HLA-DR抗原β链的共同表位与类风湿关节炎相关性研究
作者：刘巧红 滕云 沈凌汛
单位：刘巧红(430022 武汉，同济医科大学附属协和医院风湿科)；滕云(同济医科大学医学遗传研究室(滕云)；沈凌汛(430022 武汉，同济医科大学附属协和医院风湿科)
关键词：关节炎，类风湿；抗原决定簇；HLA-DR抗原；聚合酶链反应-序列特异性引物
中华风湿病学杂志000307 【摘 要】 目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-DR基因编码的共同表位(SE)与武汉籍汉族类风湿关节炎(RA)的相关性。方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术(PCR-SSP)，对武汉籍汉族人群78例RA患者和126例健康者的HLA-DRB1*01、*04基因型进行检测。结果 RA患者中具有编码QKRAA或QRRAA的共同表位阳性率为43.6%，明显高于正常对照组(15.1%，P0.01)；SE阳性的RA患者的关节压痛数、侵蚀性病变以及关节外表现明显高于SE阴性的RA患者(P0.01)。结论 HLA-DR基因编码的SE与武汉籍汉族RA易感性及疾病严重性相关，共同表位的检测可作为一项病情及预后判断的指标。
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Relation between shared epitope of HLA-DR antigen β chain and rheumatoid arthritis
LIU Qiaohong,TENG Yun,SHEN Lingxun
(Department of Rheumatology,Union Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430022,China)
【Abstract】 Objective To explore the association between expression of HLA-DR antigen shared epitope (SE) and rheumatoid arthritis (RA) in Han nationality in Wuhan of China.Method The method of DNA amplification with sequence-specific primers (PCR-SSP) was used to dertermine HLA-DRB101,04 genotype in 78 patients with RA and 126 healthy controls in Han nationality from Wuhan.Results There was a significant increase in the presence of amino acid sequence QKRAA of QRRAA both in RA patients overall compared with healthy group (43.6% vs 15.1%，P0.01).RA patients with SE were more severe in tender joint numbers,radiological severity and extraarticular disease than those with SE negative.Conclusion The results suggest that strong association between SE of HLA-DR antigen and susceptibility and severity to RA in Han nationality in Wuhan,and SE may be a useful marker for disease severity and prognosis in the patients with RA.
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【Key words】 Arthritis,rheumatoid; Antigenic determinants; HLA-DR antigens; PCR-sequence-specific primers
类风湿关节炎(RA)作为自身免疫性疾病至今病因不明，国内外研究表明，人类白细胞抗原(HLA)DR抗原β链第70～74位氨基酸残基的多态性与RA的易感性有密切的关系，凡是在该段位置上的氨基酸序列为QKRAA、QRRAA或RRRAA的个体，都表现出对RA的易感性增高[1，2]。但不同种族，不同地理环境中，HLA-DRB1基因型的构成差异较大[3]。为探讨这些共同表位(shared epitope, SE)与RA易感性及疾病严重性的相关性，我们对武汉籍汉族的RA患者和健康人群的HLA-DR1和HLA-DR4进行基因分析。
1 资料与方法
, http://www.100md.com 1.1 研究对象
78例RA患者均符合美国风湿病协会1987年RA分类标准[4]，男性12例，女性66例，年龄(39±10)岁，病程(10±8)年。另选择健康成年人126名作为正常对照组。所有观察对象均为祖籍三代居住武汉地区，无血缘关系的汉族人。两组对象的年龄和性别构成差异无显著性。
1.2 方法
1.2.1 全血DNA的制备：取外周血3 ml，2% EDAT抗凝，常规盐析法提取DNA。
1.2.2 HLA-DR1和HLA-DR4等位基因及其亚型测定：采用PCR-SSP法，按文献[5]略加改进。引物的核苷酸序列、扩增产物长度及其扩增的特异等位基因分别见表1。以β球蛋白基因作为内对照，5′端引物序列为 5′-TATCATGCCTCTTTGCACCA-TTC-3′，3′端引物为5′-AATGCACTGACCTCCCACATTCC-3′，扩增片段长约580 bp。95 ℃预变性5 min，然后按94 ℃变性25 s，64 ℃退火55 s，72 ℃延伸30 s，循环30次，72 ℃再延伸5 min，扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察。
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表1 应用PCR-SSP进行HLA-DRB1*01，*04亚型分析的特异性引物核苷酸序列、产物长度及扩增特异性 5′引物
序列(5′-3′)
3′引物
序列(5′-3′)
产物(bp)
扩增特异性(DRB1*04)
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′041
GTCCACCGCGGCCCGCT
, 百拇医药
212
01，02，09
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′042
CGCGGCCCGCTCGTCT
206
02
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′043
TGCAGTAGGTGTCCACCT
, http://www.100md.com
222
03，06，07，11
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′044
CTGCAGTAGGTGTCCACCG
223
01，02，04，05，08，09，10
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′045
, http://www.100md.com
TGTTCCAGTACTCGGCGCT
171
05，09，10，11
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′046
CGCTGTCGAAGCGCACGG
111
06
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
, 百拇医药
3′047
CTGCACTGTGAAGCTCTCAC
260
01，05，07，08，09
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′048
CTGCACTGTGAAGCTCTCCA
260
02，03，04，06，10，11
5′引物
, 百拇医药
序列(5′-3′)
3′引物
序列(5′-3′)
产物(bp)
扩增特异性(DRB1*01)
5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′A
CTGCACTGTGAAGCTCTCAC
255
01，03
5′01
, 百拇医药
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′B
CTGCACTGTGAAGCTCTCCA
255
02
5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′C
GGCCCGCCTCTGCTCCA
195
01，02
, http://www.100md.com 5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′D
CGGCCCGCTCGTCTTCC
195
03
5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′E
TCGCCGCTGCACTGTGAAG
261
04
, http://www.100md.com
1.2.3 临床观察指标：包括患者的发病年龄、性别、病程、关节外表现(血管炎、皮下结节、雷诺现象等)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、患者受累关节及其放射分数[6]等。
1.3 统计学处理
用χ2检验进行率的比较，两组间差异分析采用t检验。
2 结果
2.1 RA患者和正常对照组共同表位的频率：见表2。RA患者中呈SE阳性的有34例，明显高于对照组(43.6%比15.1%，P<0.01)，其中编码QKRAA共同表位(DRB1*0401)的有4例(5.1%)，编码QRRAA (DRB1*0101、*0102、*0404、*0405、*0408)有30例(38.5%)。
, 百拇医药 表2 SE与RA疾病严重性的关系 表现型
RA
对照
P值
RR
例数
%
例数
%
SE
-
44
51.3
, 百拇医药
107
84.9
+
34
43.6
19
15.1
<0.01
4.35
SE杂合子
DRB1*01
3
3.8
, http://www.100md.com
3
2.3
1.64
DRB1*04
32
41.0
16
12.7
<0.01
4.78
SE纯合子
DRB1*04
3
, 百拇医药
2.4
0
0
<0.01
RA患者中，呈DR4阳性的有41例(52.5%)，其中编码SE的有32例(41.0%)，对照组中DR4阳性有27例(21.6%)，其中编码SE的有16例(12.7%)，均低于RA患者(P<0.01)。
2.2 SE阳性和SE阴性的RA患者的临床特征的比较，见表3。编码SE/SE(SE纯合子)和SE/-(SE杂合子)组患者的关节压痛数、放射分数以及类风湿结节数与-/-(SE阴性)组相比有明显差异(P<0.01)，编码SE/SE和SE/-组相比仅放射分数有差异(P<0.01)外，余差异无显著性。表3 SE阳性和SE阴性的RA患者的临床特征比较 项目
, 百拇医药 ES/SE
SE/-
-/-
发病年龄(岁)
46±11
51±14
47±13
类风湿结节数n(%)
4(100)*
30(85.7)*
5(12.5)
RF(≥1∶20)n(%)
, 百拇医药
3(75)
28(82.4)
32(80)
ESR(mm/1h)
52±33
57±31
50±33
压痛关节数(个)
29±13*
27±12*
16±11
肿胀关节数(个)
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21±14
20±12
15±5
受限关节数(个)
12±9
11±7
10±5
放射分数(分)
49±31*Δ
29±20*
13±10
注：与-/-相比，*P<0.01；与SE/-相比，ΔP<0.01
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2.3 RA患者关节受累部位与SE的关系：见表4。SE阳性组RA患者总的受累关节数目和放射分数较高，尤其是腕关节、肘关节和膝关节受累频率明显高于SE阴性组(P<0.01)。而掌指关节、近端指关节、远端指关节、髋关节、肩关节与SE关系不大。表4 SE与关节侵蚀的关系 关节
SE(-)
SE(+)
腕关节(个)
8
34*
掌指关节(个)
30
33
, 百拇医药 近端指关节(个)
29
30
远端指关节(个)
3
5
膝关节(个)
5
30*
肘关节(个)
2
34*
髋关节(个)
, 百拇医药
2
5
肩关节(个)
12
15
注：与SE(-)相比，*P<0.01
3 讨论
RA的病因较复杂，除环境因素外，遗传因素也在RA的发生和发展中起着重要的作用。目前已证实RA患者在细胞免疫和体液免疫异常，如患者多伴有IgM-RF、抗ssDNA抗体等自身抗体增高。随着免疫遗传学的发展，已有许多研究证实RA与HLA相关。
HLA复合体位于人类第6号染色体短臂上，其中HLA-II类基因具有高度多态性，是参与机体特异性识别和免疫应答的主要成分。HLA等位基因多态性决定了个体免疫反应的表型，通过对T细胞的自身调节，影响抗原递呈过程。至今已发现与RA有关的基因型有：DRB1*0401、*0404、*0405、*0408、*0101、*0102、*1001、*1402，这些基因编码DR抗原的第三高变区氨基酸序列均为QKRAA或QRRAA或RRRAA(共同表位学说)[7，8]。上述序列中个别氨基酸如果被带相反电荷的氨基酸取代，将降低RA易感风险。Toussirot等发现，法国东部高加索人群RA患者以编码QRRAA为主，基因型主要为DRB1*0401。Nepom等研究显示编码共同表位阳性的RA患者中QKRAA占74%。我们采用PCR-SSP法对武汉籍汉族RA患者进行编码SE的DR基因分析，RA患者SE的阳性率明显高于正常人群，且以QRRAA与RA相关为主，基因型以DRB1*0405为主，结果与我国北方的有关研究相似，表明与RA发病有关的SE有一定的地域差异。
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本研究还显示，RA患者编码SE/SE和SE/-患者与关节压痛数、侵蚀性病变(放射分数)、关节外表现(如类风湿结节)有较强相关性，提示编码共同表位的RA患者病情较重，治疗及预后较差。如果将编码共同表位阳性的RA患者受累关节部位与共同表位阴性组相比较，发现共同表位阳性组RA患者的腕关节、肘关节以及膝关节受累的频率高于共同表位阴性组。Moreno等研究认为，西班牙人群中RA患者SE阳性与膝关节、肘关节和肩关节侵蚀有关。
共同表位学说认为这些由不同基因编码的共同表位QRRAA或QKRAA，它们的氨基酸残基恰好位于HLA-Ⅱ类分子抗原结合槽的α螺旋部位，这些氨基酸具有与共同的抗原结合特性，可与致关节炎抗原肽结合，并将其呈递给T细胞，从而导致RA发病。Roudier等发现EB病毒包膜的一种糖白gp110含有与HLA-DRB1中70～74位相同的氨基酸序列，EB病毒感染可能诱发T细胞对gp110的免疫反应，并和DR4发生交叉免疫反应，从而导致RA发病。
RA的临床表现复杂多样，共同表位可作为疾病严重性和预后的参考指标，在RA患者发病早期，可根据共同表位的检测情况采取针对性治疗，以及时控制病情。当然HLA-II类基因在RA发病中的作用仅占33%，说明有共同表位以外的机制在RA发病中起作用，尚需进一步研究。
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参 考 文 献
1,Hong C,Park MH,Takeuchi F,et al.Association of specific amino acid sequence of HLA-DR with rheumatoid arthritis in Koreans and its diagnostic value.J Rheumatol,1996,23:1699-1703.
2,Yelamos J,Garcia-Lozano R,Moreno I,et al.Association of HLA-DR4-Dw15(DRB1*0405) and DR10 with rheumatoid arthritis in a Spanish population.Arthritis Rheum,1993,36:811-814.
3,McCuskey CT,Reid B,Green D,et al.HLA-D region antigens in patients with rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum,1991,34:192-197.
, 百拇医药
4,Arnett FC,Edworth S,Blook DA,et al.The american rheumatism association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum,1987,31:315-324.
5,Zetterquist H,Olerup O.Identification of the HLA-DRB1*04,-DRB1*07,and -DRB1*09 alleles by PCR amplification with sequence-spcific primers (PCR-SSP) in 2 hours.Hum Immunol,1992,34:64-74.
6,Larsen A.How to apply Larsen score in evaluating radiographs of rheumatoid arthritis in long term studies?J Rheumatol,1995,22:1974-1975.
, 百拇医药
7,Winchester R,Dwyer E,Rose S.The genetic bases of rheumatoid arthritis:the shared epitope hypothesis.Rheum Dis Clin North Am,1992,18:761-783.
8,Gregersen P,Silver J,Windchester R. The shared epitope hypotheses:an approach to understanding the genetics of susceptibility to rheumatoid arthirtis.Arthritis Rheum,1987,30:1205-1213.
(收稿日期：1999-11-18), 百拇医药
单位：刘巧红(430022 武汉，同济医科大学附属协和医院风湿科)；滕云(同济医科大学医学遗传研究室(滕云)；沈凌汛(430022 武汉，同济医科大学附属协和医院风湿科)
关键词：关节炎，类风湿；抗原决定簇；HLA-DR抗原；聚合酶链反应-序列特异性引物
中华风湿病学杂志000307 【摘 要】 目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-DR基因编码的共同表位(SE)与武汉籍汉族类风湿关节炎(RA)的相关性。方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术(PCR-SSP)，对武汉籍汉族人群78例RA患者和126例健康者的HLA-DRB1*01、*04基因型进行检测。结果 RA患者中具有编码QKRAA或QRRAA的共同表位阳性率为43.6%，明显高于正常对照组(15.1%，P0.01)；SE阳性的RA患者的关节压痛数、侵蚀性病变以及关节外表现明显高于SE阴性的RA患者(P0.01)。结论 HLA-DR基因编码的SE与武汉籍汉族RA易感性及疾病严重性相关，共同表位的检测可作为一项病情及预后判断的指标。
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Relation between shared epitope of HLA-DR antigen β chain and rheumatoid arthritis
LIU Qiaohong,TENG Yun,SHEN Lingxun
(Department of Rheumatology,Union Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430022,China)
【Abstract】 Objective To explore the association between expression of HLA-DR antigen shared epitope (SE) and rheumatoid arthritis (RA) in Han nationality in Wuhan of China.Method The method of DNA amplification with sequence-specific primers (PCR-SSP) was used to dertermine HLA-DRB101,04 genotype in 78 patients with RA and 126 healthy controls in Han nationality from Wuhan.Results There was a significant increase in the presence of amino acid sequence QKRAA of QRRAA both in RA patients overall compared with healthy group (43.6% vs 15.1%，P0.01).RA patients with SE were more severe in tender joint numbers,radiological severity and extraarticular disease than those with SE negative.Conclusion The results suggest that strong association between SE of HLA-DR antigen and susceptibility and severity to RA in Han nationality in Wuhan,and SE may be a useful marker for disease severity and prognosis in the patients with RA.
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【Key words】 Arthritis,rheumatoid; Antigenic determinants; HLA-DR antigens; PCR-sequence-specific primers
类风湿关节炎(RA)作为自身免疫性疾病至今病因不明，国内外研究表明，人类白细胞抗原(HLA)DR抗原β链第70～74位氨基酸残基的多态性与RA的易感性有密切的关系，凡是在该段位置上的氨基酸序列为QKRAA、QRRAA或RRRAA的个体，都表现出对RA的易感性增高[1，2]。但不同种族，不同地理环境中，HLA-DRB1基因型的构成差异较大[3]。为探讨这些共同表位(shared epitope, SE)与RA易感性及疾病严重性的相关性，我们对武汉籍汉族的RA患者和健康人群的HLA-DR1和HLA-DR4进行基因分析。
1 资料与方法
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78例RA患者均符合美国风湿病协会1987年RA分类标准[4]，男性12例，女性66例，年龄(39±10)岁，病程(10±8)年。另选择健康成年人126名作为正常对照组。所有观察对象均为祖籍三代居住武汉地区，无血缘关系的汉族人。两组对象的年龄和性别构成差异无显著性。
1.2 方法
1.2.1 全血DNA的制备：取外周血3 ml，2% EDAT抗凝，常规盐析法提取DNA。
1.2.2 HLA-DR1和HLA-DR4等位基因及其亚型测定：采用PCR-SSP法，按文献[5]略加改进。引物的核苷酸序列、扩增产物长度及其扩增的特异等位基因分别见表1。以β球蛋白基因作为内对照，5′端引物序列为 5′-TATCATGCCTCTTTGCACCA-TTC-3′，3′端引物为5′-AATGCACTGACCTCCCACATTCC-3′，扩增片段长约580 bp。95 ℃预变性5 min，然后按94 ℃变性25 s，64 ℃退火55 s，72 ℃延伸30 s，循环30次，72 ℃再延伸5 min，扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察。
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表1 应用PCR-SSP进行HLA-DRB1*01，*04亚型分析的特异性引物核苷酸序列、产物长度及扩增特异性 5′引物
序列(5′-3′)
3′引物
序列(5′-3′)
产物(bp)
扩增特异性(DRB1*04)
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′041
GTCCACCGCGGCCCGCT
, 百拇医药
212
01，02，09
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′042
CGCGGCCCGCTCGTCT
206
02
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′043
TGCAGTAGGTGTCCACCT
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222
03，06，07，11
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′044
CTGCAGTAGGTGTCCACCG
223
01，02，04，05，08，09，10
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′045
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TGTTCCAGTACTCGGCGCT
171
05，09，10，11
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′046
CGCTGTCGAAGCGCACGG
111
06
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
, 百拇医药
3′047
CTGCACTGTGAAGCTCTCAC
260
01，05，07，08，09
5′04
GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA
3′048
CTGCACTGTGAAGCTCTCCA
260
02，03，04，06，10，11
5′引物
, 百拇医药
序列(5′-3′)
3′引物
序列(5′-3′)
产物(bp)
扩增特异性(DRB1*01)
5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′A
CTGCACTGTGAAGCTCTCAC
255
01，03
5′01
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TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′B
CTGCACTGTGAAGCTCTCCA
255
02
5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′C
GGCCCGCCTCTGCTCCA
195
01，02
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TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′D
CGGCCCGCTCGTCTTCC
195
03
5′01
TTGTGGCAGCTTAAGTTTGAAT
3′E
TCGCCGCTGCACTGTGAAG
261
04
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1.2.3 临床观察指标：包括患者的发病年龄、性别、病程、关节外表现(血管炎、皮下结节、雷诺现象等)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、患者受累关节及其放射分数[6]等。
1.3 统计学处理
用χ2检验进行率的比较，两组间差异分析采用t检验。
2 结果
2.1 RA患者和正常对照组共同表位的频率：见表2。RA患者中呈SE阳性的有34例，明显高于对照组(43.6%比15.1%，P<0.01)，其中编码QKRAA共同表位(DRB1*0401)的有4例(5.1%)，编码QRRAA (DRB1*0101、*0102、*0404、*0405、*0408)有30例(38.5%)。
, 百拇医药 表2 SE与RA疾病严重性的关系 表现型
RA
对照
P值
RR
例数
%
例数
%
SE
-
44
51.3
, 百拇医药
107
84.9
+
34
43.6
19
15.1
<0.01
4.35
SE杂合子
DRB1*01
3
3.8
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3
2.3
1.64
DRB1*04
32
41.0
16
12.7
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4.78
SE纯合子
DRB1*04
3
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2.4
0
0
<0.01
RA患者中，呈DR4阳性的有41例(52.5%)，其中编码SE的有32例(41.0%)，对照组中DR4阳性有27例(21.6%)，其中编码SE的有16例(12.7%)，均低于RA患者(P<0.01)。
2.2 SE阳性和SE阴性的RA患者的临床特征的比较，见表3。编码SE/SE(SE纯合子)和SE/-(SE杂合子)组患者的关节压痛数、放射分数以及类风湿结节数与-/-(SE阴性)组相比有明显差异(P<0.01)，编码SE/SE和SE/-组相比仅放射分数有差异(P<0.01)外，余差异无显著性。表3 SE阳性和SE阴性的RA患者的临床特征比较 项目
, 百拇医药 ES/SE
SE/-
-/-
发病年龄(岁)
46±11
51±14
47±13
类风湿结节数n(%)
4(100)*
30(85.7)*
5(12.5)
RF(≥1∶20)n(%)
, 百拇医药
3(75)
28(82.4)
32(80)
ESR(mm/1h)
52±33
57±31
50±33
压痛关节数(个)
29±13*
27±12*
16±11
肿胀关节数(个)
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21±14
20±12
15±5
受限关节数(个)
12±9
11±7
10±5
放射分数(分)
49±31*Δ
29±20*
13±10
注：与-/-相比，*P<0.01；与SE/-相比，ΔP<0.01
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2.3 RA患者关节受累部位与SE的关系：见表4。SE阳性组RA患者总的受累关节数目和放射分数较高，尤其是腕关节、肘关节和膝关节受累频率明显高于SE阴性组(P<0.01)。而掌指关节、近端指关节、远端指关节、髋关节、肩关节与SE关系不大。表4 SE与关节侵蚀的关系 关节
SE(-)
SE(+)
腕关节(个)
8
34*
掌指关节(个)
30
33
, 百拇医药 近端指关节(个)
29
30
远端指关节(个)
3
5
膝关节(个)
5
30*
肘关节(个)
2
34*
髋关节(个)
, 百拇医药
2
5
肩关节(个)
12
15
注：与SE(-)相比，*P<0.01
3 讨论
RA的病因较复杂，除环境因素外，遗传因素也在RA的发生和发展中起着重要的作用。目前已证实RA患者在细胞免疫和体液免疫异常，如患者多伴有IgM-RF、抗ssDNA抗体等自身抗体增高。随着免疫遗传学的发展，已有许多研究证实RA与HLA相关。
HLA复合体位于人类第6号染色体短臂上，其中HLA-II类基因具有高度多态性，是参与机体特异性识别和免疫应答的主要成分。HLA等位基因多态性决定了个体免疫反应的表型，通过对T细胞的自身调节，影响抗原递呈过程。至今已发现与RA有关的基因型有：DRB1*0401、*0404、*0405、*0408、*0101、*0102、*1001、*1402，这些基因编码DR抗原的第三高变区氨基酸序列均为QKRAA或QRRAA或RRRAA(共同表位学说)[7，8]。上述序列中个别氨基酸如果被带相反电荷的氨基酸取代，将降低RA易感风险。Toussirot等发现，法国东部高加索人群RA患者以编码QRRAA为主，基因型主要为DRB1*0401。Nepom等研究显示编码共同表位阳性的RA患者中QKRAA占74%。我们采用PCR-SSP法对武汉籍汉族RA患者进行编码SE的DR基因分析，RA患者SE的阳性率明显高于正常人群，且以QRRAA与RA相关为主，基因型以DRB1*0405为主，结果与我国北方的有关研究相似，表明与RA发病有关的SE有一定的地域差异。
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本研究还显示，RA患者编码SE/SE和SE/-患者与关节压痛数、侵蚀性病变(放射分数)、关节外表现(如类风湿结节)有较强相关性，提示编码共同表位的RA患者病情较重，治疗及预后较差。如果将编码共同表位阳性的RA患者受累关节部位与共同表位阴性组相比较，发现共同表位阳性组RA患者的腕关节、肘关节以及膝关节受累的频率高于共同表位阴性组。Moreno等研究认为，西班牙人群中RA患者SE阳性与膝关节、肘关节和肩关节侵蚀有关。
共同表位学说认为这些由不同基因编码的共同表位QRRAA或QKRAA，它们的氨基酸残基恰好位于HLA-Ⅱ类分子抗原结合槽的α螺旋部位，这些氨基酸具有与共同的抗原结合特性，可与致关节炎抗原肽结合，并将其呈递给T细胞，从而导致RA发病。Roudier等发现EB病毒包膜的一种糖白gp110含有与HLA-DRB1中70～74位相同的氨基酸序列，EB病毒感染可能诱发T细胞对gp110的免疫反应，并和DR4发生交叉免疫反应，从而导致RA发病。
RA的临床表现复杂多样，共同表位可作为疾病严重性和预后的参考指标，在RA患者发病早期，可根据共同表位的检测情况采取针对性治疗，以及时控制病情。当然HLA-II类基因在RA发病中的作用仅占33%，说明有共同表位以外的机制在RA发病中起作用，尚需进一步研究。
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参 考 文 献
1,Hong C,Park MH,Takeuchi F,et al.Association of specific amino acid sequence of HLA-DR with rheumatoid arthritis in Koreans and its diagnostic value.J Rheumatol,1996,23:1699-1703.
2,Yelamos J,Garcia-Lozano R,Moreno I,et al.Association of HLA-DR4-Dw15(DRB1*0405) and DR10 with rheumatoid arthritis in a Spanish population.Arthritis Rheum,1993,36:811-814.
3,McCuskey CT,Reid B,Green D,et al.HLA-D region antigens in patients with rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum,1991,34:192-197.
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4,Arnett FC,Edworth S,Blook DA,et al.The american rheumatism association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum,1987,31:315-324.
5,Zetterquist H,Olerup O.Identification of the HLA-DRB1*04,-DRB1*07,and -DRB1*09 alleles by PCR amplification with sequence-spcific primers (PCR-SSP) in 2 hours.Hum Immunol,1992,34:64-74.
6,Larsen A.How to apply Larsen score in evaluating radiographs of rheumatoid arthritis in long term studies?J Rheumatol,1995,22:1974-1975.
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7,Winchester R,Dwyer E,Rose S.The genetic bases of rheumatoid arthritis:the shared epitope hypothesis.Rheum Dis Clin North Am,1992,18:761-783.
8,Gregersen P,Silver J,Windchester R. The shared epitope hypotheses:an approach to understanding the genetics of susceptibility to rheumatoid arthirtis.Arthritis Rheum,1987,30:1205-1213.
(收稿日期：1999-11-18), 百拇医药