薄层扫描法测定三七消痔栓中人参皂甙Re的含量
作者：郑峰 叶桂生
单位：郑峰(安徽省淮北市药品检验所 235000)；叶桂生(安徽大学化学化工学院 230001)
关键词：三七消痔栓；人参皂甙Re；薄层扫描法
首都医药000622摘要 采用双波长薄层扫描法测定中成药三七消痔栓中人参皂甙Re的含量，平均回收率为99.28%，RSD为0.64%。本方法简便，灵敏度高，重现性好，可作为该药的质量控制指标之一，也可为含三七类中成药栓剂的定量作参考。
三七消痔栓是由三七、冰片、红花等十一味中药组成的复方制剂。其中三七为首药，故本文选择人参皂甙Re为指标，用双波长薄层扫描法测定其含量，控制其内在质量。
1.仪器与试药
CS-930型双波长薄层扫描仪(日本岛津)。人参皂甙Re(中国药品生物制品检定所)，硅胶G(青岛海洋化工厂)，溶剂和试剂均为分析纯。样品(解放军291医院)。
, 百拇医药
2.实验方法
2.1 层析条件 吸附剂：将硅胶G与0.5%CMC-Na(1:3)混合铺板，105℃活化1小时备用。展开剂：氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水(15：40：22：10)10℃下放置的下层溶液(1)。显色剂：喷10%硫酸乙醇溶液后在105℃加热5分钟。
2.2 扫描条件 双波长反射吸收法，锯齿扫描。狭缝1.2×1.2mm，灵敏度中等，测定波长λS＝530nm，参比波长λR＝600nm，线性化参数SX＝3。
2.3 对照品溶液的制备 取人参皂甙Re标准品约5mg，精密称定置于5ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度。
2.4 供试品溶液的制备 取本品约8g，精密称定至烧瓶中，加乙醚100ml，水浴回流提取2小时，弃去乙醚液。残渣挥干溶剂，加甲醇100ml，水浴回流提取4小时，放冷，过滤，残渣再加甲醇50ml，回流提取1小时，放冷、过滤，残渣再用甲醇洗两次，每次10ml，过滤、合并滤液。滤液蒸干，残渣加水20ml微热溶解后加入氨水1ml摇匀，用水饱和正丁醇提取5次(20、20、10、10、10ml)，合并正丁醇提取液，用20ml氨水分两次洗涤正丁醇提取液，每次10ml，弃去氨水液，将正丁醇提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，冰水浴中冷却后过滤，滤液转入10ml量瓶中，用甲醇洗涤后，并入10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度。
, 百拇医药
2.5线性关系考查 用定量毛细管吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ul对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，按上述层析条件展开，显色后扫描，用最小两乘法求得回归方程为：Y＝3793.77X-858.97 γ＝0.9983 (Y为吸收度积分值，X为标准品的量：ug)结果表明：人参皂甙Re在1.02-5.10ug范围内线性良好。
2.6 稳定性试验 取供试品溶液10μl，点于硅胶G薄层板上，按上述层析条件展开，显色，每隔20分钟扫描，其结果在3小时内面积积分值不变。
2.7 精密度考察 用定量毛细管吸取供试品溶液10μl，点于同一硅胶G薄层板上6个点，按上述条件展开，显色后扫描，RSD＝2.13%。
2.8加样回收试验 准确称取已知含量的样品5份，每份约8g，精密加入标准品约2mg，除对照品溶液点3μl和5μl，其它操作按样品测定的方法制备并测定，结果见表1。
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表1 加样回收试验结果 测定
次数
样品量
(g)
供试品含
量(μg)
对照品加
入量(μg)
供试品及对照品
测得总量(μg)
回收率
(%)
1
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7.7418
1.192
2.14
3.327
99.77
2
7.8503
1.209
2.02
3.208
98.96
3
7.7989
, 百拇医药
1.201
2.07
3.241
98.55
4
8.3684
1.289
2.15
3.442
100.1
5
7.7286
1.190
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2.12
3.289
99.01
平均值(%)：99.28，RSD(%)：0.64
2.9样品中人参皂甙Re的含量测定 精密吸取供试品溶液10μl，对照品溶液1μl和3μl分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，显色后扫描，结果见表2。
表2 样品中人参皂甙Re的含量 (n＝5) 批 号
样品量(g)
测得量(μg)
含量(mg/g)
RSD(%)
, http://www.100md.com
991225
7.8812
1.216
0.154
1.12
991227
8.1165
1.351
0.166
1.47
991229
8.2857
1.238
, http://www.100md.com
0.149
1.56
3.讨论
三七中所含有的人参皂甙Re与三七皂甙R1极性相近，本文所采用的展开剂恰能使二者分开，为含三七类中成药中人参皂Re的测定提供了方法。
本法为薄层扫描法测定，很大程度上排除了其它成分和杂质的干扰，使测得结果准确，可作为三七消痔栓质量控制指标之一。
参考文献
1，药典委员会编.中国药典(一部)，广东科技出版社，1995，9
2，肖崇厚主编.中药化学，上海科技出版社，1992，293
3，魏献春.广东药学院学报，1999，15(1)：13
(2000-04-27 收稿), 百拇医药
单位：郑峰(安徽省淮北市药品检验所 235000)；叶桂生(安徽大学化学化工学院 230001)
关键词：三七消痔栓；人参皂甙Re；薄层扫描法
首都医药000622摘要 采用双波长薄层扫描法测定中成药三七消痔栓中人参皂甙Re的含量，平均回收率为99.28%，RSD为0.64%。本方法简便，灵敏度高，重现性好，可作为该药的质量控制指标之一，也可为含三七类中成药栓剂的定量作参考。
三七消痔栓是由三七、冰片、红花等十一味中药组成的复方制剂。其中三七为首药，故本文选择人参皂甙Re为指标，用双波长薄层扫描法测定其含量，控制其内在质量。
1.仪器与试药
CS-930型双波长薄层扫描仪(日本岛津)。人参皂甙Re(中国药品生物制品检定所)，硅胶G(青岛海洋化工厂)，溶剂和试剂均为分析纯。样品(解放军291医院)。
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2.实验方法
2.1 层析条件 吸附剂：将硅胶G与0.5%CMC-Na(1:3)混合铺板，105℃活化1小时备用。展开剂：氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水(15：40：22：10)10℃下放置的下层溶液(1)。显色剂：喷10%硫酸乙醇溶液后在105℃加热5分钟。
2.2 扫描条件 双波长反射吸收法，锯齿扫描。狭缝1.2×1.2mm，灵敏度中等，测定波长λS＝530nm，参比波长λR＝600nm，线性化参数SX＝3。
2.3 对照品溶液的制备 取人参皂甙Re标准品约5mg，精密称定置于5ml量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度。
2.4 供试品溶液的制备 取本品约8g，精密称定至烧瓶中，加乙醚100ml，水浴回流提取2小时，弃去乙醚液。残渣挥干溶剂，加甲醇100ml，水浴回流提取4小时，放冷，过滤，残渣再加甲醇50ml，回流提取1小时，放冷、过滤，残渣再用甲醇洗两次，每次10ml，过滤、合并滤液。滤液蒸干，残渣加水20ml微热溶解后加入氨水1ml摇匀，用水饱和正丁醇提取5次(20、20、10、10、10ml)，合并正丁醇提取液，用20ml氨水分两次洗涤正丁醇提取液，每次10ml，弃去氨水液，将正丁醇提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，冰水浴中冷却后过滤，滤液转入10ml量瓶中，用甲醇洗涤后，并入10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度。
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2.5线性关系考查 用定量毛细管吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ul对照品溶液，点于同一硅胶G薄层板上，按上述层析条件展开，显色后扫描，用最小两乘法求得回归方程为：Y＝3793.77X-858.97 γ＝0.9983 (Y为吸收度积分值，X为标准品的量：ug)结果表明：人参皂甙Re在1.02-5.10ug范围内线性良好。
2.6 稳定性试验 取供试品溶液10μl，点于硅胶G薄层板上，按上述层析条件展开，显色，每隔20分钟扫描，其结果在3小时内面积积分值不变。
2.7 精密度考察 用定量毛细管吸取供试品溶液10μl，点于同一硅胶G薄层板上6个点，按上述条件展开，显色后扫描，RSD＝2.13%。
2.8加样回收试验 准确称取已知含量的样品5份，每份约8g，精密加入标准品约2mg，除对照品溶液点3μl和5μl，其它操作按样品测定的方法制备并测定，结果见表1。
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表1 加样回收试验结果 测定
次数
样品量
(g)
供试品含
量(μg)
对照品加
入量(μg)
供试品及对照品
测得总量(μg)
回收率
(%)
1
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7.7418
1.192
2.14
3.327
99.77
2
7.8503
1.209
2.02
3.208
98.96
3
7.7989
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1.201
2.07
3.241
98.55
4
8.3684
1.289
2.15
3.442
100.1
5
7.7286
1.190
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2.12
3.289
99.01
平均值(%)：99.28，RSD(%)：0.64
2.9样品中人参皂甙Re的含量测定 精密吸取供试品溶液10μl，对照品溶液1μl和3μl分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，显色后扫描，结果见表2。
表2 样品中人参皂甙Re的含量 (n＝5) 批 号
样品量(g)
测得量(μg)
含量(mg/g)
RSD(%)
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991225
7.8812
1.216
0.154
1.12
991227
8.1165
1.351
0.166
1.47
991229
8.2857
1.238
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0.149
1.56
3.讨论
三七中所含有的人参皂甙Re与三七皂甙R1极性相近，本文所采用的展开剂恰能使二者分开，为含三七类中成药中人参皂Re的测定提供了方法。
本法为薄层扫描法测定，很大程度上排除了其它成分和杂质的干扰，使测得结果准确，可作为三七消痔栓质量控制指标之一。
参考文献
1，药典委员会编.中国药典(一部)，广东科技出版社，1995，9
2，肖崇厚主编.中药化学，上海科技出版社，1992，293
3，魏献春.广东药学院学报，1999，15(1)：13
(2000-04-27 收稿), 百拇医药