P53蛋白和增殖细胞核抗原在涎腺良恶性肌上皮瘤中的表达
作者：王丽京 高玉好 杨连甲
单位：兰州医学院口腔系 (王丽京 730000)；西安 第四军医大学口腔医学院 (高玉好 杨连甲)
关键词：癌基因；增殖细胞核抗原；肌上皮瘤
实用口腔医学杂志990515 〔摘要〕 目的：检测P53蛋白和PCNA在涎腺良恶性肌上皮瘤中的表达。方法：采用免疫组化方法检测12例肌上皮瘤、8例肌上皮瘤细胞生长活跃型、20例恶性肌上皮瘤中P53蛋白和PCNA的表达，用图像分析系统检测PCNA的相对含量。结果：P53蛋白在6例恶性肌上皮瘤中呈阳性表达，在良性肌上皮瘤中均呈阴性表达；PCNA阳性表达的增殖指数和相对含量在恶性肌上皮瘤中表达高于在良性肌上皮中的表达(P<0.01)；PCNA高表达与P53蛋白高表达有一定相关性。结论：p53基因突变对恶性肌上皮瘤的发生有一定作用；PCNA阳性表达和相对含量的检测是诊断恶性肌上皮瘤的重要生物学指标。
, http://www.100md.com
Expression of P53 and PCNA in myoepithelioma and malignant
myoepithelioma of salivary gland
Wang Lijing,Gao Yuhao,Yang Lianjia.Department of Stomatology,Lanzhou Medical College,Lanzhou 73000
〔Abatract〕Objectlve: To study the expression of P53 and PCNA in myoepithelioma and malignant myoepithelioma of salivary gland.Methods:12 cases of myoepithelioma,8 of myoepithelioma with active proliferation and 20 of malignant myoepithelioma were examined by immunohistochemical methods.Results:P53 protein expression was positive in six of malignant myoepithelioma and negative in all cases of myoepithelioma.The proliferating index (PI) of PCNA positive cells in malignant myoepithelioma showed a higher index of nuclear staining of P53 protein (mean 22.08%) than that in myoepithelioma(mean 4.17%) or myoepithelioma with active proliferation(mean 6.00%).The absorbance of PCNA relative content in malignant myoepithelioma (0.17±0.158) was higher than that in benign myoepithelioma (0.03±0.36 for myoepithelioma and 0.08±0.087 for that with active proliferation) (P<0.01).Conciuslon:PCNA and the mutation of p53 gene may play an important role in the carcinogenesis of malignant myoepithelioma.
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Key words Oncogene; P53;Proliferating cell nuclear antigen; Myoepithelioma.
涎腺肌上皮肿瘤是近几年才得到关注的新型肿瘤〔1〕，对它的生物学行为仍了解甚少。目前发现抑癌基因p53的突变是人类肿瘤中最常见的基因改变，p53基因突变后失去对细胞生长的调控作用，引起细胞的恶性增殖。P53基因蛋白已作为检测乳腺癌和消化道肿瘤恶性程度及预后的重要指标〔2〕。近年来增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen 简称PCNA)作为判断细胞增殖活性的一个重要指标被广泛应用于癌前病变、良性和恶性肿瘤的研究中〔3〕。有关P53蛋白和PCNA在涎腺肿瘤中的研究报道尚不多见。我们采用P53蛋白单抗(Pab1801，突变型)和PCNA单抗(PC10)研究了40例涎腺良恶性肌上皮瘤，探讨它们在肿瘤发生、发展过程中的作用。
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1 材料与方法
1.1 标本
40例标本均选自第四军医大学口腔医院病理科1974～1995年间临床检验存档的蜡块。所有标本依据作者提出的纳入标准进行筛选〔4〕，同时经两名高年资病理医生参照1991年WHO关于《涎腺肿瘤组织病理新分类》标准重新确诊，并经免疫组化Ck-18、Actin抗体染色为双阳性表达所证实。依据细胞分化程度分为12例肌上皮瘤、8例肌上皮瘤细胞生长活跃型、20例恶性肌上皮瘤，同时依据细胞形态分为上皮细胞型、梭形细胞型、浆细胞样细胞型和透明细胞型四型。全部标本经中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片4张，1张HE染色，其余分别进行P53和PCNA抗体染色。
1.2 免疫组化方法
鼠抗人P53蛋白单抗(Pab1801，突变型)和PCNA单抗(PC10)分别为丹麦Dako公司和美国Zymed公司产品，ABC试剂盒为Vector公司产品。采用常规ABC法，P53蛋白和PCNA的工作浓度均为1∶50。唯一改良之处是在正常血清封闭前，切片浸于饱和的硫氢酸铅溶液中96～100 ℃加热2次，每次5 min，以恢复抗原性。2例乳腺浸润性导管癌和2例腺样囊性癌分别作为P53蛋白和PCNA的阳性对照，PBS液代替一抗作为阴性对照；2例腮腺组织作为正常对照。
, 百拇医药
1.3 免疫组化结果观察
P53蛋白和PCNA的阳性表达均为细胞核内出现棕黄色颗粒。PCNA染色结果采用网格测试的方法，每例选择10个高倍镜视野(×40)，至少计数1000个细胞，计算阳性细胞的百分比，称为增殖指数(proliferating index,PI)。用PI值来判断肿瘤细胞增殖活性，PI>20%认为是高增殖指数〔5〕。P53蛋白染色，镜下计数阳性细胞>5%为阳性。
1.4 PCNA吸光度的测定
利用北京航天大学CIMAS8型多媒体彩色病理图像分析系统，检测已做免疫组化染色的各组标本中PCNA阳性细胞的吸光度。每组检测3～6张切片，先由光学显微镜成像，随机选择测量视野，确定细胞核内有棕黄色颗粒的细胞为阳性目标，由摄像机摄像后成像于计算机彩色显示屏上，输入计算机处理，计算被测阳性目标的吸光度并以数字形式打印。
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1.5 统计学处理
采用行×列表χ2检验和Newman-Keuls方差分析。
2 结 果
2.1 P53蛋白表达
20例恶性肌上皮瘤中P53蛋白阳性表达者6例，阳性率30%，阳性细胞散在分布于肿瘤中，以上皮细胞和透明细胞多见(图1)。12例肌上皮瘤和8例肌上皮瘤细胞生长活跃型中P53蛋白均为阴性表达。2例乳腺癌均为阳性表达，腮腺组织均为阴性表达。
图1 恶性肌上皮瘤，透明细胞型，P53染色阳性细胞分布于肿瘤组织中，ABC法×400
, http://www.100md.com 2.2 PCNA的表达
各组标本中PCNA阳性细胞的计数情况见表1。12例肌上皮瘤中PCNA表达水平较低，阳性细胞散在分布；8例肌上皮瘤细胞生长活跃型阳性细胞数有所增加(图2)，但两者间PI值无显著性差异(P>0.05)。20例恶性肌上皮瘤中阳性细胞明显增多，与良性肌上皮瘤相比PI值有极显著性差异(P<0.01)，阳性细胞弥漫分布，在肿瘤周边部多见，多为上皮细胞和透明细胞(图3)。2例腺样囊性癌PI值均>20%，腮腺组织PI值<3%。
图2 肌上皮瘤细胞生长活跃型，PCNA染色阳性细胞较稀疏地分布于肿瘤组织中，ABC法×400
图3 恶性肌上皮瘤，PCNA染色阳性细胞弥漫分布于肿瘤组织中，ABC法×400
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表1 各组标本中PCNA的PI值比较 分 组
例数
PI(
±s)
P
肌上皮瘤
12
4.17±3.22
>0.05①
肌上皮瘤细胞
生长活跃型
8
, 百拇医药
6.00±3.79
<0.01②
恶性肌上皮瘤
20
22.08±6.93
<0.01③
①肌上皮瘤与肌上皮瘤细胞生长活跃型相比②肌上皮瘤细胞生长活跃型与恶性肌上皮瘤相比③肌上皮瘤与恶性肌上皮瘤相比，下表同。
2.3 PCNA表达的定量分析
吸光度是反映计算机某一点颜色深浅程度的一种参数，与物体颜色深浅呈正比。PCNA阳性细胞的吸光度越大表明其相对含量也较大。所以，测定PCNA阳性细胞吸光度，能较为客观地观察不同肌上皮瘤中PCNA相对含量(表2)。图像分析表明在肌上皮瘤和肌上皮瘤细胞生长活跃型中PCNA吸光度较低，两者间无显著性差异(P>0.05)；恶性肌上皮瘤中PCNA吸光度增高，与前两者相比均有显著性差异(P<0.05)。表2 各组标本中PCNA的相对含量(方差分析) 分 组
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所测细胞数
吸光度(±s)
q
P
肌上皮瘤
52
0.03±0.036
2.37①
>0.05
肌上皮瘤细胞
生长活跃型
, 百拇医药
138
0.08±0.087
6.52②
<0.05
恶性肌上皮瘤
216
0.17±0.158
7.12③
<0.05
2.4 P53蛋白表达与PCNA表达的关系
在恶性肌上皮瘤中，以PI值=20%为界线分组，>20%有7例，其中有4例P53蛋白表达阳性，<20%有13例，其中有2例P53蛋白表达阳性，可见PCNA高表达与P53蛋白高表达有一定相关性，两者在恶性肌上皮瘤中的表达高于在良性肌上皮瘤中的表达(P<0.05)。
, 百拇医药
3 讨 论
P53蛋白是p53抑癌基因产物，野生型P53蛋白半衰期短在正常细胞中含量低，免疫组化方法难以检测到。而突变性P53蛋白半衰期明显延长，含量比正常增多，表达增强。因此，通过免疫组化方法检测到的P53蛋白均为突变型P53蛋白。P53在涎腺肿瘤的研究已有报道。Righi〔6〕等报道P53蛋白在多形性腺瘤恶变过程中起着重要作用，Kamio〔7〕报道P53蛋白在涎腺恶性肿瘤中的阳性表达多集中在有丝分裂较多的区域，提示P53蛋白的聚积与癌细胞的恶性增殖有密切关系。本实验显示，P53蛋白在良性肌上皮瘤中均呈阴性表达，在恶性肌上皮瘤中呈30%的阳性表达，提示p53基因突变在恶性肌上皮瘤的发生、发展过程中起了一定的作用，可作为诊断恶性肌上皮瘤的一个参考指标。
PCNA是相对分子质量为36 000的核蛋白，为DNA合成期必不可少的一种细胞生长因子。它在细胞或肿瘤中的表达能较客观地反映细胞的增殖活性。PCNA在恶性肿瘤中的表达与其恶性程度呈正相关，但在正常细胞或良性肿瘤过度增殖时，也可有PCNA阳性细胞出现〔3〕。有作者报道PCNA在涎腺组织仅少数腺泡细胞呈阳性表达，在涎腺肿瘤中阳性表达显著升高，并对肿瘤的分化程度和预后估计有重要意义〔8，9〕。Yang〔10〕等报道PCNA在恶性多形性腺瘤中的表达明显高于良性病例，可作为鉴别良恶性的标记物。本实验显示，在恶性肌上皮瘤中PCNA阳性表达水平显著高于肌上皮瘤和肌上皮瘤细胞生长活跃型，其PI值与后两者相比有显著性差异，提示恶性肌上皮瘤有较强的增殖活性，PI值可以作为诊断恶性肌上皮瘤的重要生物学指标。吸光度的测定表明PCNA的相对含量与肿瘤的恶性程度呈正相关，随着肿瘤由良性向恶性转化，PCNA的相对含量明显增加，提示肌上皮肿瘤中PCNA吸光度的测定在判断肿瘤性质方面有重要的临床价值，而且也为本实验标本的筛选和病理诊断的正确性提供了反证依据。组织学观察发现PCNA阳性细胞多为上皮细胞及透明细胞，多见于肿瘤边缘组织中，可能是这些肿瘤细胞和部位有较高的增殖活性。
, 百拇医药
有作者报道P53蛋白阳性表达的肿瘤组织比阴性组织具有较高的增殖活性，认为P53能够间接地反映细胞的增殖活性〔5〕。许多研究也表明PCNA的检测结合病理形态和几种癌基因如C-erbB-2、P53检测能较为客观地判断肿瘤的性质〔5,10〕。本实验结果显示PCNA高表达伴随有P53蛋白的高表达，说明在肌上皮肿瘤的演进过程中两者起了协同作用，特别是它们在肌上皮肿瘤由良性向恶性转化过程中起了非常重要的作用，所以PCNA和P53蛋白的联合检测对诊断恶性肌上皮瘤更有意义。
本研究为甘肃省教委自然科学基金资助 06249
参考文献
1Seifert G.Histological typing of salivary gland tumors.International histological classification of tumors.Berlin:Springer-Verlag,1991.12
, 百拇医药
2 Martinazzi M,Crivell F,Zampatti C,et al.Relationship between P53 expression and other prognostic factor in human breast carcinoma:An immunohistochemical study.Am J Clin Pathol,1993,100:213
3 Penney N,Boaert M,Serfling U,et al.PCNA expression in cutaneous keratinous neoplasms and verruca vulgars.Am J Pathol,1992,141:139
4 王丽京,朱任之,杨连甲.涎腺肌上皮瘤的临床病理分型和免疫组化研究.实用口腔医学杂志，1997，13：24
5 Drobnjak M.Prognostic implications of P53 nuclear overexpression and high proliferation index of ki-67 in adult soft tissue sarcomas.J Natl Cancer Inst,1994,86:549
, 百拇医药
6 Righi PD,Li YQ,Deutsch M,et al.The role of the p53 gene in the malignant transformation of pleomorphic adenomas of the parotid gland.Anticancer Res,1994,14:2253
7 Kamio N.Coexpression of P53 and C-erbB-2 proteins is associated with histological type tumor stage and cell proliferation in malignant salivary gland tumours.Virchows Arch〔A〕，1996，428：75
8 Trendell S,Oates J,Crocker J.The evaluation of salivary gland tumours using proliferating cell nuclear antigen.J Laryngol Otol,1997,11:551
9 Skalova A,Leivo I.Cell proliferation in salivary gland tumors.Gen Diagn Pathol,1996,142:7
10 Yang LJ,Liu BL,Qin CL.Comparison of proliferating cell muclear antigen index in benign and malignant salivary pleomorphic adenoma.Eur J Cancer B Oral Oncol,1994,30B:56
(收稿：1998-11-22 修回：1999-05-26), 百拇医药
单位：兰州医学院口腔系 (王丽京 730000)；西安 第四军医大学口腔医学院 (高玉好 杨连甲)
关键词：癌基因；增殖细胞核抗原；肌上皮瘤
实用口腔医学杂志990515 〔摘要〕 目的：检测P53蛋白和PCNA在涎腺良恶性肌上皮瘤中的表达。方法：采用免疫组化方法检测12例肌上皮瘤、8例肌上皮瘤细胞生长活跃型、20例恶性肌上皮瘤中P53蛋白和PCNA的表达，用图像分析系统检测PCNA的相对含量。结果：P53蛋白在6例恶性肌上皮瘤中呈阳性表达，在良性肌上皮瘤中均呈阴性表达；PCNA阳性表达的增殖指数和相对含量在恶性肌上皮瘤中表达高于在良性肌上皮中的表达(P<0.01)；PCNA高表达与P53蛋白高表达有一定相关性。结论：p53基因突变对恶性肌上皮瘤的发生有一定作用；PCNA阳性表达和相对含量的检测是诊断恶性肌上皮瘤的重要生物学指标。
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Expression of P53 and PCNA in myoepithelioma and malignant
myoepithelioma of salivary gland
Wang Lijing,Gao Yuhao,Yang Lianjia.Department of Stomatology,Lanzhou Medical College,Lanzhou 73000
〔Abatract〕Objectlve: To study the expression of P53 and PCNA in myoepithelioma and malignant myoepithelioma of salivary gland.Methods:12 cases of myoepithelioma,8 of myoepithelioma with active proliferation and 20 of malignant myoepithelioma were examined by immunohistochemical methods.Results:P53 protein expression was positive in six of malignant myoepithelioma and negative in all cases of myoepithelioma.The proliferating index (PI) of PCNA positive cells in malignant myoepithelioma showed a higher index of nuclear staining of P53 protein (mean 22.08%) than that in myoepithelioma(mean 4.17%) or myoepithelioma with active proliferation(mean 6.00%).The absorbance of PCNA relative content in malignant myoepithelioma (0.17±0.158) was higher than that in benign myoepithelioma (0.03±0.36 for myoepithelioma and 0.08±0.087 for that with active proliferation) (P<0.01).Conciuslon:PCNA and the mutation of p53 gene may play an important role in the carcinogenesis of malignant myoepithelioma.
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Key words Oncogene; P53;Proliferating cell nuclear antigen; Myoepithelioma.
涎腺肌上皮肿瘤是近几年才得到关注的新型肿瘤〔1〕，对它的生物学行为仍了解甚少。目前发现抑癌基因p53的突变是人类肿瘤中最常见的基因改变，p53基因突变后失去对细胞生长的调控作用，引起细胞的恶性增殖。P53基因蛋白已作为检测乳腺癌和消化道肿瘤恶性程度及预后的重要指标〔2〕。近年来增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen 简称PCNA)作为判断细胞增殖活性的一个重要指标被广泛应用于癌前病变、良性和恶性肿瘤的研究中〔3〕。有关P53蛋白和PCNA在涎腺肿瘤中的研究报道尚不多见。我们采用P53蛋白单抗(Pab1801，突变型)和PCNA单抗(PC10)研究了40例涎腺良恶性肌上皮瘤，探讨它们在肿瘤发生、发展过程中的作用。
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1 材料与方法
1.1 标本
40例标本均选自第四军医大学口腔医院病理科1974～1995年间临床检验存档的蜡块。所有标本依据作者提出的纳入标准进行筛选〔4〕，同时经两名高年资病理医生参照1991年WHO关于《涎腺肿瘤组织病理新分类》标准重新确诊，并经免疫组化Ck-18、Actin抗体染色为双阳性表达所证实。依据细胞分化程度分为12例肌上皮瘤、8例肌上皮瘤细胞生长活跃型、20例恶性肌上皮瘤，同时依据细胞形态分为上皮细胞型、梭形细胞型、浆细胞样细胞型和透明细胞型四型。全部标本经中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片4张，1张HE染色，其余分别进行P53和PCNA抗体染色。
1.2 免疫组化方法
鼠抗人P53蛋白单抗(Pab1801，突变型)和PCNA单抗(PC10)分别为丹麦Dako公司和美国Zymed公司产品，ABC试剂盒为Vector公司产品。采用常规ABC法，P53蛋白和PCNA的工作浓度均为1∶50。唯一改良之处是在正常血清封闭前，切片浸于饱和的硫氢酸铅溶液中96～100 ℃加热2次，每次5 min，以恢复抗原性。2例乳腺浸润性导管癌和2例腺样囊性癌分别作为P53蛋白和PCNA的阳性对照，PBS液代替一抗作为阴性对照；2例腮腺组织作为正常对照。
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1.3 免疫组化结果观察
P53蛋白和PCNA的阳性表达均为细胞核内出现棕黄色颗粒。PCNA染色结果采用网格测试的方法，每例选择10个高倍镜视野(×40)，至少计数1000个细胞，计算阳性细胞的百分比，称为增殖指数(proliferating index,PI)。用PI值来判断肿瘤细胞增殖活性，PI>20%认为是高增殖指数〔5〕。P53蛋白染色，镜下计数阳性细胞>5%为阳性。
1.4 PCNA吸光度的测定
利用北京航天大学CIMAS8型多媒体彩色病理图像分析系统，检测已做免疫组化染色的各组标本中PCNA阳性细胞的吸光度。每组检测3～6张切片，先由光学显微镜成像，随机选择测量视野，确定细胞核内有棕黄色颗粒的细胞为阳性目标，由摄像机摄像后成像于计算机彩色显示屏上，输入计算机处理，计算被测阳性目标的吸光度并以数字形式打印。
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1.5 统计学处理
采用行×列表χ2检验和Newman-Keuls方差分析。
2 结 果
2.1 P53蛋白表达
20例恶性肌上皮瘤中P53蛋白阳性表达者6例，阳性率30%，阳性细胞散在分布于肿瘤中，以上皮细胞和透明细胞多见(图1)。12例肌上皮瘤和8例肌上皮瘤细胞生长活跃型中P53蛋白均为阴性表达。2例乳腺癌均为阳性表达，腮腺组织均为阴性表达。
图1 恶性肌上皮瘤，透明细胞型，P53染色阳性细胞分布于肿瘤组织中，ABC法×400
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各组标本中PCNA阳性细胞的计数情况见表1。12例肌上皮瘤中PCNA表达水平较低，阳性细胞散在分布；8例肌上皮瘤细胞生长活跃型阳性细胞数有所增加(图2)，但两者间PI值无显著性差异(P>0.05)。20例恶性肌上皮瘤中阳性细胞明显增多，与良性肌上皮瘤相比PI值有极显著性差异(P<0.01)，阳性细胞弥漫分布，在肿瘤周边部多见，多为上皮细胞和透明细胞(图3)。2例腺样囊性癌PI值均>20%，腮腺组织PI值<3%。
图2 肌上皮瘤细胞生长活跃型，PCNA染色阳性细胞较稀疏地分布于肿瘤组织中，ABC法×400
图3 恶性肌上皮瘤，PCNA染色阳性细胞弥漫分布于肿瘤组织中，ABC法×400
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表1 各组标本中PCNA的PI值比较 分 组
例数
PI(
±s)P
肌上皮瘤
12
4.17±3.22
>0.05①
肌上皮瘤细胞
生长活跃型
8
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6.00±3.79
<0.01②
恶性肌上皮瘤
20
22.08±6.93
<0.01③
①肌上皮瘤与肌上皮瘤细胞生长活跃型相比②肌上皮瘤细胞生长活跃型与恶性肌上皮瘤相比③肌上皮瘤与恶性肌上皮瘤相比，下表同。
2.3 PCNA表达的定量分析
吸光度是反映计算机某一点颜色深浅程度的一种参数，与物体颜色深浅呈正比。PCNA阳性细胞的吸光度越大表明其相对含量也较大。所以，测定PCNA阳性细胞吸光度，能较为客观地观察不同肌上皮瘤中PCNA相对含量(表2)。图像分析表明在肌上皮瘤和肌上皮瘤细胞生长活跃型中PCNA吸光度较低，两者间无显著性差异(P>0.05)；恶性肌上皮瘤中PCNA吸光度增高，与前两者相比均有显著性差异(P<0.05)。表2 各组标本中PCNA的相对含量(方差分析) 分 组
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所测细胞数
吸光度(
±s)q
P
肌上皮瘤
52
0.03±0.036
2.37①
>0.05
肌上皮瘤细胞
生长活跃型
, 百拇医药
138
0.08±0.087
6.52②
<0.05
恶性肌上皮瘤
216
0.17±0.158
7.12③
<0.05
2.4 P53蛋白表达与PCNA表达的关系
在恶性肌上皮瘤中，以PI值=20%为界线分组，>20%有7例，其中有4例P53蛋白表达阳性，<20%有13例，其中有2例P53蛋白表达阳性，可见PCNA高表达与P53蛋白高表达有一定相关性，两者在恶性肌上皮瘤中的表达高于在良性肌上皮瘤中的表达(P<0.05)。
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3 讨 论
P53蛋白是p53抑癌基因产物，野生型P53蛋白半衰期短在正常细胞中含量低，免疫组化方法难以检测到。而突变性P53蛋白半衰期明显延长，含量比正常增多，表达增强。因此，通过免疫组化方法检测到的P53蛋白均为突变型P53蛋白。P53在涎腺肿瘤的研究已有报道。Righi〔6〕等报道P53蛋白在多形性腺瘤恶变过程中起着重要作用，Kamio〔7〕报道P53蛋白在涎腺恶性肿瘤中的阳性表达多集中在有丝分裂较多的区域，提示P53蛋白的聚积与癌细胞的恶性增殖有密切关系。本实验显示，P53蛋白在良性肌上皮瘤中均呈阴性表达，在恶性肌上皮瘤中呈30%的阳性表达，提示p53基因突变在恶性肌上皮瘤的发生、发展过程中起了一定的作用，可作为诊断恶性肌上皮瘤的一个参考指标。
PCNA是相对分子质量为36 000的核蛋白，为DNA合成期必不可少的一种细胞生长因子。它在细胞或肿瘤中的表达能较客观地反映细胞的增殖活性。PCNA在恶性肿瘤中的表达与其恶性程度呈正相关，但在正常细胞或良性肿瘤过度增殖时，也可有PCNA阳性细胞出现〔3〕。有作者报道PCNA在涎腺组织仅少数腺泡细胞呈阳性表达，在涎腺肿瘤中阳性表达显著升高，并对肿瘤的分化程度和预后估计有重要意义〔8，9〕。Yang〔10〕等报道PCNA在恶性多形性腺瘤中的表达明显高于良性病例，可作为鉴别良恶性的标记物。本实验显示，在恶性肌上皮瘤中PCNA阳性表达水平显著高于肌上皮瘤和肌上皮瘤细胞生长活跃型，其PI值与后两者相比有显著性差异，提示恶性肌上皮瘤有较强的增殖活性，PI值可以作为诊断恶性肌上皮瘤的重要生物学指标。吸光度的测定表明PCNA的相对含量与肿瘤的恶性程度呈正相关，随着肿瘤由良性向恶性转化，PCNA的相对含量明显增加，提示肌上皮肿瘤中PCNA吸光度的测定在判断肿瘤性质方面有重要的临床价值，而且也为本实验标本的筛选和病理诊断的正确性提供了反证依据。组织学观察发现PCNA阳性细胞多为上皮细胞及透明细胞，多见于肿瘤边缘组织中，可能是这些肿瘤细胞和部位有较高的增殖活性。
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有作者报道P53蛋白阳性表达的肿瘤组织比阴性组织具有较高的增殖活性，认为P53能够间接地反映细胞的增殖活性〔5〕。许多研究也表明PCNA的检测结合病理形态和几种癌基因如C-erbB-2、P53检测能较为客观地判断肿瘤的性质〔5,10〕。本实验结果显示PCNA高表达伴随有P53蛋白的高表达，说明在肌上皮肿瘤的演进过程中两者起了协同作用，特别是它们在肌上皮肿瘤由良性向恶性转化过程中起了非常重要的作用，所以PCNA和P53蛋白的联合检测对诊断恶性肌上皮瘤更有意义。
本研究为甘肃省教委自然科学基金资助 06249
参考文献
1Seifert G.Histological typing of salivary gland tumors.International histological classification of tumors.Berlin:Springer-Verlag,1991.12
, 百拇医药
2 Martinazzi M,Crivell F,Zampatti C,et al.Relationship between P53 expression and other prognostic factor in human breast carcinoma:An immunohistochemical study.Am J Clin Pathol,1993,100:213
3 Penney N,Boaert M,Serfling U,et al.PCNA expression in cutaneous keratinous neoplasms and verruca vulgars.Am J Pathol,1992,141:139
4 王丽京,朱任之,杨连甲.涎腺肌上皮瘤的临床病理分型和免疫组化研究.实用口腔医学杂志，1997，13：24
5 Drobnjak M.Prognostic implications of P53 nuclear overexpression and high proliferation index of ki-67 in adult soft tissue sarcomas.J Natl Cancer Inst,1994,86:549
, 百拇医药
6 Righi PD,Li YQ,Deutsch M,et al.The role of the p53 gene in the malignant transformation of pleomorphic adenomas of the parotid gland.Anticancer Res,1994,14:2253
7 Kamio N.Coexpression of P53 and C-erbB-2 proteins is associated with histological type tumor stage and cell proliferation in malignant salivary gland tumours.Virchows Arch〔A〕，1996，428：75
8 Trendell S,Oates J,Crocker J.The evaluation of salivary gland tumours using proliferating cell nuclear antigen.J Laryngol Otol,1997,11:551
9 Skalova A,Leivo I.Cell proliferation in salivary gland tumors.Gen Diagn Pathol,1996,142:7
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(收稿：1998-11-22 修回：1999-05-26), 百拇医药