莪术油肝动脉灌注治疗大鼠移植性肝癌*
作者：吴万垠 罗云坚 程剑华 常 钢 刘伟胜 李任先
单位：广州中医药大学第二附属医院肿瘤科 广东省广州市 510120
关键词：肝肿瘤/治疗；莪术油；肿瘤移植；肝动脉灌注
莪术油肝动脉灌注治疗大鼠移植性肝癌Therapeutic effect of Curcuma aramatica oil infused via hepatic artery against transplanted hepatoma in rats*
WU Wan-Yin, LUO Yun-Jian, CHENG Jian-Hua, CHANG Gang, LIU Wei-Sheng and LI Ren-Xian
Department of Cancer, The Second Affiliated Hospital, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China
, 百拇医药
Subject headings liver neoplasms/therapy; curcuma aramatica oil; neoplasm transplantation; hepatic artery infusion
Abstract
AIM To observe the therapeutic effect of Curcuma aramatica oil (CAO) infused via hepatic artery against transplanted hepatoma in rats.
METHODS Forty rats bearing transplanted hepatoma were randomly divided into two groups, each of which included twenty rats. CAO (10mg/kg) and normal saline (0.2-0.3mL) were infused from gastroduodenal artery into hepatic artery, respectively, in the treated and controlled groups of rats.
, 百拇医药
RESULTS Compared with the controlled rats, the tumor growth rates of CAO rats were significantly decreased (10.8%±4.5% vs 20.6%±12.7%，P<0.05), the tumor necrosis was more extensive (P<0.01) and the survival time was prolonged (14.8d±3.4d vs 11.7d±1.9d，P<0.05).
CONCLUSION A therapeutic efficacy of CAO infused via hepatic artery against hepatoma could be obtained in the rats bearing transplanted hepatoma.
中国图书资料分类号 R735.7
, 百拇医药
摘 要
目的 观察莪术油经动脉灌注对大鼠移植性肝癌的治疗作用.
方法 复制40只大鼠移植性肝癌模型，随机分为治疗组与对照组，每组各20只. 经胃十二指肠动脉至肝固有动脉分别灌注莪术油(10mg/kg)及生理盐水(0.2mL～0.3mL).
结果 与对照组比较，莪术油治疗组大鼠的肿瘤生长(GR)受到显著抑制(10.8%±4.5% vs 20.6%±12.7%，P<0.05)，肿瘤坏死程度加重(P<0.01)，生存时间明显延长(14.8d±3.4d vs 11.7d±1.9d，P<0.05).
结论 莪术油经肝动脉灌注对大鼠移植性肝癌具有治疗作用.
0 引言
莪术油是从活血破瘀中药莪术中提取的挥发油，其中含有莪术醇、β-榄香烯、莪术二酮等多种抗癌活性成分[1]. 近年来，临床上用莪术油肝动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌已取得了较理想的疗效[2]. 由于影响肝癌介入治疗的预后因素很多，加之已进行的临床研究样本量较小，其实际疗效有必要作实验模型证实. 我们通过复制国内较常用的大鼠移植性肝癌模型[3，4]对莪术油动脉灌注栓塞的抑瘤疗效及机制进行了研究.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 ♂ Wistar大鼠体重180g～250g，Walker-256瘤株均由上海医药工业研究院提供，10g/L莪术油注射液由我院制剂室制备. 30g/L戊巴比妥钠、750mL/L酒精等均由我院中心实验室配制. 大鼠移植性肝癌模型建立参照杨继金et al[3]方法，将皮下荷瘤大鼠断颈处死后，局部消毒，取皮下瘤块，拨去纤维组织，挑选无出血、坏死肿瘤组织，用利刀片切成0.2mm3大小的小块备用. 另取大鼠40只，以戊巴比妥钠按40mg/kg ip麻醉. 大鼠取仰卧位，四肢固定于手术板上后，术区用750mL/L酒精消毒. 在腹正中切开皮肤10mm左右. 用显微组织镊子将肝包膜戳一小口，将肿瘤块沿隧道嵌入. 移植完毕后逐层缝合腹壁，饲养待用.
1.2 方法 选择荷瘤大鼠40只，分为对照组与治疗组，每组各20只. 动脉插管参照Lindell et al[5]的方法. 瘤块接种大鼠肝脏后7d，ip麻醉后固定，再次剖腹(开口约2cm～3cm)，暴露肝脏，测量肿瘤表面最大径(a)和最小径(b)，分离胃十二指肠动脉、肝动脉及肝固有动脉，结扎胃十二指肠动脉的远端. 以银夹暂时阻断肝总动脉，于手术显微镜下在胃十二指肠动脉上切一小口，由此插入外径约0.3mm的特制导管，上行进入肝固有动脉. 待回血后，予对照组大鼠灌注0.2mL～0.3mL生理盐水，治疗组大鼠按10mg/kg灌注莪术油. 灌注后拔管，结扎胃十二指肠动脉近端，放开肝总动脉上的银夹. 逐层缝合切口后擦净伤口，外涂金霉素软膏，分笼、恒温、自动供水供食饲养.
, 百拇医药
疗效判定 ①肿瘤生长率：每组10只大鼠于治疗后7d处死，再次测取肿瘤的最大径(a)和最小径(b)，按公式计算肿瘤体积：V=ab2/2[6]，再根据治疗前后的肿瘤体积计算肿瘤生长率(GR)：GR=(治疗后的肿瘤体积/治疗前的肿瘤体积)×100%. ②肿瘤坏死范围：以上处死大鼠，完整留取瘤块置100mL/L福尔马林液中固定，常规石蜡包埋，取瘤体最大剖面作病理切片，HE染色，光镜下观察瘤组织坏死情况. 按坏死组织所占比例分为3度：轻度(0%～30%)、中度(31%～70%)及重度(71%～100%). ③生存时间：每组另10只大鼠续养以观察其生存天数，并计算治疗组大鼠的生命延长率(治疗组平均生存天数/对照组平均生存天数-1)×100%.
统计学处理 两组肿瘤生长率及生存时间以t检验，肿瘤坏死程度以Ridit分析.
2 结果
2.1 肿瘤生长率 治疗前两组间肿瘤体积无显著性差异(P>0.05)；灌注治疗后，对照组肿瘤较治疗前增长显著(P<0.01). 治疗组比对照组肿瘤生长明显减缓(P<0.01). 两组肿瘤生长率间亦存在显著性差异(P<0.05)，说明莪术油经动脉灌注能显著延缓肝移植肿瘤的生长(表1).
, 百拇医药
表1 大鼠动脉莪术油灌注后肝肿瘤体积及肿瘤增长率(
±s,n=10)
组别
肿 瘤 体 积 (cm3)
肿瘤增长率(%)
灌注前
灌注后
对照组
0.059±0.022
1.037±0.353
, 百拇医药
20.6±12.7
治疗组
0.065±0.020
0.637±0.167b
10.8± 4.5a
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组.
2.2 肿瘤坏死范围 大鼠肝肿瘤的坏死程度(表2)经Ridit分析，结果提示两组之间存在显著性差异(P<0.01). 对照组以轻度坏死为主，而治疗组则以中重度坏死为主.
表2 大鼠莪术油治疗后肝肿瘤组织坏死率(n=10,%)
, http://www.100md.com
组别
坏 死 分 度
轻度
中度
重度
对照组
9
1
0
治疗组b
4
4
2
, 百拇医药
bP<0.01，vs 对照组，经Ridit分析.
2.3 大鼠生存时间 对照组大鼠平均生存时间为11.7d±1.9d，而治疗组大鼠平均生存时间为14.8d±3.4d，两组之间存在显著性差异(P<0.05). 经莪术油灌注治疗后，大鼠的生命延长率达26.5%.
3 讨论
从活血破瘀中药莪术中提取的莪术油，已经证实其具有较可靠的抗肿瘤效应[1]. 其中含有的莪术醇、β-榄香烯、莪术二酮等多种抗癌活性成分已被广泛研究应用[7-9]. 最近的研究尚提示[7,8]，莪术油中所含β-榄香烯除具有直接杀伤肿瘤细胞作用外，尚能诱导其凋亡及逆转癌细胞的生物学特性. 韩铭钧et al[2]根据莪术油具有抗癌、调节免疫、低毒及油性等特征，将其应用于经肝动脉介入治疗肝癌，在肿瘤缩小率(39.2%)及生存时间方面均取得了较理想的疗效. 应用莪术油灌注治疗肝癌除了能避免化疗药物的毒副作用的优点外，其本身的油性特点亦有一定的载药与栓塞性能. 本研究拟从实验角度观察莪术油经肝动脉灌注治疗肝癌的疗效.
, http://www.100md.com
我们通过复制目前国内较公认的移植性肝癌模型，并参照Lindell et al[5]的模拟肝动脉插管介入给药途径，对莪术油经动脉给药的疗效进行了研究. 所用动物模型虽荷以肉瘤，但其血管丰富，很适合从事血管介入研究[3]. 董永华et al[10]曾以化学致癌物诱发大鼠原发性肝癌，但所诱出的肝癌时间及性质难以控制，不能满足短时间内大量的需求，故至今未得以推广使用. 我们给大鼠肝脏移植肿瘤后，7d时肿瘤体积在(0.059～0.065)cm3，灌注后7d时肿瘤的增长率达20%左右，同其他报道[3，4]结果相类似，表明该模型有较好的重复性，适合本课题研究. 选用莪术油用于经肝动脉介入治疗肝癌，主要考虑到其具有较肯定的抗肿瘤作用及油性特征. 尽管其他一些中药注射液[11，12]也具有较好的抗肿瘤作用，但由于它们没有油性载药栓塞性能，在经动脉介入治疗肝癌方面应用前景将有限. 本研究中，经莪术油灌注治疗的大鼠，肝肿瘤生长率明显缩小，生存时间亦得以延长. 这可能同莪术油的油性栓塞作用及抗癌活性的复合作用有关，最终导致肿瘤的坏死程度加重而达到以上结果. 该研究为莪术油在临床上用于经肝动脉介入治疗肝癌提供了实验依据.
, 百拇医药
吴万垠，男，1964-08-10生，安徽省和县人，汉族. 1986年安徽中医学院本科毕业，1992年上海中医药大学硕士，1997年上海医科大学博士，1997年至现在广州中医药大学博士后，主要从事肝癌的中西医结合防治研究，发表论文19篇.
*九五国家科技攻关课题，No.96-906-07-04.
通讯作者 吴万垠，510120，广州中医药大学第二附属医院肿瘤科，广东省广州市大德路111号.
*Supported by “9*5” National Major Project, No.96-907-03-04.
Correspondence to:WU Wan-Yin, Department of Cancer, The Second Affiliated Hospital, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, 111 Dadelu, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China
, http://www.100md.com
Tel. +86*20*81887233-342
收稿日期 1998-07-06
4 参考文献
1 徐厚谦，李应东. 莪术研究概况. 甘肃中医学院学报，1995；12(1)：46-49
2 韩铭钧，任克，赵仲春，张曦彤. 油性中药抗癌剂OCC肝动脉栓塞治疗肝癌84例3年随访报告. 临床放射学杂志，1998；17(2)：112-114
3 杨继金，朱永法，左长京，刘崎，田建民，王振堂 et al. 大白鼠转移性肝癌模型的制作. 中华放射学杂志，1993；27(2)：122-123
4 董生，肖湘生，陈庆华，陆伟根. 肝动脉注入羟基喜树碱明胶微球对大鼠移植性肝癌的疗效研究. 中华放射学杂志，1996；30(1)：45-48
, 百拇医药
5 Lindell B, Aronson KF, Nosslin B. Repeated arterial embolization of rat liver by degradable microspheres. Eur Sur Res, 1988;9:347
6 Garsson G, Gullbery B, Hafstrom L. Estimation of liver tumor volume using different formulas—an experimental study in rats. J Cancer Res Clin Oncol, 1983;105(1):20
7 杨骅，王仙平，郁琳琳，郑树. 榄香烯抗癌作用与诱导肿瘤细胞凋亡. 中华肿瘤杂志，1996；18(3)：169-172
8 钱军，秦叔逵，杨爱珍，乐美兆，刘文虎. 榄香烯乳逆转人肺癌细胞的实验研究. 肿瘤防治研究，1996；23(5)：299-301
, 百拇医药
9 辽宁中医学院中医系肿瘤研究组. 温莪术有效成分抗肿瘤作用的实验研究. 新医学杂志，1976；12(1)：28-32
10 董永华，林贵，颜志平. 活体碘油门静脉灌注在大鼠肝癌模型中分布的观察. 中华放射学杂志，1992；26(10)：704-707
11 沈建华，范忠泽，王之，孙珏，赵泽华. 中药消癌平针剂经肝动脉介入治疗晚期肝癌的近期疗效分析. 实用肿瘤学杂志，1998；12(1)：28-30
12 彭正顺，饶荣生，倪恿文，谭云山，龚子夫. 肝动脉灌注活血药治疗晚期肝癌疗效观察. 中国中西医结合杂志，1993；13(6)：330-332, 百拇医药
单位：广州中医药大学第二附属医院肿瘤科 广东省广州市 510120
关键词：肝肿瘤/治疗；莪术油；肿瘤移植；肝动脉灌注
莪术油肝动脉灌注治疗大鼠移植性肝癌Therapeutic effect of Curcuma aramatica oil infused via hepatic artery against transplanted hepatoma in rats*
WU Wan-Yin, LUO Yun-Jian, CHENG Jian-Hua, CHANG Gang, LIU Wei-Sheng and LI Ren-Xian
Department of Cancer, The Second Affiliated Hospital, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China
, 百拇医药
Subject headings liver neoplasms/therapy; curcuma aramatica oil; neoplasm transplantation; hepatic artery infusion
Abstract
AIM To observe the therapeutic effect of Curcuma aramatica oil (CAO) infused via hepatic artery against transplanted hepatoma in rats.
METHODS Forty rats bearing transplanted hepatoma were randomly divided into two groups, each of which included twenty rats. CAO (10mg/kg) and normal saline (0.2-0.3mL) were infused from gastroduodenal artery into hepatic artery, respectively, in the treated and controlled groups of rats.
, 百拇医药
RESULTS Compared with the controlled rats, the tumor growth rates of CAO rats were significantly decreased (10.8%±4.5% vs 20.6%±12.7%，P<0.05), the tumor necrosis was more extensive (P<0.01) and the survival time was prolonged (14.8d±3.4d vs 11.7d±1.9d，P<0.05).
CONCLUSION A therapeutic efficacy of CAO infused via hepatic artery against hepatoma could be obtained in the rats bearing transplanted hepatoma.
中国图书资料分类号 R735.7
, 百拇医药
摘 要
目的 观察莪术油经动脉灌注对大鼠移植性肝癌的治疗作用.
方法 复制40只大鼠移植性肝癌模型，随机分为治疗组与对照组，每组各20只. 经胃十二指肠动脉至肝固有动脉分别灌注莪术油(10mg/kg)及生理盐水(0.2mL～0.3mL).
结果 与对照组比较，莪术油治疗组大鼠的肿瘤生长(GR)受到显著抑制(10.8%±4.5% vs 20.6%±12.7%，P<0.05)，肿瘤坏死程度加重(P<0.01)，生存时间明显延长(14.8d±3.4d vs 11.7d±1.9d，P<0.05).
结论 莪术油经肝动脉灌注对大鼠移植性肝癌具有治疗作用.
0 引言
莪术油是从活血破瘀中药莪术中提取的挥发油，其中含有莪术醇、β-榄香烯、莪术二酮等多种抗癌活性成分[1]. 近年来，临床上用莪术油肝动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌已取得了较理想的疗效[2]. 由于影响肝癌介入治疗的预后因素很多，加之已进行的临床研究样本量较小，其实际疗效有必要作实验模型证实. 我们通过复制国内较常用的大鼠移植性肝癌模型[3，4]对莪术油动脉灌注栓塞的抑瘤疗效及机制进行了研究.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 ♂ Wistar大鼠体重180g～250g，Walker-256瘤株均由上海医药工业研究院提供，10g/L莪术油注射液由我院制剂室制备. 30g/L戊巴比妥钠、750mL/L酒精等均由我院中心实验室配制. 大鼠移植性肝癌模型建立参照杨继金et al[3]方法，将皮下荷瘤大鼠断颈处死后，局部消毒，取皮下瘤块，拨去纤维组织，挑选无出血、坏死肿瘤组织，用利刀片切成0.2mm3大小的小块备用. 另取大鼠40只，以戊巴比妥钠按40mg/kg ip麻醉. 大鼠取仰卧位，四肢固定于手术板上后，术区用750mL/L酒精消毒. 在腹正中切开皮肤10mm左右. 用显微组织镊子将肝包膜戳一小口，将肿瘤块沿隧道嵌入. 移植完毕后逐层缝合腹壁，饲养待用.
1.2 方法 选择荷瘤大鼠40只，分为对照组与治疗组，每组各20只. 动脉插管参照Lindell et al[5]的方法. 瘤块接种大鼠肝脏后7d，ip麻醉后固定，再次剖腹(开口约2cm～3cm)，暴露肝脏，测量肿瘤表面最大径(a)和最小径(b)，分离胃十二指肠动脉、肝动脉及肝固有动脉，结扎胃十二指肠动脉的远端. 以银夹暂时阻断肝总动脉，于手术显微镜下在胃十二指肠动脉上切一小口，由此插入外径约0.3mm的特制导管，上行进入肝固有动脉. 待回血后，予对照组大鼠灌注0.2mL～0.3mL生理盐水，治疗组大鼠按10mg/kg灌注莪术油. 灌注后拔管，结扎胃十二指肠动脉近端，放开肝总动脉上的银夹. 逐层缝合切口后擦净伤口，外涂金霉素软膏，分笼、恒温、自动供水供食饲养.
, 百拇医药
疗效判定 ①肿瘤生长率：每组10只大鼠于治疗后7d处死，再次测取肿瘤的最大径(a)和最小径(b)，按公式计算肿瘤体积：V=ab2/2[6]，再根据治疗前后的肿瘤体积计算肿瘤生长率(GR)：GR=(治疗后的肿瘤体积/治疗前的肿瘤体积)×100%. ②肿瘤坏死范围：以上处死大鼠，完整留取瘤块置100mL/L福尔马林液中固定，常规石蜡包埋，取瘤体最大剖面作病理切片，HE染色，光镜下观察瘤组织坏死情况. 按坏死组织所占比例分为3度：轻度(0%～30%)、中度(31%～70%)及重度(71%～100%). ③生存时间：每组另10只大鼠续养以观察其生存天数，并计算治疗组大鼠的生命延长率(治疗组平均生存天数/对照组平均生存天数-1)×100%.
统计学处理 两组肿瘤生长率及生存时间以t检验，肿瘤坏死程度以Ridit分析.
2 结果
2.1 肿瘤生长率 治疗前两组间肿瘤体积无显著性差异(P>0.05)；灌注治疗后，对照组肿瘤较治疗前增长显著(P<0.01). 治疗组比对照组肿瘤生长明显减缓(P<0.01). 两组肿瘤生长率间亦存在显著性差异(P<0.05)，说明莪术油经动脉灌注能显著延缓肝移植肿瘤的生长(表1).
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表1 大鼠动脉莪术油灌注后肝肿瘤体积及肿瘤增长率(
±s,n=10)组别
肿 瘤 体 积 (cm3)
肿瘤增长率(%)
灌注前
灌注后
对照组
0.059±0.022
1.037±0.353
, 百拇医药
20.6±12.7
治疗组
0.065±0.020
0.637±0.167b
10.8± 4.5a
aP<0.05，bP<0.01，vs 对照组.
2.2 肿瘤坏死范围 大鼠肝肿瘤的坏死程度(表2)经Ridit分析，结果提示两组之间存在显著性差异(P<0.01). 对照组以轻度坏死为主，而治疗组则以中重度坏死为主.
表2 大鼠莪术油治疗后肝肿瘤组织坏死率(n=10,%)
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组别
坏 死 分 度
轻度
中度
重度
对照组
9
1
0
治疗组b
4
4
2
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bP<0.01，vs 对照组，经Ridit分析.
2.3 大鼠生存时间 对照组大鼠平均生存时间为11.7d±1.9d，而治疗组大鼠平均生存时间为14.8d±3.4d，两组之间存在显著性差异(P<0.05). 经莪术油灌注治疗后，大鼠的生命延长率达26.5%.
3 讨论
从活血破瘀中药莪术中提取的莪术油，已经证实其具有较可靠的抗肿瘤效应[1]. 其中含有的莪术醇、β-榄香烯、莪术二酮等多种抗癌活性成分已被广泛研究应用[7-9]. 最近的研究尚提示[7,8]，莪术油中所含β-榄香烯除具有直接杀伤肿瘤细胞作用外，尚能诱导其凋亡及逆转癌细胞的生物学特性. 韩铭钧et al[2]根据莪术油具有抗癌、调节免疫、低毒及油性等特征，将其应用于经肝动脉介入治疗肝癌，在肿瘤缩小率(39.2%)及生存时间方面均取得了较理想的疗效. 应用莪术油灌注治疗肝癌除了能避免化疗药物的毒副作用的优点外，其本身的油性特点亦有一定的载药与栓塞性能. 本研究拟从实验角度观察莪术油经肝动脉灌注治疗肝癌的疗效.
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我们通过复制目前国内较公认的移植性肝癌模型，并参照Lindell et al[5]的模拟肝动脉插管介入给药途径，对莪术油经动脉给药的疗效进行了研究. 所用动物模型虽荷以肉瘤，但其血管丰富，很适合从事血管介入研究[3]. 董永华et al[10]曾以化学致癌物诱发大鼠原发性肝癌，但所诱出的肝癌时间及性质难以控制，不能满足短时间内大量的需求，故至今未得以推广使用. 我们给大鼠肝脏移植肿瘤后，7d时肿瘤体积在(0.059～0.065)cm3，灌注后7d时肿瘤的增长率达20%左右，同其他报道[3，4]结果相类似，表明该模型有较好的重复性，适合本课题研究. 选用莪术油用于经肝动脉介入治疗肝癌，主要考虑到其具有较肯定的抗肿瘤作用及油性特征. 尽管其他一些中药注射液[11，12]也具有较好的抗肿瘤作用，但由于它们没有油性载药栓塞性能，在经动脉介入治疗肝癌方面应用前景将有限. 本研究中，经莪术油灌注治疗的大鼠，肝肿瘤生长率明显缩小，生存时间亦得以延长. 这可能同莪术油的油性栓塞作用及抗癌活性的复合作用有关，最终导致肿瘤的坏死程度加重而达到以上结果. 该研究为莪术油在临床上用于经肝动脉介入治疗肝癌提供了实验依据.
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吴万垠，男，1964-08-10生，安徽省和县人，汉族. 1986年安徽中医学院本科毕业，1992年上海中医药大学硕士，1997年上海医科大学博士，1997年至现在广州中医药大学博士后，主要从事肝癌的中西医结合防治研究，发表论文19篇.
*九五国家科技攻关课题，No.96-906-07-04.
通讯作者 吴万垠，510120，广州中医药大学第二附属医院肿瘤科，广东省广州市大德路111号.
*Supported by “9*5” National Major Project, No.96-907-03-04.
Correspondence to:WU Wan-Yin, Department of Cancer, The Second Affiliated Hospital, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, 111 Dadelu, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China
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收稿日期 1998-07-06
4 参考文献
1 徐厚谦，李应东. 莪术研究概况. 甘肃中医学院学报，1995；12(1)：46-49
2 韩铭钧，任克，赵仲春，张曦彤. 油性中药抗癌剂OCC肝动脉栓塞治疗肝癌84例3年随访报告. 临床放射学杂志，1998；17(2)：112-114
3 杨继金，朱永法，左长京，刘崎，田建民，王振堂 et al. 大白鼠转移性肝癌模型的制作. 中华放射学杂志，1993；27(2)：122-123
4 董生，肖湘生，陈庆华，陆伟根. 肝动脉注入羟基喜树碱明胶微球对大鼠移植性肝癌的疗效研究. 中华放射学杂志，1996；30(1)：45-48
, 百拇医药
5 Lindell B, Aronson KF, Nosslin B. Repeated arterial embolization of rat liver by degradable microspheres. Eur Sur Res, 1988;9:347
6 Garsson G, Gullbery B, Hafstrom L. Estimation of liver tumor volume using different formulas—an experimental study in rats. J Cancer Res Clin Oncol, 1983;105(1):20
7 杨骅，王仙平，郁琳琳，郑树. 榄香烯抗癌作用与诱导肿瘤细胞凋亡. 中华肿瘤杂志，1996；18(3)：169-172
8 钱军，秦叔逵，杨爱珍，乐美兆，刘文虎. 榄香烯乳逆转人肺癌细胞的实验研究. 肿瘤防治研究，1996；23(5)：299-301
, 百拇医药
9 辽宁中医学院中医系肿瘤研究组. 温莪术有效成分抗肿瘤作用的实验研究. 新医学杂志，1976；12(1)：28-32
10 董永华，林贵，颜志平. 活体碘油门静脉灌注在大鼠肝癌模型中分布的观察. 中华放射学杂志，1992；26(10)：704-707
11 沈建华，范忠泽，王之，孙珏，赵泽华. 中药消癌平针剂经肝动脉介入治疗晚期肝癌的近期疗效分析. 实用肿瘤学杂志，1998；12(1)：28-30
12 彭正顺，饶荣生，倪恿文，谭云山，龚子夫. 肝动脉灌注活血药治疗晚期肝癌疗效观察. 中国中西医结合杂志，1993；13(6)：330-332, 百拇医药