促渗剂对酮洛芬凝胶透皮作用的影响
作者：傅若秋 何凤慈 李建平
单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究所 重庆 400042
关键词：酮洛芬；薄荷脑；氮酮；丙二醇；透皮作用
促渗剂对酮洛芬凝胶透皮作用的影响 提要 采取简单小室法，用离体小鼠皮肤进行体外透皮扩散试验，计算含不同促渗剂的2%酮洛芬凝胶的累积渗透量Q及渗透速率k。比较其结果，1%～5%薄荷脑、1%～5%氮酮对2%酮洛芬凝胶的累积渗透量Q及渗透速率k均显著地提高(P<0.01)；10%～30%丙二醇显著地降低2%酮洛芬凝胶的Q与k(P<0.01)，并明显抑制薄荷脑、氮酮的促渗作用；薄荷脑与氮酮的联用并无联合增效作用。提示薄荷脑、氮酮可作为促渗剂在酮洛芬凝胶剂中单独使用。
EFFECTS OF PENETRATION ENHANCERS ON PERCUTANEOUS
, http://www.100md.com
ABSORPTION OF KETOPROFEN GEL
Fu Ruoqiu He Fengci Li Jianping
(Research Institue of Surgery, Daping Hospital, The Third Military Medical University Chongqing 400042)
ABSTRACT Using simple cells, the experiment of percutaneous absorption of 2% ketoprofen Gel was done with mouse skin in vitro; The cumulative penetration (Q) and the penetration rate (k) were calculated. The results showed that 1%～5% menthnol and 1%～5% azone markedly enhanced the cumulation penetration (Q) and the penetration rate (k) of 2% ketoprofen Gel (P<0.01);10%～30% propylene-glycol decreased (Q) and (k) of 2% ketoprofen Gel (P<0.01), furthermore, it also inhibited the effects of menthnol and azone on (Q) and (k) (P<0.01); The combination of 3% menthnol and 3% azone had no excellent synergism on (Q) and (k). It suggested that menthnol and azone could be the penetration enhancer for preparation ketoprofen Gel.
, 百拇医药
Key Words Ketoprofen Menthnol Azone Propylenen-glycol Penetration
酮洛芬(ketoprofen，KP)是一强效非甾体抗炎药，主要用于治疗类风湿关节炎、骨关节炎、急性痛风性关节炎及痛经等。为了避免KP对胃肠道的刺激作用，可经皮肤给药，以达到局部治疗的目的。实验考察了几种常用促渗剂对KP凝胶的促渗效果，旨在为确定处方组分提供理论依据。
1 实验部分
1.1 材料和仪器
酮洛芬(KP)符合英国药典1993年版标准(西南合成制药厂)；氮酮(azone,广州助剂化工厂)；薄荷脑为药用标准(南通制药厂)；丙二醇为分析纯(重庆东方试剂厂)。DU-650紫外分光光度计(美国贝克曼公司)；85-2型恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)。
, http://www.100md.com
昆明种小白鼠(25±5) g，♀
不拘(第三军医大学实验动物中心)。
按表1所列促渗剂种类及浓度配制系列2%KP凝胶剂作为供试品，同时配制各自不含KP的空白凝胶剂作为空白对照品。
1.2 方法与结果
1.2.1 标准曲线的制备 精密称取KP0.05 g于250 ml量瓶中，用pH7.8的磷酸盐缓冲液(PBS)溶解至刻度；分别取0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ml于50 ml量瓶中，用0.01 mol/L NaOH溶液稀释成含KP 2.04、4.08、6.12、8.16、10.20、12.24 μg/ml的溶液，于260 nm波长处测定其吸光度A，以浓度C(μg/ml)对吸光度A回归，得标准曲线方程：
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C=0.0254+15.699A r=0.9999。
1.2.2 离体鼠皮的制备 小鼠用5%硫化钠糊脱毛，处死，剥离腹部皮肤，去除皮下脂肪，用蒸馏水反复洗净，滤纸吸去表面水分，备用。
1.2.3 实验装置与方法 实验装置参照文献[1]改进的简单小室。释放池为一两端开口，内径为1.46 cm的玻璃管，下端塞一透气塞，形成供药室，内填供试品约0.5 g。接受池为一50 ml烧杯，内装pH7.8的PBS 30 ml作为接受介质，接受池置(37±1)℃恒温水浴中，磁力搅拌。将离体小鼠皮固定于释放池下端，角质层面向供药室，与供试品紧密接触。于释放池放入接受池后的1、3、6、8、10 h时，分别取接受液2 ml(同时补接受介质2 ml)置25 ml量瓶中，用0.01 mol/L NaOH溶液稀释至刻度，于260 nm波长处测定吸光度值。以空白对照品同法操作所得结果进行空白校正。校正后的吸光度值代入标准曲线方程计算样品浓度，并计算累积渗透量Q(含每次取样时的损失量，表1)。
, 百拇医药
表1 含不同促渗剂的酮洛芬凝胶透皮累积渗透量Q(mg,x±s,n=5)
Table 1 The cumulative penetration (Q) of 2% ketoprofen Gel with different penetration enhancers
Penetration enhancers
Cumulative penetration(mg)
kind
concentration
1 h
3 h
6 h
, 百拇医药
8 h
10 h
None
0%
0.257±0.042
0.766±0.099
1.532±0.201
2.039±0.228
2.562±0.301
Menthnol
1%
0.333±0.158
, 百拇医药
1.165±0.277
2.261±0.340
2.809±0.382
3.487±0.476
3%
0.579±0.029
1.940±0.430
4.039±0.155
5.267±0.262
6.322±0.246
5%
1.087±0.138
, http://www.100md.com
3.162±0.152
5.701±0.244
7.072±0.294
8.418±0.331
Azone
1%
0.257±0.109
1.299±0.239
3.474±0.393
4.463±0.615
5.443±0.684
, http://www.100md.com 3%
0.189±0.079
1.237±0.343
3.517±0.746
5.230±0.668
6.844±0.758
5%
0.426±0.132
2.504±0.327
5.268±0.416
6.852±0.488
8.382±0.607
, 百拇医药
Propylene-glycol
10%
0.147±0.081
0.407±0.152
0.874±0.249
1.267±0.291
1.613±0.379
20%
0.166±0.031
0.508±0.090
0.947±0.232
, 百拇医药
1.282±0.325
1.648±0.386
30%
0.144±0.032
0.329±0.017
0.633±0.040
1.009±0.040
1.347±0.062
Propylene-glycol+Menthnol
20%+3%
0.426±0.145
, 百拇医药
1.801±0.145
3.008±0.328
3.812±0.342
4.428±0.320
Propylene-glycol+Azone
20%+3%
0.356±0.049
1.261±0.123
3.220±0.215
4.259±0.259
5.365±0.276
, http://www.100md.com
Menthanol+Azone
3%+3%
0.299±0.114
1.678±0.411
4.000±0.451
5.474±0.511
6.735±0.425
将累积渗透量Q对时间t进行回归，得含不同促渗剂的KP凝胶体外透皮动力学曲线方程及参数，结果见表2。 表2 不同促渗剂对酮洛芬凝胶透皮速率(k)的影响(x±s，n=5)
Table 2 Effects of different penetration enhancers on penetration rate(k) of ketoprofen Gel
, 百拇医药
Penatration enhancers
Q-t regression equation
r
k(mg/h)
kind
concentration
None
0%
Q=-0.00095+0.256t
0.999
0.256±0.031
, 百拇医药 Menthnol
1%
Q＝0.071+0.346t
0.998
0.346±0.036*
3%
Q＝0.089+0.638t
0.998
0.638±0.024*
5%
Q＝0.554+0.810t
, 百拇医药 0.996
0.810±0.054*
Azone
1%
Q＝-0.328+0.592t
0.997
0.592±0.070*
3%
Q＝-0.809±0.753t
0.997
0.753±0.090*
, http://www.100md.com
5%
Q＝-0.257+0.883t
0.998
0.883±0.065*
Propylene-glycol
10%
Q＝-0.060+0.165t
0.997
0.165±0.037*
20%
Q＝0.0026+0.162t
, 百拇医药
0.999
0.162±0.043*
30%
Q＝-0.053+0.133t
0.988
0.133±0.0057*
Propylene-glycol+Menthanol
20%+3%
Q＝0.254+0.436t
0.991
0.436±0.037*
, 百拇医药
Propylene-glycol+Azone
20%+3%
Q＝-0.287+0.568t
0.998
0.568±0.026*
Menthnol+Azone
3%+3%
Q＝-0.429+0.726t
0.999
0.726±0.042*
Compared with no penetration enchancer group *P<0.01
, 百拇医药
表2结果表明，KP凝胶累积渗透量Q与渗透时间t呈良好的线性关系，其渗透过程符合零级动力学。凡含薄荷脑、氮酮的KP凝胶的渗透速率k均比不含促渗剂的KP凝胶高(P<0.01)，而只含丙二醇的KP凝胶的渗透速率k均比不含促渗剂的KP凝胶低(P<0.01)。
1.2.4 薄荷脑、氮酮、丙二醇及三者联用的促渗效果分析 1%、3%、5%的薄荷脑对KP凝胶均有较强的促渗作用(P<0.01)，其渗透速率k分别提高1.4倍、2.5倍、3.2倍，促渗作用随薄荷脑的浓度增高而增强，各浓度之间均有显著差异(P<0.01)；且薄荷脑浓度C薄与渗透速率k之间有较好的线性关系：
k=0.25-11.6C薄 r=0.989。
1%、3%、5%的氮酮对KP凝胶均有较强的促渗作用(P<0.01)，其渗透速率k分别提高2.3倍、2.9倍、3.4倍。其中3%、5%组的促渗作用明显强于1%组(P<0.01)，而3%组与5%组之间却无显著差异(P>0.05)。
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10%、20%、30%的丙二醇对KP凝胶的经皮渗透均有很强的抑制作用(P<0.01)。但三组浓度之间并无显著的差异(P>0.05)，表明当丙二醇浓度大于10%时，其对KP凝胶的抑制作用与丙二醇浓度无关。
将20%的丙二醇分别与3%薄荷脑、3%氮酮联用，结果表明丙二醇明显地抑制薄荷脑、氮酮的促渗作用(P<0.01)；3%薄荷脑与3%氮酮联用的结果与单用薄荷脑相比，作用增强了14%(P<0.05)，而与单用氮酮相比作用并无显著增强(P>0.05)。
2 讨论
氮酮是近年来国内外使用较多的促渗剂，一般认为其作用机理在于改善角质层的通透性[2]，而薄荷脑作为促渗剂亦有报道[3]。比较薄荷脑和氮酮对KP凝胶的促渗效果，可以发现，薄荷脑对KP凝胶促渗作用与其浓度有较好的相关性，而氮酮的作用与其浓度的相关性较小；在一定浓度下，薄荷脑可达到与氮酮等效的促渗作用。实验结果表明，5%的薄荷脑与3%、5%氮酮具有等效的促渗作用(P>0.05)；薄荷脑的促渗作用比氮酮起效快。从表1可见1%、3%、5%薄荷脑组1 h的累积渗透量分别是不含促渗剂组的1.3倍(P>0.05)、2.3倍(P<0.01)、6.2倍(P<0.01)，而1%、3%、5%氮酮1 h的累积渗透量与不含促渗剂组相比无显著差异(P>0.05)。
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丙二醇可单独作为促渗剂，亦可与其它促渗剂合用，以增强促渗效果，但其增强作用与药物的性质有关[2]。以上实验结果显示，无论单用还是合用，丙二醇对KP凝胶的经皮渗透均有抑制作用。提示在KP凝胶中不宜加入丙二醇。
3%的薄荷脑与3%氮酮联用，尽管渗透速率比单用薄荷脑提高了14%(P<0.05)，但3%薄荷脑与3%氮酮并不等效，氮酮强于薄荷脑(P<0.05)，而且与单用氮酮比较并无显著差异(P>0.05)，而且认为这是联合增强效应的结果。
参考文献
1 王晓波，岳平，兰学山等.抛物线拟合研究氮酮促进5-氟尿嘧啶透皮吸收的最佳浓度.中国药学杂志，1990，25(3)∶151
2 梁秉文主编.经皮给药制剂.北京：中国医药科技出版社，1992.116
3 吴宋夏，王宗锐，湛小红等.薄荷脑促渗作用的研究.中国医院药学杂志，1994，14(8)∶366, 百拇医药
单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究所 重庆 400042
关键词：酮洛芬；薄荷脑；氮酮；丙二醇；透皮作用
促渗剂对酮洛芬凝胶透皮作用的影响 提要 采取简单小室法，用离体小鼠皮肤进行体外透皮扩散试验，计算含不同促渗剂的2%酮洛芬凝胶的累积渗透量Q及渗透速率k。比较其结果，1%～5%薄荷脑、1%～5%氮酮对2%酮洛芬凝胶的累积渗透量Q及渗透速率k均显著地提高(P<0.01)；10%～30%丙二醇显著地降低2%酮洛芬凝胶的Q与k(P<0.01)，并明显抑制薄荷脑、氮酮的促渗作用；薄荷脑与氮酮的联用并无联合增效作用。提示薄荷脑、氮酮可作为促渗剂在酮洛芬凝胶剂中单独使用。
EFFECTS OF PENETRATION ENHANCERS ON PERCUTANEOUS
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ABSORPTION OF KETOPROFEN GEL
Fu Ruoqiu He Fengci Li Jianping
(Research Institue of Surgery, Daping Hospital, The Third Military Medical University Chongqing 400042)
ABSTRACT Using simple cells, the experiment of percutaneous absorption of 2% ketoprofen Gel was done with mouse skin in vitro; The cumulative penetration (Q) and the penetration rate (k) were calculated. The results showed that 1%～5% menthnol and 1%～5% azone markedly enhanced the cumulation penetration (Q) and the penetration rate (k) of 2% ketoprofen Gel (P<0.01);10%～30% propylene-glycol decreased (Q) and (k) of 2% ketoprofen Gel (P<0.01), furthermore, it also inhibited the effects of menthnol and azone on (Q) and (k) (P<0.01); The combination of 3% menthnol and 3% azone had no excellent synergism on (Q) and (k). It suggested that menthnol and azone could be the penetration enhancer for preparation ketoprofen Gel.
, 百拇医药
Key Words Ketoprofen Menthnol Azone Propylenen-glycol Penetration
酮洛芬(ketoprofen，KP)是一强效非甾体抗炎药，主要用于治疗类风湿关节炎、骨关节炎、急性痛风性关节炎及痛经等。为了避免KP对胃肠道的刺激作用，可经皮肤给药，以达到局部治疗的目的。实验考察了几种常用促渗剂对KP凝胶的促渗效果，旨在为确定处方组分提供理论依据。
1 实验部分
1.1 材料和仪器
酮洛芬(KP)符合英国药典1993年版标准(西南合成制药厂)；氮酮(azone,广州助剂化工厂)；薄荷脑为药用标准(南通制药厂)；丙二醇为分析纯(重庆东方试剂厂)。DU-650紫外分光光度计(美国贝克曼公司)；85-2型恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)。
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昆明种小白鼠(25±5) g，♀
不拘(第三军医大学实验动物中心)。按表1所列促渗剂种类及浓度配制系列2%KP凝胶剂作为供试品，同时配制各自不含KP的空白凝胶剂作为空白对照品。
1.2 方法与结果
1.2.1 标准曲线的制备 精密称取KP0.05 g于250 ml量瓶中，用pH7.8的磷酸盐缓冲液(PBS)溶解至刻度；分别取0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ml于50 ml量瓶中，用0.01 mol/L NaOH溶液稀释成含KP 2.04、4.08、6.12、8.16、10.20、12.24 μg/ml的溶液，于260 nm波长处测定其吸光度A，以浓度C(μg/ml)对吸光度A回归，得标准曲线方程：
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C=0.0254+15.699A r=0.9999。
1.2.2 离体鼠皮的制备 小鼠用5%硫化钠糊脱毛，处死，剥离腹部皮肤，去除皮下脂肪，用蒸馏水反复洗净，滤纸吸去表面水分，备用。
1.2.3 实验装置与方法 实验装置参照文献[1]改进的简单小室。释放池为一两端开口，内径为1.46 cm的玻璃管，下端塞一透气塞，形成供药室，内填供试品约0.5 g。接受池为一50 ml烧杯，内装pH7.8的PBS 30 ml作为接受介质，接受池置(37±1)℃恒温水浴中，磁力搅拌。将离体小鼠皮固定于释放池下端，角质层面向供药室，与供试品紧密接触。于释放池放入接受池后的1、3、6、8、10 h时，分别取接受液2 ml(同时补接受介质2 ml)置25 ml量瓶中，用0.01 mol/L NaOH溶液稀释至刻度，于260 nm波长处测定吸光度值。以空白对照品同法操作所得结果进行空白校正。校正后的吸光度值代入标准曲线方程计算样品浓度，并计算累积渗透量Q(含每次取样时的损失量，表1)。
, 百拇医药
表1 含不同促渗剂的酮洛芬凝胶透皮累积渗透量Q(mg,x±s,n=5)
Table 1 The cumulative penetration (Q) of 2% ketoprofen Gel with different penetration enhancers
Penetration enhancers
Cumulative penetration(mg)
kind
concentration
1 h
3 h
6 h
, 百拇医药
8 h
10 h
None
0%
0.257±0.042
0.766±0.099
1.532±0.201
2.039±0.228
2.562±0.301
Menthnol
1%
0.333±0.158
, 百拇医药
1.165±0.277
2.261±0.340
2.809±0.382
3.487±0.476
3%
0.579±0.029
1.940±0.430
4.039±0.155
5.267±0.262
6.322±0.246
5%
1.087±0.138
, http://www.100md.com
3.162±0.152
5.701±0.244
7.072±0.294
8.418±0.331
Azone
1%
0.257±0.109
1.299±0.239
3.474±0.393
4.463±0.615
5.443±0.684
, http://www.100md.com 3%
0.189±0.079
1.237±0.343
3.517±0.746
5.230±0.668
6.844±0.758
5%
0.426±0.132
2.504±0.327
5.268±0.416
6.852±0.488
8.382±0.607
, 百拇医药
Propylene-glycol
10%
0.147±0.081
0.407±0.152
0.874±0.249
1.267±0.291
1.613±0.379
20%
0.166±0.031
0.508±0.090
0.947±0.232
, 百拇医药
1.282±0.325
1.648±0.386
30%
0.144±0.032
0.329±0.017
0.633±0.040
1.009±0.040
1.347±0.062
Propylene-glycol+Menthnol
20%+3%
0.426±0.145
, 百拇医药
1.801±0.145
3.008±0.328
3.812±0.342
4.428±0.320
Propylene-glycol+Azone
20%+3%
0.356±0.049
1.261±0.123
3.220±0.215
4.259±0.259
5.365±0.276
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Menthanol+Azone
3%+3%
0.299±0.114
1.678±0.411
4.000±0.451
5.474±0.511
6.735±0.425
将累积渗透量Q对时间t进行回归，得含不同促渗剂的KP凝胶体外透皮动力学曲线方程及参数，结果见表2。 表2 不同促渗剂对酮洛芬凝胶透皮速率(k)的影响(x±s，n=5)
Table 2 Effects of different penetration enhancers on penetration rate(k) of ketoprofen Gel
, 百拇医药
Penatration enhancers
Q-t regression equation
r
k(mg/h)
kind
concentration
None
0%
Q=-0.00095+0.256t
0.999
0.256±0.031
, 百拇医药 Menthnol
1%
Q＝0.071+0.346t
0.998
0.346±0.036*
3%
Q＝0.089+0.638t
0.998
0.638±0.024*
5%
Q＝0.554+0.810t
, 百拇医药 0.996
0.810±0.054*
Azone
1%
Q＝-0.328+0.592t
0.997
0.592±0.070*
3%
Q＝-0.809±0.753t
0.997
0.753±0.090*
, http://www.100md.com
5%
Q＝-0.257+0.883t
0.998
0.883±0.065*
Propylene-glycol
10%
Q＝-0.060+0.165t
0.997
0.165±0.037*
20%
Q＝0.0026+0.162t
, 百拇医药
0.999
0.162±0.043*
30%
Q＝-0.053+0.133t
0.988
0.133±0.0057*
Propylene-glycol+Menthanol
20%+3%
Q＝0.254+0.436t
0.991
0.436±0.037*
, 百拇医药
Propylene-glycol+Azone
20%+3%
Q＝-0.287+0.568t
0.998
0.568±0.026*
Menthnol+Azone
3%+3%
Q＝-0.429+0.726t
0.999
0.726±0.042*
Compared with no penetration enchancer group *P<0.01
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表2结果表明，KP凝胶累积渗透量Q与渗透时间t呈良好的线性关系，其渗透过程符合零级动力学。凡含薄荷脑、氮酮的KP凝胶的渗透速率k均比不含促渗剂的KP凝胶高(P<0.01)，而只含丙二醇的KP凝胶的渗透速率k均比不含促渗剂的KP凝胶低(P<0.01)。
1.2.4 薄荷脑、氮酮、丙二醇及三者联用的促渗效果分析 1%、3%、5%的薄荷脑对KP凝胶均有较强的促渗作用(P<0.01)，其渗透速率k分别提高1.4倍、2.5倍、3.2倍，促渗作用随薄荷脑的浓度增高而增强，各浓度之间均有显著差异(P<0.01)；且薄荷脑浓度C薄与渗透速率k之间有较好的线性关系：
k=0.25-11.6C薄 r=0.989。
1%、3%、5%的氮酮对KP凝胶均有较强的促渗作用(P<0.01)，其渗透速率k分别提高2.3倍、2.9倍、3.4倍。其中3%、5%组的促渗作用明显强于1%组(P<0.01)，而3%组与5%组之间却无显著差异(P>0.05)。
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10%、20%、30%的丙二醇对KP凝胶的经皮渗透均有很强的抑制作用(P<0.01)。但三组浓度之间并无显著的差异(P>0.05)，表明当丙二醇浓度大于10%时，其对KP凝胶的抑制作用与丙二醇浓度无关。
将20%的丙二醇分别与3%薄荷脑、3%氮酮联用，结果表明丙二醇明显地抑制薄荷脑、氮酮的促渗作用(P<0.01)；3%薄荷脑与3%氮酮联用的结果与单用薄荷脑相比，作用增强了14%(P<0.05)，而与单用氮酮相比作用并无显著增强(P>0.05)。
2 讨论
氮酮是近年来国内外使用较多的促渗剂，一般认为其作用机理在于改善角质层的通透性[2]，而薄荷脑作为促渗剂亦有报道[3]。比较薄荷脑和氮酮对KP凝胶的促渗效果，可以发现，薄荷脑对KP凝胶促渗作用与其浓度有较好的相关性，而氮酮的作用与其浓度的相关性较小；在一定浓度下，薄荷脑可达到与氮酮等效的促渗作用。实验结果表明，5%的薄荷脑与3%、5%氮酮具有等效的促渗作用(P>0.05)；薄荷脑的促渗作用比氮酮起效快。从表1可见1%、3%、5%薄荷脑组1 h的累积渗透量分别是不含促渗剂组的1.3倍(P>0.05)、2.3倍(P<0.01)、6.2倍(P<0.01)，而1%、3%、5%氮酮1 h的累积渗透量与不含促渗剂组相比无显著差异(P>0.05)。
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丙二醇可单独作为促渗剂，亦可与其它促渗剂合用，以增强促渗效果，但其增强作用与药物的性质有关[2]。以上实验结果显示，无论单用还是合用，丙二醇对KP凝胶的经皮渗透均有抑制作用。提示在KP凝胶中不宜加入丙二醇。
3%的薄荷脑与3%氮酮联用，尽管渗透速率比单用薄荷脑提高了14%(P<0.05)，但3%薄荷脑与3%氮酮并不等效，氮酮强于薄荷脑(P<0.05)，而且与单用氮酮比较并无显著差异(P>0.05)，而且认为这是联合增强效应的结果。
参考文献
1 王晓波，岳平，兰学山等.抛物线拟合研究氮酮促进5-氟尿嘧啶透皮吸收的最佳浓度.中国药学杂志，1990，25(3)∶151
2 梁秉文主编.经皮给药制剂.北京：中国医药科技出版社，1992.116
3 吴宋夏，王宗锐，湛小红等.薄荷脑促渗作用的研究.中国医院药学杂志，1994，14(8)∶366, 百拇医药