超促排卵周期中巨噬细胞集落刺激因子的测定
作者：全松 万兰 宋兰林
单位：全松(广州，第一军医大学南方医院妇产科 510515)；宋兰林(广州，第一军医大学南方医院妇产科 510515)；万兰(解放军第四五七医院妇产科)
关键词：巨噬细胞集落刺激因子；囊状滤泡；排卵；受精；胎儿发育
中华妇产科杂志000113 摘 要：目的 探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对卵泡发育、排卵、卵子受精及胚胎质量的影响。方法 用酶联免疫吸附试验方法测定36例超促排卵患者的卵泡早期、卵泡中期和取卵日血清中M-CSF水平,以及取卵日卵泡液中M-CSF水平。结果 超促排卵周期中，血清M-CSF水平呈逐渐升高趋势，取卵日达高峰。取卵日卵泡液M-CSF水平[(1 245.7±43.6)kU/L]显著高于同日血清M-CSF水平[(983.6±29.6)kU/L]。在找到卵子、受精卵及直径≥16 mm和容积≥2 ml的卵泡中，其卵泡液M-CSF水平分别为(1 327.3±42.8)kU/L、(1 356.2±34.7)kU/L和(1 297.6±33.7)kU/L；而未找到卵子、未受精及直径<16 mm和容积<2 ml卵泡的卵泡液M-CSF水平分别为(1 086.7±28.3)kU/L、(1 175.4±37.3)kU/L和(1 038.4±25.9)kU/L，3者间比较，差异均有极显著性(P<0.01，P<0.05，P<0.05)。但是，胚胎分级3～4分的卵泡液M-CSF水平[(1 271.8±37.3)kU/L]与胚胎分级1～2分的卵泡液M-CSF水平[(1 312.6±51.2)kU/L]比较，差异无显著性 (P>0.05)。结论 M-CSF通过参与卵泡发育、成熟而影响卵子受精，但不影响卵裂及胚胎质量。
, 百拇医药
Measurement of Macrophage Colony-stimulating Factor during In-vitro Fertilization and Embryo Transfer Cycles
QUAN Song
(Department of Obstetrics and Gynecology，Nanfang Hospital, The First Military Medical University, Guangzhou 510515,China)
SONG Lanlin
(Department of Obstetrics and Gynecology，Nanfang Hospital, The First Military Medical University, Guangzhou 510515,China)
, http://www.100md.com
WAN Lan
Abstract：Objective To explore the influences of macrophage colony-stimulating factor(M-CSF) on follicle development, ovulation, fertilization and embryo quality during in-vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) cycles.Methods 36 patients underwent 54 cycles of controlled ovarian hyperstimulation by gonadotropin-releasing hormone agonist-human menopausal goudotropin-human chorionic gonadotropin for IVF-ET program. M-CSF concentrations in serum were measured at early follicular phase, mid-follicular phase and the day of oocyte retrieval by enzyme-linked immunosorbent assay. Follicular fluid(FF) on the day of egg retrieval was also measured for M-CSF concentration. Results M-CSF concentration in serum gradually increased throughout ovarian hyperstimulation and reached a peak on the day of oocyte retrieval. M-CSF concentration in FF was significantly higher than that in serum on the same day (P<0.01). The M-CSF concentration in FF from follicles where oocytes could be retrieved, fertilized or with a diameter ≥16 mm, volume ≥2 ml, was significantly higher than those from follicles where oocyte could not be retrieved, fertilized or with a diameter <16 mm, volume <2 ml, respectively (P<0.01). However, there was no significant difference in M-CSF concentration of FF between high and low embryo grade groups (P>0.05). Conclusions M-CSF may play an important role as an intraovarian regulator in the process of follicle development, maturation and ovulation. Therefore, M-CSF may exert an effect on fertilization process but not on the embryo quality.
, 百拇医药
Key words：Macrophage colony-stimulating factor；Graafion follicle； Ovulation； Fertilization；Fetal development▲
卵巢的功能不但受促性腺激素(gonadotropin,Gn)的调节，生长激素及多肽生长因子也对卵泡发育具有重要作用[1,2]。近来发现，卵巢在Gn和卵巢甾体激素调节下产生一些细胞因子，反过来这些细胞因子又可通过旁分泌和自分泌方式调节卵巢功能[3]。本研究中，我们通过测定和分析超促排卵周期中不同时期血清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)水平及取卵日卵泡液中M-CSF水平的变化，探讨M-CSF对卵泡发育、成熟、排卵、受精及胚胎质量的影响。
资料与方法
, 百拇医药 一、研究对象
选择1997年7月至1998年2月间接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕患者36例(54个周期)作为研究对象，去除发生卵巢过度刺激或反应不良的7个周期。平均年龄(31.0±3.6)岁。不孕原因：输卵管因素(32.6%)、男性因素(35.2%)、不明原因(17.7%)、子宫内膜异位症 (7.8%)、抗精子抗体阳性(6.7%)。
二、方法
1.超促排卵治疗：采用固定取卵日超促排卵方案，从上1个月经周期高温相第7 d开始应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a,商品名Buserelin，德国Hoechst公司产品)600 μg，每日喷鼻1次，患者月经来潮后就诊确定取卵日( 通常确定周一至周三)，于取卵日前11 d开始每天肌内注射(肌注)纯卵泡刺激素(pFSH, 商品名Metrodin,瑞士Serono公司产品)225 IU，共4 d，再改用人绝经期促性腺激素(hMG, 商品名Humegon, 日本Organon公司产品)150 IU/d，肌注共5 d。用药期间行阴道B超检查监测卵泡发育情况，当卵泡直径发育至18 mm时，肌注人绒毛膜促性腺激素(hCG, 商品名Profasi,瑞士Serono公司产品)5000 IU，35 h后在阴道B超引导下穿刺取卵。
, 百拇医药
2.标本的收集及M-CSF的测定：血清标本分别在卵泡早期、卵泡中期、取卵日收集，置于-20℃保存。取卵时记录每个卵泡的直径、容量，卵泡直径≥ 16 mm、卵泡液容量≥ 2 ml的卵泡为大卵泡组，卵泡直径<16 mm、卵泡液容量<2 ml的卵泡为小卵泡组，并做好标记，以便确定该卵泡是否找到卵子、是否受精及胚胎的质量。捡卵后卵泡液用微孔滤膜去除细胞等有形成分，并置于-20℃保存。血清及卵泡液M-CSF水平采用Hanamura等[4]建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，同时测定(试剂来源于美国Perry Laboratory 公司)，以纯M-CSF标准曲线作对照及质控。
3.胚胎质量的判定：胚胎分级评分标准：4分：卵裂球形态大小正常、均匀，没有核碎片；3分：卵裂球形态大小轻微不均，碎片<1/3；2分：卵裂球形态大小不均，碎片>1/3；1分:1或2个卵裂球，大量无核碎片; 0分：退化，完全是碎片。3～4分的胚胎为高质量胚胎组，1～2分为低质量胚胎组。
, 百拇医药
三、统计学分析
结果以
±s表示，显著性比较采用t检验、配对t检验及χ2检验。
结果
一、超促排卵周期中血清M-CSF水平的变化
在超促排卵周期中，血清M-CSF的水平随着卵泡发育逐渐升高，卵泡早期为(669.4±31.7)kU/L,卵泡中期为(816.2±36.5)kU/L，取卵日为(983.6±29.6)kU/L。取卵日血清M-CSF水平显著高于卵泡早期(P<0.01)和卵泡中期(P<0.05)。
二、取卵日血清与卵泡液M-CSF水平比较
取卵日血清中M-CSF水平(983.6±29.6)kU/L，穿刺的 361个卵泡平均卵泡液M-CSF水平为(1245.7±43.6)kU/L，卵泡液M-CSF水平显著高于血清M-CSF水平(P<0.01)。
, 百拇医药
三、找到卵子与否与卵泡液M-CSF水平的关系
找到卵子的卵泡有167个，其卵泡液M-CSF水平为(1 327.3±42.8 )kU/L，未找到卵子的卵泡有94个，其卵泡液M-CSF水平为(1086.7±28.3)kU/L，两者比较，差异有极显著性(P<0.01)。
四、受精与卵泡液M-CSF水平的关系
在167个卵子中，有119个卵子受精，受精卵的卵泡液M-CSF水平为(1356.2±34.7)kU/L，未受精卵的卵泡液M-CSF水平为(1 175.4±37.3)kU/L，两者比较，差异有显著性(P<0.05)。
五、卵泡大小与卵泡液M-CSF水平、获卵率、受精率及卵裂率的关系
大卵泡组的卵泡液M-CSF水平、获卵率、受精率均显著高于小卵泡组(P<0.05)，但两组的卵裂率差异无显著性(P>0.05),见表1。
, 百拇医药
表1 大、小卵泡组的卵泡液M-CSF水平、获卵率、受精率、卵裂率比较(±s) 组别
穿刺
卵泡数
(个)
M-CSF水平
(kU/L)
获卵
数
获卵率
(%)
受精率
, 百拇医药
(%)
卵裂率
(%)
大卵泡组
157
1297.6±33.7*
112
71.3**
72.5*
94.3
小卵泡组
204
, http://www.100md.com
1038.4±25.9
55
27.0
54.3
90.3
注：与小卵泡组比较，*P<0.05 **P<0.01
六、胚胎质量与卵泡液M-CSF水平的关系
119个受精卵经过卵裂发育到2～8细胞期胚胎共103个，其中属高质量胚胎组的54个，低质量胚胎组49个，卵泡液M-CSF水平分别为(1 271.8±37.3)kU/L、(1 312.6±51.2)kU/L，两者比较，差异无显著性(P>0.05)。
, 百拇医药 七、血清M-CSF水平与妊娠率的关系
36例患者中8例获临床妊娠，妊娠者取卵日血清M-CSF水平[(1 015.2±46.7)kU/L]比非妊娠者[(966.4±53.8)kU/L]高(P>0.05)。
讨论
一、M-CSF对卵泡发育、成熟和排卵的作用
M-CSF在不同组织中均可直接或通过刺激巨噬细胞产生和释放其他细胞因子，间接诱导细胞增殖、分化[3]。我们观察到，超促排卵过程中血清M-CSF水平逐渐增高，取卵日达峰值，且取卵日卵泡液M-CSF水平明显高于同日血清。只有卵巢对促性腺激素反应良好者表现上述变化规律，说明血清M-CSF水平变化不但与卵巢对促性腺激素反应、卵泡的发育数量有关，也与卵泡液M-CSF水平相关[3,5]。超促排卵周期中，M-CSF主要由卵丘产生及促性腺激素作用于卵泡，使之发育和分泌甾体激素，后者刺激输卵管和子宫内膜分泌M-CSF[6,7]。在找到卵子的卵泡及大卵泡组的卵泡液M-CSF水平分别明显高于未找到卵子及小卵泡组，大卵泡组获卵率明显高于小卵泡组，提示超促排卵周期中M-CSF还参与卵泡的成熟、排卵。
, 百拇医药
二、M-CSF 对受精和卵裂的影响
我们比较同一患者的受精卵与未受精卵的卵泡液M-CSF水平发现，前者明显高于后者，这与Nishimura等[3]的结果相悖。我们还观察到，大卵泡组不但卵泡液M-CSF水平，而且获卵率及受精率均高于小卵泡组，但两组的卵裂率却无明显差异，推测卵泡液M-CSF可影响卵子的受精，其环节是影响卵泡发育、成熟，而对受精卵的卵裂却无明显影响。Dubey等[8]发现，卵子的成熟、受精率、卵裂率随着卵泡直径和容积增加而提高；但单精子显微注射(ICSI)的研究证实，卵泡直径≥16 mm和卵泡直径<16 mm 之间的受精率和卵裂率无明显差异，说明一旦卵细胞受精，其卵裂率与卵泡直径大小无关[9]。
三、M-CSF对胚胎质量及妊娠率的影响
本研究结果显示，卵泡液M-CSF水平不影响胚胎的质量。妊娠与非妊娠者的血清M-CSF水平无显著差异，此可能与样本较小有关，还有待于积累资料。虽然小卵泡的受精率明显低于大卵泡，但胚胎质量无差别，具有相同的植入率；在IVF-ET中大卵泡的妊娠率则明显高于小卵泡，而在ICSI中两者妊娠率相似[10]。因IVF-ET中每次移植3个胚胎，无法直接比较卵泡液M-CSF水平与植入率和妊娠率的关系，但是，卵泡液M-CSF能通过影响卵泡的发育成熟、排卵、受精过程及超促排卵周期产生的胚胎数，从而引起植入率和妊娠率的变化。
, 百拇医药
参考文献：
[1]Homburg R, West C, Torresani T, et al. Cotreatment with human growth hormone and gonadotropins for induction of ovulation: a controlled clinical trial. Fertil Steril, 1990,53:254-260.
[2]Artini PG, Battaglia C, D'Ambrogio G, et al. Relationship between human oocyte maturity,fertilization and follicular fluid growth factors. Hum Reprod, 1994, 9:902-906.
[3]Nishimura K, Tanaka N, Kawano T, et al.Changes in macrophage colony-stimulating factor concentration in serum and follicular fluid in in-vitro fertilization and embryo transfer cycles. Fertil Steril,1998,69:53-57.
, 百拇医药
[4]Hanamura T, Motoyoshi K, Yoshida K, et al. Quantitation and identification of human monocytic colony-stimulating factor in human serum by enzyme-linked immunosorbent assay. Blood,1988,72:886-892.
[5]Paloran V, Coupey L, Donnard M, et al. Elevation of serum M-CSF concentrations during pregnancy and ovarian hyperstimulation. Br J Haematol, 1994,86:675-677.
[6]Arceci RJ, Pampfer S, Pollard JW. Expression of CSF-1/c-fms and SF/c-kit mRNA during preimplantation mouse development. Dev Biol, 1992,51:1-8.
, http://www.100md.com
[7]Azuma C, Saji F, Kimura T, et al. Steroid hormones induce macrophage colony-stimulating factor (MCSF) and MCSF receptor mRNA in the human endometrium. J Mol Endocrinol, 1990,5:103-108.
[8]Dubey AK, Wang HA, Duffy P, et al. The correlation between follicular measurements, oocyte morphology, and fertilization rates in an in vitro fertilization program. Fertil Steril,1995,64:787-790.
[9]Bergh C, Broden H, Lundin K, et al. Comparison of fertilization, cleavage and pregnancy rates of oocytes from large and small follicles. Hum Reprod, 1998,13: 1912-1915.
[10]Wittmacck FM, Kreger DO, Blasco L, et al. Effect of follicular size on oocyte retrieval, fertilization, cleavage,and embryo quality in in-vitro fertilization cycles: a 6-year data collection. Fertil Steril,1994,62:1205-1210.
收稿日期：1999-01-28, 百拇医药
单位：全松(广州，第一军医大学南方医院妇产科 510515)；宋兰林(广州，第一军医大学南方医院妇产科 510515)；万兰(解放军第四五七医院妇产科)
关键词：巨噬细胞集落刺激因子；囊状滤泡；排卵；受精；胎儿发育
中华妇产科杂志000113 摘 要：目的 探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对卵泡发育、排卵、卵子受精及胚胎质量的影响。方法 用酶联免疫吸附试验方法测定36例超促排卵患者的卵泡早期、卵泡中期和取卵日血清中M-CSF水平,以及取卵日卵泡液中M-CSF水平。结果 超促排卵周期中，血清M-CSF水平呈逐渐升高趋势，取卵日达高峰。取卵日卵泡液M-CSF水平[(1 245.7±43.6)kU/L]显著高于同日血清M-CSF水平[(983.6±29.6)kU/L]。在找到卵子、受精卵及直径≥16 mm和容积≥2 ml的卵泡中，其卵泡液M-CSF水平分别为(1 327.3±42.8)kU/L、(1 356.2±34.7)kU/L和(1 297.6±33.7)kU/L；而未找到卵子、未受精及直径<16 mm和容积<2 ml卵泡的卵泡液M-CSF水平分别为(1 086.7±28.3)kU/L、(1 175.4±37.3)kU/L和(1 038.4±25.9)kU/L，3者间比较，差异均有极显著性(P<0.01，P<0.05，P<0.05)。但是，胚胎分级3～4分的卵泡液M-CSF水平[(1 271.8±37.3)kU/L]与胚胎分级1～2分的卵泡液M-CSF水平[(1 312.6±51.2)kU/L]比较，差异无显著性 (P>0.05)。结论 M-CSF通过参与卵泡发育、成熟而影响卵子受精，但不影响卵裂及胚胎质量。
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Measurement of Macrophage Colony-stimulating Factor during In-vitro Fertilization and Embryo Transfer Cycles
QUAN Song
(Department of Obstetrics and Gynecology，Nanfang Hospital, The First Military Medical University, Guangzhou 510515,China)
SONG Lanlin
(Department of Obstetrics and Gynecology，Nanfang Hospital, The First Military Medical University, Guangzhou 510515,China)
, http://www.100md.com
WAN Lan
Abstract：Objective To explore the influences of macrophage colony-stimulating factor(M-CSF) on follicle development, ovulation, fertilization and embryo quality during in-vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) cycles.Methods 36 patients underwent 54 cycles of controlled ovarian hyperstimulation by gonadotropin-releasing hormone agonist-human menopausal goudotropin-human chorionic gonadotropin for IVF-ET program. M-CSF concentrations in serum were measured at early follicular phase, mid-follicular phase and the day of oocyte retrieval by enzyme-linked immunosorbent assay. Follicular fluid(FF) on the day of egg retrieval was also measured for M-CSF concentration. Results M-CSF concentration in serum gradually increased throughout ovarian hyperstimulation and reached a peak on the day of oocyte retrieval. M-CSF concentration in FF was significantly higher than that in serum on the same day (P<0.01). The M-CSF concentration in FF from follicles where oocytes could be retrieved, fertilized or with a diameter ≥16 mm, volume ≥2 ml, was significantly higher than those from follicles where oocyte could not be retrieved, fertilized or with a diameter <16 mm, volume <2 ml, respectively (P<0.01). However, there was no significant difference in M-CSF concentration of FF between high and low embryo grade groups (P>0.05). Conclusions M-CSF may play an important role as an intraovarian regulator in the process of follicle development, maturation and ovulation. Therefore, M-CSF may exert an effect on fertilization process but not on the embryo quality.
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Key words：Macrophage colony-stimulating factor；Graafion follicle； Ovulation； Fertilization；Fetal development▲
卵巢的功能不但受促性腺激素(gonadotropin,Gn)的调节，生长激素及多肽生长因子也对卵泡发育具有重要作用[1,2]。近来发现，卵巢在Gn和卵巢甾体激素调节下产生一些细胞因子，反过来这些细胞因子又可通过旁分泌和自分泌方式调节卵巢功能[3]。本研究中，我们通过测定和分析超促排卵周期中不同时期血清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)水平及取卵日卵泡液中M-CSF水平的变化，探讨M-CSF对卵泡发育、成熟、排卵、受精及胚胎质量的影响。
资料与方法
, 百拇医药 一、研究对象
选择1997年7月至1998年2月间接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕患者36例(54个周期)作为研究对象，去除发生卵巢过度刺激或反应不良的7个周期。平均年龄(31.0±3.6)岁。不孕原因：输卵管因素(32.6%)、男性因素(35.2%)、不明原因(17.7%)、子宫内膜异位症 (7.8%)、抗精子抗体阳性(6.7%)。
二、方法
1.超促排卵治疗：采用固定取卵日超促排卵方案，从上1个月经周期高温相第7 d开始应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a,商品名Buserelin，德国Hoechst公司产品)600 μg，每日喷鼻1次，患者月经来潮后就诊确定取卵日( 通常确定周一至周三)，于取卵日前11 d开始每天肌内注射(肌注)纯卵泡刺激素(pFSH, 商品名Metrodin,瑞士Serono公司产品)225 IU，共4 d，再改用人绝经期促性腺激素(hMG, 商品名Humegon, 日本Organon公司产品)150 IU/d，肌注共5 d。用药期间行阴道B超检查监测卵泡发育情况，当卵泡直径发育至18 mm时，肌注人绒毛膜促性腺激素(hCG, 商品名Profasi,瑞士Serono公司产品)5000 IU，35 h后在阴道B超引导下穿刺取卵。
, 百拇医药
2.标本的收集及M-CSF的测定：血清标本分别在卵泡早期、卵泡中期、取卵日收集，置于-20℃保存。取卵时记录每个卵泡的直径、容量，卵泡直径≥ 16 mm、卵泡液容量≥ 2 ml的卵泡为大卵泡组，卵泡直径<16 mm、卵泡液容量<2 ml的卵泡为小卵泡组，并做好标记，以便确定该卵泡是否找到卵子、是否受精及胚胎的质量。捡卵后卵泡液用微孔滤膜去除细胞等有形成分，并置于-20℃保存。血清及卵泡液M-CSF水平采用Hanamura等[4]建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，同时测定(试剂来源于美国Perry Laboratory 公司)，以纯M-CSF标准曲线作对照及质控。
3.胚胎质量的判定：胚胎分级评分标准：4分：卵裂球形态大小正常、均匀，没有核碎片；3分：卵裂球形态大小轻微不均，碎片<1/3；2分：卵裂球形态大小不均，碎片>1/3；1分:1或2个卵裂球，大量无核碎片; 0分：退化，完全是碎片。3～4分的胚胎为高质量胚胎组，1～2分为低质量胚胎组。
, 百拇医药
三、统计学分析
结果以
±s表示，显著性比较采用t检验、配对t检验及χ2检验。结果
一、超促排卵周期中血清M-CSF水平的变化
在超促排卵周期中，血清M-CSF的水平随着卵泡发育逐渐升高，卵泡早期为(669.4±31.7)kU/L,卵泡中期为(816.2±36.5)kU/L，取卵日为(983.6±29.6)kU/L。取卵日血清M-CSF水平显著高于卵泡早期(P<0.01)和卵泡中期(P<0.05)。
二、取卵日血清与卵泡液M-CSF水平比较
取卵日血清中M-CSF水平(983.6±29.6)kU/L，穿刺的 361个卵泡平均卵泡液M-CSF水平为(1245.7±43.6)kU/L，卵泡液M-CSF水平显著高于血清M-CSF水平(P<0.01)。
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三、找到卵子与否与卵泡液M-CSF水平的关系
找到卵子的卵泡有167个，其卵泡液M-CSF水平为(1 327.3±42.8 )kU/L，未找到卵子的卵泡有94个，其卵泡液M-CSF水平为(1086.7±28.3)kU/L，两者比较，差异有极显著性(P<0.01)。
四、受精与卵泡液M-CSF水平的关系
在167个卵子中，有119个卵子受精，受精卵的卵泡液M-CSF水平为(1356.2±34.7)kU/L，未受精卵的卵泡液M-CSF水平为(1 175.4±37.3)kU/L，两者比较，差异有显著性(P<0.05)。
五、卵泡大小与卵泡液M-CSF水平、获卵率、受精率及卵裂率的关系
大卵泡组的卵泡液M-CSF水平、获卵率、受精率均显著高于小卵泡组(P<0.05)，但两组的卵裂率差异无显著性(P>0.05),见表1。
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表1 大、小卵泡组的卵泡液M-CSF水平、获卵率、受精率、卵裂率比较(
±s) 组别穿刺
卵泡数
(个)
M-CSF水平
(kU/L)
获卵
数
获卵率
(%)
受精率
, 百拇医药
(%)
卵裂率
(%)
大卵泡组
157
1297.6±33.7*
112
71.3**
72.5*
94.3
小卵泡组
204
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1038.4±25.9
55
27.0
54.3
90.3
注：与小卵泡组比较，*P<0.05 **P<0.01
六、胚胎质量与卵泡液M-CSF水平的关系
119个受精卵经过卵裂发育到2～8细胞期胚胎共103个，其中属高质量胚胎组的54个，低质量胚胎组49个，卵泡液M-CSF水平分别为(1 271.8±37.3)kU/L、(1 312.6±51.2)kU/L，两者比较，差异无显著性(P>0.05)。
, 百拇医药 七、血清M-CSF水平与妊娠率的关系
36例患者中8例获临床妊娠，妊娠者取卵日血清M-CSF水平[(1 015.2±46.7)kU/L]比非妊娠者[(966.4±53.8)kU/L]高(P>0.05)。
讨论
一、M-CSF对卵泡发育、成熟和排卵的作用
M-CSF在不同组织中均可直接或通过刺激巨噬细胞产生和释放其他细胞因子，间接诱导细胞增殖、分化[3]。我们观察到，超促排卵过程中血清M-CSF水平逐渐增高，取卵日达峰值，且取卵日卵泡液M-CSF水平明显高于同日血清。只有卵巢对促性腺激素反应良好者表现上述变化规律，说明血清M-CSF水平变化不但与卵巢对促性腺激素反应、卵泡的发育数量有关，也与卵泡液M-CSF水平相关[3,5]。超促排卵周期中，M-CSF主要由卵丘产生及促性腺激素作用于卵泡，使之发育和分泌甾体激素，后者刺激输卵管和子宫内膜分泌M-CSF[6,7]。在找到卵子的卵泡及大卵泡组的卵泡液M-CSF水平分别明显高于未找到卵子及小卵泡组，大卵泡组获卵率明显高于小卵泡组，提示超促排卵周期中M-CSF还参与卵泡的成熟、排卵。
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二、M-CSF 对受精和卵裂的影响
我们比较同一患者的受精卵与未受精卵的卵泡液M-CSF水平发现，前者明显高于后者，这与Nishimura等[3]的结果相悖。我们还观察到，大卵泡组不但卵泡液M-CSF水平，而且获卵率及受精率均高于小卵泡组，但两组的卵裂率却无明显差异，推测卵泡液M-CSF可影响卵子的受精，其环节是影响卵泡发育、成熟，而对受精卵的卵裂却无明显影响。Dubey等[8]发现，卵子的成熟、受精率、卵裂率随着卵泡直径和容积增加而提高；但单精子显微注射(ICSI)的研究证实，卵泡直径≥16 mm和卵泡直径<16 mm 之间的受精率和卵裂率无明显差异，说明一旦卵细胞受精，其卵裂率与卵泡直径大小无关[9]。
三、M-CSF对胚胎质量及妊娠率的影响
本研究结果显示，卵泡液M-CSF水平不影响胚胎的质量。妊娠与非妊娠者的血清M-CSF水平无显著差异，此可能与样本较小有关，还有待于积累资料。虽然小卵泡的受精率明显低于大卵泡，但胚胎质量无差别，具有相同的植入率；在IVF-ET中大卵泡的妊娠率则明显高于小卵泡，而在ICSI中两者妊娠率相似[10]。因IVF-ET中每次移植3个胚胎，无法直接比较卵泡液M-CSF水平与植入率和妊娠率的关系，但是，卵泡液M-CSF能通过影响卵泡的发育成熟、排卵、受精过程及超促排卵周期产生的胚胎数，从而引起植入率和妊娠率的变化。
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收稿日期：1999-01-28, 百拇医药