不同来源精子单精子卵胞浆内注射治疗不育症
作者：郑菊芬 黄学锋 李澄棣 叶碧绿 林金菊 周颖 赵军招
单位：(温州医学院附属第一医院 生殖医学中心，浙江 温州 325000)
关键词：单精子卵胞浆内注射术；男性不育；梗阻性无精子症
温州医学院学报000303 [摘要]目的:采用不同来源精子行单精子卵胞浆内注射术(ICSI)治疗不育症并进行疗效对比观察。 方法:女性行常规超促排卵和经阴道超声引导下取卵。比较采用精液、附睾和睾丸精子行ICSI后的卵子损伤率、受精率、卵裂率、胚胎质量和临床妊娠率。 结果:53对不育夫妇共行62个ICSI周期，27例临床妊娠，周期临床妊娠率为43.5%。分别有36、12和14个周期采用精液、附睾和睾丸精子，三组的卵子损伤率、受精率、卵裂率、胚胎质量和临床妊娠率没有显著的差别。结论:采用精液、附睾和睾丸精子行ICSI可获得相似的治疗结果。
, 百拇医药 [中图分类号]R711.6 [文献标识码]A
[文章编号]1000-2138(2000)03-0185-03
Results of intracytoplasmic sperm injection with spermatozoa from ejaculates, epididymal aspirates and testicular biopsies
ZHENG Ju-fen HUANG Xue-feng LI Cheng-di et al
(Reproductive Medicine Unit,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College,Wenzhou 325000)
Abstract：Objective：To compare the results of intracytoplasmic injection (ICSI) with spermatozoa from different sources.Methods：The female partners were routinely superovulated and underwent oocyte retrieval under vaginal ultrasound. The mature oocytes were microinjected with spermatozoa from ejaculates, epididymal aspirates and testicular biopsies. The oocyte intactness, fertilization, embryo cleavage, embryo quality and clinical pregnancy rates were evaluated and compared.Results：The clinical pregnancy rate per cycle was 43.5%. Among 62 cycles,36,12 and 14 cycles were ICSI with ejaculated, epididymal and testicular spermatozoa,respectively. The oocyte intactness,fertilization,embryo cleavage,embryo quality and clinical pregnancy rates were of no statistical difference.Conclusion：The ejaculated,epididymal and testicular spermatozoa used in ICSI achieved comparable clinical results.
, 百拇医药
Key words：intracytoplasmic sperm injection； infertility; obstructive azoospermia
自1992年Palermo等采用单精子卵胞浆内注射术(ICSI)治疗严重精液异常所致不育症获得成功妊娠以来，ICSI已广泛用于治疗各种精液异常和无精子症引起的不育。本中心于1999年2月至2000年1月采用不同来源精子进行连续62个ICSI周期的治疗，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象 53对不育夫妇共行62个ICSI周期。ICSI指征包括精液异常(36个周期)、梗阻性无精子症(25个周期)和非梗阻性无精子症(1个周期)。精液密度<5×106/ml和(或)活动率<10%为严重精液异常。对于梗阻性无精子症，首先行经皮附睾精子抽吸术(PESA)，如附睾液中未发现精子，则立即行睾丸精子获取术(TESE)。而非梗阻性无精子症则只能采用TESE获取精子。本组资料有36个周期采用精液精子(17个周期为轻、中度精液异常精子，19个周期为严重异常精液精子)，12个周期的精子来自附睾，14个周期的精子来自睾丸。三组的不育夫妇女方的平均年龄分别为30.8岁、28.3岁和29.3岁(P>0.05)，平均不育年限分别为6.8年、6.1年和6.2年(P>0.05)。
, http://www.100md.com
1.2 女性超促排卵和取卵 采用本中心的常规超促排卵方案[1]，经阴道B超行卵泡抽吸术获得卵丘复合物。在ICSI操作之前，将卵丘复合物置于含透明质酸酶(Sigma，H2251)80～160iu/ml的HTF-Hepes(9529, Irvine Scientific)中剥离颗粒细胞。
1.3 精子的处理 取卵当天，男方禁欲3天后手淫获得精液，根据精子密度和活动力选用Percoll或直接离心方法收集活动精子。附睾精子采用经皮附睾精子抽吸术(PESA)获取。局部麻醉后，将连接注射器的7号输液针头刺入附睾头部，轻轻按摩附睾头部，抽吸获取附睾液，置于培养液中镜检。如未发现精子，则行睾丸精子获取术(TESE)。切开睾丸白膜，取米粒大小睾丸组织，将其在培养液中于培养皿底部的井字划痕上搓动，磨碎曲细精管。将附睾液和睾丸悬液离心洗涤三次(500g×10分钟)，获得附睾和睾丸精子悬液待用。
1.4 ICSI操作 ICSI的操作在配有微分干涉光学系统(DIC)的Zeiss倒置显微镜的温台(37℃)上进行。采用Narishige显微操作系统(MN-188和MO-188)。
, 百拇医药
ICSI操作前，将5μl的10%PVP(Irvine Scientific，99219)置于Petri皿(Falcon 1006)中央，在PVP微滴周围放置8个5μl的HTF-Hepes微滴，尽快用石腊油(M8410，Sigma)遮盖微滴以免渗透压改变。
将处理后的精子悬液放入1～2个HTF-Hepes微滴，而将卵子放入其他的HTF-Hepes微滴，每次卵子总数少于5个。在精子微滴中选择形态正常的活动精子转移到PVP微滴中，用ICSI注射针在培养皿底部猛烈划破精子的尾部，可多次重复，明确已制动后，将精子吸入注射针，尾部先吸入，使精子置于注射针尖端。将含精子的显微注射针和持针移入含卵子的微滴中，成熟卵母细胞由持针吸引固定，使第一极体位于6点的位置。将ICSI注射针穿过透明带刺入成熟卵母细胞胞浆内，回抽部分胞浆后将回抽的胞浆和精子注入卵子，缓慢退出注射针。重复以上过程，对每个成熟卵母细胞子行ICSI。
1.5 培养 穿刺卵子置于含10%母体灭活血清的Earle's(E2888,Sigma)或HTF培养液(9528,Irvine Scientific)中，在37℃含5%CO2的湿化空气中培养。
, 百拇医药
1.6 受精、卵裂、胚胎评价、胚胎转移和妊娠观察 穿刺后16～18小时后观察注射卵子有否正常受精，即是否有2个原核和2个极体。穿刺后40～48小时观察有否卵裂，并按照胚胎碎片的多少评价胚胎的质量：①A级胚胎为无碎片或碎片<5%，②B级胚胎碎片5%～20%，③C级胚胎碎片为20%～50%，④D级胚胎碎片>50%。将不超过4个的形态学评分最佳的胚胎经阴道植入子宫。2周后，检测尿和血hCG确定有否妊娠，5周后B超观察妊娠囊和搏动胎心数目以确定有无临床妊娠和有无多胎妊娠。
1.7 统计方法 年龄、不育年限和胚胎移植数采用单因素ANOVA检验，临床妊娠率采用χ2检验，其它统计量采用Kruskal-Wallis检验进行组间显著检验。
2 结果
62个ICSI周期获得27例临床妊娠，周期临床妊娠率为43.5%。1例采用精液精子行ICSI获得临床妊娠的病例因宫颈妊娠予以人工流产，1例采用附睾精子的临床妊娠在孕8月时死胎，3例出生5个正常婴儿。总出生和继续妊娠率为40.3%。
, http://www.100md.com
采用不同来源精子行ICSI治疗结果见表1。各组的获卵数、卵子完整率、受精率、卵裂率、各级胚胎比例、胚胎移植数和周期临床妊娠率差异都没有显著性(P>0.05)。
表1 不同来源精子单精子卵胞浆内注射术的治疗结果 (
±s)
精液精子
附睾精子
睾丸精子
轻、中度精液异常
严重精液异常
小计
每周期成熟卵子数
, http://www.100md.com
8.7±4.9
10.9±5.6
9.8±5.3
12.5±6.9
9.3±3.8
卵子完整率(%)
90±15
88±17
89±16
92±8
91±10
受精率(%)
, http://www.100md.com
82±18
71±23
76±21
76±23
78±15
卵裂率(%)
96±13
93±9
94±11
97±7
88±24
胚胎质量 A级(%)
11±13
, http://www.100md.com
18±18
15±16
17±24
26±27
B级(%)
33±22
38±34
36±29
35±33
35±16
C级(%)
26±23
20±22
, 百拇医药
23±23
19±12
16±18
D级(%)
29±36
23±32
26±34
30±36
21±19
每周期胚胎移植数
3.4±0.8
3.3±0.6
3.3±0.7
, http://www.100md.com
3.1±0.5
3.1±0.4
临床妊娠率(%)
47.1(8/17)
42.1(8/19)
44.4(16/36)
50(6/12)
35.7(5/14)
3 讨论 自1992年以来，ICSI已广泛应用于治疗各种精液指标异常的不育症，获得了与常规IVF治疗女性原因不孕症相似的受精率和临床妊娠率[2]。本组采用精液精子的36个ICSI周期，最严重的异常精液包括低倍镜下多个视野偶见精子(4个周期)，但所有精液标本经处理都获得活动的精子行ICSI。严重精液异常采用ICSI获得了令人满意的受精率，尽管轻、中度精液异常获得的受精率(82.9% vs 71.0%)更高些，但差异无统计学意义(P>0.05)。轻、中度和重度精液异常的精子行ICSI获得的胚胎质量相似，临床妊娠率分别为47.1%和42.1%(P>0.05)。这些结果与文献报道[2，3]的一致。这表明只要在精液中找到活动的精子就可以行ICSI治疗，并可获得相似的治疗结果。
, 百拇医药
ICSI的治疗结果不受精液指标的影响，使得有可能采用外科获取的附睾或睾丸精子结合ICSI治疗无精子症。我们采用PESA获得的附睾精子数量较多活动力较好，类似于严重异常精液的精子。但睾丸精子则活动力较差，有时为找到1个明确活动的睾丸精子需观察5分钟以上，因而采用睾丸精子行ICSI每卵穿刺所需的时间更长，操作更困难。但是，本研究结果显示，精液、附睾和睾丸精子获得的卵子损伤率和受精率几乎相同，表明操作的难易程度并不导致睾丸精子行ICSI的卵子损伤率增高和受精率下降。初期的文献报道采用梗阻性无精子症睾丸精子的受精率比采用精液和附睾的低[3]，近期文献已报道采用梗阻性无精子症睾丸精子可以获得与采用精液精子相似的受精率，但采用非梗阻性无精子症睾丸精子的受精率则较低[5]。本组中，睾丸精子和精液精子获得相似的受精率(76.0% vs 78.0%)。我们认为，原因之一是采用了改进的ICSI操作技术，对精子尾部进行剧烈而且有时是多次的制动，Palermo[4]已报道精子尾部的剧烈制动可以显著地提高受精率，采用不成熟睾丸精子的提高幅度最大(从
, 百拇医药
40.9%提高到66.7%)，提示不成熟的睾丸精子更需要膜的损伤以利卵子激活因子的通过。本组13/14个周期采用了梗阻性无精子症睾丸精子，这是本组睾丸精子获得与精液精子相似受精率的另一原因。结果表明梗阻性无精子症的睾丸精子，即来自正常生精组织的睾丸精子，应用ICSI可以获得与采用精液精子相似的受精率。
Nagy等[3]报道采用睾丸精子比采用精液精子获得的可移植胚胎稍少些。本研究结果显示不同来源的精子行ICSI可以获得相似的卵裂率以及相似比例的A级、B级和可移植胚胎，表明精液和来自梗阻性无精子症的附睾及睾丸精子不影响受精后胚胎的发展潜能。
本研究中各组女方年龄、不育年限和获卵数的差异无显著性意义，移植的胚胎数也相似，精液、附睾和睾丸精子行ICSI分别获得了43.5%、50.0%和35.7%(P>0.05) 的相似的临床妊娠率。本组大多数妊娠多在继续中，因而随访结果尚不完整。但文献表明不同来源精子行ICSI对产科结果和出生婴儿没有不同的影响[6，7]。
, 百拇医药
作者简介：郑菊芬(1967-)，女，浙江温州人，主治医师。
参考文献
[1] 林金菊,叶碧绿,周颖，等.体外受精—胚胎移植治疗不孕症临床分析[J].温州医学院学报,1999，29(4):267-269.
[2] Palermo G, Adler A, Cohen J. Intracytoplasmic sperm injection:a novel treatment for all forms of male factor infertility[J]. Fertil Steril,1995，63:1231-1240.
[3] Nagy ZN,Silber S,Liu J,et al. Using ejaculated,fresh,and frozen-thawed epididymal and testicular spermatozoa gives rise to comparable results after intracytoplasmic sperm injection[J]. Fertil Steril,1995，63:808-815.
, http://www.100md.com
[4] Palermo GD, Schlegel PN, Colomdero LT,et al. Aggressive sperm immoblization prior to intracytoplasmic injection with immature spermatozoa improves fertilization and pregnant rate[J]. Hum Reprod,1996,11:1023-1029.
[5] Mansour RT, Kamal A, Fahmy I. Intracytoplasmic sperm injection in obstructive and non-obstructive azoospermia[J]. Hum Reprod,1997，12:1974-1979.
[6] Aytoz A, Camus M, Tournaye H,et al. Outcome of pregnancies after intracytoplasmic sperm injection and the effect of sperm origin and quality on this outcome[J]. Fertil Steril,1998，70：500-505.
, 百拇医药
[7] Bonduelle M, Wilikens A, Buysse A,et al. A follow-up study of children born after intracytoplasmic sperm injection with epididymal and testicular spermatozoa and after replacement of cryopreserved embryos obtained after ICSI[J]. Hum Reprod, 1998，13(Suppl 1):196-207.
收稿日期：2000-03-06
修回日期：2000-04-21, 百拇医药
单位：(温州医学院附属第一医院 生殖医学中心，浙江 温州 325000)
关键词：单精子卵胞浆内注射术；男性不育；梗阻性无精子症
温州医学院学报000303 [摘要]目的:采用不同来源精子行单精子卵胞浆内注射术(ICSI)治疗不育症并进行疗效对比观察。 方法:女性行常规超促排卵和经阴道超声引导下取卵。比较采用精液、附睾和睾丸精子行ICSI后的卵子损伤率、受精率、卵裂率、胚胎质量和临床妊娠率。 结果:53对不育夫妇共行62个ICSI周期，27例临床妊娠，周期临床妊娠率为43.5%。分别有36、12和14个周期采用精液、附睾和睾丸精子，三组的卵子损伤率、受精率、卵裂率、胚胎质量和临床妊娠率没有显著的差别。结论:采用精液、附睾和睾丸精子行ICSI可获得相似的治疗结果。
, 百拇医药 [中图分类号]R711.6 [文献标识码]A
[文章编号]1000-2138(2000)03-0185-03
Results of intracytoplasmic sperm injection with spermatozoa from ejaculates, epididymal aspirates and testicular biopsies
ZHENG Ju-fen HUANG Xue-feng LI Cheng-di et al
(Reproductive Medicine Unit,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College,Wenzhou 325000)
Abstract：Objective：To compare the results of intracytoplasmic injection (ICSI) with spermatozoa from different sources.Methods：The female partners were routinely superovulated and underwent oocyte retrieval under vaginal ultrasound. The mature oocytes were microinjected with spermatozoa from ejaculates, epididymal aspirates and testicular biopsies. The oocyte intactness, fertilization, embryo cleavage, embryo quality and clinical pregnancy rates were evaluated and compared.Results：The clinical pregnancy rate per cycle was 43.5%. Among 62 cycles,36,12 and 14 cycles were ICSI with ejaculated, epididymal and testicular spermatozoa,respectively. The oocyte intactness,fertilization,embryo cleavage,embryo quality and clinical pregnancy rates were of no statistical difference.Conclusion：The ejaculated,epididymal and testicular spermatozoa used in ICSI achieved comparable clinical results.
, 百拇医药
Key words：intracytoplasmic sperm injection； infertility; obstructive azoospermia
自1992年Palermo等采用单精子卵胞浆内注射术(ICSI)治疗严重精液异常所致不育症获得成功妊娠以来，ICSI已广泛用于治疗各种精液异常和无精子症引起的不育。本中心于1999年2月至2000年1月采用不同来源精子进行连续62个ICSI周期的治疗，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象 53对不育夫妇共行62个ICSI周期。ICSI指征包括精液异常(36个周期)、梗阻性无精子症(25个周期)和非梗阻性无精子症(1个周期)。精液密度<5×106/ml和(或)活动率<10%为严重精液异常。对于梗阻性无精子症，首先行经皮附睾精子抽吸术(PESA)，如附睾液中未发现精子，则立即行睾丸精子获取术(TESE)。而非梗阻性无精子症则只能采用TESE获取精子。本组资料有36个周期采用精液精子(17个周期为轻、中度精液异常精子，19个周期为严重异常精液精子)，12个周期的精子来自附睾，14个周期的精子来自睾丸。三组的不育夫妇女方的平均年龄分别为30.8岁、28.3岁和29.3岁(P>0.05)，平均不育年限分别为6.8年、6.1年和6.2年(P>0.05)。
, http://www.100md.com
1.2 女性超促排卵和取卵 采用本中心的常规超促排卵方案[1]，经阴道B超行卵泡抽吸术获得卵丘复合物。在ICSI操作之前，将卵丘复合物置于含透明质酸酶(Sigma，H2251)80～160iu/ml的HTF-Hepes(9529, Irvine Scientific)中剥离颗粒细胞。
1.3 精子的处理 取卵当天，男方禁欲3天后手淫获得精液，根据精子密度和活动力选用Percoll或直接离心方法收集活动精子。附睾精子采用经皮附睾精子抽吸术(PESA)获取。局部麻醉后，将连接注射器的7号输液针头刺入附睾头部，轻轻按摩附睾头部，抽吸获取附睾液，置于培养液中镜检。如未发现精子，则行睾丸精子获取术(TESE)。切开睾丸白膜，取米粒大小睾丸组织，将其在培养液中于培养皿底部的井字划痕上搓动，磨碎曲细精管。将附睾液和睾丸悬液离心洗涤三次(500g×10分钟)，获得附睾和睾丸精子悬液待用。
1.4 ICSI操作 ICSI的操作在配有微分干涉光学系统(DIC)的Zeiss倒置显微镜的温台(37℃)上进行。采用Narishige显微操作系统(MN-188和MO-188)。
, 百拇医药
ICSI操作前，将5μl的10%PVP(Irvine Scientific，99219)置于Petri皿(Falcon 1006)中央，在PVP微滴周围放置8个5μl的HTF-Hepes微滴，尽快用石腊油(M8410，Sigma)遮盖微滴以免渗透压改变。
将处理后的精子悬液放入1～2个HTF-Hepes微滴，而将卵子放入其他的HTF-Hepes微滴，每次卵子总数少于5个。在精子微滴中选择形态正常的活动精子转移到PVP微滴中，用ICSI注射针在培养皿底部猛烈划破精子的尾部，可多次重复，明确已制动后，将精子吸入注射针，尾部先吸入，使精子置于注射针尖端。将含精子的显微注射针和持针移入含卵子的微滴中，成熟卵母细胞由持针吸引固定，使第一极体位于6点的位置。将ICSI注射针穿过透明带刺入成熟卵母细胞胞浆内，回抽部分胞浆后将回抽的胞浆和精子注入卵子，缓慢退出注射针。重复以上过程，对每个成熟卵母细胞子行ICSI。
1.5 培养 穿刺卵子置于含10%母体灭活血清的Earle's(E2888,Sigma)或HTF培养液(9528,Irvine Scientific)中，在37℃含5%CO2的湿化空气中培养。
, 百拇医药
1.6 受精、卵裂、胚胎评价、胚胎转移和妊娠观察 穿刺后16～18小时后观察注射卵子有否正常受精，即是否有2个原核和2个极体。穿刺后40～48小时观察有否卵裂，并按照胚胎碎片的多少评价胚胎的质量：①A级胚胎为无碎片或碎片<5%，②B级胚胎碎片5%～20%，③C级胚胎碎片为20%～50%，④D级胚胎碎片>50%。将不超过4个的形态学评分最佳的胚胎经阴道植入子宫。2周后，检测尿和血hCG确定有否妊娠，5周后B超观察妊娠囊和搏动胎心数目以确定有无临床妊娠和有无多胎妊娠。
1.7 统计方法 年龄、不育年限和胚胎移植数采用单因素ANOVA检验，临床妊娠率采用χ2检验，其它统计量采用Kruskal-Wallis检验进行组间显著检验。
2 结果
62个ICSI周期获得27例临床妊娠，周期临床妊娠率为43.5%。1例采用精液精子行ICSI获得临床妊娠的病例因宫颈妊娠予以人工流产，1例采用附睾精子的临床妊娠在孕8月时死胎，3例出生5个正常婴儿。总出生和继续妊娠率为40.3%。
, http://www.100md.com
采用不同来源精子行ICSI治疗结果见表1。各组的获卵数、卵子完整率、受精率、卵裂率、各级胚胎比例、胚胎移植数和周期临床妊娠率差异都没有显著性(P>0.05)。
表1 不同来源精子单精子卵胞浆内注射术的治疗结果 (
±s)精液精子
附睾精子
睾丸精子
轻、中度精液异常
严重精液异常
小计
每周期成熟卵子数
, http://www.100md.com
8.7±4.9
10.9±5.6
9.8±5.3
12.5±6.9
9.3±3.8
卵子完整率(%)
90±15
88±17
89±16
92±8
91±10
受精率(%)
, http://www.100md.com
82±18
71±23
76±21
76±23
78±15
卵裂率(%)
96±13
93±9
94±11
97±7
88±24
胚胎质量 A级(%)
11±13
, http://www.100md.com
18±18
15±16
17±24
26±27
B级(%)
33±22
38±34
36±29
35±33
35±16
C级(%)
26±23
20±22
, 百拇医药
23±23
19±12
16±18
D级(%)
29±36
23±32
26±34
30±36
21±19
每周期胚胎移植数
3.4±0.8
3.3±0.6
3.3±0.7
, http://www.100md.com
3.1±0.5
3.1±0.4
临床妊娠率(%)
47.1(8/17)
42.1(8/19)
44.4(16/36)
50(6/12)
35.7(5/14)
3 讨论 自1992年以来，ICSI已广泛应用于治疗各种精液指标异常的不育症，获得了与常规IVF治疗女性原因不孕症相似的受精率和临床妊娠率[2]。本组采用精液精子的36个ICSI周期，最严重的异常精液包括低倍镜下多个视野偶见精子(4个周期)，但所有精液标本经处理都获得活动的精子行ICSI。严重精液异常采用ICSI获得了令人满意的受精率，尽管轻、中度精液异常获得的受精率(82.9% vs 71.0%)更高些，但差异无统计学意义(P>0.05)。轻、中度和重度精液异常的精子行ICSI获得的胚胎质量相似，临床妊娠率分别为47.1%和42.1%(P>0.05)。这些结果与文献报道[2，3]的一致。这表明只要在精液中找到活动的精子就可以行ICSI治疗，并可获得相似的治疗结果。
, 百拇医药
ICSI的治疗结果不受精液指标的影响，使得有可能采用外科获取的附睾或睾丸精子结合ICSI治疗无精子症。我们采用PESA获得的附睾精子数量较多活动力较好，类似于严重异常精液的精子。但睾丸精子则活动力较差，有时为找到1个明确活动的睾丸精子需观察5分钟以上，因而采用睾丸精子行ICSI每卵穿刺所需的时间更长，操作更困难。但是，本研究结果显示，精液、附睾和睾丸精子获得的卵子损伤率和受精率几乎相同，表明操作的难易程度并不导致睾丸精子行ICSI的卵子损伤率增高和受精率下降。初期的文献报道采用梗阻性无精子症睾丸精子的受精率比采用精液和附睾的低[3]，近期文献已报道采用梗阻性无精子症睾丸精子可以获得与采用精液精子相似的受精率，但采用非梗阻性无精子症睾丸精子的受精率则较低[5]。本组中，睾丸精子和精液精子获得相似的受精率(76.0% vs 78.0%)。我们认为，原因之一是采用了改进的ICSI操作技术，对精子尾部进行剧烈而且有时是多次的制动，Palermo[4]已报道精子尾部的剧烈制动可以显著地提高受精率，采用不成熟睾丸精子的提高幅度最大(从
, 百拇医药
40.9%提高到66.7%)，提示不成熟的睾丸精子更需要膜的损伤以利卵子激活因子的通过。本组13/14个周期采用了梗阻性无精子症睾丸精子，这是本组睾丸精子获得与精液精子相似受精率的另一原因。结果表明梗阻性无精子症的睾丸精子，即来自正常生精组织的睾丸精子，应用ICSI可以获得与采用精液精子相似的受精率。
Nagy等[3]报道采用睾丸精子比采用精液精子获得的可移植胚胎稍少些。本研究结果显示不同来源的精子行ICSI可以获得相似的卵裂率以及相似比例的A级、B级和可移植胚胎，表明精液和来自梗阻性无精子症的附睾及睾丸精子不影响受精后胚胎的发展潜能。
本研究中各组女方年龄、不育年限和获卵数的差异无显著性意义，移植的胚胎数也相似，精液、附睾和睾丸精子行ICSI分别获得了43.5%、50.0%和35.7%(P>0.05) 的相似的临床妊娠率。本组大多数妊娠多在继续中，因而随访结果尚不完整。但文献表明不同来源精子行ICSI对产科结果和出生婴儿没有不同的影响[6，7]。
, 百拇医药
作者简介：郑菊芬(1967-)，女，浙江温州人，主治医师。
参考文献
[1] 林金菊,叶碧绿,周颖，等.体外受精—胚胎移植治疗不孕症临床分析[J].温州医学院学报,1999，29(4):267-269.
[2] Palermo G, Adler A, Cohen J. Intracytoplasmic sperm injection:a novel treatment for all forms of male factor infertility[J]. Fertil Steril,1995，63:1231-1240.
[3] Nagy ZN,Silber S,Liu J,et al. Using ejaculated,fresh,and frozen-thawed epididymal and testicular spermatozoa gives rise to comparable results after intracytoplasmic sperm injection[J]. Fertil Steril,1995，63:808-815.
, http://www.100md.com
[4] Palermo GD, Schlegel PN, Colomdero LT,et al. Aggressive sperm immoblization prior to intracytoplasmic injection with immature spermatozoa improves fertilization and pregnant rate[J]. Hum Reprod,1996,11:1023-1029.
[5] Mansour RT, Kamal A, Fahmy I. Intracytoplasmic sperm injection in obstructive and non-obstructive azoospermia[J]. Hum Reprod,1997，12:1974-1979.
[6] Aytoz A, Camus M, Tournaye H,et al. Outcome of pregnancies after intracytoplasmic sperm injection and the effect of sperm origin and quality on this outcome[J]. Fertil Steril,1998，70：500-505.
, 百拇医药
[7] Bonduelle M, Wilikens A, Buysse A,et al. A follow-up study of children born after intracytoplasmic sperm injection with epididymal and testicular spermatozoa and after replacement of cryopreserved embryos obtained after ICSI[J]. Hum Reprod, 1998，13(Suppl 1):196-207.
收稿日期：2000-03-06
修回日期：2000-04-21, 百拇医药