CAG证病结合模型的胃粘膜病理和癌基因表达研究
作者：刘晓颖 陈小野 李卫红 邹世洁 安 威
单位：刘晓颖 李卫红 安 威(首都医科大学 北京 100054)；陈小野 邹世洁(中国中医研究院基础理论研究所 北京 100700)
关键词：慢性萎缩性胃炎；肾虚；癌基因
摘 要 目的 探讨慢性萎缩性胃炎 摘 要 目的 探讨慢性萎缩性胃炎(CAG)的胃粘膜病理和癌基因表达的证病相关变化。方法 复制CAG证病结合模型，将脾虚证、肝郁证、肾虚证分别与CAG同时联合造摸，并设立相关组进行对照，观察各组胃粘膜病理及细胞增殖动力学的变化，用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，用原位杂交法检测相关癌基因P53的表达。结果 与正常对照组比较，各实验组胃粘膜有明显萎缩，慢性炎症和一定程度的不典型增生，细胞增殖动力学的改变，PCNA和P53基因呈现不同程度的表达。其中以肾虚CAG组最为严重。结论 CAG可以有不同的辨证类型，其中肾虚证与CAG的病理有更本质的相关性。
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STUDY ON PATHOLOGY OF GASTRIC MUCOSA AND EXPRESSION
OF ONCOGENE IN CAG MODEL WHICH COMBINED WITH
SYNDROME AND DISEASE
Liu Xiaoying1, Chen Xiaoye2, Li Weihong1, Zhou Shijie2, An Wei1
(1.Capital University of Medical Science, Beijing 100054)
(2.Institute of Basic Theory, China Academy of TCM, Beijing 100700)
, 百拇医药
Objective:To explore the correlation changes of syndrome and disease on pathology of gastric mucosa and expression of oncogene in chronic atrophic gastritis (CAG).Methods:The CAG model,which combined with syndrome and disease,were established.The model of insufficiency of the spleen,stagnation of the liver-qi and deficiency of the kidney separately were established with CAG,and correlative group were established as control.Pathological studies of every group were on the gastric mucoasa.The change of dynamics of cell proliferation was detected.Expression of PCNA was detected by immunohistochemical method.Expression of p53 oncogene was detected by in situ hybridization.Results:Compared to the control group,every experimental group had atrophy of gastric mucosa,chronic inflammation,atypical hyperplasia,and the changes of dynamics of cell proliferation.The expression of PCNA and P53 oncogene was higher.Among these groups,the changes in deficiency of the kidey were obvious.Conclusion:There have difference type of differentiation of symptoms and signs in CAG,in which deficiency of the kidney have essential correlation with the pathology of CAG.
, 百拇医药
Key words: Chronic atrophic gastritis,Deficiency of the kidney,Oncogene
中医对慢性萎缩性胃炎(CAG)的认识主要反映在辨证上，肝郁证和脾虚证是CAG的常见伴随证型，依据中医久病“穷必及肾”的原理，脾虚证的进一步发展往往导致肾虚证。因此本实验复制CAG证病结合模型，以图探讨其胃粘膜病理和癌基因表达的证、病相关变化。
材料与方法
1 动物和分组
Wistar雌性大鼠320只，体重198.7±23.7g，北京医科大学实验动物科学部提供，普通级合格证号：〈京动字〉第8910R016号，按体重配对随机分为组：①正常对照组：60只；②单纯CAG组：65只；③脾虚CAG组：65只；④肝郁CAG组：65只；⑤肾虚CAG组：65只。
, 百拇医药
2 造模方法
2.1 CAG造模方法[1] 用胃组织匀浆免疫注射加胆酸饲养法。取同批Wistar大鼠100只，处死后低温下取出胃，生理盐水充分洗涤，尽量去掉胃外膜结缔组织。加适量PBS(pH7.2)，剪碎，匀浆；4℃保存及自身胃蛋白酶消化。再经低温离心取上清液，冷冻干燥后得胃组织粉末16g，备用。动物购回后预养2周，再用0.3%脱氧胆酸钠和0.6%阿斯匹林作饮水，隔周交替自饮至实验结束，在造模第10天和第24天，取30%胃组织生理盐水溶液，与等量完全弗氏佐剂混合，充分乳化后，足跖部皮内注射，0.1 ml/只；第49天取60%胃组织溶液，腹腔注射，0.1 ml/只。造模时间为45周。
2.2 脾虚证造模方法 在实验第6周开始，采用耗气破气加饥饱失常法，取川厚朴、枳实、大黄以3∶3∶2比例，100%煎剂隔日灌胃，3 ml/只，同时隔日喂饲，造模时间为45周。
2.3 肝郁证造模方法 在实验第6周开始，用钳子夹大鼠尾部，使之保持激怒、争斗状态，30分钟/天，同时每3周0.1%肾上腺素腹侧皮下注射2次，0.1ml/只/次，造模时间为45周。
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2.4 肾虚证造模方法 在实验第6周开始，用甲基硫氧嘧啶(MTU)以0.08%浓度加入脱氧胆酸钠溶液或阿斯匹林溶液中自饮，造模时间为45周。
3 各组处置
3.1 正常对照组 正常饲养。
3.2 单纯CAG组 CAG造模。
3.3 脾虚CAG组 CAG造模加脾虚造模。
3.4 肝郁CAG组 CAG造模加肝郁造模。
3.5 肾虚CAG组 CAG造模加肾虚造模。
4 观察方法及检测指标
4.1 胃粘膜病理观察和形态计量
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于实验45周，常规大鼠胃粘膜取材，石腊包埋切片，HE和AB pH2.5PAS染色，光镜观察并用测微尺作形态计量。
4.2 胃粘膜细胞周期变化及DNA指数及增殖指数测定[2]
采用FACS420型流式细胞仪(美国Becton Dickinson公司)测定。
4.3 胃粘膜增殖细胞核抗原PCNA的表达[3]
实验第35周，各组处死10只动物，胃粘膜取材，石蜡包埋切片，采用免疫组化方法(S-P)法，检测PCNA的表达。
4.4 胃粘膜P53基因的表达
采用原位杂交方法[4]。实验45周，取各组大鼠胃组织固定，石蜡切片，做原位杂交。P53探针为RNA探针，终浓度2 mg/L，42℃条件下杂交20小时，最后以0.03% H2O2和0.05% DAB显色。阳性细胞的细胞核显示棕黄色颗粒，以颗粒的深浅及多少，用(-)表示阴性，用(±)(+)(++)分别表示阳性的强度。
, 百拇医药
5 统计学处理
各组实验数据以均值±标准差(
±s)表示，两组间的差异显著性分析用t检验。
结果
1 胃粘膜病理观察和形态计量
胃粘膜病理观察可见，与正常对照组比较，各实验组胃粘膜固有膜纤维组织增生显著，肝郁CAG组较轻；各实验组粘膜下层炎细胞浸润明显；肾虚CAG组主、壁细胞变性明显；小凹上皮异型改变各组均显著加重，脾虚CAG组，特别是肾虚CAG组小凹上皮甚至呈网状。各实验组出现程度不同的肠化改变，肠化部位以幽门粘膜多见。各实验组幽门粘膜与十二指肠粘膜交界处上移，以肾虚CAG组最明显。胃粘膜形态计量见表1。
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表1 各组大鼠胃粘膜形态计量(±s)(n)
分组
正常对照组
单纯CAG组
脾虚CAG组
肝郁CAG组
肾虚CAG组
胃体粘膜固有层厚度(um)
519.42±19.31(14)
, 百拇医药 441.08±17.61 (14)**
443.58±17.48 (15)**
438.38±15.57 (15)**
464.49±15.71 (12)*
胃小凹相对长度
0.187±0.014(14)
0.221±0.016(14)
0.231±0.012(15)*
0.229±0.011(15)*
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0.303±0.020(12)**△△
胃体腺腺底相对厚度
0.286±0.018(14)
0.228±0.019(14)*
0.221±0.021(15)*
0.328±0.018(15)
0.190±0.020(12)**
胃体粘膜核分裂相频数(个/视野)
0(14)
0.045±0.031(13)**
, 百拇医药
0.532±0.256(13)**
0.090±0.066(12)**
0.861±0.324(12)**△
幽门粘膜核分裂相频数(个/视野)
0.523±0.134(12)
1.196±0.165(11)**
2.492±0.365(12)**△△
2.250±0.443(6)**△
2.063±0.484(8)*
, 百拇医药
注：与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01； 与单纯CAG组比较：△P<0.05，△△P<0.01。
如表1所示，与正常对照组比较，各实验组胃体粘膜固有层厚度减少(P<0.01或P<0.05)。胃小凹相对长度增加(P<0.05)，胃体腺腺底相对厚度减少(P<0.05或P<0.01)；胃体与幽门粘膜核分裂相频数增加(P<0.01或P<0.05)。综合上述几项，肾虚CAG组改变最为明显。与单纯CAG组比较，肾虚CAG组胃小凹相对长度明显增加(P<0.01)，胃体粘膜核分裂相频数增加(P<0.05)。
2 胃粘膜细胞周期变化及DNA指数和增殖指数比较(见表2)
表2 各组胃粘膜细胞增殖动力学变化(±s)
, 百拇医药
分组
n
G1期(%)
S期(%)
G2/M期
PI值(%)
DI值异常率(异/总)
正常对照组
6
79.00±1.53
7.33±1.84
13.83±1.49
, 百拇医药 21.17±1.58
单纯CAG组
6
54.33±9.26
32.67±9.79
13.17±1.38
45.83±9.48
4/6
脾虚CAG组
6
60.67±13.25
, 百拇医药
27.67±13.76
11.33±1.56
39.00±13.39
3/6
肝郁CAG组
6
74.00±7.67
16.17±7.64
10.33±1.28
26.50±7.69
3/6
肾虚CAG组
, 百拇医药
4
68.75±6.65
21.00±6.38
10.25±1.80
31.25±6.65
4/4
注：与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01。
如表2所示，与正常对照组比较，各实验组DI值异常率增高。单纯CAG组、G1期细胞所占比例下降(P<0.05)，S期细胞所占比例上升(P<0.05)，PI值上升(P<0.05)。肾虚CAG组、S期细胞所占比例上升，DI值异常率增高明显。
, 百拇医药 3 胃粘膜PCNA的表达(见表3)
表3 各组胃粘膜PCNA表达(n)
分 组
-
+
++
正常对照组
6
2
2
单纯CAG组
8
1
, 百拇医药
1
脾虚CAG组
5
0
3
肝郁CAG组
7
0
3
肾虚CAG组
3
3
4
如表3所示，实验35周，与正常对照组比较，肾虚CAG组PCNA有较强阳性表达，而其他各实验组无明显变化。
, 百拇医药
4 胃粘膜P53基因的表达
P53基因在胃粘膜的表达，正常对照组为(-)；单纯CAG组为(+)；脾虚CAG组为(++)；肝郁CAG组为(+)；肾虚CAG组为(++)(依次见图1、2、3、4、5)。
图1
图2
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图3
图4
图5
讨论
1 本实验表明，与正常对照组比较，各实验组胃粘膜有明显萎缩、慢性炎症和一定程度的不典型增生，细胞增殖动力学方面的改变，以及胃粘膜PCNA和P53基因呈现不同程度的表达。各组之间有一定的差异，以肾虚CAG组改变最为严重。本实验建立CAG证病结合模型，在动物模型上进行脾虚证、肝郁证、肾虚证与胃粘膜癌基因异常表达关系的研究，从癌基因角度初步地揭示了肾虚证在CAG病变中的重要地位，有利于指导临床对CAG的微观辨证。脾虚在CAG病变中的地位见作者本刊另文。
, 百拇医药
2 设肾虚CAG模型的论证 作者依据中医久病“穷必及肾”的原理，CAG的反重演律本质，肺、脾、肾虚证在证候实质研究中所揭示的演化规律，以及局部辨证与整体辨证的关系，认为肾虚是CAG更为本质的病理。本实验首次建立肾阳虚证CAG模型，以胃粘膜病理为中心观察其改变。甲状腺功能减退是肾阳虚证的一个重要病理，甲减与肾上腺皮质功能减退、性腺功能减退等肾阳虚证的其他重要病理有一定的相关性。因此，甲减模型是理想的肾阳虚证模型之一。甲状腺激素有促进细胞分化的作用，而CAG的主要病理特征是细胞分化不足[5]，肾虚证也与细胞代偿功能衰竭、组织和细胞幼稚化有关。所以，甲减模型与肾虚证、CAG有良好的本质相关性。即使不从证候角度来说，甲减也应可作为CAG造模的一种有用因素。
作者简介：刘晓颖，女，25岁，助教，首都医科大学细胞室。研究方向：肿瘤的生物治疗。地址：北京市右安门外西头条10号，邮编：100054，电话：63051471。
*国家自然科学基金资助项目(No.39370864)
, 百拇医药
参考文献
[1] 陈小野，等.大鼠脾虚型萎缩性胃炎模型的实验研究.中医基础与实验研究.第1版，北京：中医古籍出版社，1993.
[2] 李勇，丛庆文，马志学，等.胃癌及其癌前期病变的流式细胞光度分析.实用肿瘤学杂志 1991；5：16
[3] He-XB,Muguruma-N，et al.Expression of proliferating cells nuclear antigen(PCNA)in biopsy and autopsy specimens of gastric carcinomal.J-Med-Invest,1998；44(3～4):149～53
[4] Hao-Y,et al.Abnormal change of p53 gene in gastric and precancerous lesions and APC gene deletion in gastric carcinoma and near tissues.J-Tongji-Med-Univ,1997；17(2):75～78
[5] 陈小野.中医药学实验研究中最佳实验动物模型的选择.实验动物科学与管理，1996；13：80～94, 百拇医药
单位：刘晓颖 李卫红 安 威(首都医科大学 北京 100054)；陈小野 邹世洁(中国中医研究院基础理论研究所 北京 100700)
关键词：慢性萎缩性胃炎；肾虚；癌基因
摘 要 目的 探讨慢性萎缩性胃炎 摘 要 目的 探讨慢性萎缩性胃炎(CAG)的胃粘膜病理和癌基因表达的证病相关变化。方法 复制CAG证病结合模型，将脾虚证、肝郁证、肾虚证分别与CAG同时联合造摸，并设立相关组进行对照，观察各组胃粘膜病理及细胞增殖动力学的变化，用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，用原位杂交法检测相关癌基因P53的表达。结果 与正常对照组比较，各实验组胃粘膜有明显萎缩，慢性炎症和一定程度的不典型增生，细胞增殖动力学的改变，PCNA和P53基因呈现不同程度的表达。其中以肾虚CAG组最为严重。结论 CAG可以有不同的辨证类型，其中肾虚证与CAG的病理有更本质的相关性。
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STUDY ON PATHOLOGY OF GASTRIC MUCOSA AND EXPRESSION
OF ONCOGENE IN CAG MODEL WHICH COMBINED WITH
SYNDROME AND DISEASE
Liu Xiaoying1, Chen Xiaoye2, Li Weihong1, Zhou Shijie2, An Wei1
(1.Capital University of Medical Science, Beijing 100054)
(2.Institute of Basic Theory, China Academy of TCM, Beijing 100700)
, 百拇医药
Objective:To explore the correlation changes of syndrome and disease on pathology of gastric mucosa and expression of oncogene in chronic atrophic gastritis (CAG).Methods:The CAG model,which combined with syndrome and disease,were established.The model of insufficiency of the spleen,stagnation of the liver-qi and deficiency of the kidney separately were established with CAG,and correlative group were established as control.Pathological studies of every group were on the gastric mucoasa.The change of dynamics of cell proliferation was detected.Expression of PCNA was detected by immunohistochemical method.Expression of p53 oncogene was detected by in situ hybridization.Results:Compared to the control group,every experimental group had atrophy of gastric mucosa,chronic inflammation,atypical hyperplasia,and the changes of dynamics of cell proliferation.The expression of PCNA and P53 oncogene was higher.Among these groups,the changes in deficiency of the kidey were obvious.Conclusion:There have difference type of differentiation of symptoms and signs in CAG,in which deficiency of the kidney have essential correlation with the pathology of CAG.
, 百拇医药
Key words: Chronic atrophic gastritis,Deficiency of the kidney,Oncogene
中医对慢性萎缩性胃炎(CAG)的认识主要反映在辨证上，肝郁证和脾虚证是CAG的常见伴随证型，依据中医久病“穷必及肾”的原理，脾虚证的进一步发展往往导致肾虚证。因此本实验复制CAG证病结合模型，以图探讨其胃粘膜病理和癌基因表达的证、病相关变化。
材料与方法
1 动物和分组
Wistar雌性大鼠320只，体重198.7±23.7g，北京医科大学实验动物科学部提供，普通级合格证号：〈京动字〉第8910R016号，按体重配对随机分为组：①正常对照组：60只；②单纯CAG组：65只；③脾虚CAG组：65只；④肝郁CAG组：65只；⑤肾虚CAG组：65只。
, 百拇医药
2 造模方法
2.1 CAG造模方法[1] 用胃组织匀浆免疫注射加胆酸饲养法。取同批Wistar大鼠100只，处死后低温下取出胃，生理盐水充分洗涤，尽量去掉胃外膜结缔组织。加适量PBS(pH7.2)，剪碎，匀浆；4℃保存及自身胃蛋白酶消化。再经低温离心取上清液，冷冻干燥后得胃组织粉末16g，备用。动物购回后预养2周，再用0.3%脱氧胆酸钠和0.6%阿斯匹林作饮水，隔周交替自饮至实验结束，在造模第10天和第24天，取30%胃组织生理盐水溶液，与等量完全弗氏佐剂混合，充分乳化后，足跖部皮内注射，0.1 ml/只；第49天取60%胃组织溶液，腹腔注射，0.1 ml/只。造模时间为45周。
2.2 脾虚证造模方法 在实验第6周开始，采用耗气破气加饥饱失常法，取川厚朴、枳实、大黄以3∶3∶2比例，100%煎剂隔日灌胃，3 ml/只，同时隔日喂饲，造模时间为45周。
2.3 肝郁证造模方法 在实验第6周开始，用钳子夹大鼠尾部，使之保持激怒、争斗状态，30分钟/天，同时每3周0.1%肾上腺素腹侧皮下注射2次，0.1ml/只/次，造模时间为45周。
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2.4 肾虚证造模方法 在实验第6周开始，用甲基硫氧嘧啶(MTU)以0.08%浓度加入脱氧胆酸钠溶液或阿斯匹林溶液中自饮，造模时间为45周。
3 各组处置
3.1 正常对照组 正常饲养。
3.2 单纯CAG组 CAG造模。
3.3 脾虚CAG组 CAG造模加脾虚造模。
3.4 肝郁CAG组 CAG造模加肝郁造模。
3.5 肾虚CAG组 CAG造模加肾虚造模。
4 观察方法及检测指标
4.1 胃粘膜病理观察和形态计量
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于实验45周，常规大鼠胃粘膜取材，石腊包埋切片，HE和AB pH2.5PAS染色，光镜观察并用测微尺作形态计量。
4.2 胃粘膜细胞周期变化及DNA指数及增殖指数测定[2]
采用FACS420型流式细胞仪(美国Becton Dickinson公司)测定。
4.3 胃粘膜增殖细胞核抗原PCNA的表达[3]
实验第35周，各组处死10只动物，胃粘膜取材，石蜡包埋切片，采用免疫组化方法(S-P)法，检测PCNA的表达。
4.4 胃粘膜P53基因的表达
采用原位杂交方法[4]。实验45周，取各组大鼠胃组织固定，石蜡切片，做原位杂交。P53探针为RNA探针，终浓度2 mg/L，42℃条件下杂交20小时，最后以0.03% H2O2和0.05% DAB显色。阳性细胞的细胞核显示棕黄色颗粒，以颗粒的深浅及多少，用(-)表示阴性，用(±)(+)(++)分别表示阳性的强度。
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5 统计学处理
各组实验数据以均值±标准差(
±s)表示，两组间的差异显著性分析用t检验。结果
1 胃粘膜病理观察和形态计量
胃粘膜病理观察可见，与正常对照组比较，各实验组胃粘膜固有膜纤维组织增生显著，肝郁CAG组较轻；各实验组粘膜下层炎细胞浸润明显；肾虚CAG组主、壁细胞变性明显；小凹上皮异型改变各组均显著加重，脾虚CAG组，特别是肾虚CAG组小凹上皮甚至呈网状。各实验组出现程度不同的肠化改变，肠化部位以幽门粘膜多见。各实验组幽门粘膜与十二指肠粘膜交界处上移，以肾虚CAG组最明显。胃粘膜形态计量见表1。
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表1 各组大鼠胃粘膜形态计量(
±s)(n)分组
正常对照组
单纯CAG组
脾虚CAG组
肝郁CAG组
肾虚CAG组
胃体粘膜固有层厚度(um)
519.42±19.31(14)
, 百拇医药 441.08±17.61 (14)**
443.58±17.48 (15)**
438.38±15.57 (15)**
464.49±15.71 (12)*
胃小凹相对长度
0.187±0.014(14)
0.221±0.016(14)
0.231±0.012(15)*
0.229±0.011(15)*
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0.303±0.020(12)**△△
胃体腺腺底相对厚度
0.286±0.018(14)
0.228±0.019(14)*
0.221±0.021(15)*
0.328±0.018(15)
0.190±0.020(12)**
胃体粘膜核分裂相频数(个/视野)
0(14)
0.045±0.031(13)**
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0.532±0.256(13)**
0.090±0.066(12)**
0.861±0.324(12)**△
幽门粘膜核分裂相频数(个/视野)
0.523±0.134(12)
1.196±0.165(11)**
2.492±0.365(12)**△△
2.250±0.443(6)**△
2.063±0.484(8)*
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注：与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01； 与单纯CAG组比较：△P<0.05，△△P<0.01。
如表1所示，与正常对照组比较，各实验组胃体粘膜固有层厚度减少(P<0.01或P<0.05)。胃小凹相对长度增加(P<0.05)，胃体腺腺底相对厚度减少(P<0.05或P<0.01)；胃体与幽门粘膜核分裂相频数增加(P<0.01或P<0.05)。综合上述几项，肾虚CAG组改变最为明显。与单纯CAG组比较，肾虚CAG组胃小凹相对长度明显增加(P<0.01)，胃体粘膜核分裂相频数增加(P<0.05)。
2 胃粘膜细胞周期变化及DNA指数和增殖指数比较(见表2)
表2 各组胃粘膜细胞增殖动力学变化(
±s), 百拇医药
分组
n
G1期(%)
S期(%)
G2/M期
PI值(%)
DI值异常率(异/总)
正常对照组
6
79.00±1.53
7.33±1.84
13.83±1.49
, 百拇医药 21.17±1.58
单纯CAG组
6
54.33±9.26
32.67±9.79
13.17±1.38
45.83±9.48
4/6
脾虚CAG组
6
60.67±13.25
, 百拇医药
27.67±13.76
11.33±1.56
39.00±13.39
3/6
肝郁CAG组
6
74.00±7.67
16.17±7.64
10.33±1.28
26.50±7.69
3/6
肾虚CAG组
, 百拇医药
4
68.75±6.65
21.00±6.38
10.25±1.80
31.25±6.65
4/4
注：与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01。
如表2所示，与正常对照组比较，各实验组DI值异常率增高。单纯CAG组、G1期细胞所占比例下降(P<0.05)，S期细胞所占比例上升(P<0.05)，PI值上升(P<0.05)。肾虚CAG组、S期细胞所占比例上升，DI值异常率增高明显。
, 百拇医药 3 胃粘膜PCNA的表达(见表3)
表3 各组胃粘膜PCNA表达(n)
分 组
-
+
++
正常对照组
6
2
2
单纯CAG组
8
1
, 百拇医药
1
脾虚CAG组
5
0
3
肝郁CAG组
7
0
3
肾虚CAG组
3
3
4
如表3所示，实验35周，与正常对照组比较，肾虚CAG组PCNA有较强阳性表达，而其他各实验组无明显变化。
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4 胃粘膜P53基因的表达
P53基因在胃粘膜的表达，正常对照组为(-)；单纯CAG组为(+)；脾虚CAG组为(++)；肝郁CAG组为(+)；肾虚CAG组为(++)(依次见图1、2、3、4、5)。
图1
图2
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图3
图4
图5
讨论
1 本实验表明，与正常对照组比较，各实验组胃粘膜有明显萎缩、慢性炎症和一定程度的不典型增生，细胞增殖动力学方面的改变，以及胃粘膜PCNA和P53基因呈现不同程度的表达。各组之间有一定的差异，以肾虚CAG组改变最为严重。本实验建立CAG证病结合模型，在动物模型上进行脾虚证、肝郁证、肾虚证与胃粘膜癌基因异常表达关系的研究，从癌基因角度初步地揭示了肾虚证在CAG病变中的重要地位，有利于指导临床对CAG的微观辨证。脾虚在CAG病变中的地位见作者本刊另文。
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2 设肾虚CAG模型的论证 作者依据中医久病“穷必及肾”的原理，CAG的反重演律本质，肺、脾、肾虚证在证候实质研究中所揭示的演化规律，以及局部辨证与整体辨证的关系，认为肾虚是CAG更为本质的病理。本实验首次建立肾阳虚证CAG模型，以胃粘膜病理为中心观察其改变。甲状腺功能减退是肾阳虚证的一个重要病理，甲减与肾上腺皮质功能减退、性腺功能减退等肾阳虚证的其他重要病理有一定的相关性。因此，甲减模型是理想的肾阳虚证模型之一。甲状腺激素有促进细胞分化的作用，而CAG的主要病理特征是细胞分化不足[5]，肾虚证也与细胞代偿功能衰竭、组织和细胞幼稚化有关。所以，甲减模型与肾虚证、CAG有良好的本质相关性。即使不从证候角度来说，甲减也应可作为CAG造模的一种有用因素。
作者简介：刘晓颖，女，25岁，助教，首都医科大学细胞室。研究方向：肿瘤的生物治疗。地址：北京市右安门外西头条10号，邮编：100054，电话：63051471。
*国家自然科学基金资助项目(No.39370864)
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参考文献
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[2] 李勇，丛庆文，马志学，等.胃癌及其癌前期病变的流式细胞光度分析.实用肿瘤学杂志 1991；5：16
[3] He-XB,Muguruma-N，et al.Expression of proliferating cells nuclear antigen(PCNA)in biopsy and autopsy specimens of gastric carcinomal.J-Med-Invest,1998；44(3～4):149～53
[4] Hao-Y,et al.Abnormal change of p53 gene in gastric and precancerous lesions and APC gene deletion in gastric carcinoma and near tissues.J-Tongji-Med-Univ,1997；17(2):75～78
[5] 陈小野.中医药学实验研究中最佳实验动物模型的选择.实验动物科学与管理，1996；13：80～94, 百拇医药