γ-GABA对大鼠离体培养颗粒细胞生成雌二醇的影响及作用机制
作者：姜杰 倪江 朱辉 李庆雷 边淑玲
单位：哈尔滨医科大学生理教研室，哈尔滨 150086)
关键词：γ-氨基丁酸(γ-GABA)；颗粒细胞；雌二醇
中国应用生理学杂志000321摘要 目的和方法:实验采用离体培养大鼠颗粒细胞的方法，观察外源性γ-GABA对其 雌二醇生成影响。为进一步探讨其作用机制，还观察在γ-GABA受体激动剂蝇覃醇、蛋白质 合成抑制剂放线菌酮、腺苷酸环化酶激动剂 forskolin作用下，γ-GABA对颗粒细胞生成雌 二醇的影响。结果：γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的雌二醇生成，蝇覃醇有同 样作用。γ-GABA减少forskolin作用下的大鼠颗粒细胞的雌二醇生成。结论： γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞雌二醇的生成，可能是通过γ-GABA受体的途径，且与细胞内腺 苷酸环化酶系统有关。
中图分类号： R335.5文献标识码：A文章编号：1000-6834(2000)03-0272-03
, 百拇医药
EFFECT OF γ-GABA ON ESTRADIOL PRODUCTION AND ITS MECHANISM BY RAT GRANULOSA CELLS CULTURED IN VITRO
JIANG Jie1, NI Jiang2, ZHU Hui2, LI Qing-lei2, BIAN Shu -ling2
(1.Department of Anesthesiology, the 211th Hospital of PLA, Harbi n 150080;2.Department of Physiology, Harbin Medical University, Harbin 150086)
ABSTRACT
, 百拇医药
Aim: To evaluate the effect of γ-GABA on estradiol secretion and its m echanism by rat granulosa cells cultured in vitro.Methods: T he i mmature female rats were killed after 48 h pretreated with PMSG.Their ovaries we re taken out and granulosa cells were obtained by puncturing the follicles. Gran ulosa cells were cultured in KRBGAL for 1 h and treated with reagents for a furt her 2 h. The production of estradiol was assayed by RIA. Results: γ-GABA inhibited estradiol secretion and also inhibited hCG-induced estra diol secretion in cultured rat grallulosa cells. Muscimol (γ-GABA receptor ago nist) also inhibited estradiol secretion and γ-GABA decreased forskolinind uced estradiol secretion in culturd rat granulosa cells. Conclusion: γ-GABA inhibited estradiol secretion in cultured rat granulosa cells. The effect of γ-GABA may be mediated by γ-GABA receptor and adenylate-cAMP mess enger system.
, 百拇医药
KEY WORDS: γ-GABA; granulosa cell; estradiol
γ-氨基丁酸(γ-GABA)是一种抑制性神经递质。γ-GABA通过调节下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)的合成和释放，间接影响卵巢功能[1]。γ-GABA不仅存在于中枢 神经系统，也广泛存在于外周组织。大多数组织中γ-GABA含量低于脑组织γ-GABA含量的 1%，然而在大鼠的卵巢、输卵管，与大脑γ-GABA含量相比，含有高浓度的γ-GABA [2]，并且在输卵管中测到γ-GABA合成酶和分解酶活性[3]。Erdo[4] 观察到给大鼠卵巢表面灌注γ-GABA能使雌二醇(E2)产量增加，孕酮生成减少。我们选 用大鼠离体培养颗粒细胞模型，观察外源性γ-GABA对其E2生成的影响并对其作用机制 进行探讨。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 试剂
孕马血清促性腺激素(PMSG)(天津实验动物中心产品)；γ-氨基丁酸(γ-GABA)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、γ-GABA受体激动剂蝇覃醇(muscimol)、腺苷酸环化酶激动剂 fo rskolin、蛋白质合成抑制剂放线菌酮(Cycloheximaide)(美国 Sigma公司产品)；E2放射 免疫测定药盒(上海生物制品研究所产品);0.1%牛血清白蛋白葡聚糖-Krebs-Ringer碳酸 缓冲液(KRBGAL)(本实验室自己配制)。
1.2 大鼠颗粒细胞悬液的制备及培养
选用28～30 d龄健康雌性Wistar大白鼠，皮下注射PMSG 100U/只，48 h后断头处死动 物，取出双侧卵巢可见卵巢表面有多个囊状卵泡。用不锈钢针刺破卵泡，用KRBGAL反复冲洗 卵泡，将含颗粒细胞的KRBGAL离心10 min(300xg)，弃上清，向沉积在离心管底的疏松细胞 团中加入KRBGAL，充分混匀即得颗粒细胞悬液。
, 百拇医药
用血细胞计数板记数颗粒细胞，用KRBGAL将其稀释至6×105 cells/ml，分装各培 养管，每管0.5 ml，预培养60 min后加入处理因子，使各培养管终体积为1.0 ml，再继续 培养120 min后终止反应。
1.3 统计学处理
实验所得样品按E2放射免疫药盒要求程序进行操作。实验结果采取绝对值表示法，以3×105个颗粒细胞的E2生成量表示。本实验结果批内变异数<10%批间变异数<15%。[ JP3〗数据以均数±标准差(
±s)表示，n＝7-9。以t检验检查 其显著性差异。
2 结果
2.1 γ-GABA对离体大鼠颗粒细胞生成E2的影响
, http://www.100md.com
不同浓度的γ-GABA均抑制大鼠颗粒细胞E2生成，以4×10-6mol/L γ-GABA对大鼠颗粒细胞的E2生成作用抑制最强(表1)。
Tab.1 Effect of γ-GABA on E2secretion by rat
granulosa cells in vitro(±s) Group
E2(fmol/3×105cells)
Con
342.68±35.98
, 百拇医药
γ-GABA(mol/L)
4×10-8
295.41±20.02* *
4×10-7
282.80±19.01* *
4×10-6
227.71±18.04* *
4×10-5
270.19±25.46* *
, 百拇医药
* * P<0.01, vs con
2.2 γ-GABA对hCG诱导的离体大鼠颗粒细胞生成E2的影响
结果显示4×10-6 mol/L γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的E2生成，10 IU hCG明显促 进 大鼠细胞的E2生成。γ-GABA和hCG共同作用仍促进大鼠颗粒细胞的E2生成，但与hCG组 相比E2生成量减少(P<0.01，表2)。
Tab.2 Effect of γ-GABA on hCG-induced E2 secretion
by rat granulosa cells in vitro(±s) Group
, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
338.54±33.56
γ-GABA
239.32±23.48* *
hCG
461.53±44.08* *
γ-GABA+hCG
380.25±37.8# #
* * P<0.01, vs con;# #P<0.01,vs hCG
, 百拇医药
2.3 γ-GABA在蝇覃醇作用下对离体大鼠颗粒细胞生成E2的 影响
结果表明4×10-6 mol/L γ-GABA和4×10-6 mol/L蝇覃醇单独作用均明显抑 制大鼠颗粒细胞的E2生成，(P<0.01)。γ-GABA和蝇覃醇共同作用仍抑制大鼠颗粒细 胞的E2生成，与γ-GABA组相同(表3)。
Tab.3 Effect of γ-GABA and muscimol on E2 secretion
by rat granulosa cells in vitro(±s)
Group
, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
338.56±19.16
Muscimol
263.96±18.54* *
γ-GABA
252.63±6.90* *
γ-GABA+Muscimol
247.65±14.58* *
* * P<0.01, vs con
, 百拇医药
2.4 γ-GABA在放线菌酮作用下对离体大鼠颗粒细胞生成E2 的影响
结果表明4×10-6 mol/L γ-GABA和50 μg放线菌酮单独作用均抑制大鼠颗粒细胞的 E2生成，γ-GABA和放线菌酮共同作用仍抑制大鼠颗粒细胞的E2生成，与γ-GABA组相 同(表4)。
Tab.4 Effect of γ-GABA and cycloheximaide on E2 secre tion
by rat granulosa cells in vitro(±s)
Group
, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
322.74±32.17
γ-GABA
238.71±18.04* *
cycloheximaide
242.37±18.75* *
γ-GABA+cycloheximaide
246.65±9.83
* * P<0.01, vs con
, 百拇医药
2.5 γ-GABA在forskolin作用下对离体大鼠颗粒细胞生成E2 的影响
4×10-6 mol/L γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的E2生成，1×10-3 mol/L fors kolin促进大鼠颗粒细胞的E2生成。γ-GABA可抑制forskolin对大鼠颗粒细胞的E2生成 作用，与forskolin组相比，P<0.01(表5)。
Tab.5 Effect of γ-GABA and forskolin on E2 secretion
by rat granulosa cells in vitro(±s) Group
, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
314.32±31.39
γ-GABA
227.71±16.46* *
forskolin
460.79±45.92* *
γ-GABA+forskolin
367.08±35.92# #
* * P<0.01, vs con; # #P<0.01, vs forskolin
, 百拇医药
3 讨论
实验结果表明γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的E2生成。Shaeffer等人[5]用 3H蝇覃醇作为放射性配体检测，发现卵巢有γ-GABA结合位点，特别是颗粒细胞上富含有特 异的、高亲和力的γ-GABA结合位点。本实验结果证实蝇覃醇可发挥与γ-GABA相同的作用 ，抑制大鼠颗粒细胞的E2生成。γ-GABA和蝇覃醇共同作用仍抑制大鼠颗粒细胞的E2生 成。推测颗粒细胞上可能有γ-GABA受体，γ-GABA通过颗粒细胞膜上的γ-GABA受体介导 的途径影响E2的生成。本文结果与Erdo报道[4]有不同之处，两者选用的细胞模 型不同，Erdo用的是假孕大鼠，在体条件下每只动物卵巢表面局部给予超大剂量的γ-GABA ，导致出现此结果。
众所周知，颗粒细胞上存在着黄体生成素和卵泡刺激素受体，本文实验结果表明,hCG促 进大鼠颗粒细胞的E2生成，γ-GABA减少 hCG诱导的颗粒细胞E2生成，提示γ-GABA和 hCG与相应受体相互作用时可能相互影响。有研究报道,cAMP参与卵巢功能的调节[6] ，腺苷酸环化酶激动剂Forskolin能影响黄体细胞孕酮的分泌[7]。为了探讨γ- GABA对颗粒细胞E2生成的影响是否通过cAMP系统，我们选用腺苷酸环化酶激动剂forskoli n来增加内源性cAMP生成。结果表明，forskolin促进颗粒细胞E2生成。γ-GABA减少fors kolin作用下的颗粒细胞E2生成，提示γ-GABA对颗粒细胞E2生成的影响与腺苷酸环化 酶系统有关。有人报道蟾促黑素细胞γ-GABA受体的作用是双向的，通过cAMP升高刺激促黑 激素释放，又可通过氯离子通道的开放抑制促黑激素合成[8]。本文结果表明γ- GABA对颗粒细胞生成E2效应也是双向的，是否也反映颗粒细胞上γ-GABA受体由腺苷酸环 化酶及氯离子通道介导的两种不同机制?还有待进一步研究。
, http://www.100md.com
我们同时观察到蛋白质合成抑制剂放线菌酮单独作用时,可抑制大鼠颗粒细胞的 E2生成。γ-GABA在放线菌酮影响下与γ-GABA单独作用相比，对颗粒细胞E2生成无显著差 异,γ-GABA对颗粒细胞E2生成的影响是否与蛋白质有关，还有待进一步研究。Lorsignol 等人报道γ-GABA可使催乳细胞内Ca2+水平升高，γ-GABA受体激动剂muscimol也有 同样作用[9]。在颗粒细胞中γ-GABA对E2生成影响是否也通过Ca2+参与 ，还有待于进一步研究。
作者简介：姜杰(1970-)，女，黑龙江富裕人，主治医师，硕士，曾从事生殖生理研究。
参考文献
[1] Mitsushima D, Hei D L,Terasawa E. γ-aminobutyric acid is an inhib i tory neurotransmitter restricting the release of luteinizing hormone-releasing hormone before the onset of puberty[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1994,91:39 5-399.
, 百拇医药
[2] Erdo S L, Rosdy B, Szporny L. Higher GABA concentrations in Fallopiantube than in brain of the rat[J]. J Neurochem, 1982,38:1174-1176.
[3] Martin D R. γ-aminobutyric acid system in rat oviduct[J]. J Biol Che m, 1981,256:9816-9829.
[4] Erdo S L, Varga B,Horrath E. Effect of local GABA administration on rat ov arian blood flow and on progesterone and estradiol secretion[J]. Eur J Pharm acol,1985,111:397-400.
, 百拇医药
[5] Schaeffer J M, Hsueh A J W. Identification of γ-aminobutyric acid and its binding sites in the rat ovary[J]. Life Sci, 1982,30:1599-1604.
[6] Grazul-Bilska A T, Reynolds L P, Kirsch JD, et al. Gap junctional int ercellular communication of bovine luteal cells from several stages of the estro us cycle: effects of cyclic adenosine 3',5'-monophosphate[J]. Biol Reprod ,1996,54(3):538-545.
[7] Feng S M, Almond G W. Effects of L H, prostaglandin E2, 8-bromo-cyclic AMP and forskolin on progesterone secretion by pig luteal cells[J]. J Reprod Fertil, 1998,113(1):83-89.
, 百拇医药
[8] Verburg-Van Kemenade B M, Jenks B J, Houben A J. Regulation of cyclic-A MP synthesis in amphibian mela-notrope cells through catecholamine and GABA receptors[J]. Life Sci, 1987,40:1859-1867.
[9] Lorsignol A, Taupignon A,Dufy B. Short application of raminobutyric a ci d increase intracellular calcium concentration in single identified rat lactotr ophs[J]. Neuroendocrinology, 1994,60:389-399.
收稿日期：1999-11-08；修回日期：2000-04-29, http://www.100md.com
单位：哈尔滨医科大学生理教研室，哈尔滨 150086)
关键词：γ-氨基丁酸(γ-GABA)；颗粒细胞；雌二醇
中国应用生理学杂志000321摘要 目的和方法:实验采用离体培养大鼠颗粒细胞的方法，观察外源性γ-GABA对其 雌二醇生成影响。为进一步探讨其作用机制，还观察在γ-GABA受体激动剂蝇覃醇、蛋白质 合成抑制剂放线菌酮、腺苷酸环化酶激动剂 forskolin作用下，γ-GABA对颗粒细胞生成雌 二醇的影响。结果：γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的雌二醇生成，蝇覃醇有同 样作用。γ-GABA减少forskolin作用下的大鼠颗粒细胞的雌二醇生成。结论： γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞雌二醇的生成，可能是通过γ-GABA受体的途径，且与细胞内腺 苷酸环化酶系统有关。
中图分类号： R335.5文献标识码：A文章编号：1000-6834(2000)03-0272-03
, 百拇医药
EFFECT OF γ-GABA ON ESTRADIOL PRODUCTION AND ITS MECHANISM BY RAT GRANULOSA CELLS CULTURED IN VITRO
JIANG Jie1, NI Jiang2, ZHU Hui2, LI Qing-lei2, BIAN Shu -ling2
(1.Department of Anesthesiology, the 211th Hospital of PLA, Harbi n 150080;2.Department of Physiology, Harbin Medical University, Harbin 150086)
ABSTRACT
, 百拇医药
Aim: To evaluate the effect of γ-GABA on estradiol secretion and its m echanism by rat granulosa cells cultured in vitro.Methods: T he i mmature female rats were killed after 48 h pretreated with PMSG.Their ovaries we re taken out and granulosa cells were obtained by puncturing the follicles. Gran ulosa cells were cultured in KRBGAL for 1 h and treated with reagents for a furt her 2 h. The production of estradiol was assayed by RIA. Results: γ-GABA inhibited estradiol secretion and also inhibited hCG-induced estra diol secretion in cultured rat grallulosa cells. Muscimol (γ-GABA receptor ago nist) also inhibited estradiol secretion and γ-GABA decreased forskolinind uced estradiol secretion in culturd rat granulosa cells. Conclusion: γ-GABA inhibited estradiol secretion in cultured rat granulosa cells. The effect of γ-GABA may be mediated by γ-GABA receptor and adenylate-cAMP mess enger system.
, 百拇医药
KEY WORDS: γ-GABA; granulosa cell; estradiol
γ-氨基丁酸(γ-GABA)是一种抑制性神经递质。γ-GABA通过调节下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)的合成和释放，间接影响卵巢功能[1]。γ-GABA不仅存在于中枢 神经系统，也广泛存在于外周组织。大多数组织中γ-GABA含量低于脑组织γ-GABA含量的 1%，然而在大鼠的卵巢、输卵管，与大脑γ-GABA含量相比，含有高浓度的γ-GABA [2]，并且在输卵管中测到γ-GABA合成酶和分解酶活性[3]。Erdo[4] 观察到给大鼠卵巢表面灌注γ-GABA能使雌二醇(E2)产量增加，孕酮生成减少。我们选 用大鼠离体培养颗粒细胞模型，观察外源性γ-GABA对其E2生成的影响并对其作用机制 进行探讨。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 试剂
孕马血清促性腺激素(PMSG)(天津实验动物中心产品)；γ-氨基丁酸(γ-GABA)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、γ-GABA受体激动剂蝇覃醇(muscimol)、腺苷酸环化酶激动剂 fo rskolin、蛋白质合成抑制剂放线菌酮(Cycloheximaide)(美国 Sigma公司产品)；E2放射 免疫测定药盒(上海生物制品研究所产品);0.1%牛血清白蛋白葡聚糖-Krebs-Ringer碳酸 缓冲液(KRBGAL)(本实验室自己配制)。
1.2 大鼠颗粒细胞悬液的制备及培养
选用28～30 d龄健康雌性Wistar大白鼠，皮下注射PMSG 100U/只，48 h后断头处死动 物，取出双侧卵巢可见卵巢表面有多个囊状卵泡。用不锈钢针刺破卵泡，用KRBGAL反复冲洗 卵泡，将含颗粒细胞的KRBGAL离心10 min(300xg)，弃上清，向沉积在离心管底的疏松细胞 团中加入KRBGAL，充分混匀即得颗粒细胞悬液。
, 百拇医药
用血细胞计数板记数颗粒细胞，用KRBGAL将其稀释至6×105 cells/ml，分装各培 养管，每管0.5 ml，预培养60 min后加入处理因子，使各培养管终体积为1.0 ml，再继续 培养120 min后终止反应。
1.3 统计学处理
实验所得样品按E2放射免疫药盒要求程序进行操作。实验结果采取绝对值表示法，以3×105个颗粒细胞的E2生成量表示。本实验结果批内变异数<10%批间变异数<15%。[ JP3〗数据以均数±标准差(
±s)表示，n＝7-9。以t检验检查 其显著性差异。2 结果
2.1 γ-GABA对离体大鼠颗粒细胞生成E2的影响
, http://www.100md.com
不同浓度的γ-GABA均抑制大鼠颗粒细胞E2生成，以4×10-6mol/L γ-GABA对大鼠颗粒细胞的E2生成作用抑制最强(表1)。
Tab.1 Effect of γ-GABA on E2secretion by rat
granulosa cells in vitro(
±s) GroupE2(fmol/3×105cells)
Con
342.68±35.98
, 百拇医药
γ-GABA(mol/L)
4×10-8
295.41±20.02* *
4×10-7
282.80±19.01* *
4×10-6
227.71±18.04* *
4×10-5
270.19±25.46* *
, 百拇医药
* * P<0.01, vs con
2.2 γ-GABA对hCG诱导的离体大鼠颗粒细胞生成E2的影响
结果显示4×10-6 mol/L γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的E2生成，10 IU hCG明显促 进 大鼠细胞的E2生成。γ-GABA和hCG共同作用仍促进大鼠颗粒细胞的E2生成，但与hCG组 相比E2生成量减少(P<0.01，表2)。
Tab.2 Effect of γ-GABA on hCG-induced E2 secretion
by rat granulosa cells in vitro(
±s) Group, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
338.54±33.56
γ-GABA
239.32±23.48* *
hCG
461.53±44.08* *
γ-GABA+hCG
380.25±37.8# #
* * P<0.01, vs con;# #P<0.01,vs hCG
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2.3 γ-GABA在蝇覃醇作用下对离体大鼠颗粒细胞生成E2的 影响
结果表明4×10-6 mol/L γ-GABA和4×10-6 mol/L蝇覃醇单独作用均明显抑 制大鼠颗粒细胞的E2生成，(P<0.01)。γ-GABA和蝇覃醇共同作用仍抑制大鼠颗粒细 胞的E2生成，与γ-GABA组相同(表3)。
Tab.3 Effect of γ-GABA and muscimol on E2 secretion
by rat granulosa cells in vitro(
±s)Group
, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
338.56±19.16
Muscimol
263.96±18.54* *
γ-GABA
252.63±6.90* *
γ-GABA+Muscimol
247.65±14.58* *
* * P<0.01, vs con
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2.4 γ-GABA在放线菌酮作用下对离体大鼠颗粒细胞生成E2 的影响
结果表明4×10-6 mol/L γ-GABA和50 μg放线菌酮单独作用均抑制大鼠颗粒细胞的 E2生成，γ-GABA和放线菌酮共同作用仍抑制大鼠颗粒细胞的E2生成，与γ-GABA组相 同(表4)。
Tab.4 Effect of γ-GABA and cycloheximaide on E2 secre tion
by rat granulosa cells in vitro(
±s)Group
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E2(fmol/3×105cells)
Con
322.74±32.17
γ-GABA
238.71±18.04* *
cycloheximaide
242.37±18.75* *
γ-GABA+cycloheximaide
246.65±9.83
* * P<0.01, vs con
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2.5 γ-GABA在forskolin作用下对离体大鼠颗粒细胞生成E2 的影响
4×10-6 mol/L γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的E2生成，1×10-3 mol/L fors kolin促进大鼠颗粒细胞的E2生成。γ-GABA可抑制forskolin对大鼠颗粒细胞的E2生成 作用，与forskolin组相比，P<0.01(表5)。
Tab.5 Effect of γ-GABA and forskolin on E2 secretion
by rat granulosa cells in vitro(
±s) Group, http://www.100md.com
E2(fmol/3×105cells)
Con
314.32±31.39
γ-GABA
227.71±16.46* *
forskolin
460.79±45.92* *
γ-GABA+forskolin
367.08±35.92# #
* * P<0.01, vs con; # #P<0.01, vs forskolin
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3 讨论
实验结果表明γ-GABA抑制大鼠颗粒细胞的E2生成。Shaeffer等人[5]用 3H蝇覃醇作为放射性配体检测，发现卵巢有γ-GABA结合位点，特别是颗粒细胞上富含有特 异的、高亲和力的γ-GABA结合位点。本实验结果证实蝇覃醇可发挥与γ-GABA相同的作用 ，抑制大鼠颗粒细胞的E2生成。γ-GABA和蝇覃醇共同作用仍抑制大鼠颗粒细胞的E2生 成。推测颗粒细胞上可能有γ-GABA受体，γ-GABA通过颗粒细胞膜上的γ-GABA受体介导 的途径影响E2的生成。本文结果与Erdo报道[4]有不同之处，两者选用的细胞模 型不同，Erdo用的是假孕大鼠，在体条件下每只动物卵巢表面局部给予超大剂量的γ-GABA ，导致出现此结果。
众所周知，颗粒细胞上存在着黄体生成素和卵泡刺激素受体，本文实验结果表明,hCG促 进大鼠颗粒细胞的E2生成，γ-GABA减少 hCG诱导的颗粒细胞E2生成，提示γ-GABA和 hCG与相应受体相互作用时可能相互影响。有研究报道,cAMP参与卵巢功能的调节[6] ，腺苷酸环化酶激动剂Forskolin能影响黄体细胞孕酮的分泌[7]。为了探讨γ- GABA对颗粒细胞E2生成的影响是否通过cAMP系统，我们选用腺苷酸环化酶激动剂forskoli n来增加内源性cAMP生成。结果表明，forskolin促进颗粒细胞E2生成。γ-GABA减少fors kolin作用下的颗粒细胞E2生成，提示γ-GABA对颗粒细胞E2生成的影响与腺苷酸环化 酶系统有关。有人报道蟾促黑素细胞γ-GABA受体的作用是双向的，通过cAMP升高刺激促黑 激素释放，又可通过氯离子通道的开放抑制促黑激素合成[8]。本文结果表明γ- GABA对颗粒细胞生成E2效应也是双向的，是否也反映颗粒细胞上γ-GABA受体由腺苷酸环 化酶及氯离子通道介导的两种不同机制?还有待进一步研究。
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我们同时观察到蛋白质合成抑制剂放线菌酮单独作用时,可抑制大鼠颗粒细胞的 E2生成。γ-GABA在放线菌酮影响下与γ-GABA单独作用相比，对颗粒细胞E2生成无显著差 异,γ-GABA对颗粒细胞E2生成的影响是否与蛋白质有关，还有待进一步研究。Lorsignol 等人报道γ-GABA可使催乳细胞内Ca2+水平升高，γ-GABA受体激动剂muscimol也有 同样作用[9]。在颗粒细胞中γ-GABA对E2生成影响是否也通过Ca2+参与 ，还有待于进一步研究。
作者简介：姜杰(1970-)，女，黑龙江富裕人，主治医师，硕士，曾从事生殖生理研究。
参考文献
[1] Mitsushima D, Hei D L,Terasawa E. γ-aminobutyric acid is an inhib i tory neurotransmitter restricting the release of luteinizing hormone-releasing hormone before the onset of puberty[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1994,91:39 5-399.
, 百拇医药
[2] Erdo S L, Rosdy B, Szporny L. Higher GABA concentrations in Fallopiantube than in brain of the rat[J]. J Neurochem, 1982,38:1174-1176.
[3] Martin D R. γ-aminobutyric acid system in rat oviduct[J]. J Biol Che m, 1981,256:9816-9829.
[4] Erdo S L, Varga B,Horrath E. Effect of local GABA administration on rat ov arian blood flow and on progesterone and estradiol secretion[J]. Eur J Pharm acol,1985,111:397-400.
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收稿日期：1999-11-08；修回日期：2000-04-29, http://www.100md.com