超声溶栓对血小板激活的影响
作者：王明生 胡大一 贾三庆 王乐丰 杨明 李田昌
单位：首都医科大学心血管病研究所 北京红十字朝阳医院心脏中心，100020
关键词：超声溶栓；颗粒膜蛋白CD62P；血小板激活；冠心病
中国急救医学001006 [摘 要] 目的 探讨超声溶栓对血小板激活的影响。方法 30例急性心肌梗死患者分为超声溶栓+急诊PTCA组(A组：15例)和急诊PTCA组(B组：15例)。另外年龄在40岁以上且行择期PTCA的劳力性心绞痛患者为对照组(control组：10例)。根据术前冠脉病变分为单支病变组(C1＝20)、双支病变组(C2＝13)和多支病变组(C3＝7)。抽取手术前后静脉血，用流式细胞仪测定颗粒膜蛋白CD62P的表达。结果 A组、B组和对照组间CD62P分别为77.2%±8.5%、72.2%±6.9%和54.6%±6.3%，A组和B组分别与对照组相比均有显著性差异(P<0.05)，A组和B组相比无显著性差异。冠脉异常(C)组中各亚组C1、C2、C3间CD62P分别为48.8%±6.8%、52.6%±4.6%和71.4%±5.2%，C1和C2组分别与C3组比较均有显著性差异(P<0.05)，C1和C2组间比较无显著性差异。结论 血小板激活在冠心病血栓形成和发病中起了重要作用。超声溶栓对血小板激活无影响。
, http://www.100md.com
[中图分类号] R 541.4；R 454.3 [文献标识码] A [文章编号] 1002-1949(2000)10-0582-02
Effect of ultrasound thrombolysis on platelet activation
WANG Ming-sheng
(Heart Center，Beijing Redcross Chaoyang Hospital，Beijing 100020, China)
HU Da-yi
(Heart Center，Beijing Redcross Chaoyang Hospital，Beijing 100020, China)
, 百拇医药 JIA San-qing，et al
(Heart Center，Beijing Redcross Chaoyang Hospital，Beijing 100020, China)
[Abstract] Objective We investigated whether ultrasound thrombolysis had the effect on platelet activation in patients with acute myocardium infarction and effort angina.Methods Platelet samples were obtained from 30 patients of whom 15 had ultrasound thrombolysis and primary PTCA(groupA)and 15 had only primary PTCA(group B)and 10 patients with effort angina had PTCA(group control).The patients were grouped single-vessel disease and double-vessel disease and three-vessel disease based on angiogram.Results In both A and B groups，CD62P expression was significantly higher than in the control group.But the difference between the group A and B was not significant.Patients with three-vessel disease had significantly increased CD62P expression compared with the other subgroups.Conclusions Platelet activation played a major role in coronary artery disease pathogenesis and thrombosis.Ultrasound thrombolysis had no effect on platelet activation.
, 百拇医药
[Key words] Ultrasound thrombolysis； Coronary artery disease； CD62P； Platelet activation
超声导管溶栓(ultrasound thrombolysis)是一种新的血管开通方式，通过低频高能超声的空化作用、生物机械振动作用以溶解体内外血栓[1，2]。研究显示血小板激活在冠心病血栓形成和发病中起了重要作用[3]。本研究通过测定急性心肌梗死和劳力性心绞痛患者在行超声溶栓和急诊PTCA后血液中颗粒膜蛋白CD62P的表达以探讨超声溶栓对血小板激活的影响。
1 材料与方法
1.1 病例选择 1998年3月～1999年4月来院的急性心肌梗死患者，发病时间小于12小时，急诊冠状动脉造影显示梗死相关血管血流为TIMI 0 级和1级，近一个月内无冠脉搭桥、PTCA及心肌打孔史。分为超声溶栓+急诊PTCA组(A组)和急诊PTCA组(B组)。另外入选10例年龄在40岁以上且行择期PTCA的劳力性心绞痛患者为对照组(control组)。根据术前冠脉病变分为单支病变组(C1)、双支病变组(C2)和多支病变组(C3)。术前服用阿司匹林300 mg，抵克利得250 mg，静脉肝素10 000 U。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 标本收集 各组均于手术前后即刻从静脉采血1.8 ml沿试管壁放入含有3.8%枸橼酸钠0.2 ml的试管内，轻轻摇匀后放置4℃保存。
1.2.2 检测方法[4] ①将新鲜血标本以800转/分离心3分钟；②取2支试管，一管加入PE标记的小鼠Ig 2a作为对照管，另一管加入PE小鼠抗人CD62P为实验管；③分别向上述2个试管加入第一步所得血浆混匀后置于室温下孵育30分钟；④向上述试管加PBS 2 ml，混匀，1 500转/分离心10分钟，弃上清；⑤重复④加入PBS 1 ml后上机检测。
1.2.3 仪器与试剂 美国BP公司FASSCalibur流式细胞仪；PE标记小鼠抗人CD62P、Ig 2a及PE标记小鼠抗人Ig 2a试剂为美国pharmigen公司产品。
1.2.4 冠状动脉内超声溶栓的操作步骤参见文献[5]。每30秒为一次，超声溶栓结束后重复造影，如果TIMI血流为0～1级或残余狭窄大于30%或存在威胁性血管闭塞，应继续行PTCA，即为超声溶栓+急诊PTCA组(A组)。
, 百拇医药
1.2.5 超声溶栓仪器 美国Rayfield Technology公司生产的ACOLYSIS SYSTEM，超声频率为40KHz，脉冲式超声能量为18W/cm2。
1.2.6 统计学处理 数据按均数±标准差
±s表示；组间比较用方差分析。手术前后比较应用配对t检验，P<0.05具有显著意义。
2 结果
共入选40例患者，其中急性前壁心肌梗死20例，急性下壁心肌梗死10例，10例择期PTCA的劳力性心绞痛患者。男25例，女15例，平均年龄55±10岁。A组15例，B组15例，control组10例；C1组20例，C2组13例，C3组7例。以上各组间患者在年龄、性别及其它一般情况均无显著性差异。对照组与A组和B组间CD62P对比见表1，冠脉异常组(C)中各亚组(C1、C2、C3)间CD62P的对比见表2。
, 百拇医药
表1 对照组与A组和B组间CD62P对比 组 别
例 数
CD62P(%)
A组
15
77.2±8.5
B组
15
72.2±6.9
对照组
10
54.6±6.3
, http://www.100md.com A组和B组分别与对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。
A组和B组相比无显著性差异。表2 冠脉异常组中各亚组间CD62P的对比 组 别
例 数
CD62P(%)
单支(C1)组
20
48.8±6.8
双支(C2)组
13
52.6±4.6
三支(C3)组
, 百拇医药
7
71.4±5.2
C1和C2组分别与C3组比较均有显著性差异(P<0.05)。
C1和C2组间比较无显著性差异。
3 讨论
超声导管溶栓是一种新的血管开通方式。它通过低频高能超声的空化作用、生物机械振动作用以溶解体内外血栓[1，2]。研究显示血小板激活在血栓形成中起了重要作用[3]。而且抗血小板治疗可明显降低冠心病不良事件的发生[6]。
血小板表面的特异性激活抗原α-颗粒膜蛋白CD62P可用于识别循环中的激活血小板[4]。本研究通过测定急性心肌梗死和劳力性心绞痛患者在行超声溶栓和(或)急诊PTCA后血液循环中的颗粒膜蛋白CD62P的表达，发现急性心肌梗死患者比劳力性心绞痛患者颗粒膜蛋白CD62P表达高(P<0.05)，但超声溶栓组和急诊PTCA组间无差异，说明超声溶栓对血小板激活无影响。激活血小板不是超声溶栓的机制。
, http://www.100md.com
本研究还发现三支病变患者的CD62P表达比单支病变和双支病变患者高，这一结果与多支病变患者的病理结果相一致。多支病变患者具有弥漫的多个粥样硬化斑块及血栓形成，从而易于发生血栓，导致不稳定心绞痛和急性心肌梗死。不过血小板激活是冠心病的原因还是结果仍不清楚，我们的研究提示冠心病患者的血小板激活增强，并加速其动脉粥样硬化病变的进程。
血小板激活在冠心病的血栓形成和发病中起了重要作用。超声溶栓对颗粒膜蛋白CD62P的表达和血小板激活无影响。激活血小板不是超声溶栓的机制。 [基金项目] 北京市科委基金资助(No.952602000)。
[参考文献]
[1]Philippe F，Drobinski G，Bucherer C，et al.Effects of ultrasound energy on thrombi in vitro[J].Cathet-Cardiovasc-Diagn，1993，28(2)：173.
, 百拇医药
[2]王明生，胡大一，陈方，等.急性心肌梗死冠脉内超声溶栓[J].中国实用内科杂志，1999，19(3)：150.
[3]Fitzgerald DJ，Roy L，Catella F，et al.Platelet activated in unstable coronary disease[J].N ENGL J Med, 1986, 315:983-989.
[4]Murakami T, Komiyama Y, Masuda M, et al. Flow cytometric analysis of plateplet activation markers CD62P and CD63P in patients with coronary artery disease[J].European J of Clinical Investigation，1996，26：996-1003.
, http://www.100md.com [5]Rosenschein U，Roth A，Rassin T，et al.Analysis of coronary ultrasound thrombolysis endpoints in acute myocardial infarction(acute trial)[J].Circulation，19997，95：1411.
[6]Stein B，Fuster V，Halaperin JL，et al.Antithrombotic therapy in cardiac disease：an emerging approach based on pathogesis and risk[J].Circulation，1989，80：1501-1513.
[收稿：1999-09-20], 百拇医药
单位：首都医科大学心血管病研究所 北京红十字朝阳医院心脏中心，100020
关键词：超声溶栓；颗粒膜蛋白CD62P；血小板激活；冠心病
中国急救医学001006 [摘 要] 目的 探讨超声溶栓对血小板激活的影响。方法 30例急性心肌梗死患者分为超声溶栓+急诊PTCA组(A组：15例)和急诊PTCA组(B组：15例)。另外年龄在40岁以上且行择期PTCA的劳力性心绞痛患者为对照组(control组：10例)。根据术前冠脉病变分为单支病变组(C1＝20)、双支病变组(C2＝13)和多支病变组(C3＝7)。抽取手术前后静脉血，用流式细胞仪测定颗粒膜蛋白CD62P的表达。结果 A组、B组和对照组间CD62P分别为77.2%±8.5%、72.2%±6.9%和54.6%±6.3%，A组和B组分别与对照组相比均有显著性差异(P<0.05)，A组和B组相比无显著性差异。冠脉异常(C)组中各亚组C1、C2、C3间CD62P分别为48.8%±6.8%、52.6%±4.6%和71.4%±5.2%，C1和C2组分别与C3组比较均有显著性差异(P<0.05)，C1和C2组间比较无显著性差异。结论 血小板激活在冠心病血栓形成和发病中起了重要作用。超声溶栓对血小板激活无影响。
, http://www.100md.com
[中图分类号] R 541.4；R 454.3 [文献标识码] A [文章编号] 1002-1949(2000)10-0582-02
Effect of ultrasound thrombolysis on platelet activation
WANG Ming-sheng
(Heart Center，Beijing Redcross Chaoyang Hospital，Beijing 100020, China)
HU Da-yi
(Heart Center，Beijing Redcross Chaoyang Hospital，Beijing 100020, China)
, 百拇医药 JIA San-qing，et al
(Heart Center，Beijing Redcross Chaoyang Hospital，Beijing 100020, China)
[Abstract] Objective We investigated whether ultrasound thrombolysis had the effect on platelet activation in patients with acute myocardium infarction and effort angina.Methods Platelet samples were obtained from 30 patients of whom 15 had ultrasound thrombolysis and primary PTCA(groupA)and 15 had only primary PTCA(group B)and 10 patients with effort angina had PTCA(group control).The patients were grouped single-vessel disease and double-vessel disease and three-vessel disease based on angiogram.Results In both A and B groups，CD62P expression was significantly higher than in the control group.But the difference between the group A and B was not significant.Patients with three-vessel disease had significantly increased CD62P expression compared with the other subgroups.Conclusions Platelet activation played a major role in coronary artery disease pathogenesis and thrombosis.Ultrasound thrombolysis had no effect on platelet activation.
, 百拇医药
[Key words] Ultrasound thrombolysis； Coronary artery disease； CD62P； Platelet activation
超声导管溶栓(ultrasound thrombolysis)是一种新的血管开通方式，通过低频高能超声的空化作用、生物机械振动作用以溶解体内外血栓[1，2]。研究显示血小板激活在冠心病血栓形成和发病中起了重要作用[3]。本研究通过测定急性心肌梗死和劳力性心绞痛患者在行超声溶栓和急诊PTCA后血液中颗粒膜蛋白CD62P的表达以探讨超声溶栓对血小板激活的影响。
1 材料与方法
1.1 病例选择 1998年3月～1999年4月来院的急性心肌梗死患者，发病时间小于12小时，急诊冠状动脉造影显示梗死相关血管血流为TIMI 0 级和1级，近一个月内无冠脉搭桥、PTCA及心肌打孔史。分为超声溶栓+急诊PTCA组(A组)和急诊PTCA组(B组)。另外入选10例年龄在40岁以上且行择期PTCA的劳力性心绞痛患者为对照组(control组)。根据术前冠脉病变分为单支病变组(C1)、双支病变组(C2)和多支病变组(C3)。术前服用阿司匹林300 mg，抵克利得250 mg，静脉肝素10 000 U。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 标本收集 各组均于手术前后即刻从静脉采血1.8 ml沿试管壁放入含有3.8%枸橼酸钠0.2 ml的试管内，轻轻摇匀后放置4℃保存。
1.2.2 检测方法[4] ①将新鲜血标本以800转/分离心3分钟；②取2支试管，一管加入PE标记的小鼠Ig 2a作为对照管，另一管加入PE小鼠抗人CD62P为实验管；③分别向上述2个试管加入第一步所得血浆混匀后置于室温下孵育30分钟；④向上述试管加PBS 2 ml，混匀，1 500转/分离心10分钟，弃上清；⑤重复④加入PBS 1 ml后上机检测。
1.2.3 仪器与试剂 美国BP公司FASSCalibur流式细胞仪；PE标记小鼠抗人CD62P、Ig 2a及PE标记小鼠抗人Ig 2a试剂为美国pharmigen公司产品。
1.2.4 冠状动脉内超声溶栓的操作步骤参见文献[5]。每30秒为一次，超声溶栓结束后重复造影，如果TIMI血流为0～1级或残余狭窄大于30%或存在威胁性血管闭塞，应继续行PTCA，即为超声溶栓+急诊PTCA组(A组)。
, 百拇医药
1.2.5 超声溶栓仪器 美国Rayfield Technology公司生产的ACOLYSIS SYSTEM，超声频率为40KHz，脉冲式超声能量为18W/cm2。
1.2.6 统计学处理 数据按均数±标准差
±s表示；组间比较用方差分析。手术前后比较应用配对t检验，P<0.05具有显著意义。2 结果
共入选40例患者，其中急性前壁心肌梗死20例，急性下壁心肌梗死10例，10例择期PTCA的劳力性心绞痛患者。男25例，女15例，平均年龄55±10岁。A组15例，B组15例，control组10例；C1组20例，C2组13例，C3组7例。以上各组间患者在年龄、性别及其它一般情况均无显著性差异。对照组与A组和B组间CD62P对比见表1，冠脉异常组(C)中各亚组(C1、C2、C3)间CD62P的对比见表2。
, 百拇医药
表1 对照组与A组和B组间CD62P对比 组 别
例 数
CD62P(%)
A组
15
77.2±8.5
B组
15
72.2±6.9
对照组
10
54.6±6.3
, http://www.100md.com A组和B组分别与对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。
A组和B组相比无显著性差异。表2 冠脉异常组中各亚组间CD62P的对比 组 别
例 数
CD62P(%)
单支(C1)组
20
48.8±6.8
双支(C2)组
13
52.6±4.6
三支(C3)组
, 百拇医药
7
71.4±5.2
C1和C2组分别与C3组比较均有显著性差异(P<0.05)。
C1和C2组间比较无显著性差异。
3 讨论
超声导管溶栓是一种新的血管开通方式。它通过低频高能超声的空化作用、生物机械振动作用以溶解体内外血栓[1，2]。研究显示血小板激活在血栓形成中起了重要作用[3]。而且抗血小板治疗可明显降低冠心病不良事件的发生[6]。
血小板表面的特异性激活抗原α-颗粒膜蛋白CD62P可用于识别循环中的激活血小板[4]。本研究通过测定急性心肌梗死和劳力性心绞痛患者在行超声溶栓和(或)急诊PTCA后血液循环中的颗粒膜蛋白CD62P的表达，发现急性心肌梗死患者比劳力性心绞痛患者颗粒膜蛋白CD62P表达高(P<0.05)，但超声溶栓组和急诊PTCA组间无差异，说明超声溶栓对血小板激活无影响。激活血小板不是超声溶栓的机制。
, http://www.100md.com
本研究还发现三支病变患者的CD62P表达比单支病变和双支病变患者高，这一结果与多支病变患者的病理结果相一致。多支病变患者具有弥漫的多个粥样硬化斑块及血栓形成，从而易于发生血栓，导致不稳定心绞痛和急性心肌梗死。不过血小板激活是冠心病的原因还是结果仍不清楚，我们的研究提示冠心病患者的血小板激活增强，并加速其动脉粥样硬化病变的进程。
血小板激活在冠心病的血栓形成和发病中起了重要作用。超声溶栓对颗粒膜蛋白CD62P的表达和血小板激活无影响。激活血小板不是超声溶栓的机制。 [基金项目] 北京市科委基金资助(No.952602000)。
[参考文献]
[1]Philippe F，Drobinski G，Bucherer C，et al.Effects of ultrasound energy on thrombi in vitro[J].Cathet-Cardiovasc-Diagn，1993，28(2)：173.
, 百拇医药
[2]王明生，胡大一，陈方，等.急性心肌梗死冠脉内超声溶栓[J].中国实用内科杂志，1999，19(3)：150.
[3]Fitzgerald DJ，Roy L，Catella F，et al.Platelet activated in unstable coronary disease[J].N ENGL J Med, 1986, 315:983-989.
[4]Murakami T, Komiyama Y, Masuda M, et al. Flow cytometric analysis of plateplet activation markers CD62P and CD63P in patients with coronary artery disease[J].European J of Clinical Investigation，1996，26：996-1003.
, http://www.100md.com [5]Rosenschein U，Roth A，Rassin T，et al.Analysis of coronary ultrasound thrombolysis endpoints in acute myocardial infarction(acute trial)[J].Circulation，19997，95：1411.
[6]Stein B，Fuster V，Halaperin JL，et al.Antithrombotic therapy in cardiac disease：an emerging approach based on pathogesis and risk[J].Circulation，1989，80：1501-1513.
[收稿：1999-09-20], 百拇医药