羊栖菜多糖降血糖作用的实验研究
作者：王兵 李靖 马舒冰 黄传贵 陈红 黄巧娟
单位：王兵 李靖 马舒冰 黄传贵 陈红(深圳海王生物工程股份有限公司，深圳 518054)；黄巧娟(中山大学生命科学学院药学系)
关键词：羊栖菜多糖，降血糖作用
中国海洋药物000311 摘要 对羊栖菜[Sargassum fusiforme(Harv.)Setchell]中分离提取的多糖进行了降血糖活性研究。实验表明，羊栖菜多糖对正常空腹小鼠无降低血糖作用。对四氧嘧啶造成的动物糖尿病模型，可使糖尿病动物血糖、血清及胰腺组织过氧化脂质水平明显降低，能明显提高糖尿病小鼠对糖的耐受能力。
THE EXPERIMENTAL STUDY OF SFP ON HYPOGLYCEMIC EFFECT
Wang Bing
, 百拇医药
(Neptunus Bioengineering,CO.,LTD,Shenzhen 518054)
Li Jing
(Neptunus Bioengineering,CO.,LTD,Shenzhen 518054)
Ma Shubing
(Neptunus Bioengineering,CO.,LTD,Shenzhen 518054)
ABSTRACT The hypoglycemic effect of SFP,extracted from Sargassum fusiforme(Harv.)Setchess,were investigated.The results showed that SFP had no obvious effect on blood glucose of normal mice.Otherwise,SFP decreased significantly blood sugar level,blood and pancreas MDA in alloxan diabetic mice and improved markedly their glucose tolerance.
, 百拇医药
KEY WORDS SFP,hypoglycemic effect
多糖在自然界中分布很广，多糖具有增强免疫功能、抗幅射、抑制肿瘤生长、抗炎、降血糖等广泛的生物学活性[1]，近年来越来越受到人们的普遍关注。我国海域辽阔，海洋生物资源十分丰富，海洋生物中的生理活性物质是研究和发展新化学成分，开发新药的天然宝库。羊栖菜多糖是从马尾藻科植物羊栖菜[Sargassum fusiforme (Harv.) Setchell]全藻中提取分离得到的多糖。有关羊栖菜中提取的多糖成分增强免疫、抗氧化等作用已有一些报道[2，3]。本文对羊栖菜多糖进行了降血糖作用实验研究。
1 实验材料
1.1 动物与瘤株
NIH纯系小白鼠，体重(20±2)g，雌雄兼用，由广东省卫生厅医学实验动物中心提供。
, 百拇医药
1.2 药品与试剂
四氧嘧啶，Sigma公司产品。血糖测定试剂盒，北京化工厂产品。MDA测定试剂盒，南京建成生物工程研究所产品。
2 实验方法
2.1 羊栖菜多糖(SFP)的提取
参照文献[4]。羊栖菜干品粉碎，碱水提取2次，上清液以Sevage法去蛋白，透析，透析液以3倍乙醇沉淀，以P2O5真空干燥沉淀物，即得羊栖菜多糖(SFP)。临用时以生理盐水配至所需浓度。
2.2 SFP对正常小鼠血糖的影响
取小鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，即空白对照组和3个剂量组，以SFP连续ip 10d，空白对照组在同样条件下ip生理盐水，连续10d，末次给药后禁食10h，眼眶取血，采用血糖测定试剂盒，葡萄糖氧化酶法测定动物空腹血糖浓度，结果见表1。
, 百拇医药
2.3 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影响
取小鼠50只，雌雄各半，随机取10只为正常对照组。其余小鼠禁食12h(自由饮水)，尾静脉注射四氧嘧啶100mg.kg-1造成糖尿病模型，注射后72h眼眶取血没血糖，取造成糖尿病模型(禁食12h血糖大于11mmol.L-1)者，随机分为4组，即模型对照组及3个实验治疗组。实验治疗组以SFP连续ip 10d，空白对照组在同样条件下ip生理盐水，连续10d，末次给药后禁食10h，眼眶取血，测定动物空腹血糖浓度，结果见表2。然后ip葡萄糖2g.kg-1，于注射后30min及120min再分别测血糖，结果见表3。
2.4 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织过氧化脂质含量的影响
取小鼠50只，雌雄各半，随机取10只为正常对照组。其余小鼠禁食12h(自由饮水)，尾静脉注射四氧嘧啶100mg.kg-1造成糖尿病模型，注射后72h眼眶取血测血糖，取造成糖尿病模型(禁食12h血糖大于11mmol.L-1)者，随机分为4组，即模型对照组及3个实验治疗组，实验治疗组以SFP连续ip 10d,空白对照组在同样条件下ip生理盐水，连续10d，末次给药后禁食10h，次日动物眼球取血，断头处死，取出胰腺组织，用冰冷生理盐水洗去浮血，在冰浴上剪成碎块，用生理盐水超声处理成10%(W/V)组织匀浆，采用MDA试剂盒，硫代巴比妥酸比色法分别测定血液、胰腺组织匀浆中MDA水平。结果如表4所示。
, http://www.100md.com
3 实验结果
3.1 SFP对正常小鼠血糖的影响
结果如表1所示。给药10d后，SFP对正常动物空腹血糖稍有降低，但与空白对照组对比无显著性差异。
表1 SFP对正常小鼠血糖的影响(
±s，n=10) 组别
剂量
(mg.kg-1)
血糖
(mmol.L-1)
, http://www.100md.com 空白对照
SFP
-
10
40
160
6.36±1.02
6.28±0.92
6.25±1.63
6.01±1.07
3.2 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影响
结果如表2所示。SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠有明显的降血糖作用，其中中剂量组与模型对照组比较，差异有显著意义(P<0.05)，高剂量组与模型对照组相比，差异有极显著意义(P<0.01)。表2 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响(±s，n=10) 组别
, 百拇医药
剂量
(mg.kg-1)
血糖
(mmol.L-1)
正常对照
模型对照
SFP
-
-
10
40
160
, 百拇医药
6.49±1.77**
16.18±2.89
14.92±2.10
13.06±2.62*
11.62±3.21**
与模型对照比较，*P<0.05,**P<0.01
3.3 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响
结果如表3所示。给予葡萄糖30min后，糖尿病小鼠的血糖值，各剂量组均低于模型对照组。中剂量和高剂量组与模型对照组比较，差异极显著(P<0.01)；给予葡萄糖120min后，高剂量组与模型对照组比较，差异有极显著意义(P<0.01)。表明SFP能增强糖尿病小鼠的负荷糖耐量。表3 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响±s，n=10) 组别
, http://www.100md.com
剂量
(mg.kg-1)
血糖(mmol.L-1)
给葡萄糖30min
给葡萄糖120min
正常对照
模型对照
SFP
-
-
10
40
, http://www.100md.com
160
10.21±2.74**
36.21±6.24
32.15±7.10
27.47±7.23**
25.31±8.23**
7.21±2.50**
22.30±4.97
20.90±3.59
18.29±3.21*
, http://www.100md.com
14.31±4.25**
与模型对照组比较，*P<0.05,**P<0.01
3.4 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织过氧化脂质含量的影响
结果如表4所示。四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织中MDA含量较正常对照组明显高(P<0.01)，SFP明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织中MDA含量。表4 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血液
及胰腺组织过氧化脂质含量的影响(±s，n=10) 组 别
剂 量
(mg.kg-1)
, 百拇医药
血液MDA
(nmol.mL-1)
血液MDA
(nmol.g-1)
正常对照
模型对照
SFP
-
-
10
40
160
, 百拇医药
8.29±1.56**
14.27±2.57
12.37±3.73
10.82±4.31*
10.05±3.68**
131.25±13.25**
189.73±23.26
175.82±25.31
163.25±19.37*
156.32±28.73
, 百拇医药
讨论
糖尿病是一种常见病、多发病，严重危害人们的身体健康。因此展开糖尿病治疗药物的研究具有重要意义。本文实验结果表明，SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠有明显的降血糖作用；能增强糖尿病小鼠的负荷糖耐量；提示SFP具有明显的降血糖活性。
实验结果还显示，糖尿病小鼠血液及胰腺中过氧化脂质含量明显较正常组高。自由基与细胞膜不饱和脂肪酸作用，产生过氧化脂质，从而破坏细胞膜和亚细胞膜的结构，损伤膜上受体和膜运输功能。而脂质过氧化物的分解产物，如丙二醛可引起蛋白质分子内和分子间交联并导致DNA断裂，染色体畸变。有研究表明，自由基在胰岛β细胞的杀伤中起重要作用。SFP能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织中过高的MDA含量，表明其降血糖作用与其抗氧化损伤胰岛细胞有密切关系。
SFP对正常小鼠的血糖水平无明显影响，说明羊栖菜多糖的降血糖作用不是通过刺激胰岛素分泌实现的，其具体的作用机制有待于进一步的研究。 参考文献
, 百拇医药
1，刘美正，郭忠武，惠永正.多糖研究新进展.天然产物研究与开发，1997，9(2)：81
2，季宇彬，孔琪，孙红，等.羊栖菜多糖对P388小鼠红细胞免疫促进作用的机制研究.中国海洋药物，1998，2：14
3，季宇彬，杨书良，谷春山.羊栖菜多糖对L615小鼠LPO含量及GR、GSH-Px、CAT和SOD活性的影响.中国海洋药物，1994，2：20
4，高向东，盛海林，潘秋文，等.均匀设计和球面对称设计在螺旋藻多糖最佳工艺研究中的应用比较.中国药科大学学报，1997，28(3)：173, http://www.100md.com
单位：王兵 李靖 马舒冰 黄传贵 陈红(深圳海王生物工程股份有限公司，深圳 518054)；黄巧娟(中山大学生命科学学院药学系)
关键词：羊栖菜多糖，降血糖作用
中国海洋药物000311 摘要 对羊栖菜[Sargassum fusiforme(Harv.)Setchell]中分离提取的多糖进行了降血糖活性研究。实验表明，羊栖菜多糖对正常空腹小鼠无降低血糖作用。对四氧嘧啶造成的动物糖尿病模型，可使糖尿病动物血糖、血清及胰腺组织过氧化脂质水平明显降低，能明显提高糖尿病小鼠对糖的耐受能力。
THE EXPERIMENTAL STUDY OF SFP ON HYPOGLYCEMIC EFFECT
Wang Bing
, 百拇医药
(Neptunus Bioengineering,CO.,LTD,Shenzhen 518054)
Li Jing
(Neptunus Bioengineering,CO.,LTD,Shenzhen 518054)
Ma Shubing
(Neptunus Bioengineering,CO.,LTD,Shenzhen 518054)
ABSTRACT The hypoglycemic effect of SFP,extracted from Sargassum fusiforme(Harv.)Setchess,were investigated.The results showed that SFP had no obvious effect on blood glucose of normal mice.Otherwise,SFP decreased significantly blood sugar level,blood and pancreas MDA in alloxan diabetic mice and improved markedly their glucose tolerance.
, 百拇医药
KEY WORDS SFP,hypoglycemic effect
多糖在自然界中分布很广，多糖具有增强免疫功能、抗幅射、抑制肿瘤生长、抗炎、降血糖等广泛的生物学活性[1]，近年来越来越受到人们的普遍关注。我国海域辽阔，海洋生物资源十分丰富，海洋生物中的生理活性物质是研究和发展新化学成分，开发新药的天然宝库。羊栖菜多糖是从马尾藻科植物羊栖菜[Sargassum fusiforme (Harv.) Setchell]全藻中提取分离得到的多糖。有关羊栖菜中提取的多糖成分增强免疫、抗氧化等作用已有一些报道[2，3]。本文对羊栖菜多糖进行了降血糖作用实验研究。
1 实验材料
1.1 动物与瘤株
NIH纯系小白鼠，体重(20±2)g，雌雄兼用，由广东省卫生厅医学实验动物中心提供。
, 百拇医药
1.2 药品与试剂
四氧嘧啶，Sigma公司产品。血糖测定试剂盒，北京化工厂产品。MDA测定试剂盒，南京建成生物工程研究所产品。
2 实验方法
2.1 羊栖菜多糖(SFP)的提取
参照文献[4]。羊栖菜干品粉碎，碱水提取2次，上清液以Sevage法去蛋白，透析，透析液以3倍乙醇沉淀，以P2O5真空干燥沉淀物，即得羊栖菜多糖(SFP)。临用时以生理盐水配至所需浓度。
2.2 SFP对正常小鼠血糖的影响
取小鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，即空白对照组和3个剂量组，以SFP连续ip 10d，空白对照组在同样条件下ip生理盐水，连续10d，末次给药后禁食10h，眼眶取血，采用血糖测定试剂盒，葡萄糖氧化酶法测定动物空腹血糖浓度，结果见表1。
, 百拇医药
2.3 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影响
取小鼠50只，雌雄各半，随机取10只为正常对照组。其余小鼠禁食12h(自由饮水)，尾静脉注射四氧嘧啶100mg.kg-1造成糖尿病模型，注射后72h眼眶取血没血糖，取造成糖尿病模型(禁食12h血糖大于11mmol.L-1)者，随机分为4组，即模型对照组及3个实验治疗组。实验治疗组以SFP连续ip 10d，空白对照组在同样条件下ip生理盐水，连续10d，末次给药后禁食10h，眼眶取血，测定动物空腹血糖浓度，结果见表2。然后ip葡萄糖2g.kg-1，于注射后30min及120min再分别测血糖，结果见表3。
2.4 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织过氧化脂质含量的影响
取小鼠50只，雌雄各半，随机取10只为正常对照组。其余小鼠禁食12h(自由饮水)，尾静脉注射四氧嘧啶100mg.kg-1造成糖尿病模型，注射后72h眼眶取血测血糖，取造成糖尿病模型(禁食12h血糖大于11mmol.L-1)者，随机分为4组，即模型对照组及3个实验治疗组，实验治疗组以SFP连续ip 10d,空白对照组在同样条件下ip生理盐水，连续10d，末次给药后禁食10h，次日动物眼球取血，断头处死，取出胰腺组织，用冰冷生理盐水洗去浮血，在冰浴上剪成碎块，用生理盐水超声处理成10%(W/V)组织匀浆，采用MDA试剂盒，硫代巴比妥酸比色法分别测定血液、胰腺组织匀浆中MDA水平。结果如表4所示。
, http://www.100md.com
3 实验结果
3.1 SFP对正常小鼠血糖的影响
结果如表1所示。给药10d后，SFP对正常动物空腹血糖稍有降低，但与空白对照组对比无显著性差异。
表1 SFP对正常小鼠血糖的影响(
±s，n=10) 组别剂量
(mg.kg-1)
血糖
(mmol.L-1)
, http://www.100md.com 空白对照
SFP
-
10
40
160
6.36±1.02
6.28±0.92
6.25±1.63
6.01±1.07
3.2 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影响
结果如表2所示。SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠有明显的降血糖作用，其中中剂量组与模型对照组比较，差异有显著意义(P<0.05)，高剂量组与模型对照组相比，差异有极显著意义(P<0.01)。表2 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响(
±s，n=10) 组别, 百拇医药
剂量
(mg.kg-1)
血糖
(mmol.L-1)
正常对照
模型对照
SFP
-
-
10
40
160
, 百拇医药
6.49±1.77**
16.18±2.89
14.92±2.10
13.06±2.62*
11.62±3.21**
与模型对照比较，*P<0.05,**P<0.01
3.3 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响
结果如表3所示。给予葡萄糖30min后，糖尿病小鼠的血糖值，各剂量组均低于模型对照组。中剂量和高剂量组与模型对照组比较，差异极显著(P<0.01)；给予葡萄糖120min后，高剂量组与模型对照组比较，差异有极显著意义(P<0.01)。表明SFP能增强糖尿病小鼠的负荷糖耐量。表3 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响
±s，n=10) 组别, http://www.100md.com
剂量
(mg.kg-1)
血糖(mmol.L-1)
给葡萄糖30min
给葡萄糖120min
正常对照
模型对照
SFP
-
-
10
40
, http://www.100md.com
160
10.21±2.74**
36.21±6.24
32.15±7.10
27.47±7.23**
25.31±8.23**
7.21±2.50**
22.30±4.97
20.90±3.59
18.29±3.21*
, http://www.100md.com
14.31±4.25**
与模型对照组比较，*P<0.05,**P<0.01
3.4 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织过氧化脂质含量的影响
结果如表4所示。四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织中MDA含量较正常对照组明显高(P<0.01)，SFP明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织中MDA含量。表4 SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠血液
及胰腺组织过氧化脂质含量的影响(
±s，n=10) 组 别剂 量
(mg.kg-1)
, 百拇医药
血液MDA
(nmol.mL-1)
血液MDA
(nmol.g-1)
正常对照
模型对照
SFP
-
-
10
40
160
, 百拇医药
8.29±1.56**
14.27±2.57
12.37±3.73
10.82±4.31*
10.05±3.68**
131.25±13.25**
189.73±23.26
175.82±25.31
163.25±19.37*
156.32±28.73
, 百拇医药
讨论
糖尿病是一种常见病、多发病，严重危害人们的身体健康。因此展开糖尿病治疗药物的研究具有重要意义。本文实验结果表明，SFP对四氧嘧啶糖尿病小鼠有明显的降血糖作用；能增强糖尿病小鼠的负荷糖耐量；提示SFP具有明显的降血糖活性。
实验结果还显示，糖尿病小鼠血液及胰腺中过氧化脂质含量明显较正常组高。自由基与细胞膜不饱和脂肪酸作用，产生过氧化脂质，从而破坏细胞膜和亚细胞膜的结构，损伤膜上受体和膜运输功能。而脂质过氧化物的分解产物，如丙二醛可引起蛋白质分子内和分子间交联并导致DNA断裂，染色体畸变。有研究表明，自由基在胰岛β细胞的杀伤中起重要作用。SFP能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺组织中过高的MDA含量，表明其降血糖作用与其抗氧化损伤胰岛细胞有密切关系。
SFP对正常小鼠的血糖水平无明显影响，说明羊栖菜多糖的降血糖作用不是通过刺激胰岛素分泌实现的，其具体的作用机制有待于进一步的研究。 参考文献
, 百拇医药
1，刘美正，郭忠武，惠永正.多糖研究新进展.天然产物研究与开发，1997，9(2)：81
2，季宇彬，孔琪，孙红，等.羊栖菜多糖对P388小鼠红细胞免疫促进作用的机制研究.中国海洋药物，1998，2：14
3，季宇彬，杨书良，谷春山.羊栖菜多糖对L615小鼠LPO含量及GR、GSH-Px、CAT和SOD活性的影响.中国海洋药物，1994，2：20
4，高向东，盛海林，潘秋文，等.均匀设计和球面对称设计在螺旋藻多糖最佳工艺研究中的应用比较.中国药科大学学报，1997，28(3)：173, http://www.100md.com