计算机程序化的初均速法测定双黄连注射液的稳定性
作者：张振涛 冷江涌 卢春林
单位：张振涛 (呼和浩特 010059 内蒙古医学院化学教研室；冷江涌 卢春林 呼和浩特 010059 内蒙古医学院第一附属医院)
关键词：双黄连注射液；稳定性；初均速法；计算机程序
980331摘要 用计算机程序化的初均速法，测定了双黄连溶液中3种主要成分绿原酸、黄芩甙、连翘甙的活化能及室温贮存期。该方法简便、快速、结果准确。对临床应用有一定价值。
The stability of Shuanghuanglian injection which was
determined by the initial average rate method of
, http://www.100md.com programme-controlled computer
Zhang Zhentao(Zhang ZT),Leng Jiangyong(Leng JY),Lu Chunlin(Lu CL)(Inner Mongolia Medical College,Huhhot 010059)
ABSTRACT The activation energies and shelflives of three ingredients in Shuanghuanglian injection were determined by the initial average rate method of programme-controlled computer.Comparing with published values.the result agreed satisfactorily and the method was simple,convenient and quickly.It had some value for the clinical pharmaceuticals.
, 百拇医药
KEY WORDS Shuanghuanglian injection,stability,initial average rate method,computer
药物稳定性的测定方法，目前主要采用加速实验法[1]，通过测定各加速温度下的浓度变化，用作图法及数值回归分析确定某成分的活化能及贮存期。计算工作繁琐，耗时。双黄连注射液是由金银花、黄芩、连翘等提取物制成的中药复方制剂，由于其成分较多，对其稳定性的测定需要更为复杂的数据处理。本文试图通过计算机程序对初均速法[2]得到的数据进行数值分析，确定各成分的稳定性。
1 试剂与仪器
1.1 试剂：双黄连注射液(哈尔滨中药二厂，批号：960312)；盐酸(国产分析纯)。
1.2 仪器：超级恒温水浴；岛津UV-120-02分光光度计；联想486微机。
, http://www.100md.com
2 方 法
2.1 测定不同加速温度下各成分的吸收值
将双黄连注射液配制成7.5mg/ml溶液，分装于安瓿中，熔封。将安瓿分置于50,54,58,62,66,70和74℃的恒温器中。取样时间分别为10,9,8,7,6,5和4h，取出后立即用冷水终止反应。各吸取0.5ml于100ml量瓶中，用0.2mol/L HCl稀至刻度，分别测定276,277,304,312,324和336nm的吸收值(A)。
2.2 程度化的初均速法
原理：在双黄连注射中，3种有效成分分别为绿原酸(1)、黄芩甙(2)、连翘甙(3)。它们的浓度可按下式计算[3]：
c1=113.58(A304-0.9359A312)+0.0655
, 百拇医药
c2=27.098(A276-1.0017A336)-0.5272
c3=112.47(A277-1.0019A304)-5.0182
通过c可以计算出相应的初均速度V0(V0=
),按初均速，由Arrhenius公式将ln V0对1/T作图，可以计算出各成分的a、b、υ及活化能和室温贮存期。依据上述原理，我们在Visual foxpro下编制程序，程序示意框图如下：程序设置
输入温度T,时间t及相应的吸收值A;A324,A312;A276,A336;A227,A304;计算ΔA;ΔA1=A324-0.9359A312;ΔA2=A276-1.0017A336;ΔA3=A277-1.0019A304计算相应的浓度c1=113.58ΔA1+0.0655;c2=27.098ΔA2-0.5272;c3=112.47ΔA3-5.0182;令T=293,C=C0计算平均速度Voi=
(i=1,2,3)
, http://www.100md.com
lnVoi关于
作回归分析归方程及回归系数；令
计算E1、E2和E3；令T=293,计算
及
(i=1,2,3)结束。
3 结 果
3.1 不同加速温度下各成分的吸收值：结果见表1。
, http://www.100md.com
表1 双黄连溶液在不同温度下的吸收值 温度
(K)
时间
(h)
吸收值(nm)
324
312
276
336
277
304
293
0
, http://www.100md.com
0.504
0.520
0.670
0.396
0.666
0.478
323
10
0.497
0.512
0.668
0.394
0.632
, http://www.100md.com
0.444
327
9
0.483
0.497
0.651
0.377
0.631
0.443
331
8
0.472
0.485
, 百拇医药
0.641
0.367
0.626
0.438
335
7
0.465
0.477
0.630
0.356
0.623
0.435
339
, http://www.100md.com
6
0.464
0.476
0.628
0.354
0.619
0.431
343
5
0.462
0.475
0.626
0.354
, http://www.100md.com
0.617
0.429
347
4
0.460
0.473
0.625
0.351
0.616
0.428
3.2 各成分的活化能及室温贮存期：按表1各组数据输入微机，得到以下结果(见表2)。表2 3种成分的活化能及室温贮存期 成分
, 百拇医药 a
b
ν
活化能
(KJ/mol)
室温贮存期
(年)
绿原酸
29.02
-11979.46
-0.9981
99.60
1.71
, 百拇医药
黄芩甙
18.55
-8818.46
-0.9982
73.28
1.25
连翘甙
19.01
-8917.58
-0.9967
74.59
1.33
4 讨 论
, 百拇医药
50年代开始,Higushi等就开始用化学动力学的原理来评价药物的稳定性。药物的分解，主要的问题是药物浓度对反应速度的影响。通过测定药物分解的速度，了解影响反应速度的各种因素，从而可以采取有效措施，防止或缓解药物的分解。目前药物制剂稳定性的实验方法通常有留样法和加速实验法，加速实验法又分为经典恒温法和线性恒温法。这两种方法的共同特点都是用Arrhenius公式，通过作图及计算，确定反应速度常数及活化能。但药物分解多为复杂反应，反应后期的机理比较复杂，不同温度下的反应级数可能不同。经典恒温法在每个温度取样多次，至反应后期，Arrhenius作图的线性不佳。庞贻慧根据Carstensen[4]提出的药物分解观点，改进和提出了初均速法，即在至少7个加速温度下，测定初始平均速度V0，按Arrhenius指数规律，以V0代替K，推求室温贮存期，这种方法可以大大减少分析工作量。
目前复方药物在不断增加，许多新药，特别是中药制剂，其成份较多，因此在确定各成份稳定性工作时，数值分析和作图，仍需要较大的工作量和时间，且所得结果易产生误差。
, 百拇医药
本文以计算机程序化的初均速法测定了双黄连注射液中绿原酸、黄芩甙、连翘甙的稳定性。在实际操作中，只需把所得到的吸收值数据输入微机，即可在很短的时间内，获得上述3种成份的活化能及室温贮存期。该方法简便快速，其结果准确性亦高[5]。对临床药物检测有一定参考价值。
参考文献
1 Kennon L.Use of models in determining chemical pharmaceutical stability.J Pharm Sci,1964,53∶815.
2 庞贻慧，鲁纯素.药物稳定性预测方法的简化初均速法.药学学报，1982，17(2)∶207.
3 栾正香，谷正兆，翟登奎.系数倍率法测定双黄连注射液中黄芩甙、绿原酸、连翘甙含量.中国中药杂志，1991，16(10)∶602.
4 Carstensen JT.Pharmaceutics of solid and solid desage forms.New York:Wiley,1977∶182.
5 马满玲，朱宝军，贾柏林.双黄连注射液的稳定性实验.中医药学报，1992，6∶50.
收稿日期：1997-05-09, 百拇医药
单位：张振涛 (呼和浩特 010059 内蒙古医学院化学教研室；冷江涌 卢春林 呼和浩特 010059 内蒙古医学院第一附属医院)
关键词：双黄连注射液；稳定性；初均速法；计算机程序
980331摘要 用计算机程序化的初均速法，测定了双黄连溶液中3种主要成分绿原酸、黄芩甙、连翘甙的活化能及室温贮存期。该方法简便、快速、结果准确。对临床应用有一定价值。
The stability of Shuanghuanglian injection which was
determined by the initial average rate method of
, http://www.100md.com programme-controlled computer
Zhang Zhentao(Zhang ZT),Leng Jiangyong(Leng JY),Lu Chunlin(Lu CL)(Inner Mongolia Medical College,Huhhot 010059)
ABSTRACT The activation energies and shelflives of three ingredients in Shuanghuanglian injection were determined by the initial average rate method of programme-controlled computer.Comparing with published values.the result agreed satisfactorily and the method was simple,convenient and quickly.It had some value for the clinical pharmaceuticals.
, 百拇医药
KEY WORDS Shuanghuanglian injection,stability,initial average rate method,computer
药物稳定性的测定方法，目前主要采用加速实验法[1]，通过测定各加速温度下的浓度变化，用作图法及数值回归分析确定某成分的活化能及贮存期。计算工作繁琐，耗时。双黄连注射液是由金银花、黄芩、连翘等提取物制成的中药复方制剂，由于其成分较多，对其稳定性的测定需要更为复杂的数据处理。本文试图通过计算机程序对初均速法[2]得到的数据进行数值分析，确定各成分的稳定性。
1 试剂与仪器
1.1 试剂：双黄连注射液(哈尔滨中药二厂，批号：960312)；盐酸(国产分析纯)。
1.2 仪器：超级恒温水浴；岛津UV-120-02分光光度计；联想486微机。
, http://www.100md.com
2 方 法
2.1 测定不同加速温度下各成分的吸收值
将双黄连注射液配制成7.5mg/ml溶液，分装于安瓿中，熔封。将安瓿分置于50,54,58,62,66,70和74℃的恒温器中。取样时间分别为10,9,8,7,6,5和4h，取出后立即用冷水终止反应。各吸取0.5ml于100ml量瓶中，用0.2mol/L HCl稀至刻度，分别测定276,277,304,312,324和336nm的吸收值(A)。
2.2 程度化的初均速法
原理：在双黄连注射中，3种有效成分分别为绿原酸(1)、黄芩甙(2)、连翘甙(3)。它们的浓度可按下式计算[3]：
c1=113.58(A304-0.9359A312)+0.0655
, 百拇医药
c2=27.098(A276-1.0017A336)-0.5272
c3=112.47(A277-1.0019A304)-5.0182
通过c可以计算出相应的初均速度V0(V0=
),按初均速，由Arrhenius公式将ln V0对1/T作图，可以计算出各成分的a、b、υ及活化能和室温贮存期。依据上述原理，我们在Visual foxpro下编制程序，程序示意框图如下：程序设置输入温度T,时间t及相应的吸收值A;A324,A312;A276,A336;A227,A304;计算ΔA;ΔA1=A324-0.9359A312;ΔA2=A276-1.0017A336;ΔA3=A277-1.0019A304计算相应的浓度c1=113.58ΔA1+0.0655;c2=27.098ΔA2-0.5272;c3=112.47ΔA3-5.0182;令T=293,C=C0计算平均速度Voi=(i=1,2,3), http://www.100md.com
lnVoi关于
作回归分析归方程及回归系数；令计算E1、E2和E3；令T=293,计算及(i=1,2,3)结束。3 结 果
3.1 不同加速温度下各成分的吸收值：结果见表1。
, http://www.100md.com
表1 双黄连溶液在不同温度下的吸收值 温度
(K)
时间
(h)
吸收值(nm)
324
312
276
336
277
304
293
0
, http://www.100md.com
0.504
0.520
0.670
0.396
0.666
0.478
323
10
0.497
0.512
0.668
0.394
0.632
, http://www.100md.com
0.444
327
9
0.483
0.497
0.651
0.377
0.631
0.443
331
8
0.472
0.485
, 百拇医药
0.641
0.367
0.626
0.438
335
7
0.465
0.477
0.630
0.356
0.623
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339
, http://www.100md.com
6
0.464
0.476
0.628
0.354
0.619
0.431
343
5
0.462
0.475
0.626
0.354
, http://www.100md.com
0.617
0.429
347
4
0.460
0.473
0.625
0.351
0.616
0.428
3.2 各成分的活化能及室温贮存期：按表1各组数据输入微机，得到以下结果(见表2)。表2 3种成分的活化能及室温贮存期 成分
, 百拇医药 a
b
ν
活化能
(KJ/mol)
室温贮存期
(年)
绿原酸
29.02
-11979.46
-0.9981
99.60
1.71
, 百拇医药
黄芩甙
18.55
-8818.46
-0.9982
73.28
1.25
连翘甙
19.01
-8917.58
-0.9967
74.59
1.33
4 讨 论
, 百拇医药
50年代开始,Higushi等就开始用化学动力学的原理来评价药物的稳定性。药物的分解，主要的问题是药物浓度对反应速度的影响。通过测定药物分解的速度，了解影响反应速度的各种因素，从而可以采取有效措施，防止或缓解药物的分解。目前药物制剂稳定性的实验方法通常有留样法和加速实验法，加速实验法又分为经典恒温法和线性恒温法。这两种方法的共同特点都是用Arrhenius公式，通过作图及计算，确定反应速度常数及活化能。但药物分解多为复杂反应，反应后期的机理比较复杂，不同温度下的反应级数可能不同。经典恒温法在每个温度取样多次，至反应后期，Arrhenius作图的线性不佳。庞贻慧根据Carstensen[4]提出的药物分解观点，改进和提出了初均速法，即在至少7个加速温度下，测定初始平均速度V0，按Arrhenius指数规律，以V0代替K，推求室温贮存期，这种方法可以大大减少分析工作量。
目前复方药物在不断增加，许多新药，特别是中药制剂，其成份较多，因此在确定各成份稳定性工作时，数值分析和作图，仍需要较大的工作量和时间，且所得结果易产生误差。
, 百拇医药
本文以计算机程序化的初均速法测定了双黄连注射液中绿原酸、黄芩甙、连翘甙的稳定性。在实际操作中，只需把所得到的吸收值数据输入微机，即可在很短的时间内，获得上述3种成份的活化能及室温贮存期。该方法简便快速，其结果准确性亦高[5]。对临床药物检测有一定参考价值。
参考文献
1 Kennon L.Use of models in determining chemical pharmaceutical stability.J Pharm Sci,1964,53∶815.
2 庞贻慧，鲁纯素.药物稳定性预测方法的简化初均速法.药学学报，1982，17(2)∶207.
3 栾正香，谷正兆，翟登奎.系数倍率法测定双黄连注射液中黄芩甙、绿原酸、连翘甙含量.中国中药杂志，1991，16(10)∶602.
4 Carstensen JT.Pharmaceutics of solid and solid desage forms.New York:Wiley,1977∶182.
5 马满玲，朱宝军，贾柏林.双黄连注射液的稳定性实验.中医药学报，1992，6∶50.
收稿日期：1997-05-09, 百拇医药