薄层扫描法测定仲景胃灵片中芍药甙的含量
作者：韩少兰 毛爱英
单位：深圳中联制药厂 518029 咸宁市药品检验所 437000
关键词：仲景胃灵片；芍药甙；含量测定；薄层扫描法
湖北中医学院学报/990122
中国图书分类号 R284.1
Determination of Paeoniflorin Content in Zhongjing Weiling Tablets by TCL-Scanning Method
Han ShaoLan
Shenzhen Zhonglian Fharmaceutical Factory,518004
, 百拇医药
Abstract：The dual wavelength TCL-scanning method was adopted for determination of paeoniflorin content in Zhongjing Weiling tablets.This method is simple,reliable and apply to quality control of finished products and semi-finished products.
Key words：Zhongjing Weiling tablets Paeoniflorin Assaying TCL-scanning method
仲景胃灵片是由白芍、高良姜、砂仁、肉桂、延胡索、小茴香、甘草等中药制成的中成药制剂，具有温中散寒，理气解郁，健胃止痛的功效。该处方中的白芍药为君药，其有效成份为芍药甙，具有显著的生理活性。为控制产品质量，笔者采用双波长薄层扫描法测定仲景胃灵片半成品和成品中白芍含芍药甙的含量。
, 百拇医药
1 仪器与试药
CS-9000薄层扫描仪(日本岛津)，薄层层析用硅胶C(青岛海洋化工厂分厂)，自动点样器(CAMAG LINOMAT IV)，芍药甙对照品(中国药品生物制品检定所)，仲景胃灵片(深圳中联制药厂)，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液制备
精密称取在105°C干燥至恒重的芍药甙对照品5.12mg，置5ml容量瓶中，加甲醇溶解，定溶至刻度，制得每1ml含1.024mg的芍药甙标准溶液。
2.2 供试品溶液的制备
取本品10片，研细，精密称定，至索氏提取器中加石油醚50ml，回流1小时，弃去石油醚，药挥干，溶剂加甲醇60ml，回流提取6小时，提取回收甲醇至干，残渣加水20ml，溶解，滤过，并定量转移至分液漏斗中，以水饱和正丁醇提取振摇提取5次，(20，20，15，15，15ml)。合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次20ml，正丁醇提取液置水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，并移至5ml的溶量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
, 百拇医药
2.3 阴性对照的制备
取缺白芍药材制成的阴性对照片剂10g，用与供试品相同的方法制成阴性对照液。
2.4 层析条件
薄层板为硅胶G预制板，使用前放入烘箱中110°C活化30min，置干燥器中备用。展开剂为氯仿：甲醇(5∶1)。显色剂为2%香草醛硫酸溶液。
2.5 薄层分析
将供试品溶液、阴性对照液和对照品溶液分别用自动点样器点于同一硅胶G板上，点成1cm长的条形，以氯仿-甲醇(5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，105°C烘2～5分钟，供试品溶液色谱中，与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同蓝紫色的斑点。而阴性样品则无。
2.6 扫描条件选择
, 百拇医药
将对照品溶液与样品溶液在薄层板上所显的斑点，于可见光区(370-700nm)进行光谱扫描，结果均在540nm波长处有最大吸收，在630nm波长处为最小吸收，故确定λR为540nm，λR为630nm。扫描方式为反射法双波长锯齿扫描，SX=3，狭缝1.2mm×1.2mm，灵敏度×1。
2.7 线性关系考察
用自动点样器点样，分别点1ul，2ul，3ul，4ul，5ul对照品溶液于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，晾干，显色，封板，扫描测定峰面积，以浓度(X)为横座标，峰面积(Y)积分值为纵座标，绘制出标准曲线，曲线经回归得回归方程Y=35850.43X+10824.19，相关系数r=0.9992(n=5)，线性范围为1.032-5.160。
2.8 精密度与稳定性试验
, 百拇医药 对芍药甙对照品同一斑点连续扫描5次，测得峰面积RSD(相对标准偏差)为0.21%；同一样品在同一薄层板不同位置点样，按上法展开后，斑点扫描测得RSD为2.23%，每隔20min扫描测一次斑点的峰面积，芍药甙斑点在2小时内基本稳定，RSD为2.53%(n=6)。2.5小时后测定，峰面积积分值成下降趋势。
2.9 样品测定
用自动点样器点样，对照品与样品分别各点5ul，10ul，点于同一薄层板上，展开，显色，立刻扫描测定。根据对照品与样品的峰面积，按外标两点法计算仲景胃灵片中芍药甙的含量。共测定了6批样品(每批样品均测3次)，结果见表1。
2.10 加样回收试验
取同一批号样品10片除去包衣，精密称定，分别加入芍药甙对照品(1024mg/ml)1ml，2ml，按上述方法提取，点样，展开，显色后，扫描测定，结果见表2。
, 百拇医药
表1 样品中芍药甙含量测定结果 样品批号
芍药甙含量%
RSD%
9607023
1.223
2.50
9607055
1.182
1.87
9607059
1.286
1.92
, 百拇医药
9704070
1.260
1.63
9704075
1.153
1.72
9704098
1.344
2.23
表2 芍药甙加标回收率测定结果 样品编号
样品中已知量(mg)
加入芍药甙量(mg)
, http://www.100md.com
测出芍药甙量(mg)
回收率%
平均回收率%
RSD%
1
1.240
1.103
2.151
91.8
2
1.250
1.104
2.170
, 百拇医药
92.2
3
1.279
1.102
2.264
95.1
93.1
1.55
4
1.190
1.206
2.209
92.2
, http://www.100md.com
5
1.193
1.216
2.257
93.7
6
1.194
1.220
2.204
94.2
3 讨论
采用双波长薄层扫描法测定仲景胃灵片中芍药含量，用于控制该片剂半成品(素片)，成品质量是可行的，具有简单、快速、灵敏度高、重现性好的优点。
收稿日期：1999-01-14, 百拇医药
单位：深圳中联制药厂 518029 咸宁市药品检验所 437000
关键词：仲景胃灵片；芍药甙；含量测定；薄层扫描法
湖北中医学院学报/990122
中国图书分类号 R284.1
Determination of Paeoniflorin Content in Zhongjing Weiling Tablets by TCL-Scanning Method
Han ShaoLan
Shenzhen Zhonglian Fharmaceutical Factory,518004
, 百拇医药
Abstract：The dual wavelength TCL-scanning method was adopted for determination of paeoniflorin content in Zhongjing Weiling tablets.This method is simple,reliable and apply to quality control of finished products and semi-finished products.
Key words：Zhongjing Weiling tablets Paeoniflorin Assaying TCL-scanning method
仲景胃灵片是由白芍、高良姜、砂仁、肉桂、延胡索、小茴香、甘草等中药制成的中成药制剂，具有温中散寒，理气解郁，健胃止痛的功效。该处方中的白芍药为君药，其有效成份为芍药甙，具有显著的生理活性。为控制产品质量，笔者采用双波长薄层扫描法测定仲景胃灵片半成品和成品中白芍含芍药甙的含量。
, 百拇医药
1 仪器与试药
CS-9000薄层扫描仪(日本岛津)，薄层层析用硅胶C(青岛海洋化工厂分厂)，自动点样器(CAMAG LINOMAT IV)，芍药甙对照品(中国药品生物制品检定所)，仲景胃灵片(深圳中联制药厂)，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液制备
精密称取在105°C干燥至恒重的芍药甙对照品5.12mg，置5ml容量瓶中，加甲醇溶解，定溶至刻度，制得每1ml含1.024mg的芍药甙标准溶液。
2.2 供试品溶液的制备
取本品10片，研细，精密称定，至索氏提取器中加石油醚50ml，回流1小时，弃去石油醚，药挥干，溶剂加甲醇60ml，回流提取6小时，提取回收甲醇至干，残渣加水20ml，溶解，滤过，并定量转移至分液漏斗中，以水饱和正丁醇提取振摇提取5次，(20，20，15，15，15ml)。合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次20ml，正丁醇提取液置水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，并移至5ml的溶量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
, 百拇医药
2.3 阴性对照的制备
取缺白芍药材制成的阴性对照片剂10g，用与供试品相同的方法制成阴性对照液。
2.4 层析条件
薄层板为硅胶G预制板，使用前放入烘箱中110°C活化30min，置干燥器中备用。展开剂为氯仿：甲醇(5∶1)。显色剂为2%香草醛硫酸溶液。
2.5 薄层分析
将供试品溶液、阴性对照液和对照品溶液分别用自动点样器点于同一硅胶G板上，点成1cm长的条形，以氯仿-甲醇(5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，105°C烘2～5分钟，供试品溶液色谱中，与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同蓝紫色的斑点。而阴性样品则无。
2.6 扫描条件选择
, 百拇医药
将对照品溶液与样品溶液在薄层板上所显的斑点，于可见光区(370-700nm)进行光谱扫描，结果均在540nm波长处有最大吸收，在630nm波长处为最小吸收，故确定λR为540nm，λR为630nm。扫描方式为反射法双波长锯齿扫描，SX=3，狭缝1.2mm×1.2mm，灵敏度×1。
2.7 线性关系考察
用自动点样器点样，分别点1ul，2ul，3ul，4ul，5ul对照品溶液于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，晾干，显色，封板，扫描测定峰面积，以浓度(X)为横座标，峰面积(Y)积分值为纵座标，绘制出标准曲线，曲线经回归得回归方程Y=35850.43X+10824.19，相关系数r=0.9992(n=5)，线性范围为1.032-5.160。
2.8 精密度与稳定性试验
, 百拇医药 对芍药甙对照品同一斑点连续扫描5次，测得峰面积RSD(相对标准偏差)为0.21%；同一样品在同一薄层板不同位置点样，按上法展开后，斑点扫描测得RSD为2.23%，每隔20min扫描测一次斑点的峰面积，芍药甙斑点在2小时内基本稳定，RSD为2.53%(n=6)。2.5小时后测定，峰面积积分值成下降趋势。
2.9 样品测定
用自动点样器点样，对照品与样品分别各点5ul，10ul，点于同一薄层板上，展开，显色，立刻扫描测定。根据对照品与样品的峰面积，按外标两点法计算仲景胃灵片中芍药甙的含量。共测定了6批样品(每批样品均测3次)，结果见表1。
2.10 加样回收试验
取同一批号样品10片除去包衣，精密称定，分别加入芍药甙对照品(1024mg/ml)1ml，2ml，按上述方法提取，点样，展开，显色后，扫描测定，结果见表2。
, 百拇医药
表1 样品中芍药甙含量测定结果 样品批号
芍药甙含量%
RSD%
9607023
1.223
2.50
9607055
1.182
1.87
9607059
1.286
1.92
, 百拇医药
9704070
1.260
1.63
9704075
1.153
1.72
9704098
1.344
2.23
表2 芍药甙加标回收率测定结果 样品编号
样品中已知量(mg)
加入芍药甙量(mg)
, http://www.100md.com
测出芍药甙量(mg)
回收率%
平均回收率%
RSD%
1
1.240
1.103
2.151
91.8
2
1.250
1.104
2.170
, 百拇医药
92.2
3
1.279
1.102
2.264
95.1
93.1
1.55
4
1.190
1.206
2.209
92.2
, http://www.100md.com
5
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1.216
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6
1.194
1.220
2.204
94.2
3 讨论
采用双波长薄层扫描法测定仲景胃灵片中芍药含量，用于控制该片剂半成品(素片)，成品质量是可行的，具有简单、快速、灵敏度高、重现性好的优点。
收稿日期：1999-01-14, 百拇医药