CD3激活的异体高效杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤
作者：段玉龙 侯俊卿 刘桂玲 代利红 刘利平 丁朝鹏
单位：段玉龙 侯俊卿 刘桂玲 代利红 刘利平 丁朝鹏(河南省平顶山市第二人民医院肿瘤科 平顶山市 467000)
关键词：过继免疫治疗；脐血淋巴细胞；恶性肿瘤；疗效
肿瘤防治杂志000461
中图分类号：R730.54 文献标识码：A
文章编号：1009-4571(2000)04-0429-01
肿瘤生物治疗是当今继手术、放疗和化疗的第4种治疗手段。我们自1995年始采用CD3体外激活的高效杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤病人25例，疗效满意，总结如下。
, 百拇医药
1 临床资料
1.1 一般资料
经病理和CT确诊晚期恶性肿瘤25例，男14例，女11例；年龄35～81岁，中位年龄61岁。一般情况按ECOG标准分级属1、2级。RBC>5×1012/L，PL>5×1010/L，WBC>3×109/L。其中肺癌8例，肝癌5例，肾癌3例，乳腺癌4例，直肠癌3例，纵隔淋巴瘤2例，既往行化疗失败。胸/腹水23例。
1.2 治疗方法
1.2.1 活化异体淋巴细胞的制备 ①1～10 μg/ml抗CD3单克隆抗体加入培养瓶中，室温下反应24 h后，将CD3溶液吸尽冲洗1次备用；②采用肝素抗凝的新鲜脐带血，分离取其淋巴细胞，Hank's液洗涤2次，RPMI 1640培养液(含5%血清、rIL-Ⅱ 200 U/ml)细胞浓度调至1×106/ml；③加至CD3包被的培养瓶，37℃ 5% CO2培养5天；④淋巴细胞移至CD3包被、含γIL-Ⅱ 200 U/ml培养液中继续培养，3天换液1次；⑤培养15～21天后收集细胞，Hank's液洗涤后，收获活化的淋巴细胞，计数≥1×109个/ml，做无菌试验备用。
, 百拇医药
1.2.2 活化异体淋巴细胞的应用 取活化的淋巴细胞液10 ml，经0.5 Gy γ射线照射。①照射后的细胞液悬浮于100 ml生理盐水中静脉输注，1次/5日，6次/疗程；②腔内注射：适量抽放胸/腹水后，取细胞液10 ml腔内注射，2次/周。
1.2.3 疗效评定标准 完全缓解(CR)：病灶完全消失，持续4周以上；部分缓解(PR)：肿瘤缩小50%以上，持续4周以上；好转(MR)：病灶减小25%，但不足50%；无效(NR)：肿块减小不足25%或增大。
1.3 结果
1.3.1 近期疗效 CR 2例、PR 7例、MR 5例、NR 11例，缓解率(CR+PR)为36%，有效率(CR+PR+MR)为56%。癌性症状控制满意，癌痛缓解率89%(16/18)，乏力缓解率100%，纳差缓解率57%(12/21)，睡眠改善率72%(18/25)，胸/腹水CR 2例、PR 4例、MR 7例(表1)。
, 百拇医药
表1 CD3激活的异体高效杀伤细胞
治疗晚期恶性肿瘤临床疗效 病种
n
NR
MR
PR
CR
CR+PR
肺癌
8
2
1
4
, 百拇医药
1
5
肝癌
5
2
1
1
1
2
肾癌
3
1
1
1
, 百拇医药
0
1
乳腺癌
4
2
1
1
0
1
直肠癌
3
2
1
0
, 百拇医药
0
0
纵隔肿瘤
2
2
0
0
0
0
合计
25
11
5
7
, 百拇医药
2
9(36%)
1.3.2 毒副反应 全部病例150人次中仅24人出现寒战、发热等反应，通过减慢速度或应用镇静药物后缓解。
2 讨论
目前研究认为，肿瘤发生是机体免疫监控功能失常的结果，我们应用抗CD3单克隆抗体做诱导剂，以新鲜脐带血作原料，利用γIL-Ⅱ进行培养制作出高效的杀肿瘤细胞，有效活性维持时间长，表现出超强的杀瘤活力。输注前应用γ射线照射，抑制γ射线敏感的活细胞对免疫的抑制作用，有利于对肿瘤细胞的免疫作用[1]。
研究表明，该方法对肺癌、肝癌有较好的治疗效果，并能改善癌性症状，提高生活质量。其机理是通过激活的淋巴细胞直接杀伤肿瘤细胞；提高患者自身的免疫功能，间接地发挥抗肿瘤作用[2]。该方法以脐带血为原料，利用异体淋巴细胞制作开展过继免疫疗法，为过继免疫法的细胞取材开辟了新源。该技术简便、快速、高效，避免了常规方法制LAK细胞扩增能力低，缺乏靶细胞特异性，杀瘤活性不够，成本昂贵等缺点，提高了过继免疫治疗的疗效。
, 百拇医药
参考文献：
[1]Wasserman,Petrini B,Blomgren H,etal.Radiosensitivity of T Lymphoeyte Swbpopulation[J].J Clin Lab Immmnol,1982,7:139～141.
[2]梁军，林本辉，赵敬然.经支气管动脉输注LAK/IL-2治疗肺癌的免疫指标变化及临床意义[J].中国肿瘤临床，1996，23(6)：427～429.
收稿日期：2000-03-17
修回日期：2000-05-18, 百拇医药
单位：段玉龙 侯俊卿 刘桂玲 代利红 刘利平 丁朝鹏(河南省平顶山市第二人民医院肿瘤科 平顶山市 467000)
关键词：过继免疫治疗；脐血淋巴细胞；恶性肿瘤；疗效
肿瘤防治杂志000461
中图分类号：R730.54 文献标识码：A
文章编号：1009-4571(2000)04-0429-01
肿瘤生物治疗是当今继手术、放疗和化疗的第4种治疗手段。我们自1995年始采用CD3体外激活的高效杀伤细胞治疗晚期恶性肿瘤病人25例，疗效满意，总结如下。
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1 临床资料
1.1 一般资料
经病理和CT确诊晚期恶性肿瘤25例，男14例，女11例；年龄35～81岁，中位年龄61岁。一般情况按ECOG标准分级属1、2级。RBC>5×1012/L，PL>5×1010/L，WBC>3×109/L。其中肺癌8例，肝癌5例，肾癌3例，乳腺癌4例，直肠癌3例，纵隔淋巴瘤2例，既往行化疗失败。胸/腹水23例。
1.2 治疗方法
1.2.1 活化异体淋巴细胞的制备 ①1～10 μg/ml抗CD3单克隆抗体加入培养瓶中，室温下反应24 h后，将CD3溶液吸尽冲洗1次备用；②采用肝素抗凝的新鲜脐带血，分离取其淋巴细胞，Hank's液洗涤2次，RPMI 1640培养液(含5%血清、rIL-Ⅱ 200 U/ml)细胞浓度调至1×106/ml；③加至CD3包被的培养瓶，37℃ 5% CO2培养5天；④淋巴细胞移至CD3包被、含γIL-Ⅱ 200 U/ml培养液中继续培养，3天换液1次；⑤培养15～21天后收集细胞，Hank's液洗涤后，收获活化的淋巴细胞，计数≥1×109个/ml，做无菌试验备用。
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1.2.2 活化异体淋巴细胞的应用 取活化的淋巴细胞液10 ml，经0.5 Gy γ射线照射。①照射后的细胞液悬浮于100 ml生理盐水中静脉输注，1次/5日，6次/疗程；②腔内注射：适量抽放胸/腹水后，取细胞液10 ml腔内注射，2次/周。
1.2.3 疗效评定标准 完全缓解(CR)：病灶完全消失，持续4周以上；部分缓解(PR)：肿瘤缩小50%以上，持续4周以上；好转(MR)：病灶减小25%，但不足50%；无效(NR)：肿块减小不足25%或增大。
1.3 结果
1.3.1 近期疗效 CR 2例、PR 7例、MR 5例、NR 11例，缓解率(CR+PR)为36%，有效率(CR+PR+MR)为56%。癌性症状控制满意，癌痛缓解率89%(16/18)，乏力缓解率100%，纳差缓解率57%(12/21)，睡眠改善率72%(18/25)，胸/腹水CR 2例、PR 4例、MR 7例(表1)。
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表1 CD3激活的异体高效杀伤细胞
治疗晚期恶性肿瘤临床疗效 病种
n
NR
MR
PR
CR
CR+PR
肺癌
8
2
1
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1
5
肝癌
5
2
1
1
1
2
肾癌
3
1
1
1
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0
1
乳腺癌
4
2
1
1
0
1
直肠癌
3
2
1
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纵隔肿瘤
2
2
0
0
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0
合计
25
11
5
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2
9(36%)
1.3.2 毒副反应 全部病例150人次中仅24人出现寒战、发热等反应，通过减慢速度或应用镇静药物后缓解。
2 讨论
目前研究认为，肿瘤发生是机体免疫监控功能失常的结果，我们应用抗CD3单克隆抗体做诱导剂，以新鲜脐带血作原料，利用γIL-Ⅱ进行培养制作出高效的杀肿瘤细胞，有效活性维持时间长，表现出超强的杀瘤活力。输注前应用γ射线照射，抑制γ射线敏感的活细胞对免疫的抑制作用，有利于对肿瘤细胞的免疫作用[1]。
研究表明，该方法对肺癌、肝癌有较好的治疗效果，并能改善癌性症状，提高生活质量。其机理是通过激活的淋巴细胞直接杀伤肿瘤细胞；提高患者自身的免疫功能，间接地发挥抗肿瘤作用[2]。该方法以脐带血为原料，利用异体淋巴细胞制作开展过继免疫疗法，为过继免疫法的细胞取材开辟了新源。该技术简便、快速、高效，避免了常规方法制LAK细胞扩增能力低，缺乏靶细胞特异性，杀瘤活性不够，成本昂贵等缺点，提高了过继免疫治疗的疗效。
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参考文献：
[1]Wasserman,Petrini B,Blomgren H,etal.Radiosensitivity of T Lymphoeyte Swbpopulation[J].J Clin Lab Immmnol,1982,7:139～141.
[2]梁军，林本辉，赵敬然.经支气管动脉输注LAK/IL-2治疗肺癌的免疫指标变化及临床意义[J].中国肿瘤临床，1996，23(6)：427～429.
收稿日期：2000-03-17
修回日期：2000-05-18, 百拇医药