多发性骨髓瘤细胞黏附分子表达的研究
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中华内科杂志 2000年第9期第39卷
作者：陈文明 夏成青 朱嘉芷 陈世伦 李利红 吴垠 张蕾 李燕郴
单位：陈文明 朱嘉芷 陈世伦 李利红 吴垠 李燕郴(100020 首都医科大学附属北京朝阳医院血液科)；夏成青(病理科)
关键词：
中华内科杂志000914 多发性骨髓瘤的恶性浆细胞表达一系列黏附分子，使恶性浆细胞选择性的黏附并归巢基质，为浆细胞的增殖提供物理学及细胞因子的支持。本研究旨在检测多发性骨髓瘤(MM)及相关疾病骨髓浆细胞黏附分子的表达及其意义。
一、资料与方法
1. 病人：MM及相关疾病共26例, 其中MM 18例, 浆细胞白血病(PCL)1例, 华氏巨球蛋白血症(WM)3例, 未定性单克隆免疫球蛋白病(MGUS)4例(其中1例转化为MM), 并以10例反应性浆细胞增多症(RP)患者做对照。所有患者的诊断均符合血液病诊断及疗效标准。将MM分为进展期及平稳期。
, 百拇医药
2. 流式细胞仪检测黏附分子的表达：所有标本均取自患者的骨髓。对新采集的骨髓2 ml 用Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离出单个核细胞。参照文献[1]提供的方法检测细胞黏附分子的表达。采用CD38与CD44, CD49d, CD49e, CD54, CD56, CD58, CD11a中的任何一种双标记的方法, 检测CD+38细胞中上述黏附分子的表达。根据细胞表面荧光的强度判断黏附分子表面表达的强弱。
二、结果
各组患者的骨髓瘤(浆)细胞黏附分子的表达,见表1。
1.对照组：10例该组患者骨髓浆细胞表达CD44, CD11a, CD49d, CD49e及 CD54, 但其表达较弱，在(±～+)之间。
, 百拇医药
2. MGUS细胞黏附分子的表达：4 例MGUS患者的骨髓浆细胞表达CD49d, CD49e, CD54, CD11a, CD56及CD58, 除CD11a强表达(++)外，其他荧光强度与对照组相似。因此，通过细胞黏附分子的表达尚不能明确区分反应性浆细胞增多症与MGUS。
3.MM组：(1)平稳期细胞黏附分子的表达：18例MM的
表1 骨髓CD+38细胞表面黏附分子的表达 疾病
名称
CD44
CD49d
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CD49e
CD54
CD56
CD11a
CD58
RP
+
±/+
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-/±
+
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-
MGUS
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MM
平稳期
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进展期
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PCL
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WM
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注：-:不表达;±:弱表达;+:表达;++:强表达
4.PCL细胞黏附分子的表达：本组1例患者由MM转化而来，其细胞黏附分子的表达与MM不同，主要表达CD44, CD54及CD11a, 而CD49d, CD49e, CD56, CD58的表达明显减弱(-～±)。MM与PCL的黏附分子表达的差异是否可以作为鉴别指标之一，由于病例太少，其临床意义有待更进一步评价。
5.WM组：3例WM的骨髓浆细胞表达与平稳期的MM相似, 其 CD54, CD56, CD58均具有较强(++)水平的表达, 而不表达 CD49e。
讨论 MPC表达CD49d及CD49e。CD49d在MM细胞系和新鲜MPC强表达。CD49d与配体相互作用，促进MPC归巢于骨髓基质，并通过骨髓基质触发白细胞介素-6(IL-6)分泌。Kawano等[2]发现了MPC的两个亚类：CD49e阴性的不成熟骨髓瘤细胞具有很强的增殖潜能及对IL-6的强反应性。CD49e阳性的成熟骨髓瘤细胞有更高的产生M蛋白的能力，但对IL-6反应不敏感。另外，在MM平稳期，MPC几乎不表达CD11a，但在进展期CD11a表达上调，CD11a的表达与浆细胞的标记指数呈正相关[2]，表明CD11a在MPC增殖中起作用。我们的研究也发现：在MM的平稳期向进展期的转化中，CD49e及CD11a的表达增强，说明MM进展期的骨髓浆细胞更为不成熟。 本研究结果显示CD56在MPC有极强的表达，而在正常浆细胞，反应性浆细胞增多症中的浆细胞不表达或仅低水平表达。髓外播散的MPC其CD56，CD49e和CD11a表达下调，而CD44表达上调。这表明CD56在肿瘤细胞归巢于骨髓基质，抑制其髓外播散起重要作用。血清中高浓度的可溶性CD56对MM诊断的特异性高达95.5%，且血清CD56水平与疾病进程有关[3]。我们对CD56的研究发现，CD56的表达具有诊断、鉴别诊断及监测病情的临床意义。 在我们的研究中，CD44在所有的浆细胞均有表达，但其他黏附分子的表达随疾病的不同及疾病的临床阶段的不同而存在差异。这种表达差异的存在对于MM的诊断及判断MGUS向MM转化，MM向PCL转化具有重要意义。关于WM的骨髓浆细胞黏附分子的表达研究报道较少，我们对3例WM的研究发现其与MM平稳期的表达相似。 黏附分子的检测除可用于诊断、鉴别诊断和疾病监测外，也在成为MM治疗的新靶点。如体外应用抗 CD54或CD11a的McAb能部分地取消由于MPC与骨髓基质细胞黏附所引起的IL-6分泌增加。抗 CD54的McAb已用于治疗小鼠的MM[4],这种McAb虽不能抑制肿瘤细胞的增殖，但能阻止骨损害的发展，预计有关MM细胞黏附分子的McAb有较理想的应用前景。
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参考文献
1，Vacca A, Di Loreto M, Ribatti D, et al. Bone marrow of patients with active multiple myeloma: angiogenesis and plasma cell adhesion molecules LFA-1,VLA-4,LAM-1,and CD44. Am J Hematol, 1995,50:9-14.
2，Kawano MM, Huang N, Harada H, et al. Identification of immature and mature myeloma cells in the bone marrow of human myelomas. Blood, 1993,82:564-570.
3，Kaiser U, Oldenburg M, jaques G, et al. Soluble CD56(NCAM):A new differential diagnostic and prognostic marker in multiple myeloma. Ann Hematol, 1996,73: 121-126.
4，Teoh G, Anderson KC. Interaction of tumor and host cells with adhesion and extracellular matrix molecules in the development of multiple myeloma. Hematol Oncol Clin North Am,1997,11:27-39.
(收稿日期： 1999-11-22), 百拇医药
单位：陈文明 朱嘉芷 陈世伦 李利红 吴垠 李燕郴(100020 首都医科大学附属北京朝阳医院血液科)；夏成青(病理科)
关键词：
中华内科杂志000914 多发性骨髓瘤的恶性浆细胞表达一系列黏附分子，使恶性浆细胞选择性的黏附并归巢基质，为浆细胞的增殖提供物理学及细胞因子的支持。本研究旨在检测多发性骨髓瘤(MM)及相关疾病骨髓浆细胞黏附分子的表达及其意义。
一、资料与方法
1. 病人：MM及相关疾病共26例, 其中MM 18例, 浆细胞白血病(PCL)1例, 华氏巨球蛋白血症(WM)3例, 未定性单克隆免疫球蛋白病(MGUS)4例(其中1例转化为MM), 并以10例反应性浆细胞增多症(RP)患者做对照。所有患者的诊断均符合血液病诊断及疗效标准。将MM分为进展期及平稳期。
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2. 流式细胞仪检测黏附分子的表达：所有标本均取自患者的骨髓。对新采集的骨髓2 ml 用Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离出单个核细胞。参照文献[1]提供的方法检测细胞黏附分子的表达。采用CD38与CD44, CD49d, CD49e, CD54, CD56, CD58, CD11a中的任何一种双标记的方法, 检测CD+38细胞中上述黏附分子的表达。根据细胞表面荧光的强度判断黏附分子表面表达的强弱。
二、结果
各组患者的骨髓瘤(浆)细胞黏附分子的表达,见表1。
1.对照组：10例该组患者骨髓浆细胞表达CD44, CD11a, CD49d, CD49e及 CD54, 但其表达较弱，在(±～+)之间。
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2. MGUS细胞黏附分子的表达：4 例MGUS患者的骨髓浆细胞表达CD49d, CD49e, CD54, CD11a, CD56及CD58, 除CD11a强表达(++)外，其他荧光强度与对照组相似。因此，通过细胞黏附分子的表达尚不能明确区分反应性浆细胞增多症与MGUS。
3.MM组：(1)平稳期细胞黏附分子的表达：18例MM的
表1 骨髓CD+38细胞表面黏附分子的表达 疾病
名称
CD44
CD49d
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CD49e
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注：-:不表达;±:弱表达;+:表达;++:强表达
4.PCL细胞黏附分子的表达：本组1例患者由MM转化而来，其细胞黏附分子的表达与MM不同，主要表达CD44, CD54及CD11a, 而CD49d, CD49e, CD56, CD58的表达明显减弱(-～±)。MM与PCL的黏附分子表达的差异是否可以作为鉴别指标之一，由于病例太少，其临床意义有待更进一步评价。
5.WM组：3例WM的骨髓浆细胞表达与平稳期的MM相似, 其 CD54, CD56, CD58均具有较强(++)水平的表达, 而不表达 CD49e。
讨论 MPC表达CD49d及CD49e。CD49d在MM细胞系和新鲜MPC强表达。CD49d与配体相互作用，促进MPC归巢于骨髓基质，并通过骨髓基质触发白细胞介素-6(IL-6)分泌。Kawano等[2]发现了MPC的两个亚类：CD49e阴性的不成熟骨髓瘤细胞具有很强的增殖潜能及对IL-6的强反应性。CD49e阳性的成熟骨髓瘤细胞有更高的产生M蛋白的能力，但对IL-6反应不敏感。另外，在MM平稳期，MPC几乎不表达CD11a，但在进展期CD11a表达上调，CD11a的表达与浆细胞的标记指数呈正相关[2]，表明CD11a在MPC增殖中起作用。我们的研究也发现：在MM的平稳期向进展期的转化中，CD49e及CD11a的表达增强，说明MM进展期的骨髓浆细胞更为不成熟。 本研究结果显示CD56在MPC有极强的表达，而在正常浆细胞，反应性浆细胞增多症中的浆细胞不表达或仅低水平表达。髓外播散的MPC其CD56，CD49e和CD11a表达下调，而CD44表达上调。这表明CD56在肿瘤细胞归巢于骨髓基质，抑制其髓外播散起重要作用。血清中高浓度的可溶性CD56对MM诊断的特异性高达95.5%，且血清CD56水平与疾病进程有关[3]。我们对CD56的研究发现，CD56的表达具有诊断、鉴别诊断及监测病情的临床意义。 在我们的研究中，CD44在所有的浆细胞均有表达，但其他黏附分子的表达随疾病的不同及疾病的临床阶段的不同而存在差异。这种表达差异的存在对于MM的诊断及判断MGUS向MM转化，MM向PCL转化具有重要意义。关于WM的骨髓浆细胞黏附分子的表达研究报道较少，我们对3例WM的研究发现其与MM平稳期的表达相似。 黏附分子的检测除可用于诊断、鉴别诊断和疾病监测外，也在成为MM治疗的新靶点。如体外应用抗 CD54或CD11a的McAb能部分地取消由于MPC与骨髓基质细胞黏附所引起的IL-6分泌增加。抗 CD54的McAb已用于治疗小鼠的MM[4],这种McAb虽不能抑制肿瘤细胞的增殖，但能阻止骨损害的发展，预计有关MM细胞黏附分子的McAb有较理想的应用前景。
, http://www.100md.com
参考文献
1，Vacca A, Di Loreto M, Ribatti D, et al. Bone marrow of patients with active multiple myeloma: angiogenesis and plasma cell adhesion molecules LFA-1,VLA-4,LAM-1,and CD44. Am J Hematol, 1995,50:9-14.
2，Kawano MM, Huang N, Harada H, et al. Identification of immature and mature myeloma cells in the bone marrow of human myelomas. Blood, 1993,82:564-570.
3，Kaiser U, Oldenburg M, jaques G, et al. Soluble CD56(NCAM):A new differential diagnostic and prognostic marker in multiple myeloma. Ann Hematol, 1996,73: 121-126.
4，Teoh G, Anderson KC. Interaction of tumor and host cells with adhesion and extracellular matrix molecules in the development of multiple myeloma. Hematol Oncol Clin North Am,1997,11:27-39.
(收稿日期： 1999-11-22), 百拇医药