巴布剂复方紫荆消伤膏质量标准研究
作者：杨莉娅 谢松 吴云鸣 周庆氢
单位：上海市药材有限公司 200002
关键词：复方紫荆消伤膏；巴布剂；紫荆皮；马钱子；独活；白芷；薄层色谱扫描法
中草药001112摘 要 采用薄层色谱法对巴布剂复方紫荆消伤膏中的紫荆皮、马钱子 、独活和白芷进行了定性鉴别。采用薄层色谱扫描法对方中士的宁含量进行了测定，上述 方法简便，重复性好。
巴布剂复方紫荆消伤膏是依据骨伤科临床常用名方“三色敷药”经新药研究而成，全方由紫 荆皮、羌活、独活、白芷、川芎、当归、丹参、马钱子(生)、甘草等22 味中药组成，具有 活血化瘀、消肿止痛、舒筋通络之功效，能有效地治疗软组织损伤。为规范本品的生产，有 效地控制大复方的产品质量，我们用薄层色谱法对方中的紫荆皮、马钱子、独活和白芷进行 了定性鉴别；又用薄层色谱扫描法对方中士的宁含量进行了测定。
, 百拇医药
1 仪器与试药
CAMAG TLC SCANNE R3 薄层扫描仪，半自动点样仪，薄层涂布器；紫荆皮、独活、欧前胡素 、士的宁、马钱子碱对照品(中国药品生物制品检定所)；硅胶G、硅胶GF254(青岛海 洋化工厂)；样品由上海中药制药三厂提供；其他试剂、试药、溶剂均为分析纯。薄层板的 制备：取硅胶G或GF254与0.5%CMC-Na溶液，按(1∶3)混合、研磨均匀，于涂布器上 铺板，室温阴干，于105 ℃活化1 h，干燥、备用。
2 定性鉴别
2.1 紫荆皮：取本品2 片，剪成小条，揭去薄膜，加乙酸乙酯40 mL，加热回流0.5 h， 滤过，收集滤液浓缩至0.5 mL，作供试品溶液；同法制备空白紫荆皮样品溶液；另取紫荆 皮药材粉0.5 g，同法制备，浓缩至2 mL，作对照品溶液。吸取供试品、阴性溶液各15 μL ，对照品溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-苯(9∶1)展开剂，展开， 取出，晾干，置饱和碘蒸气缸内，放置10 min取出，在供试品色谱中，与对照品色谱中相应 的位置显相同颜色的斑点，见图1-1。
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2.2 独活：取本品1 片，剪成小条，揭去薄膜，加正己烷40 mL，加热回流0.5 h，滤过 ， 滤液浓缩至1 mL，作为供试品溶液；同法制备空白独活样品溶液；另取独活药材粉 0.5 g，同法制备，浓缩至2 mL，作为对照品溶液。吸取上述3 种溶液4 μL，分别点 于 同一硅胶GF254薄层板上以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)展开，取出，晾干，置紫外灯365 nm下视检。在供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，见 图1-2。
2.3 白芷：取本品2 片，剪成小条，揭去薄膜，加石油醚(60 ℃～90 ℃)50 mL，加热回 流2 次，每次1 h。合并石油醚溶液，浓缩至1 mL，作为供试品溶液；同法制备空白白芷样品溶 液；另取欧前胡素对照品，加石油醚(60 ℃～90 ℃)制成每毫升含 1 mg的溶液，作为对照 品 溶液。吸取上述供试品溶液、阴性溶液各20 μL，对照品溶液5 μL，分别点于同一硅胶GF 254薄层板上，以石油醚(60 ℃～90 ℃)-乙醚(3∶2)展开，取出，晾干，再同样条 件展 开一次，置紫外灯254 nm下视检。供试品色谱中，在与欧前胡素对照品色谱相应的位置上显 相同颜色的斑点，见图1-3。
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2.4 马钱子：取含量测定项下的供试品溶液和空白马钱子样品溶液；另取士的宁和马钱子 碱对照品加氯仿制成1 mg/L的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液、阴性溶液各 10 μL，对照品溶液3 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇 -浓氨水(16∶12∶1∶4)上层为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外灯254 nm下视检，供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图1-4。
1-空白 1-空白 1-空白 1-空白
2-紫荆皮2-独活2-欧前胡素2-马钱子
3-供试样3-供试样3-供试样3-士的宁
4-供试样
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图1 药材的薄层图
3 含量测定
3.1 层析条件：含CMC-Na的硅胶GF254薄层板，展开剂：甲苯-丙酮-乙醇-浓 氨水(16∶12∶1∶4)上层溶液，展距10 cm。
3.2 扫描条件：反射法锯齿扫描，λs=254 nm，λR=325 nm，狭缝1.25 mm×1.25 mm ，扫描速度20 mm/min，灵敏度×5。
3.3 对照品溶液配制：精密称取于105 ℃干燥至恒重的士的宁，置容量瓶中，加氯仿配 制成1 mg/mL的士的宁对照品溶液。
3.4 供试样品液制备：取本品3 片，用适量蒸馏水将衬布均匀湿润，剪成小条，揭去薄膜 ，加0.5 mL浓氨水，再加25 mL氯仿回流1 h，其间不断振摇，第2～4次氯仿各15 mL ，每次45 min，合并氯仿液于分液漏斗内，用硫酸溶液(3→100)萃取3 次，每次10 mL，合 并酸液，加浓氨水调pH≈9～10，再用氯仿萃取3 次，每次10 mL，合并氯仿层，蒸干，残渣 精密加氯仿1 mL使溶解，为样品液。
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3.5 空白样品液制备：取除马钱子的处方中其他21 味中药，按制备工艺制成空马钱子样 品，再按样品液制备方法制备空白样品液，备用。
3.6 线性关系考察：准确吸取上述对照品液1.0～5.0 mL于10 mL容量瓶中，定容；分别 取 10 μL点于同一块硅胶GF254板上，按上述方法展开测定，绘制标准曲线，并回归得 直线方程为：A=723.19M-9 102.04，r=0.998 9，同时显示士的宁浓度 在1.1～5.5 μg之间其浓度与峰面积呈线性关系。
3.7 干扰性试验：取对照品液、样品液、空白样品液各10 μL，点于同一硅胶GF254 预制板上，按上述方法展开晾干，扫描测定，得各供试液图谱，结果空白供试液在测定波 长处无干扰和吸收，即其他药材成分对士的宁测定无干扰，此外马钱子其他成分亦对测定无 干扰。
3.8 稳定性试验：取照品液适量，点于硅胶GF254板上，上述方法展开，测定斑点 峰面积积分值，每隔0.5 h测定1 次，记录积分值，结果0～4 h内数值稳定， RSD=2.0%。
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3.9 精密度试验：同一薄层板同一斑点连续测定11 次，RSD=3.2%.
3.10 样品测定：取5 个批号的样品，制成供试品溶液，分别准确吸收样品液10.0 μL点 于硅胶GF254板上，并平行点对照品3.0 μL，按上述方法展开，测定，结果如表1 。
3.11 回收率测定：加样回收率测定结果为90.49%，RSD=3.4%(n=3)。
表1 样品中士的宁的含量测定结果(n=3)[ ST
4 讨论
4.1 本文所制定的定性鉴别方法，均根据被测成分的极性来选择提取溶液。
4.2 本产品为贴膏剂，膏体基质有多种水溶性高分子复合成分，其含马钱子量少，故在含 量测定的分离提取时，先用水来湿润，其目的是提高氯仿对膏体的穿透性，以利于士的宁的 提取。由于本品中含有表面活性剂，对提取带来影响，故回收率略低。因本方内含22 味中 药，故上述研究可为中药大复方的分析提供参考。
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Address： Yang Liya, Shanghai Chinese Medicinal Materials Co. Ltd., Shanghai
杨莉娅 1984年毕业于上海科技大学化学系高分子专业，理学士，上海中药制药三厂工 程师。负责多项科研项目开发，其中“蟾酥膏巴布膏”荣获1984年上海市新产品二等奖、“ 复方紫荆消伤膏”获得国家中药三类新药生产批文。按照新药审批办法要求，探索、研究新 产品达15项，其中通过各级评审获得生产批文达12项产品：强力花粉口服液、仙草壮阳 口服液、麝香虎骨膏、益肾灵冲剂、脑得生片、西洋参冲剂、蟾酥膏巴布膏、西洋参含片( 首创)等，完成复方紫荆消伤膏临床前药效学、毒理学、工艺、质量标准等工作。
上海中药制药三厂
参 考 文 献
1，王宝琴，陈德昌，鲁 静，等.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医 药科技出版社，1994
2，郭钟慧，吕国雄，莫翠华.中成药，1998，20(5)：13
(2000-01-14收稿), 百拇医药
单位：上海市药材有限公司 200002
关键词：复方紫荆消伤膏；巴布剂；紫荆皮；马钱子；独活；白芷；薄层色谱扫描法
中草药001112摘 要 采用薄层色谱法对巴布剂复方紫荆消伤膏中的紫荆皮、马钱子 、独活和白芷进行了定性鉴别。采用薄层色谱扫描法对方中士的宁含量进行了测定，上述 方法简便，重复性好。
巴布剂复方紫荆消伤膏是依据骨伤科临床常用名方“三色敷药”经新药研究而成，全方由紫 荆皮、羌活、独活、白芷、川芎、当归、丹参、马钱子(生)、甘草等22 味中药组成，具有 活血化瘀、消肿止痛、舒筋通络之功效，能有效地治疗软组织损伤。为规范本品的生产，有 效地控制大复方的产品质量，我们用薄层色谱法对方中的紫荆皮、马钱子、独活和白芷进行 了定性鉴别；又用薄层色谱扫描法对方中士的宁含量进行了测定。
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1 仪器与试药
CAMAG TLC SCANNE R3 薄层扫描仪，半自动点样仪，薄层涂布器；紫荆皮、独活、欧前胡素 、士的宁、马钱子碱对照品(中国药品生物制品检定所)；硅胶G、硅胶GF254(青岛海 洋化工厂)；样品由上海中药制药三厂提供；其他试剂、试药、溶剂均为分析纯。薄层板的 制备：取硅胶G或GF254与0.5%CMC-Na溶液，按(1∶3)混合、研磨均匀，于涂布器上 铺板，室温阴干，于105 ℃活化1 h，干燥、备用。
2 定性鉴别
2.1 紫荆皮：取本品2 片，剪成小条，揭去薄膜，加乙酸乙酯40 mL，加热回流0.5 h， 滤过，收集滤液浓缩至0.5 mL，作供试品溶液；同法制备空白紫荆皮样品溶液；另取紫荆 皮药材粉0.5 g，同法制备，浓缩至2 mL，作对照品溶液。吸取供试品、阴性溶液各15 μL ，对照品溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-苯(9∶1)展开剂，展开， 取出，晾干，置饱和碘蒸气缸内，放置10 min取出，在供试品色谱中，与对照品色谱中相应 的位置显相同颜色的斑点，见图1-1。
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2.2 独活：取本品1 片，剪成小条，揭去薄膜，加正己烷40 mL，加热回流0.5 h，滤过 ， 滤液浓缩至1 mL，作为供试品溶液；同法制备空白独活样品溶液；另取独活药材粉 0.5 g，同法制备，浓缩至2 mL，作为对照品溶液。吸取上述3 种溶液4 μL，分别点 于 同一硅胶GF254薄层板上以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)展开，取出，晾干，置紫外灯365 nm下视检。在供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，见 图1-2。
2.3 白芷：取本品2 片，剪成小条，揭去薄膜，加石油醚(60 ℃～90 ℃)50 mL，加热回 流2 次，每次1 h。合并石油醚溶液，浓缩至1 mL，作为供试品溶液；同法制备空白白芷样品溶 液；另取欧前胡素对照品，加石油醚(60 ℃～90 ℃)制成每毫升含 1 mg的溶液，作为对照 品 溶液。吸取上述供试品溶液、阴性溶液各20 μL，对照品溶液5 μL，分别点于同一硅胶GF 254薄层板上，以石油醚(60 ℃～90 ℃)-乙醚(3∶2)展开，取出，晾干，再同样条 件展 开一次，置紫外灯254 nm下视检。供试品色谱中，在与欧前胡素对照品色谱相应的位置上显 相同颜色的斑点，见图1-3。
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2.4 马钱子：取含量测定项下的供试品溶液和空白马钱子样品溶液；另取士的宁和马钱子 碱对照品加氯仿制成1 mg/L的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液、阴性溶液各 10 μL，对照品溶液3 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇 -浓氨水(16∶12∶1∶4)上层为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外灯254 nm下视检，供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图1-4。
1-空白 1-空白 1-空白 1-空白
2-紫荆皮2-独活2-欧前胡素2-马钱子
3-供试样3-供试样3-供试样3-士的宁
4-供试样
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图1 药材的薄层图
3 含量测定
3.1 层析条件：含CMC-Na的硅胶GF254薄层板，展开剂：甲苯-丙酮-乙醇-浓 氨水(16∶12∶1∶4)上层溶液，展距10 cm。
3.2 扫描条件：反射法锯齿扫描，λs=254 nm，λR=325 nm，狭缝1.25 mm×1.25 mm ，扫描速度20 mm/min，灵敏度×5。
3.3 对照品溶液配制：精密称取于105 ℃干燥至恒重的士的宁，置容量瓶中，加氯仿配 制成1 mg/mL的士的宁对照品溶液。
3.4 供试样品液制备：取本品3 片，用适量蒸馏水将衬布均匀湿润，剪成小条，揭去薄膜 ，加0.5 mL浓氨水，再加25 mL氯仿回流1 h，其间不断振摇，第2～4次氯仿各15 mL ，每次45 min，合并氯仿液于分液漏斗内，用硫酸溶液(3→100)萃取3 次，每次10 mL，合 并酸液，加浓氨水调pH≈9～10，再用氯仿萃取3 次，每次10 mL，合并氯仿层，蒸干，残渣 精密加氯仿1 mL使溶解，为样品液。
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3.5 空白样品液制备：取除马钱子的处方中其他21 味中药，按制备工艺制成空马钱子样 品，再按样品液制备方法制备空白样品液，备用。
3.6 线性关系考察：准确吸取上述对照品液1.0～5.0 mL于10 mL容量瓶中，定容；分别 取 10 μL点于同一块硅胶GF254板上，按上述方法展开测定，绘制标准曲线，并回归得 直线方程为：A=723.19M-9 102.04，r=0.998 9，同时显示士的宁浓度 在1.1～5.5 μg之间其浓度与峰面积呈线性关系。
3.7 干扰性试验：取对照品液、样品液、空白样品液各10 μL，点于同一硅胶GF254 预制板上，按上述方法展开晾干，扫描测定，得各供试液图谱，结果空白供试液在测定波 长处无干扰和吸收，即其他药材成分对士的宁测定无干扰，此外马钱子其他成分亦对测定无 干扰。
3.8 稳定性试验：取照品液适量，点于硅胶GF254板上，上述方法展开，测定斑点 峰面积积分值，每隔0.5 h测定1 次，记录积分值，结果0～4 h内数值稳定， RSD=2.0%。
, http://www.100md.com
3.9 精密度试验：同一薄层板同一斑点连续测定11 次，RSD=3.2%.
3.10 样品测定：取5 个批号的样品，制成供试品溶液，分别准确吸收样品液10.0 μL点 于硅胶GF254板上，并平行点对照品3.0 μL，按上述方法展开，测定，结果如表1 。
3.11 回收率测定：加样回收率测定结果为90.49%，RSD=3.4%(n=3)。
表1 样品中士的宁的含量测定结果(n=3)[ ST
4 讨论
4.1 本文所制定的定性鉴别方法，均根据被测成分的极性来选择提取溶液。
4.2 本产品为贴膏剂，膏体基质有多种水溶性高分子复合成分，其含马钱子量少，故在含 量测定的分离提取时，先用水来湿润，其目的是提高氯仿对膏体的穿透性，以利于士的宁的 提取。由于本品中含有表面活性剂，对提取带来影响，故回收率略低。因本方内含22 味中 药，故上述研究可为中药大复方的分析提供参考。
, http://www.100md.com
Address： Yang Liya, Shanghai Chinese Medicinal Materials Co. Ltd., Shanghai
杨莉娅 1984年毕业于上海科技大学化学系高分子专业，理学士，上海中药制药三厂工 程师。负责多项科研项目开发，其中“蟾酥膏巴布膏”荣获1984年上海市新产品二等奖、“ 复方紫荆消伤膏”获得国家中药三类新药生产批文。按照新药审批办法要求，探索、研究新 产品达15项，其中通过各级评审获得生产批文达12项产品：强力花粉口服液、仙草壮阳 口服液、麝香虎骨膏、益肾灵冲剂、脑得生片、西洋参冲剂、蟾酥膏巴布膏、西洋参含片( 首创)等，完成复方紫荆消伤膏临床前药效学、毒理学、工艺、质量标准等工作。
上海中药制药三厂
参 考 文 献
1，王宝琴，陈德昌，鲁 静，等.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医 药科技出版社，1994
2，郭钟慧，吕国雄，莫翠华.中成药，1998，20(5)：13
(2000-01-14收稿), 百拇医药