蝙蝠葛碱犬体内药代动力学研究
作者：陈淑娟 张斌 杨毅梅 代宗顺 曾繁典
单位：同济医科大学临床药理研究所，武汉 430030
关键词：蝙蝠葛碱药代动力学反相高效液相色谱法
中国临床药理学与治疗学000307
目的 研究不同给药途径及剂量的蝙蝠葛碱(Dau)在犬体内药代动力学特征。方法 采用拉丁方设计对5只犬进行静注、灌胃2种给药途径及5个剂量的实验，用HPLC-UV法测定血药浓度，计算药代动力学参数。结果 犬静注Dau6mg·kg-1后，药物符合二室开放模型线性动力学消除过程，t1/2(α)6～12min，K12>K21，t1/2(β)(2.7±0.4)h，Vd11.18L·kg-1。Dau灌胃给药后各犬C-T曲线呈显著双峰现象，各剂量组tpeak(1)为(0.8±0.6)～(1.2±0.5)h，tpeak(2)为(5.2±3.2)～(6.5±1.9)h，Cmax(2)一般小于相应的Cmax(1)。在12.5～25mg·kg-1范围Dau呈线性消除，两者t1/2(el)、CL、AUC/X0等重要药代动力学参数均无显著性差异(P>0.05)，AUC随给药剂量成比例上升；在50mg.kg-1以上剂量时，药物消除呈非线性，t1/2(el)、CL、AUC/X0等重要参数显著改变(P<0.05)，AUC超比例增加。结论 灌胃给药后，Dau在犬体内广泛分布并从血液中迅速清除。在50mg.kg-1以下剂量时，最大血药浓度、AUC剂量依赖性增加，药物消除呈线性特征，超过此剂量，药物t1/2(el)、CL明显延长，提示大剂量下药物消除存在饱和动力学特征。
, 百拇医药
中图分类号 R965.3
Pharmacokinetics of dauricine in dogs
CHEN Shu-Juan，ZHANG Bin，YANG Yi-Mei，DAI Zong-Shun，ZENG Fan-Dian
(Institute of Clinical Pharmacology,Tongji Medical University, Wuhan 430030)
Aim To study the pharmacokinetic characters of Dauricine in dogs.Methods Dauricine was applied in 5 dosages of two administration ways 5 dogs according to Latin Square plan. The drug plasma concentration was determined by RP-HPLC.Results Dauricine spread quickly from central compartment to spherical compartment after intravenous administration of 6 mg·kg-1.Thet1/2(α) was 6～ 12 min, K12>K21. The mean t1/2(β) was ( 2.7± 0.4) h, Vd was about 11.18 L·kg-1.The C-T profile conformed to two compartment open model. The plasma Dau concentration-time curves showed a double-peak phenomenon in all dosages of all dogswhen dauricine was given by intragastric was.The tpeak(1) was ( 0.8± 0.6) ～ ( 1.2± 0.5) h， tpeak(2) was ( 5.2± 3.2) ～ ( 6.5± 1.9) h， Cmax(2)max(1).Dauricine was eliminated linearly in the dosages of 12.5 and 25 mg· kg-1,there was no obvious difference of parameters t1/2(el),CL,AUC/X0 between them (P>0.05) and the AUC was increased in proportion.The drug is eliminated non-linearly when the dosage is above 50 mg· kg-1, the parameters t1/2(el),CL, AUC/X0 shows great difference (P<0.01) comparing with dosage 12.5 mg·kg-1, AUC was increased out of proportion.Conclusion The plasma drug concentration_time curve of Dau after ig administration in dogs shows a double_peak phenomenon.A saturated character in Dauricine's elimination is observed when the dosage is over or equal to 50 mg.kg-1.
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Key words dauricine; pharmacokinetics; RP- HPLC
蝙蝠葛碱(dauricine,Dau)系从防己科植物蝙蝠葛(menispermumdauricumD.C.)根茎中提取的一种生物碱，临床及实验均证实其良好的抗心律失常作用，且实验已经证明Dau延长心肌动作电位时程(APD)作用的剂量依赖性[1]，具有开发为新型抗心律失常药物的前景。我室在完成Dau大鼠药物代谢动力学研究的基础上，选择犬为实验对象，采用临床上常用的两种给药途径，按药效实验剂量换算，设置5个剂量组，以了解Dau在犬体内药代动力学特征。
1材料和方法
1.1药品与试剂Dau由同济医科大学临床药理研究所化学室潘锡平博士提供，该药为淡黄色粉末，熔点98～100℃(氯仿-环己烷)，相对分子量624.7，纯度99.8%。用前以1N盐酸溶液溶解，氢氧化钠溶液调pH为6，以生理盐水补充至所需体积。蝙蝠葛苏林碱(daurisoline，DS)，内标，来源同上，纯度99.0%。用前以少量甲醇溶解，高纯水稀释至200μg·ml-1。乙腈、甲醇为国产色谱纯，其他试剂均为
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国产分析纯。水为去离子水经石英亚沸单蒸。
1.2实验动物和给药方法健康杂种犬5只，体重10～15kg，雌雄兼用，由同济医科大学实验动物中心提供。实验前1wk，每犬给予肠虫清2片驱虫；定时定量以标准犬饲料喂养。试验前禁食12～16h，自由饮水。每次试验后，间隔期2wk。静脉给药系从犬前肢小隐静脉注射Dau6mg·kg-1，在规定时间点从对侧小隐静脉采血，每次4ml，抗凝，分离血浆，-40℃保存备用。灌胃给药为犬灌胃12.5、25、50、100mg·kg-1。分别在实验前及后犬前肢小隐静脉采血，分离血浆，-40℃保存备用。
1.3实验设计采用拉丁方设计，对5只犬及5组给药剂量(含两种给药途径)进行实验，间隔期2wk，其中一只实验犬在高剂量用药时死亡，仅有静注和灌胃12.5mg·kg-1两组实验数据。
1.4仪器和色谱条件Merck-HitachiL-6000泵；Gilson自动进样器；Schimadzu紫外检测器，检测波长284nm，灵敏度0.01AUFS，SchimadzuC-R3A积分仪；SupelcosilTMLC-18反相色谱柱4.5mm×150mm(ID×L)，粒径5μm；ODSC-18预柱；柱温为室温。流动相：乙腈∶水30∶70(V/V)混合溶液，磷酸调pH至4，三乙胺0.12%，0.45μm减压抽滤，超声脱气15min，流速1.0ml·min-1。
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1.5生物样品测定按我室建立的HPLC-UV法测定血浆药物浓度[2]。取犬血浆样品1ml，分别加入内标液10μl、乙腈0.5ml、二氯甲烷4ml，漩涡混合3min，离心4000rpm20min，将有机相3.5ml移入10ml刻度离心管内，剩余水相再加入二氯甲烷4ml，同法萃取并离心，分离有机相。合并2次萃取液,40℃水浴，N2吹干。残渣用流动相500μl定容，充分溶解后，10000rpm离心5min，取上清液供HPLC分析用。进样量50μl，按内标法测定其含量。
2结果
2.1静脉注射5只犬经静脉注射Dau溶液6mg·kg-1后，血药浓度随时间迅速下降，C-T曲线见图1。采用3p87程序处理，F检验二室和三室之间P>0.05，按二房室模型计算犬静注Dau血药浓度动力学参数，结果见表1。
2.2灌胃途径犬灌胃12.5、25、50、100mg·kg-1后，C-T曲线见图2～图3。从图中明显可以看到，除2号犬12.5mg·kg-1剂量以外，在其它各犬的各个剂量中都出现了明显的多峰现象同图3。灌胃及静注后的血药浓度采用非房室方法计算药代动力学参数，结果见表2。
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灌胃12.5～25mg·kg-1范围内，两种剂量的t1/2(el)、Vd、CL、AUC/X0等主要动力学参数十分相近，经统计处理无明显差异(P>0.05)，AUC随剂量增加成比例增加，说明在此剂量范围内Dau的消除为线性动力学过程。但当灌胃50mg·kg-1后，MRT、t1/2(el)明显延长(P<0.05),CL明显减少(P<0.01)，AUC超比例增加(P<0.05)，见表2。表明大剂量50mg·kg-1后，本品在大鼠体内的消除为非线性动力学过程；在灌胃100mg·kg-1，MRT、t1/2(el)等重要参数更加延长，与12.5、25mg·kg-1相比差异有极显著性(P<0.001)，与50mg·kg-1相比，差异有极显著性(P<0.001)，药物消除呈明显非线性消除，在24h各犬浓度高达0.3～0.6μg·ml-1。
图1犬静脉注射Dau6mg·kg-1后平均血药浓度时间曲线(n="5)"
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图2犬2灌胃给予不同剂量Dau血药浓度-时间曲线
图3犬3灌胃给予不同剂量Dau血药浓度-时间曲线
表1 5只术静脉注射Dau6mg.kg-1药代动力学参数 参数
第1只
第2只
第3只
第4只
第5只
第6只
A/μg.ml-1
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2.29
1.17
2.07
1.94
2.36
2.0±0.5
α/h-1
3.87
5.41
3.28
6.77
3.82
4.6±1.4
, 百拇医药
B/μg.ml-1
0.69
0.47
0.30
0.40
0.34
0.44±0.15
β/h-1
0.30
0.24
0.21
0.29
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0.26
0.26±0.04
VcL.kg-1
2.02
2.72
2.53
2.56
2.22
2.41±0.28
Vd/L.kg-1
6.93
, 百拇医药
10.94
13.77
12.41
11.88
11.2±2.6
t1/2(α)/h
0.18
0.13
0.21
0.10
0.18
0.16±0.04
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t1/2(β)/h
2.30
2.86
3.26
2.42
2.67
2.7±0.4
K21/ h-1
1.13
1.35
0.60
1.40
, 百拇医药
0.71
1.0±0.4
K10/ h-1
1.03
0.97
1.16
1.39
1.39
1.19±0.20
K12/ h-1
2.01
, http://www.100md.com 3.33
1.73
4.27
1.98
2.7±1.1
AUC/μg.h.ml-1
2.88
2.27
2.05
2.03
1.94
2.2±0.4
, 百拇医药
CLs/L.kg.h-1
2.08
2.65
2.93
3.55
3.09
2.9±0.5
C0/μg.ml-1
2.975
1.646
2.375
, http://www.100md.com
2.347
2.702
2.4±0.5
表2 犬静脉注射及灌胃给药(mg.kg-1)不同剂量Dau药代动力学参数(非房室模型)
6(iv,n=5)
12.5(ig,n=5)
25(ig,n=4)
50(ig,n=4)
100(ig,n=4)
AUC0∞/μg.h.ml-1
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2.06±0.23
1.09±0.12
1.98±0.22
6.8±1.3
26.7±5.2
AUC/X0
0.09±0.01
0.079±0.009
0.136±0.026*
0.27±0.05***
AUMC
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9.0±2.7
17.5±3.3
84.4±8.1
548±345
MRT/h
3.3±0.5
8.5±3.0
9.1±2.6
12.8±3.2
27.7±3.9
VRT/h2
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18.9±8.4
86±49
82±25
197±76
754±182
Kel/h-1
0.23±0.05
0.13±0.05
0.114±0.17
0.076±0.014
0.038±0.006
, 百拇医药
t1/2(el)/h-1
3.1±0.7
5.7±1.7##
6.2±0.8
9.3±1.7*
18.4±2.5***
CL/F/L.kg-1
3.1±0.4
11.6±1.3
12.8±1.4
, 百拇医药 7.5±1.4*
3.9±0.9***
Vss/F/K.kg-1
10.2±1.4
100±43
118±45
92±48
108±30
Cmax(1)/μg.ml-1
0.25±0.09
, 百拇医药
0.37±0.15
0.86±0.17
1.3±0.5
tpead(1)/h
1.3±0.5
1.1±0.7
0.8±0.6
1.1±0.5
Cmax(2)/μg.ml-1
0.10±0.05
0.14±0.05
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0.42±0.10
0.94±0.28
tpead(2)/h
6±2
6.5±1.9
6.0±2.3
5.2±3.2
F/%
24.3±2.2
22.2±1.4
与灌胃12.5mg.ml-1级比较*P<0.05**P<0.01***P<0.001,与静注6mg.ml-1组比较##P<0.01
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3讨论
采用我室已建立的RP-HPLC方法，对清醒犬采用拉丁方设计进行了5个剂量、两种给药途径的药动学研究，结果表明静注6mg·kg-1后，Dau在犬体内自中央室向周边室分布很快，t1/2(α)小于15min，药物从中央室消除也较快，平均t1/2(β)为(2.7±0.4)h；Dau在犬体内广泛分布，Vd值约为(11.2±2.6)L·kg-1，远大于实验犬体液体积，提示该药因脂溶性强而在体内广泛分布。Dau口服给药，在犬血浆中的C-T曲线呈明显双峰现象，tpeak(1)为(0.8±0.6)h～(1.2±0.5)h，tpeak(2)为(5.2±3.2)h～(6.5±1.91)h，第二峰后下降部分的t1/2(el)明显长于静注后t1/2(β)，这可能与药后双峰现象有关。由于个体差异，各犬出现双峰的时间及程度有所不同，但在同一只犬不同剂量下双峰出现的时间基本一致，峰形也很相似。Dau在大鼠体内药代动力学研究中我们曾报道药时曲线双峰现象的可能原因是药物的胃肠循环,由于种属差异的存在,其结果不能直接推论,故药物在犬体内产生双峰的原因尚有待于实验的证明。Dau在12.5～25mg·kg-1范围内灌胃，药物呈线性消除，而50～100mg·kg-1呈非线性消除，说明药物消除的饱和现象。
, 百拇医药
对于药物C-T曲线的双峰现象，由于其产生原因多样，直至目前尚无一种通用的理想方法予以统计分析。有些作者将其作为单峰处理，显然不甚合适，有许多作者根据药物产生双峰的原因，提出了EHC模型，胃肠道多吸收部位双峰模型[3,4],非连续性吸收[5,6]等，虽可拟合出双峰，但与实际数据契合不理想且重现性较差；生理模型在近十年内得到了较大程度的发展[7]，它作为一种整体模型，可描述任何器官和组织内药物及其代谢物浓度的变化，且可根据种属的生理参数将结果外推[8]，估测药物种属差异，在解释并模拟药物多峰现象中很有发展前景，但是生理模型需要参数很多，这一缺点严重的束缚了它的发展。目前，国际上较常规的处理方法多采用非房室模型法[9,10]，该法分析药物的体内过程,主要依据药时曲线下面积,不受数学模型的限制,普遍适用于任何房室状态。在有第二峰存在时,以第二峰后的下降部分假设为清除相来计算Kel、t1/2(el)、Vd等参数,结果符合药物在体内的基本变化趋势。但此方法也存在着许多缺点:不能给出拟合曲线，提供的参数亦较少,且多为平均值,仅提供药物变化基本趋势,并不能确切地反映体内药物处置的实际情况。虽然该方法有上述一些缺点,但由于其适用性强,特别是在多峰现象仍可应用,故而在国际学术界广为使用。在本次实验中采用非房室模型分析方法进行数据处理,所得参数符合药物动力学变化趋势。
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陈淑娟，女，27岁，医学博士，主要从事药物代谢动力学研究。
曾繁典，男，教授，博士生导师，中国药理学会副理事长。
参 考 文 献
1，Guo DL, Zeng FD, Hu CJ. Effects of Dauricine, quinidine, and sotlol on action potential duration of papillary muscles in vitro. Acta Pharmacol Sin,1997；18:384
2，Chen SJ,Yang YM, Zhang L， et al. A sensitive HPLC method for quantitation of Dauricine. J Tongji Medical University, 2000； 20(1):39
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3，Lee SH, Lee MG. Pharmacokinetics and pharmaco-dynamics of azosemide after intravenous and oral administration to rats: absorption from various GI segments. J Pharmacokinet Biopharm, 1996； 24(6): 551
4，Mahmood I. Pharmacokinetic analysis of the absorp-tion characteristics of diclofenac sodium in man by use of a multi-segment absorption model. J Pharm Phar-macol, 1996； 48(12):1260
5，Suttle AB, Pollack GM, Brouwer KL， et al. Use of a pharmacokinetic model incorporating discontinuous gastrointestinal absorption to examine the occurrence of double peaks in oral concentration-time profiles.Pharm Res, 1992； 9(3):350
, 百拇医药
6，Witcher JW, Boudinot FD. Applications and simula-tions of a discontinuous oral absorption pharmacoki-netic model. Pharm Res, 1996； 13(11):1720
7，Francis CP Law, 何绍雄.生理药代动力学模型的进展与应用.药学学报,1997； 32(2): 151
8，Bjorkman S, Wada DR, Stanski DR. Application of physiologic models to predict the influence of changes in body composition and blood flows on the pharma-cokinetics of fentanyl and alfentanil in patients. Anesthesiology, 1998； 88(3):657
, http://www.100md.com
9，Benoni G, Terzi M, Adami A,et al.Plasma concen- trations and pharmacokinetic parameters of nitrofenac using a simple and sensitive HPLC method. J Pharm Sci, 1995； 84(1):93
10，Sawamoto F. Prediction of the plasma concentra- tion profiles of orally administered drugs in rats on the basis of gastrointestinal transit kinetics and absorba- bility. J Pharm Pharmacol,1997； 49:4501
2000-05-30收稿，2000-07-07修回, 百拇医药
单位：同济医科大学临床药理研究所，武汉 430030
关键词：蝙蝠葛碱药代动力学反相高效液相色谱法
中国临床药理学与治疗学000307
目的 研究不同给药途径及剂量的蝙蝠葛碱(Dau)在犬体内药代动力学特征。方法 采用拉丁方设计对5只犬进行静注、灌胃2种给药途径及5个剂量的实验，用HPLC-UV法测定血药浓度，计算药代动力学参数。结果 犬静注Dau6mg·kg-1后，药物符合二室开放模型线性动力学消除过程，t1/2(α)6～12min，K12>K21，t1/2(β)(2.7±0.4)h，Vd11.18L·kg-1。Dau灌胃给药后各犬C-T曲线呈显著双峰现象，各剂量组tpeak(1)为(0.8±0.6)～(1.2±0.5)h，tpeak(2)为(5.2±3.2)～(6.5±1.9)h，Cmax(2)一般小于相应的Cmax(1)。在12.5～25mg·kg-1范围Dau呈线性消除，两者t1/2(el)、CL、AUC/X0等重要药代动力学参数均无显著性差异(P>0.05)，AUC随给药剂量成比例上升；在50mg.kg-1以上剂量时，药物消除呈非线性，t1/2(el)、CL、AUC/X0等重要参数显著改变(P<0.05)，AUC超比例增加。结论 灌胃给药后，Dau在犬体内广泛分布并从血液中迅速清除。在50mg.kg-1以下剂量时，最大血药浓度、AUC剂量依赖性增加，药物消除呈线性特征，超过此剂量，药物t1/2(el)、CL明显延长，提示大剂量下药物消除存在饱和动力学特征。
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中图分类号 R965.3
Pharmacokinetics of dauricine in dogs
CHEN Shu-Juan，ZHANG Bin，YANG Yi-Mei，DAI Zong-Shun，ZENG Fan-Dian
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Aim To study the pharmacokinetic characters of Dauricine in dogs.Methods Dauricine was applied in 5 dosages of two administration ways 5 dogs according to Latin Square plan. The drug plasma concentration was determined by RP-HPLC.Results Dauricine spread quickly from central compartment to spherical compartment after intravenous administration of 6 mg·kg-1.Thet1/2(α) was 6～ 12 min, K12>K21. The mean t1/2(β) was ( 2.7± 0.4) h, Vd was about 11.18 L·kg-1.The C-T profile conformed to two compartment open model. The plasma Dau concentration-time curves showed a double-peak phenomenon in all dosages of all dogswhen dauricine was given by intragastric was.The tpeak(1) was ( 0.8± 0.6) ～ ( 1.2± 0.5) h， tpeak(2) was ( 5.2± 3.2) ～ ( 6.5± 1.9) h， Cmax(2)
, 百拇医药
Key words dauricine; pharmacokinetics; RP- HPLC
蝙蝠葛碱(dauricine,Dau)系从防己科植物蝙蝠葛(menispermumdauricumD.C.)根茎中提取的一种生物碱，临床及实验均证实其良好的抗心律失常作用，且实验已经证明Dau延长心肌动作电位时程(APD)作用的剂量依赖性[1]，具有开发为新型抗心律失常药物的前景。我室在完成Dau大鼠药物代谢动力学研究的基础上，选择犬为实验对象，采用临床上常用的两种给药途径，按药效实验剂量换算，设置5个剂量组，以了解Dau在犬体内药代动力学特征。
1材料和方法
1.1药品与试剂Dau由同济医科大学临床药理研究所化学室潘锡平博士提供，该药为淡黄色粉末，熔点98～100℃(氯仿-环己烷)，相对分子量624.7，纯度99.8%。用前以1N盐酸溶液溶解，氢氧化钠溶液调pH为6，以生理盐水补充至所需体积。蝙蝠葛苏林碱(daurisoline，DS)，内标，来源同上，纯度99.0%。用前以少量甲醇溶解，高纯水稀释至200μg·ml-1。乙腈、甲醇为国产色谱纯，其他试剂均为
, http://www.100md.com
国产分析纯。水为去离子水经石英亚沸单蒸。
1.2实验动物和给药方法健康杂种犬5只，体重10～15kg，雌雄兼用，由同济医科大学实验动物中心提供。实验前1wk，每犬给予肠虫清2片驱虫；定时定量以标准犬饲料喂养。试验前禁食12～16h，自由饮水。每次试验后，间隔期2wk。静脉给药系从犬前肢小隐静脉注射Dau6mg·kg-1，在规定时间点从对侧小隐静脉采血，每次4ml，抗凝，分离血浆，-40℃保存备用。灌胃给药为犬灌胃12.5、25、50、100mg·kg-1。分别在实验前及后犬前肢小隐静脉采血，分离血浆，-40℃保存备用。
1.3实验设计采用拉丁方设计，对5只犬及5组给药剂量(含两种给药途径)进行实验，间隔期2wk，其中一只实验犬在高剂量用药时死亡，仅有静注和灌胃12.5mg·kg-1两组实验数据。
1.4仪器和色谱条件Merck-HitachiL-6000泵；Gilson自动进样器；Schimadzu紫外检测器，检测波长284nm，灵敏度0.01AUFS，SchimadzuC-R3A积分仪；SupelcosilTMLC-18反相色谱柱4.5mm×150mm(ID×L)，粒径5μm；ODSC-18预柱；柱温为室温。流动相：乙腈∶水30∶70(V/V)混合溶液，磷酸调pH至4，三乙胺0.12%，0.45μm减压抽滤，超声脱气15min，流速1.0ml·min-1。
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1.5生物样品测定按我室建立的HPLC-UV法测定血浆药物浓度[2]。取犬血浆样品1ml，分别加入内标液10μl、乙腈0.5ml、二氯甲烷4ml，漩涡混合3min，离心4000rpm20min，将有机相3.5ml移入10ml刻度离心管内，剩余水相再加入二氯甲烷4ml，同法萃取并离心，分离有机相。合并2次萃取液,40℃水浴，N2吹干。残渣用流动相500μl定容，充分溶解后，10000rpm离心5min，取上清液供HPLC分析用。进样量50μl，按内标法测定其含量。
2结果
2.1静脉注射5只犬经静脉注射Dau溶液6mg·kg-1后，血药浓度随时间迅速下降，C-T曲线见图1。采用3p87程序处理，F检验二室和三室之间P>0.05，按二房室模型计算犬静注Dau血药浓度动力学参数，结果见表1。
2.2灌胃途径犬灌胃12.5、25、50、100mg·kg-1后，C-T曲线见图2～图3。从图中明显可以看到，除2号犬12.5mg·kg-1剂量以外，在其它各犬的各个剂量中都出现了明显的多峰现象同图3。灌胃及静注后的血药浓度采用非房室方法计算药代动力学参数，结果见表2。
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灌胃12.5～25mg·kg-1范围内，两种剂量的t1/2(el)、Vd、CL、AUC/X0等主要动力学参数十分相近，经统计处理无明显差异(P>0.05)，AUC随剂量增加成比例增加，说明在此剂量范围内Dau的消除为线性动力学过程。但当灌胃50mg·kg-1后，MRT、t1/2(el)明显延长(P<0.05),CL明显减少(P<0.01)，AUC超比例增加(P<0.05)，见表2。表明大剂量50mg·kg-1后，本品在大鼠体内的消除为非线性动力学过程；在灌胃100mg·kg-1，MRT、t1/2(el)等重要参数更加延长，与12.5、25mg·kg-1相比差异有极显著性(P<0.001)，与50mg·kg-1相比，差异有极显著性(P<0.001)，药物消除呈明显非线性消除，在24h各犬浓度高达0.3～0.6μg·ml-1。
图1犬静脉注射Dau6mg·kg-1后平均血药浓度时间曲线(n="5)"
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图2犬2灌胃给予不同剂量Dau血药浓度-时间曲线
图3犬3灌胃给予不同剂量Dau血药浓度-时间曲线
表1 5只术静脉注射Dau6mg.kg-1药代动力学参数 参数
第1只
第2只
第3只
第4只
第5只
第6只
A/μg.ml-1
, 百拇医药
2.29
1.17
2.07
1.94
2.36
2.0±0.5
α/h-1
3.87
5.41
3.28
6.77
3.82
4.6±1.4
, 百拇医药
B/μg.ml-1
0.69
0.47
0.30
0.40
0.34
0.44±0.15
β/h-1
0.30
0.24
0.21
0.29
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0.26
0.26±0.04
VcL.kg-1
2.02
2.72
2.53
2.56
2.22
2.41±0.28
Vd/L.kg-1
6.93
, 百拇医药
10.94
13.77
12.41
11.88
11.2±2.6
t1/2(α)/h
0.18
0.13
0.21
0.10
0.18
0.16±0.04
, http://www.100md.com
t1/2(β)/h
2.30
2.86
3.26
2.42
2.67
2.7±0.4
K21/ h-1
1.13
1.35
0.60
1.40
, 百拇医药
0.71
1.0±0.4
K10/ h-1
1.03
0.97
1.16
1.39
1.39
1.19±0.20
K12/ h-1
2.01
, http://www.100md.com 3.33
1.73
4.27
1.98
2.7±1.1
AUC/μg.h.ml-1
2.88
2.27
2.05
2.03
1.94
2.2±0.4
, 百拇医药
CLs/L.kg.h-1
2.08
2.65
2.93
3.55
3.09
2.9±0.5
C0/μg.ml-1
2.975
1.646
2.375
, http://www.100md.com
2.347
2.702
2.4±0.5
表2 犬静脉注射及灌胃给药(mg.kg-1)不同剂量Dau药代动力学参数(非房室模型)
6(iv,n=5)
12.5(ig,n=5)
25(ig,n=4)
50(ig,n=4)
100(ig,n=4)
AUC0∞/μg.h.ml-1
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2.06±0.23
1.09±0.12
1.98±0.22
6.8±1.3
26.7±5.2
AUC/X0
0.09±0.01
0.079±0.009
0.136±0.026*
0.27±0.05***
AUMC
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9.0±2.7
17.5±3.3
84.4±8.1
548±345
MRT/h
3.3±0.5
8.5±3.0
9.1±2.6
12.8±3.2
27.7±3.9
VRT/h2
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18.9±8.4
86±49
82±25
197±76
754±182
Kel/h-1
0.23±0.05
0.13±0.05
0.114±0.17
0.076±0.014
0.038±0.006
, 百拇医药
t1/2(el)/h-1
3.1±0.7
5.7±1.7##
6.2±0.8
9.3±1.7*
18.4±2.5***
CL/F/L.kg-1
3.1±0.4
11.6±1.3
12.8±1.4
, 百拇医药 7.5±1.4*
3.9±0.9***
Vss/F/K.kg-1
10.2±1.4
100±43
118±45
92±48
108±30
Cmax(1)/μg.ml-1
0.25±0.09
, 百拇医药
0.37±0.15
0.86±0.17
1.3±0.5
tpead(1)/h
1.3±0.5
1.1±0.7
0.8±0.6
1.1±0.5
Cmax(2)/μg.ml-1
0.10±0.05
0.14±0.05
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0.42±0.10
0.94±0.28
tpead(2)/h
6±2
6.5±1.9
6.0±2.3
5.2±3.2
F/%
24.3±2.2
22.2±1.4
与灌胃12.5mg.ml-1级比较*P<0.05**P<0.01***P<0.001,与静注6mg.ml-1组比较##P<0.01
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3讨论
采用我室已建立的RP-HPLC方法，对清醒犬采用拉丁方设计进行了5个剂量、两种给药途径的药动学研究，结果表明静注6mg·kg-1后，Dau在犬体内自中央室向周边室分布很快，t1/2(α)小于15min，药物从中央室消除也较快，平均t1/2(β)为(2.7±0.4)h；Dau在犬体内广泛分布，Vd值约为(11.2±2.6)L·kg-1，远大于实验犬体液体积，提示该药因脂溶性强而在体内广泛分布。Dau口服给药，在犬血浆中的C-T曲线呈明显双峰现象，tpeak(1)为(0.8±0.6)h～(1.2±0.5)h，tpeak(2)为(5.2±3.2)h～(6.5±1.91)h，第二峰后下降部分的t1/2(el)明显长于静注后t1/2(β)，这可能与药后双峰现象有关。由于个体差异，各犬出现双峰的时间及程度有所不同，但在同一只犬不同剂量下双峰出现的时间基本一致，峰形也很相似。Dau在大鼠体内药代动力学研究中我们曾报道药时曲线双峰现象的可能原因是药物的胃肠循环,由于种属差异的存在,其结果不能直接推论,故药物在犬体内产生双峰的原因尚有待于实验的证明。Dau在12.5～25mg·kg-1范围内灌胃，药物呈线性消除，而50～100mg·kg-1呈非线性消除，说明药物消除的饱和现象。
, 百拇医药
对于药物C-T曲线的双峰现象，由于其产生原因多样，直至目前尚无一种通用的理想方法予以统计分析。有些作者将其作为单峰处理，显然不甚合适，有许多作者根据药物产生双峰的原因，提出了EHC模型，胃肠道多吸收部位双峰模型[3,4],非连续性吸收[5,6]等，虽可拟合出双峰，但与实际数据契合不理想且重现性较差；生理模型在近十年内得到了较大程度的发展[7]，它作为一种整体模型，可描述任何器官和组织内药物及其代谢物浓度的变化，且可根据种属的生理参数将结果外推[8]，估测药物种属差异，在解释并模拟药物多峰现象中很有发展前景，但是生理模型需要参数很多，这一缺点严重的束缚了它的发展。目前，国际上较常规的处理方法多采用非房室模型法[9,10]，该法分析药物的体内过程,主要依据药时曲线下面积,不受数学模型的限制,普遍适用于任何房室状态。在有第二峰存在时,以第二峰后的下降部分假设为清除相来计算Kel、t1/2(el)、Vd等参数,结果符合药物在体内的基本变化趋势。但此方法也存在着许多缺点:不能给出拟合曲线，提供的参数亦较少,且多为平均值,仅提供药物变化基本趋势,并不能确切地反映体内药物处置的实际情况。虽然该方法有上述一些缺点,但由于其适用性强,特别是在多峰现象仍可应用,故而在国际学术界广为使用。在本次实验中采用非房室模型分析方法进行数据处理,所得参数符合药物动力学变化趋势。
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陈淑娟，女，27岁，医学博士，主要从事药物代谢动力学研究。
曾繁典，男，教授，博士生导师，中国药理学会副理事长。
参 考 文 献
1，Guo DL, Zeng FD, Hu CJ. Effects of Dauricine, quinidine, and sotlol on action potential duration of papillary muscles in vitro. Acta Pharmacol Sin,1997；18:384
2，Chen SJ,Yang YM, Zhang L， et al. A sensitive HPLC method for quantitation of Dauricine. J Tongji Medical University, 2000； 20(1):39
, 百拇医药
3，Lee SH, Lee MG. Pharmacokinetics and pharmaco-dynamics of azosemide after intravenous and oral administration to rats: absorption from various GI segments. J Pharmacokinet Biopharm, 1996； 24(6): 551
4，Mahmood I. Pharmacokinetic analysis of the absorp-tion characteristics of diclofenac sodium in man by use of a multi-segment absorption model. J Pharm Phar-macol, 1996； 48(12):1260
5，Suttle AB, Pollack GM, Brouwer KL， et al. Use of a pharmacokinetic model incorporating discontinuous gastrointestinal absorption to examine the occurrence of double peaks in oral concentration-time profiles.Pharm Res, 1992； 9(3):350
, 百拇医药
6，Witcher JW, Boudinot FD. Applications and simula-tions of a discontinuous oral absorption pharmacoki-netic model. Pharm Res, 1996； 13(11):1720
7，Francis CP Law, 何绍雄.生理药代动力学模型的进展与应用.药学学报,1997； 32(2): 151
8，Bjorkman S, Wada DR, Stanski DR. Application of physiologic models to predict the influence of changes in body composition and blood flows on the pharma-cokinetics of fentanyl and alfentanil in patients. Anesthesiology, 1998； 88(3):657
, http://www.100md.com
9，Benoni G, Terzi M, Adami A,et al.Plasma concen- trations and pharmacokinetic parameters of nitrofenac using a simple and sensitive HPLC method. J Pharm Sci, 1995； 84(1):93
10，Sawamoto F. Prediction of the plasma concentra- tion profiles of orally administered drugs in rats on the basis of gastrointestinal transit kinetics and absorba- bility. J Pharm Pharmacol,1997； 49:4501
2000-05-30收稿，2000-07-07修回, 百拇医药