盐酸尼卡地平贴剂的研究
作者：陈金通 陈鸿清 姚梅坤
单位：陈金通(莆田市医院 351100)；陈鸿清(莆田市医院 351100)；姚梅坤(莆田市医院 351100)
关键词：盐酸尼卡地平，贴剂，氮酮
摘要 制备盐酸尼卡地平贴剂摘要 制备盐酸尼卡地平贴剂，利用改良Franz扩散池，进行离体皮肤渗透实验，通过改变皮肤状态，研究其释药机理。结果表明盐酸尼卡地平贴剂中药物的渗透可用Higuchi方程来表达，其去除角质层皮肤对药物渗透作用远大于完整皮肤。其渗透的主要屏障为角质层。
盐酸尼卡地平(Nicardipine hydrochloride，NC)是二氢吡啶类钙拮抗剂，是有效的脑血管病治疗药，但NC首效应大，生物利用度较低[1]，血药浓度波动较大。若将其制成贴剂，则可以达到恒速给药，起稳定病情作用，本文对盐酸尼卡地平贴剂进行了研究。
, 百拇医药
1 仪器与试药
7520型分光光度计(上海分析仪器厂)，81-2型磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)；501型超级恒温水浴(上海市实验仪器厂)；改良Franz扩散池[2](中科院上海有机所玻璃房)；盐酸尼卡地平(河北张家口东风制药厂，970701)月桂氮酮(Azone)(广州助剂化工厂)；聚乙烯吡咯烷酮K-30(上海化学试剂公司)；乳糖(上海试剂二厂)；聚乙烯醇(上海化学试剂公司)；雄性大鼠(福建医科大学动物房)；试剂均分析纯。
2 实验方法与结果
2.1 离体皮肤的制备 a 选择180～220 g雄性大鼠。将腹部毛剪去，处死，取下腹部皮肤，去除皮下脂肪，生理盐水洗净，冷藏备用。b 将上述处理过的皮肤角质层面，用粘胶带反复粘贴20次，将角质层剥去，至皮肤呈表面光滑，半透明状。
2.2 含量测定方法建立[3] 2.2.1 NC紫外吸收光谱 取NC适量溶于20%乙醇溶液(V/V)中于220～380 nm处测定其紫外吸收光谱，发现在237、358 nm有最大吸收，本文选择358 nm作为测定波长。2.2.2 标准曲线绘制及回收率实验 精密称取NC50 mg置50 ml量瓶中，加20%乙醇溶液定容，得母液。精密量取母液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml分别置100 ml量瓶中，加20%乙醇溶液定容，以20%乙醇溶液为空白于358 nm处测定吸收值A，回归得A＝0.01300C+0.00406，r＝0.9999，其平均回收率为99.76±0.27%。
, 百拇医药
2.3 贴剂的制备 称取处方量的聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、甘油、水，月桂氮酮后加热至溶，得凝胶基质；另取处方量的NC用60%乙醇水溶液溶解后与上述凝胶基质混合均匀，铺膜，置50℃烘箱中干燥至表面固化且骨架薄片有良好弹性即可，切割成5 cm×5 cm大小药膜。贴片最下层用铝塑膜履盖，第二层为药物骨架薄片，第三层为粘胶层，部分涂在铝塑膜外缘和背衬层内侧的外周(药片四周无粘胶)，第四层为海棉垫，最上层为背衬层。
2.4 离体皮肤渗透实验 冰箱中取出鼠皮，恢复至室温，用20%乙醇溶液冲洗皮肤，棉花吸干表面液体，将皮肤固定在改良Franz扩散池上，使角质层面向上、并与贴剂相粘连。扩散池有效面积为0.745 cm2。扩散池容积为4.5 ml。于扩散池中加入20%乙醇溶液4.5 ml作为接收介质。记时将贴剂加到改良Franz扩散池上，恒速200 rpm，恒温37±0.5℃，分别于2，4，6，8，12，24 h定时取样4.5 ml(立即补充相互新鲜介质)，0.45 μm微孔滤膜过滤，续滤液于358 nm处测定吸收度A，并做平行空白试验，将所测吸收度A代入标准曲线方程，计算药物浓度，并计算累积释放量(Q)：Q＝
式中Q：时间t时累积释放量；Ci：第i次取样时样品浓度。计算稳态流量(J)：J＝
，式中V：接收液总体积；A：皮肤有效扩散面积；dQ/dt：稳态时的斜率。
, 百拇医药
2.5 NC经皮释药机理研究 2.5.1 促渗剂对NC贴剂的促渗作用
分别以含Azone3种浓度3%，4%，5%为促渗剂制备NC贴剂，置完整鼠皮上，固定于改良Franz扩散池上，进行透皮试验，结果(见表1)。
表1 促渗剂对NC贴剂透皮作用影响(n＝6)
Azone%
Q(μg/cm2)
Q-t1/2方程
J(μg/cm2.h1/2)
2(h)
4
, 百拇医药
6
8
12
24
0
0.9
2.7
5.3
8.9
15.2
23.9
Q＝7.03-10.49(r＝0.990)
42.43
, 百拇医药
3
3.8
8.6
16.7
27.9
50.4
78.6
Q＝23.05t1/2-34.52(r＝0.987)
139.23
4
5.8
13.3
25.2
, 百拇医药
39.1
68.6
107.4
Q＝31.06t1/2-45.05(r＝0.990)
187.61
5
7.1
15.9
28.5
42.7
73.5
113.2
, 百拇医药 Q＝32.33t1/2-45.09(r＝0.991)
195.28
显然，氮酮浓度为5%促渗作用最强。促渗剂的促渗作用在一定浓度范围存在浓度依赖关系。5%氮酮为促渗剂比不含促渗剂的贴剂的透皮速率增加了3.6倍。2.5.2 NC贴剂经皮吸收的屏障效应
按前述方法制备去角质层皮肤，将含5%Azone贴剂贴紧皮肤、进行渗透实验，结果(见表2)。表2 NC经皮渗透的屏障效应(n＝6)
皮肤状态
Q(μg/cm2)
Q-t1/2方程
J(μg/cm2.h1/2)
, http://www.100md.com
t.h2
4
6
8
12
24
完整皮肤
7.1
15.9
28.5
42.7
73.5
113.2
, 百拇医药
Q＝32.33t1/2-45.09(r＝0.991)
195.28
去角质层皮肤
15.8
33.6
58.1
86.6
147.5
224.9
Q＝63.73t1/2-86.74(r＝0.991)
384.94
结果表明去角质层皮肤对NC的渗透系数显然大于完整皮肤。故NC贴剂经皮吸收的主要障碍为角质层。
, http://www.100md.com
3 讨论
3.1 在离体皮肤渗透实验中，由于皮肤干扰直接影响样品的紫外检测，空白试验表明鼠皮透过液在200 nm～300 nm有较大吸收，在350 nm以上则对测定影响小，故本文拟定358 nm作为NC的紫外检测波长[4]。
3.2 在本实验中药物透过皮肤后应被体内的循环系统转运走，而体外实验由于NC水溶性差，故本研究选择20%乙醇溶液作为接收液，与处方量保持一致，才能体现其透皮性能[5]。
3.3 就整个皮肤各层而言，角质层是药物透皮吸收的限速层[6]。本实验表明，去除角质层皮肤较之完整皮肤，NC的透皮速率增加了0.97倍。各种透皮促进剂的作用程度和机理不尽相同，关于其作用机制的解释甚多，主要乃各类促进剂可分别作用于皮肤分子中紧密排列的双分子脂质层或镶嵌在其中的蛋白质[6]。
, 百拇医药
参考文献
[1]戴德银主编：实用新药特药手册，第1版，北京，人民军医出版社，1994；562
[2]Chien Y.E，：Transdermal Controlled System aledications Piscataway Marcel Deuker 1987∶132
[3]黄红深等：紫外分光光度法测定盐酸尼卡地平片的含量 药物分析杂志1990；10(6)∶359
[4]周建平等：尼莫地平透皮促进剂的研究 中国药科大学学报1994；425(3)∶149-52
[5]Yasunori Morimoto，et al：Basic studies on controlled transdermal delivery of Nicardipine Hydrochloride using Ethylene-Vinyl Acetate and Ethylene-Vinyl alcohol copolymer membranes.Chen pharm Bull，1988；36(7)∶2633
[6]Barry BW：Mode of action of penetration enhancers in human skin.J Controlled Release 1987；6∶85, 百拇医药
单位：陈金通(莆田市医院 351100)；陈鸿清(莆田市医院 351100)；姚梅坤(莆田市医院 351100)
关键词：盐酸尼卡地平，贴剂，氮酮
摘要 制备盐酸尼卡地平贴剂摘要 制备盐酸尼卡地平贴剂，利用改良Franz扩散池，进行离体皮肤渗透实验，通过改变皮肤状态，研究其释药机理。结果表明盐酸尼卡地平贴剂中药物的渗透可用Higuchi方程来表达，其去除角质层皮肤对药物渗透作用远大于完整皮肤。其渗透的主要屏障为角质层。
盐酸尼卡地平(Nicardipine hydrochloride，NC)是二氢吡啶类钙拮抗剂，是有效的脑血管病治疗药，但NC首效应大，生物利用度较低[1]，血药浓度波动较大。若将其制成贴剂，则可以达到恒速给药，起稳定病情作用，本文对盐酸尼卡地平贴剂进行了研究。
, 百拇医药
1 仪器与试药
7520型分光光度计(上海分析仪器厂)，81-2型磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)；501型超级恒温水浴(上海市实验仪器厂)；改良Franz扩散池[2](中科院上海有机所玻璃房)；盐酸尼卡地平(河北张家口东风制药厂，970701)月桂氮酮(Azone)(广州助剂化工厂)；聚乙烯吡咯烷酮K-30(上海化学试剂公司)；乳糖(上海试剂二厂)；聚乙烯醇(上海化学试剂公司)；雄性大鼠(福建医科大学动物房)；试剂均分析纯。
2 实验方法与结果
2.1 离体皮肤的制备 a 选择180～220 g雄性大鼠。将腹部毛剪去，处死，取下腹部皮肤，去除皮下脂肪，生理盐水洗净，冷藏备用。b 将上述处理过的皮肤角质层面，用粘胶带反复粘贴20次，将角质层剥去，至皮肤呈表面光滑，半透明状。
2.2 含量测定方法建立[3] 2.2.1 NC紫外吸收光谱 取NC适量溶于20%乙醇溶液(V/V)中于220～380 nm处测定其紫外吸收光谱，发现在237、358 nm有最大吸收，本文选择358 nm作为测定波长。2.2.2 标准曲线绘制及回收率实验 精密称取NC50 mg置50 ml量瓶中，加20%乙醇溶液定容，得母液。精密量取母液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml分别置100 ml量瓶中，加20%乙醇溶液定容，以20%乙醇溶液为空白于358 nm处测定吸收值A，回归得A＝0.01300C+0.00406，r＝0.9999，其平均回收率为99.76±0.27%。
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2.3 贴剂的制备 称取处方量的聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、甘油、水，月桂氮酮后加热至溶，得凝胶基质；另取处方量的NC用60%乙醇水溶液溶解后与上述凝胶基质混合均匀，铺膜，置50℃烘箱中干燥至表面固化且骨架薄片有良好弹性即可，切割成5 cm×5 cm大小药膜。贴片最下层用铝塑膜履盖，第二层为药物骨架薄片，第三层为粘胶层，部分涂在铝塑膜外缘和背衬层内侧的外周(药片四周无粘胶)，第四层为海棉垫，最上层为背衬层。
2.4 离体皮肤渗透实验 冰箱中取出鼠皮，恢复至室温，用20%乙醇溶液冲洗皮肤，棉花吸干表面液体，将皮肤固定在改良Franz扩散池上，使角质层面向上、并与贴剂相粘连。扩散池有效面积为0.745 cm2。扩散池容积为4.5 ml。于扩散池中加入20%乙醇溶液4.5 ml作为接收介质。记时将贴剂加到改良Franz扩散池上，恒速200 rpm，恒温37±0.5℃，分别于2，4，6，8，12，24 h定时取样4.5 ml(立即补充相互新鲜介质)，0.45 μm微孔滤膜过滤，续滤液于358 nm处测定吸收度A，并做平行空白试验，将所测吸收度A代入标准曲线方程，计算药物浓度，并计算累积释放量(Q)：Q＝
式中Q：时间t时累积释放量；Ci：第i次取样时样品浓度。计算稳态流量(J)：J＝，式中V：接收液总体积；A：皮肤有效扩散面积；dQ/dt：稳态时的斜率。, 百拇医药
2.5 NC经皮释药机理研究 2.5.1 促渗剂对NC贴剂的促渗作用
分别以含Azone3种浓度3%，4%，5%为促渗剂制备NC贴剂，置完整鼠皮上，固定于改良Franz扩散池上，进行透皮试验，结果(见表1)。
表1 促渗剂对NC贴剂透皮作用影响(n＝6)
Azone%
Q(μg/cm2)
Q-t1/2方程
J(μg/cm2.h1/2)
2(h)
4
, 百拇医药
6
8
12
24
0
0.9
2.7
5.3
8.9
15.2
23.9
Q＝7.03-10.49(r＝0.990)
42.43
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3.8
8.6
16.7
27.9
50.4
78.6
Q＝23.05t1/2-34.52(r＝0.987)
139.23
4
5.8
13.3
25.2
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39.1
68.6
107.4
Q＝31.06t1/2-45.05(r＝0.990)
187.61
5
7.1
15.9
28.5
42.7
73.5
113.2
, 百拇医药 Q＝32.33t1/2-45.09(r＝0.991)
195.28
显然，氮酮浓度为5%促渗作用最强。促渗剂的促渗作用在一定浓度范围存在浓度依赖关系。5%氮酮为促渗剂比不含促渗剂的贴剂的透皮速率增加了3.6倍。2.5.2 NC贴剂经皮吸收的屏障效应
按前述方法制备去角质层皮肤，将含5%Azone贴剂贴紧皮肤、进行渗透实验，结果(见表2)。表2 NC经皮渗透的屏障效应(n＝6)
皮肤状态
Q(μg/cm2)
Q-t1/2方程
J(μg/cm2.h1/2)
, http://www.100md.com
t.h2
4
6
8
12
24
完整皮肤
7.1
15.9
28.5
42.7
73.5
113.2
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Q＝32.33t1/2-45.09(r＝0.991)
195.28
去角质层皮肤
15.8
33.6
58.1
86.6
147.5
224.9
Q＝63.73t1/2-86.74(r＝0.991)
384.94
结果表明去角质层皮肤对NC的渗透系数显然大于完整皮肤。故NC贴剂经皮吸收的主要障碍为角质层。
, http://www.100md.com
3 讨论
3.1 在离体皮肤渗透实验中，由于皮肤干扰直接影响样品的紫外检测，空白试验表明鼠皮透过液在200 nm～300 nm有较大吸收，在350 nm以上则对测定影响小，故本文拟定358 nm作为NC的紫外检测波长[4]。
3.2 在本实验中药物透过皮肤后应被体内的循环系统转运走，而体外实验由于NC水溶性差，故本研究选择20%乙醇溶液作为接收液，与处方量保持一致，才能体现其透皮性能[5]。
3.3 就整个皮肤各层而言，角质层是药物透皮吸收的限速层[6]。本实验表明，去除角质层皮肤较之完整皮肤，NC的透皮速率增加了0.97倍。各种透皮促进剂的作用程度和机理不尽相同，关于其作用机制的解释甚多，主要乃各类促进剂可分别作用于皮肤分子中紧密排列的双分子脂质层或镶嵌在其中的蛋白质[6]。
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参考文献
[1]戴德银主编：实用新药特药手册，第1版，北京，人民军医出版社，1994；562
[2]Chien Y.E，：Transdermal Controlled System aledications Piscataway Marcel Deuker 1987∶132
[3]黄红深等：紫外分光光度法测定盐酸尼卡地平片的含量 药物分析杂志1990；10(6)∶359
[4]周建平等：尼莫地平透皮促进剂的研究 中国药科大学学报1994；425(3)∶149-52
[5]Yasunori Morimoto，et al：Basic studies on controlled transdermal delivery of Nicardipine Hydrochloride using Ethylene-Vinyl Acetate and Ethylene-Vinyl alcohol copolymer membranes.Chen pharm Bull，1988；36(7)∶2633
[6]Barry BW：Mode of action of penetration enhancers in human skin.J Controlled Release 1987；6∶85, 百拇医药