病理学》诊断标准[3]分级，Ⅰ级15例，Ⅱ级16例，Ⅲ级16例。临床分期采用UICC标准，T1期22例，T2～T4期25例。
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选择病变典型、无明显出血坏死的石蜡包埋组织块，按常规方法制备单细胞悬液，采用间接免疫荧光方法进行rasP21和P53蛋白免疫荧光染色，应用FACS420流式细胞仪进行检测。
2 结果
2.1 膀胱移行细胞癌P53和rasP21表达与病理分级的关系(表1)。
表1 膀胱移行细胞癌病理分级与P53和rasP21表达的关系
病理分级
P53表达(%)
rasP21表达(%)
阳性
阴性
, 百拇医药
阳性
阴性
Ⅰ
8(53.3)
7(46.6)
6(40.0)
9(60.0)
Ⅱ
12(75.0)
4(25.0)
10(62.5)
6(37.5)
Ⅲ
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15(93.7)*△
1(6.2)
15(93.7)*△
1(6.2)
合计
35(74.4)
12(25.5)
31(65.9)
16(34.0)
注:与Ⅱ级比较*P<0.05;与Ⅰ级比较△P<0.05 从表1可看出P53和rasP21阳性表达率随病理分级升高而渐上升,Ⅰ级与Ⅲ级及Ⅱ级与Ⅲ级比较均有显著性差异。
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2.2 膀胱移行细胞癌病理分期与P53和rasP21表达的关系(表2)。
表2 膀胱移行细胞癌临床分期与P53和rasP21表达的关系
临床分期
P53表达(%)
rasP21表达(%)
阳性
阴性
阳性
阴性
T1期
13(59.0)
, 百拇医药 9(40.9)
11(50.0)
11(50.0)
T2～T4期
22(88.0)*
3(12.0)
20(80.0)*
5(20.0)
合计
35(74.4)
12(25.5)
31(65.9)
, 百拇医药
16(34.0)
注:*P<0.05
从表2可看出膀胱移行细胞癌临床分期中T2～T4期P53、rasP21的阳性表达率高于T1期,两者间有显著性差异。
2.3 P53、rasP21表达与膀胱移行细胞癌复发的关系
47例膀胱移行细胞癌中复发8例(17.0%)。P53阳性者复发率17.1%(6/35)，阴性者16.6%(2/12);rasP21阳性者复发率为16.1%(5/31)，阴性者18.8%(3/16)，示P53、rasP21阳性表达与复发率无明显关系。
2.4 P53、rasP21阳性表达与肿瘤大小的关系
47例膀胱移行细胞癌手术后，肿瘤直径<3.0 cm者25例(53.2%)，P53阳性表达者17例(68.0%)，rasP21阳性表达者14例(56.0%)；肿瘤直径≥3.0 cm者22例(46.8%),P53阳性表达者18例(81.8%),rasP21阳性表达者17例(77.3%)。肿瘤直径≥3.0 cm患者P53、rasP21阳性表达与肿瘤直径<3.0 cm患者P53、rasP21阳性表达比较无显著性差异。
, 百拇医药
2.5 P53、rasP21阳性表达与患者年龄的关系
47例膀胱移行细胞癌患者中，<50岁者13例(27.7%)，P53阳性表达者9例(69.2%)，rasP21阳性表达者9例(69.2%)；≥50岁患者34例(72.3%)，P53阳性表达者26例(76.5%)，rasP21阳性表达者22例(64.7%)，<50岁患者P53、rasP21阳性表达与≥50岁者P53、rasP21阳性表达比较无统计学差异。
3 讨论
P53是一种肿瘤抑制基因，蛋白产物分子量为53 000，其参与细胞生长的负调控，P53基因发生突变时则发挥癌基因功能。野生型P53蛋白的半衰期很短，免疫组化方法难以检测到，当P53发生突变时，突变型蛋白半衰期明显延长，在细胞中积累至可观察到的数量；因而免疫组化方法检测到P53蛋白过度表达表明抑癌基因P53发生突变[4]。本研究检测膀胱移行细胞癌P53蛋白的异常表达阳性率为74.4%(35/47),并且随膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期的增高其阳性表达率亦增高。表明P53在膀胱移行细胞癌发生发展中发挥了重要作用。
, 百拇医药
ras基因的活化是肿瘤发生发展过程中表现出的较为普遍的现象[5]，本研究47例膀胱移行细胞癌癌基因ras蛋白产物rasP21阳性表达率为68.9%(31/47)，与其它学者的研究几乎一致[6,7],且rasP21阳性表达率随膀胱肿瘤病理分级及临床分期的增高而增高，说明rasP21阳性表达与膀胱移行细胞癌的发生发展有关。
本研究结果还表明P53，rasP21阳性表达与膀胱移行细胞癌的复发率、患者的年龄及肿瘤的大小无明显关系。
4 结论
本研究结果表明rasP21和P53阳性表达与膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期有关，低分化和浸润癌的rasP21、P53阳性表达明显高于高分化和表浅性膀胱癌。rasP21和P53阳性表达与复发无明显关系。我们认为rasP21和P53能反映膀胱移行细胞癌的性质和预后，可作为临床有价值的指标。
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参考文献
1 Hollstein M,Sidransky D,Vogelstein B,et al.P53 mutations in human cancers.Science,1991,253:49-52.
2 Ronai Z.Ras oncogene detection in preneoplastic lesion:possible applications for diagnosis and prevention.Oncology Research,1992,51:5019-5021.
3 武医.膀胱肿瘤.见:武汉医学院病理学教研室和中山医学院病理学教研组编.外科病理学.武汉:湖北人民出版社,1979.581-583.
4 Sidransky D,von Eschenhach A,Tsai YC,et al.Identification of P53 gene mutation in bladder cancers and urine sample.Science,1991,252:102-109.
, 百拇医药
5 Janssin DS,Rzcoxeuch JA,Carney WP,et al,An immunohisto chemical analysis of ras oncogene expression in epithelial neoplasma of the colon.Cancer,1990,65:1329-1332.
6 王泽,缪廷杰,曹世龙,等.膀胱癌细胞癌基因ras产物的表达与其临床意义.上海医科大学学报，1990，17：326-329.
7 张杰英，蔡文清，张祥宏,等.膀胱移行细胞癌细胞DNA含量、rasP21和P53蛋白的定量研究.中华泌尿外科杂志，1997,18:372.
收稿 1998-09-10
修回 1998-11-20, 百拇医药
单位：050000 石家庄，河北医科大学第二医院泌尿外科(蔡文清、黎玮、张勇)，病理科(张祥宏)；河北医科院附属医院外科 (程庆龙)
关键词：膀胱肿瘤；流式细胞术；基因；ras 蛋白质P53
New Page 2 【摘 要】 目的 探讨rasP21和P53表达与膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期、复发、肿瘤大小及患者年龄的关系。方法 采用免疫流式细胞光度术与病理学相结合的方法对47例膀胱移行细胞癌细胞rasP21和P53蛋白表达进行检测分析。结果 rasP21和P53阳性表达率随病理分级升高而渐升高(P<0.05)。T2～T4期rasP21、P53的阳性表达率高于T1期(P<0.05)。rasP21阳性者复发率为51.6%(16/31)，阴性者12.5%(2/16)，P53阳性者复发率为45.7%(16/35)，阴性者16.6%(2/12)。rasP21、P53的阳性表达率与肿瘤大小及患者的年龄无统计学差异。结论 rasP21和P53的表达可反映膀胱移行细胞癌的恶性程度和预后，可作为临床上有价值的指标。
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【中图号】 R737.14
Clinical significance of rasP21 and P53 oncoprotein expression in
transitional cell carcinomas of bladder
CAI Wenqing, LI Wei,ZHANG Yong,et al.Department of Urology,Second Hospital,Hebei Medical University,Shijiazhuang,Hebei 050000
【Abstract】 Objective To elucidate rasP21 and P53 expression in bladder transitional carcinoma and their relationship with pathological grade,clinical stage,recurrence,tumor size and patients′ ages.Methods rasP21 and P53 expression at protein level were studied in 47 cases of bladder transitional carcinoma with flow cytometric(FCM)and pathological methods.Results With the differentiation of the bladder cancer,rasP21 and P53 positive expressions were significantly increased.There were statistical significance on grade Ⅰand Ⅱ as compared with grade Ⅲ (P<0.05),rasP21 and P53 positive expressions were higher in stage T2 to T4 as compared with T1(P<0.05).Recurrence rate of rasP21 and P53 positive cases was 51.6%(16/31)and 45.7%(16/35),respectively,while recurrence rate of rasP21 and P53 negative cases was 12.5%(2/16) and 16.6%(2/12),respectively.rasP21 and P53 positive expression had no statistical significance with tumor size and patients′ ages.Conclusion rasP21 and P53 expression may be a valuable marker in evaluation of malignant degree of bladder transitional carcinoma.
, 百拇医药
【Key words】 Bladder neoplasms Flow cytometry Genes,ras Protein P53
癌基因ras的激活和抑癌基因P53的突变在恶性肿瘤的发生中发挥着重要的作用[1,2]。膀胱移行细胞癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一。本研究以免疫流式细胞光度术对47例膀胱移行细胞癌rasP21和P53蛋白表达进行检测分析。
1 材料和方法
选用我院1988年～1995年间,手术切除并经病理证实的膀胱移行细胞癌的石蜡包埋组织材料共47例，男41例，女6例，年龄24～78岁，其中<50岁者13例；肿瘤直径<3.0 cm者25例，复发18例。全部组织经重新切片复查，按照武汉医学院和中山医学院《外科病理学》诊断标准[3]分级，Ⅰ级15例，Ⅱ级16例，Ⅲ级16例。临床分期采用UICC标准，T1期22例，T2～T4期25例。
, http://www.100md.com
选择病变典型、无明显出血坏死的石蜡包埋组织块，按常规方法制备单细胞悬液，采用间接免疫荧光方法进行rasP21和P53蛋白免疫荧光染色，应用FACS420流式细胞仪进行检测。
2 结果
2.1 膀胱移行细胞癌P53和rasP21表达与病理分级的关系(表1)。
表1 膀胱移行细胞癌病理分级与P53和rasP21表达的关系
病理分级
P53表达(%)
rasP21表达(%)
阳性
阴性
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阳性
阴性
Ⅰ
8(53.3)
7(46.6)
6(40.0)
9(60.0)
Ⅱ
12(75.0)
4(25.0)
10(62.5)
6(37.5)
Ⅲ
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15(93.7)*△
1(6.2)
15(93.7)*△
1(6.2)
合计
35(74.4)
12(25.5)
31(65.9)
16(34.0)
注:与Ⅱ级比较*P<0.05;与Ⅰ级比较△P<0.05 从表1可看出P53和rasP21阳性表达率随病理分级升高而渐上升,Ⅰ级与Ⅲ级及Ⅱ级与Ⅲ级比较均有显著性差异。
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2.2 膀胱移行细胞癌病理分期与P53和rasP21表达的关系(表2)。
表2 膀胱移行细胞癌临床分期与P53和rasP21表达的关系
临床分期
P53表达(%)
rasP21表达(%)
阳性
阴性
阳性
阴性
T1期
13(59.0)
, 百拇医药 9(40.9)
11(50.0)
11(50.0)
T2～T4期
22(88.0)*
3(12.0)
20(80.0)*
5(20.0)
合计
35(74.4)
12(25.5)
31(65.9)
, 百拇医药
16(34.0)
注:*P<0.05
从表2可看出膀胱移行细胞癌临床分期中T2～T4期P53、rasP21的阳性表达率高于T1期,两者间有显著性差异。
2.3 P53、rasP21表达与膀胱移行细胞癌复发的关系
47例膀胱移行细胞癌中复发8例(17.0%)。P53阳性者复发率17.1%(6/35)，阴性者16.6%(2/12);rasP21阳性者复发率为16.1%(5/31)，阴性者18.8%(3/16)，示P53、rasP21阳性表达与复发率无明显关系。
2.4 P53、rasP21阳性表达与肿瘤大小的关系
47例膀胱移行细胞癌手术后，肿瘤直径<3.0 cm者25例(53.2%)，P53阳性表达者17例(68.0%)，rasP21阳性表达者14例(56.0%)；肿瘤直径≥3.0 cm者22例(46.8%),P53阳性表达者18例(81.8%),rasP21阳性表达者17例(77.3%)。肿瘤直径≥3.0 cm患者P53、rasP21阳性表达与肿瘤直径<3.0 cm患者P53、rasP21阳性表达比较无显著性差异。
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2.5 P53、rasP21阳性表达与患者年龄的关系
47例膀胱移行细胞癌患者中，<50岁者13例(27.7%)，P53阳性表达者9例(69.2%)，rasP21阳性表达者9例(69.2%)；≥50岁患者34例(72.3%)，P53阳性表达者26例(76.5%)，rasP21阳性表达者22例(64.7%)，<50岁患者P53、rasP21阳性表达与≥50岁者P53、rasP21阳性表达比较无统计学差异。
3 讨论
P53是一种肿瘤抑制基因，蛋白产物分子量为53 000，其参与细胞生长的负调控，P53基因发生突变时则发挥癌基因功能。野生型P53蛋白的半衰期很短，免疫组化方法难以检测到，当P53发生突变时，突变型蛋白半衰期明显延长，在细胞中积累至可观察到的数量；因而免疫组化方法检测到P53蛋白过度表达表明抑癌基因P53发生突变[4]。本研究检测膀胱移行细胞癌P53蛋白的异常表达阳性率为74.4%(35/47),并且随膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期的增高其阳性表达率亦增高。表明P53在膀胱移行细胞癌发生发展中发挥了重要作用。
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ras基因的活化是肿瘤发生发展过程中表现出的较为普遍的现象[5]，本研究47例膀胱移行细胞癌癌基因ras蛋白产物rasP21阳性表达率为68.9%(31/47)，与其它学者的研究几乎一致[6,7],且rasP21阳性表达率随膀胱肿瘤病理分级及临床分期的增高而增高，说明rasP21阳性表达与膀胱移行细胞癌的发生发展有关。
本研究结果还表明P53，rasP21阳性表达与膀胱移行细胞癌的复发率、患者的年龄及肿瘤的大小无明显关系。
4 结论
本研究结果表明rasP21和P53阳性表达与膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期有关，低分化和浸润癌的rasP21、P53阳性表达明显高于高分化和表浅性膀胱癌。rasP21和P53阳性表达与复发无明显关系。我们认为rasP21和P53能反映膀胱移行细胞癌的性质和预后，可作为临床有价值的指标。
, http://www.100md.com
参考文献
1 Hollstein M,Sidransky D,Vogelstein B,et al.P53 mutations in human cancers.Science,1991,253:49-52.
2 Ronai Z.Ras oncogene detection in preneoplastic lesion:possible applications for diagnosis and prevention.Oncology Research,1992,51:5019-5021.
3 武医.膀胱肿瘤.见:武汉医学院病理学教研室和中山医学院病理学教研组编.外科病理学.武汉:湖北人民出版社,1979.581-583.
4 Sidransky D,von Eschenhach A,Tsai YC,et al.Identification of P53 gene mutation in bladder cancers and urine sample.Science,1991,252:102-109.
, 百拇医药
5 Janssin DS,Rzcoxeuch JA,Carney WP,et al,An immunohisto chemical analysis of ras oncogene expression in epithelial neoplasma of the colon.Cancer,1990,65:1329-1332.
6 王泽,缪廷杰,曹世龙,等.膀胱癌细胞癌基因ras产物的表达与其临床意义.上海医科大学学报，1990，17：326-329.
7 张杰英，蔡文清，张祥宏,等.膀胱移行细胞癌细胞DNA含量、rasP21和P53蛋白的定量研究.中华泌尿外科杂志，1997,18:372.
收稿 1998-09-10
修回 1998-11-20, 百拇医药