大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型的研究*
作者：顾立刚 郭学志 王庆国
单位：北京中医药大学基础医学院 北京100029
关键词：肝郁；溃疡性结肠炎；肝郁脾虚证；大鼠模型；疏肝健脾
北京中医药大学学报990206 摘 要：大鼠每天经一定时间限制活动和束绑后肢3周后，用5%醋酸灌注大鼠结肠造成溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型。大鼠分别在3、6、12d后处死检测实验指标。结果表明：模型组大鼠体重下降、粪便溏泄、肾上腺重量增加、胸腺重量下降；结肠粘膜在光镜下可见到大量炎细胞浸润、出血、水肿、粘膜溃疡等；大鼠脾T、B淋巴细胞增殖反应能力明显下降；全血粘度在45、18、11.25s-1切变率时比明显升高；造模12d后，模型组大鼠下丘脑单胺类激素如去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺显著升高；以上各项均比单纯醋酸诱导组改变明显。用疏肝健脾方药治疗后上述指标改善明显。
, http://www.100md.com
Study On Rat Model of Ulcerative Colitis With the TCM Syndrome of
“Depression of Liver-energy and Asthenia of Spleen”
Gu Ligang(顾立刚),Guo Xuezhi(郭学志),Wang qingguo(王庆国)
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
ABSTRACT: Being enraged for 3 weeks and then coloclyster with 5% acetic acid, a rat model of ulcerative colitis with the “Depression of Liver-ene rgy and Asthenia of Spleen” was created. Put the mice to death respectively aft er 3、6、12 days and check the experimental index. The results show that: The bo dy weight decreased with loose stool, the weight of adrenal body increased while that of thymus gland decreased; By the light-microscope the colonic mucosa was shown inflammatory infiltration, hemorrhage, edema and mucosal ulceration, etc. The multiplicative reaction of T, B lymphocytes was remarkably decreased and th e blood viscosity (map.s) (45s-1, 18s-1 and 11.25s-1) level we re significantly increase. After 1 2 days, the hypothalamic, monoamine hormone, like norepinephrine, dopamine and 5 -hydroxytryptamine, were remarkably increased. The changes of all the indexes a bove were more obviously than those only acetic acid induced colitis model s. Further, improvement was achieved by treatment with TCM prescription of “dis perse the depressed liver-energy and invigorate the spleen”.
, 百拇医药
KEY WORDS: Depression of liver-energy; Ulcerative colitis; TCM syn drome of “Depression of Liver-energy and Asthenia of Spleen”; Rat model; Disp erse the depressed liver-energy and invigorate the spleen
病证结合模型是中医证候模型在西医疾病上的具体化，又是西医疾病模型的中医证候化。我们在前期研究工作的基础上，选择了大鼠溃疡性结肠炎模型[1，2]，将其与中医肝郁证模型有机地结合起来[3]，建立大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型，现报道如下。
1 材料和方法
1.1 动物及分组
, 百拇医药 健康Wistar雄性大鼠，体重150～200g，中国中医研究院动物室提供。大鼠随机分为正常对照组、醋酸诱导大鼠溃疡性结肠炎组(简称单纯组)、大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证组(简称肝郁脾虚组)。大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证疏肝健脾治疗组(简称治疗组)，每组25只。疏肝健脾方药选用柴胡桂枝干姜汤加味组成，方药由柴胡、桂枝、干姜、白术、白芍、黄连、黄芩、黄芪、党参等组成，水煎，10g/kg灌胃，1日1次。
1.2 各组动物造模方法
(1)单纯组：参照文献[2]方法，用20%乌拉坦4mL/kg麻醉大鼠后，用特制包有圆头的长注射针头插入大鼠肛门内约10cm处结肠内，并注入5%醋酸1mL，复制醋酸诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。(2)肝郁脾虚组：大鼠首先每天放入特制圆形箱内限制活动、限制饮食，并用胶布束绑大鼠后肢，每天约8h，连续3周造成肝郁脾虚证，然后用醋酸诱导结肠溃疡，方法同单纯组。复制大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型。大鼠用醋酸诱导结肠溃疡24h后，每天继续限制活动。(3)治疗组：大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型制备同上，用醋酸诱导大鼠结肠溃疡24h后，给予大鼠灌胃疏肝健脾方药10g/kg。
, 百拇医药
1.3 实验方法
各组大鼠分别于醋酸灌注结肠后3、6、12d处死，观察大鼠粪便性状；测定大鼠体重，胸腺系数，肾上腺系数，T、B淋巴细胞增殖反应，全血粘度，血液分析及下丘脑单胺类递质的含量。同时分别取上述模型大鼠结肠溃疡粘膜组织及正常组大鼠结肠粘膜组织1cm×1cm×1cm，用福尔马林液固定，HE染色；光镜下观察结肠粘膜组织病理变化。
2 结果
2.1 大鼠体重和粪便性状变化及血液分析
模型组大鼠经限制活动、限制饮食3周后体重比正常组明显下降，P<0.01。肝郁脾虚组体重比单纯组明显下降，分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05。治疗组于第6、12天后，体重分别比肝郁脾虚组明显增加，均P<0.05(见图1)。
, 百拇医药
图1 醋酸诱导后大鼠体重变化的动态观察
注：—◆—正常对照组 —■—醋酸诱导组
—▲—肝郁脾虚组
治疗组
大鼠粪便观察于醋酸灌注结肠24h后开始，结果发现，肝郁脾虚组大鼠粪便稀溏，便中带血及粘液明显比单纯组严重，大便次数也有增加。第3天后仍可见上述症状。治疗组第3天后，大鼠粪便稀溏比肝郁脾虚组和单纯组明显减轻，便中未见带血及粘液。第12天后肝郁脾虚组和单纯组大鼠粪便稀溏比治疗组明显，但便中未见带血及粘液。大鼠于醋酸诱导结肠溃疡后第6天进行血液分析测定，结果发现，正常组、单纯组、肝郁脾虚组、治疗组血红蛋白(Hb)分别为128.5，125.7，106.0，120.7g/L。肝郁脾虚组与单纯组比较减少明显，P<0.05；治疗组与肝郁脾虚组比较血红蛋白恢复明显，P<0.05；上述4组血白细胞数(WBC)分别为7.15×109L-1，6.23×109L-1，12.65×109L-1，6.20×109L-1。肝郁脾虚组与单纯组比较增加明显，P<0.05；治疗组与肝郁脾虚组比较血白细胞数恢复明显，P<0.05。
, 百拇医药
2.2 大鼠肾上腺系数、胸腺系数及免疫功能变化的动态观察
结果见表1。
表1 大鼠肾上腺重量和免疫功能变化的动态观察(n=8;
±s) 组 别
肾上腺系数
胸腺系数
T细胞增殖(A值)
B细胞增殖(A值)
正常对照组(3d)
0.21±0.01
3.04±0.36
, http://www.100md.com
0.26±0.04
0.22±0.04
单纯溃疡组(3d)
0.20±0.02
2.23±0.16△
0.25±0.01
0.39±0.01
肝郁脾虚组(3d)
0.41±0.08*
0.94±0.10*
0.21±0.02
, http://www.100md.com
0.17±0.01
治 疗 组(3d)
0.42±0.12
1.27±0.08●
0.24±0.02
0.22±0.04●
正常对照组(6d)
0.21±0.06
3.18±0.89
0.46±0.05
0.413±0.01
, 百拇医药
单纯溃疡组(6d)
0.23±0.01
3.02±0.30
0.36±0.02△
0.372±0.03
肝郁脾虚组(6d)
0.34±0.08
1.84±0.10**
0.30±0.02**
0.27±0.01**
, http://www.100md.com 治 疗 组(6d)
0.24±0.02●
1.79±0.52
0.39±0.30●
0.49±0.06●
正常对照组(12d)
—
1.39±0.23
0.37±0.02
0.39±0.07
单纯溃疡组(12d)
, 百拇医药
—
1.24±0.43
0.34±0.04
0.44±0.09
肝郁脾虚组(12d)
—
0.72±0.12*
0.28±0.04*
0.28±0.04
治 疗 组(12d)
—
0.67±0.03
, 百拇医药
0.44±0.02●
0.23±0.01
2.3 大鼠全血粘度变化动态观察
结果见表2。表2 大鼠全血粘度变化动态观察(map.a；±s) 组 别
全血粘度
11.25s-1
1.75s-1
45s-1
75s-1
, 百拇医药
225s-1
正常对照组(3d)
11.19±0.33
9.84±0.17
7.85±0.12
7.05±0.01
5.89±0.25
单纯溃疡组(3d)
12.71±0.41
11.12±0.23△
, 百拇医药
8.72±0.12
7.15±0.07
5.92±0.26
肝郁脾虚组(3d)
15.73±2.84
13.71±0.28*
19.01±0.34**
14.22±0.25**
7.83±1.49
治 疗 组(3d)
, 百拇医药
26.19±4.34
20.99±3.05
15.78±2.34
11.94±1.63
7.78±0.68
正常对照组(6d)
12.50±2.08
10.89±1.36
8.48±0.92
8.70±0.86
7.34±0.78
, http://www.100md.com 单纯溃疡组(6d)
16.72±2.01
13.80±1.52
10.19±0.95
8.90±0.85
7.49±0.78
肝郁脾虚组(6d)
24.28±4.80*
21.24±5.59*
19.81±0.98*
10.88±0.82*
, 百拇医药
8.33±0.43
治 疗 组(6d)
15.41±2.57●
12.93±1.69●
10.46±1.17●
9.60±1.11
7.56±1.10
正常对照组(12d)
12.08±0.25
11.09±0.72
10.25±0.11
, 百拇医药
9.57±0.41
7.89±0.46
单纯溃疡组(12d)
15.86±1.46
13.69±1.03
10.61±1.29
9.96±1.17
8.11±0.88
肝郁脾虚组(12d)
29.08±0.45*
22.81±1.23*
, http://www.100md.com
13.02±1.00
12.29±0.99
8.37±0.63
治 疗 组(12d)
28.45±4.78
17.55±0.35
11.21±0.32
—
8.40±0.61
注：组别后括号内为醋酸诱导后的天数；与正常对照组比较△P<0.05；与单纯溃疡组比较*P<0.05 **P<0.05；与肝郁脾虚组比较●P<0.05
, http://www.100md.com
2.4 大鼠下丘脑单胺类递质含量变化
结果见表3。
表3 大鼠下丘脑单胺类递质含量变化的观察(μg/g;±s) 组 别
去甲肾上腺素
多巴胺
5-羟色胺
正常对照组(12d)
1.39±0.51
3.25±0.16
0.80±0.04
, 百拇医药
单纯溃疡组(12d)
1.56±0.35
3.82±0.10
1.04±0.06
肝郁脾虚组(12d)
3.92±0.65△
5.75±0.02△
1.24±0.02△
治 疗 组(12d)
2.29±0.11●
, 百拇医药 3.62±0.02●
1.05±0.04●
注：组别后括号内为醋酸诱导后的天数；与单纯溃疡组比较△P<0.05；与肝郁脾虚组比较●P<0.052.5 大鼠结肠粘膜组织病理形态学变化
光镜检查：在醋酸灌注结肠后第3、6天，模型组大鼠结肠粘膜出现大片坏死，结构破坏，形成大面积溃疡，大部分切片均为溃疡所占，或仅见少量残留粘膜上皮，粘膜层及粘膜下层有大量炎细胞浸润，粘膜厚度变薄。肝郁脾虚组与单纯溃疡组比较，结肠粘膜病理变化严重。治疗组在醋酸灌注结肠后第6天，大鼠结肠粘膜充血水肿明显减轻，炎性渗出物减少，溃疡缩小甚至愈合，结肠断面病理切片显示粘膜基本恢复正常，腺体生长，杯状细胞仍有轻度萎缩现象，仍有少量炎性细胞浸润。
3 讨论
, 百拇医药
溃疡性结肠炎属祖国医学“久泻、久痢”的范畴，临床上以脾虚证居多。然而，脾属土，肝属木，土虚易受木乘，肝郁多犯脾胃，故临床上本病多见脾虚而兼肝郁者很。西医学多认为机体免疫机制的异常在本病的发病过程中占有重要的位置。此外，也与遗传因素、精神紧张因素和胃肠功能的紊乱具有密切的关系。而后两个因素正与中医学的脾气虚弱、肝郁气滞密切相关。本实验根据溃疡性结肠炎肝郁脾虚证病人情志不和，肝气横逆犯脾，脾失健运，清浊不分，混杂而下的病机，在复制大鼠肝郁证模型的基础上加用醋酸灌注大鼠结肠，造成结肠溃疡，从而建立大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型。已知，醋酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的病理特点表现为结肠粘膜水肿、坏死、炎细胞浸润和溃疡的急性炎症反应[1]。本实验发现，通过在中医肝郁证模型的基础上叠加醋酸灌注所建立的大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型与单纯性醋酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎模型相比较，具有以下特征：体重下降、粪便溏泄明显、免疫器官萎缩、免疫功能下降；体内去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺等儿茶酚胺类激素分泌增加，肾上腺重量增加、血液粘度升高和血红蛋白减少、白细胞升高；还具有结肠粘膜充血水肿明显，糜烂出现严重，结肠粘膜溃疡指数增加、甚至出现结肠穿孔，溃疡表面布满脓苔，溃疡形成程度明显较单纯用醋酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎模型为重等特征。由此可以说明，中医肝郁因素或西医学所称的精神刺激因素的加入，可通过精神—神经体液—免疫网络，影响炎症的过程和活动性，从而加重溃疡性结肠炎的病变。
, 百拇医药
作者简介：顾立刚，男，46岁，副研究生，硕士学位导师
* 国家中医药管理局重点课题(No.950489)；国家教委博士点课题资助
参考文献
[1]陈小野主编.实用中医证候动物模型学.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1993.172～174
[2]Elson C.O,Sartor R.B,Tennyson G.S,et al.Experimental models of inflammatory b owel disease. Gastroenterology, 1995,109:1344～1367
[3]赵益业，刘承才.肝郁证的免疫学探讨.山东中医药大学学报，1997，21(1)：28～32
收稿日期：1998-04-22, 百拇医药
单位：北京中医药大学基础医学院 北京100029
关键词：肝郁；溃疡性结肠炎；肝郁脾虚证；大鼠模型；疏肝健脾
北京中医药大学学报990206 摘 要：大鼠每天经一定时间限制活动和束绑后肢3周后，用5%醋酸灌注大鼠结肠造成溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型。大鼠分别在3、6、12d后处死检测实验指标。结果表明：模型组大鼠体重下降、粪便溏泄、肾上腺重量增加、胸腺重量下降；结肠粘膜在光镜下可见到大量炎细胞浸润、出血、水肿、粘膜溃疡等；大鼠脾T、B淋巴细胞增殖反应能力明显下降；全血粘度在45、18、11.25s-1切变率时比明显升高；造模12d后，模型组大鼠下丘脑单胺类激素如去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺显著升高；以上各项均比单纯醋酸诱导组改变明显。用疏肝健脾方药治疗后上述指标改善明显。
, http://www.100md.com
Study On Rat Model of Ulcerative Colitis With the TCM Syndrome of
“Depression of Liver-energy and Asthenia of Spleen”
Gu Ligang(顾立刚),Guo Xuezhi(郭学志),Wang qingguo(王庆国)
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
ABSTRACT: Being enraged for 3 weeks and then coloclyster with 5% acetic acid, a rat model of ulcerative colitis with the “Depression of Liver-ene rgy and Asthenia of Spleen” was created. Put the mice to death respectively aft er 3、6、12 days and check the experimental index. The results show that: The bo dy weight decreased with loose stool, the weight of adrenal body increased while that of thymus gland decreased; By the light-microscope the colonic mucosa was shown inflammatory infiltration, hemorrhage, edema and mucosal ulceration, etc. The multiplicative reaction of T, B lymphocytes was remarkably decreased and th e blood viscosity (map.s) (45s-1, 18s-1 and 11.25s-1) level we re significantly increase. After 1 2 days, the hypothalamic, monoamine hormone, like norepinephrine, dopamine and 5 -hydroxytryptamine, were remarkably increased. The changes of all the indexes a bove were more obviously than those only acetic acid induced colitis model s. Further, improvement was achieved by treatment with TCM prescription of “dis perse the depressed liver-energy and invigorate the spleen”.
, 百拇医药
KEY WORDS: Depression of liver-energy; Ulcerative colitis; TCM syn drome of “Depression of Liver-energy and Asthenia of Spleen”; Rat model; Disp erse the depressed liver-energy and invigorate the spleen
病证结合模型是中医证候模型在西医疾病上的具体化，又是西医疾病模型的中医证候化。我们在前期研究工作的基础上，选择了大鼠溃疡性结肠炎模型[1，2]，将其与中医肝郁证模型有机地结合起来[3]，建立大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型，现报道如下。
1 材料和方法
1.1 动物及分组
, 百拇医药 健康Wistar雄性大鼠，体重150～200g，中国中医研究院动物室提供。大鼠随机分为正常对照组、醋酸诱导大鼠溃疡性结肠炎组(简称单纯组)、大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证组(简称肝郁脾虚组)。大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证疏肝健脾治疗组(简称治疗组)，每组25只。疏肝健脾方药选用柴胡桂枝干姜汤加味组成，方药由柴胡、桂枝、干姜、白术、白芍、黄连、黄芩、黄芪、党参等组成，水煎，10g/kg灌胃，1日1次。
1.2 各组动物造模方法
(1)单纯组：参照文献[2]方法，用20%乌拉坦4mL/kg麻醉大鼠后，用特制包有圆头的长注射针头插入大鼠肛门内约10cm处结肠内，并注入5%醋酸1mL，复制醋酸诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。(2)肝郁脾虚组：大鼠首先每天放入特制圆形箱内限制活动、限制饮食，并用胶布束绑大鼠后肢，每天约8h，连续3周造成肝郁脾虚证，然后用醋酸诱导结肠溃疡，方法同单纯组。复制大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型。大鼠用醋酸诱导结肠溃疡24h后，每天继续限制活动。(3)治疗组：大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型制备同上，用醋酸诱导大鼠结肠溃疡24h后，给予大鼠灌胃疏肝健脾方药10g/kg。
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1.3 实验方法
各组大鼠分别于醋酸灌注结肠后3、6、12d处死，观察大鼠粪便性状；测定大鼠体重，胸腺系数，肾上腺系数，T、B淋巴细胞增殖反应，全血粘度，血液分析及下丘脑单胺类递质的含量。同时分别取上述模型大鼠结肠溃疡粘膜组织及正常组大鼠结肠粘膜组织1cm×1cm×1cm，用福尔马林液固定，HE染色；光镜下观察结肠粘膜组织病理变化。
2 结果
2.1 大鼠体重和粪便性状变化及血液分析
模型组大鼠经限制活动、限制饮食3周后体重比正常组明显下降，P<0.01。肝郁脾虚组体重比单纯组明显下降，分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05。治疗组于第6、12天后，体重分别比肝郁脾虚组明显增加，均P<0.05(见图1)。
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图1 醋酸诱导后大鼠体重变化的动态观察
注：—◆—正常对照组 —■—醋酸诱导组
—▲—肝郁脾虚组
治疗组大鼠粪便观察于醋酸灌注结肠24h后开始，结果发现，肝郁脾虚组大鼠粪便稀溏，便中带血及粘液明显比单纯组严重，大便次数也有增加。第3天后仍可见上述症状。治疗组第3天后，大鼠粪便稀溏比肝郁脾虚组和单纯组明显减轻，便中未见带血及粘液。第12天后肝郁脾虚组和单纯组大鼠粪便稀溏比治疗组明显，但便中未见带血及粘液。大鼠于醋酸诱导结肠溃疡后第6天进行血液分析测定，结果发现，正常组、单纯组、肝郁脾虚组、治疗组血红蛋白(Hb)分别为128.5，125.7，106.0，120.7g/L。肝郁脾虚组与单纯组比较减少明显，P<0.05；治疗组与肝郁脾虚组比较血红蛋白恢复明显，P<0.05；上述4组血白细胞数(WBC)分别为7.15×109L-1，6.23×109L-1，12.65×109L-1，6.20×109L-1。肝郁脾虚组与单纯组比较增加明显，P<0.05；治疗组与肝郁脾虚组比较血白细胞数恢复明显，P<0.05。
, 百拇医药
2.2 大鼠肾上腺系数、胸腺系数及免疫功能变化的动态观察
结果见表1。
表1 大鼠肾上腺重量和免疫功能变化的动态观察(n=8;
±s) 组 别肾上腺系数
胸腺系数
T细胞增殖(A值)
B细胞增殖(A值)
正常对照组(3d)
0.21±0.01
3.04±0.36
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0.26±0.04
0.22±0.04
单纯溃疡组(3d)
0.20±0.02
2.23±0.16△
0.25±0.01
0.39±0.01
肝郁脾虚组(3d)
0.41±0.08*
0.94±0.10*
0.21±0.02
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0.17±0.01
治 疗 组(3d)
0.42±0.12
1.27±0.08●
0.24±0.02
0.22±0.04●
正常对照组(6d)
0.21±0.06
3.18±0.89
0.46±0.05
0.413±0.01
, 百拇医药
单纯溃疡组(6d)
0.23±0.01
3.02±0.30
0.36±0.02△
0.372±0.03
肝郁脾虚组(6d)
0.34±0.08
1.84±0.10**
0.30±0.02**
0.27±0.01**
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0.24±0.02●
1.79±0.52
0.39±0.30●
0.49±0.06●
正常对照组(12d)
—
1.39±0.23
0.37±0.02
0.39±0.07
单纯溃疡组(12d)
, 百拇医药
—
1.24±0.43
0.34±0.04
0.44±0.09
肝郁脾虚组(12d)
—
0.72±0.12*
0.28±0.04*
0.28±0.04
治 疗 组(12d)
—
0.67±0.03
, 百拇医药
0.44±0.02●
0.23±0.01
2.3 大鼠全血粘度变化动态观察
结果见表2。表2 大鼠全血粘度变化动态观察(map.a；
±s) 组 别全血粘度
11.25s-1
1.75s-1
45s-1
75s-1
, 百拇医药
225s-1
正常对照组(3d)
11.19±0.33
9.84±0.17
7.85±0.12
7.05±0.01
5.89±0.25
单纯溃疡组(3d)
12.71±0.41
11.12±0.23△
, 百拇医药
8.72±0.12
7.15±0.07
5.92±0.26
肝郁脾虚组(3d)
15.73±2.84
13.71±0.28*
19.01±0.34**
14.22±0.25**
7.83±1.49
治 疗 组(3d)
, 百拇医药
26.19±4.34
20.99±3.05
15.78±2.34
11.94±1.63
7.78±0.68
正常对照组(6d)
12.50±2.08
10.89±1.36
8.48±0.92
8.70±0.86
7.34±0.78
, http://www.100md.com 单纯溃疡组(6d)
16.72±2.01
13.80±1.52
10.19±0.95
8.90±0.85
7.49±0.78
肝郁脾虚组(6d)
24.28±4.80*
21.24±5.59*
19.81±0.98*
10.88±0.82*
, 百拇医药
8.33±0.43
治 疗 组(6d)
15.41±2.57●
12.93±1.69●
10.46±1.17●
9.60±1.11
7.56±1.10
正常对照组(12d)
12.08±0.25
11.09±0.72
10.25±0.11
, 百拇医药
9.57±0.41
7.89±0.46
单纯溃疡组(12d)
15.86±1.46
13.69±1.03
10.61±1.29
9.96±1.17
8.11±0.88
肝郁脾虚组(12d)
29.08±0.45*
22.81±1.23*
, http://www.100md.com
13.02±1.00
12.29±0.99
8.37±0.63
治 疗 组(12d)
28.45±4.78
17.55±0.35
11.21±0.32
—
8.40±0.61
注：组别后括号内为醋酸诱导后的天数；与正常对照组比较△P<0.05；与单纯溃疡组比较*P<0.05 **P<0.05；与肝郁脾虚组比较●P<0.05
, http://www.100md.com
2.4 大鼠下丘脑单胺类递质含量变化
结果见表3。
表3 大鼠下丘脑单胺类递质含量变化的观察(μg/g;
±s) 组 别去甲肾上腺素
多巴胺
5-羟色胺
正常对照组(12d)
1.39±0.51
3.25±0.16
0.80±0.04
, 百拇医药
单纯溃疡组(12d)
1.56±0.35
3.82±0.10
1.04±0.06
肝郁脾虚组(12d)
3.92±0.65△
5.75±0.02△
1.24±0.02△
治 疗 组(12d)
2.29±0.11●
, 百拇医药 3.62±0.02●
1.05±0.04●
注：组别后括号内为醋酸诱导后的天数；与单纯溃疡组比较△P<0.05；与肝郁脾虚组比较●P<0.052.5 大鼠结肠粘膜组织病理形态学变化
光镜检查：在醋酸灌注结肠后第3、6天，模型组大鼠结肠粘膜出现大片坏死，结构破坏，形成大面积溃疡，大部分切片均为溃疡所占，或仅见少量残留粘膜上皮，粘膜层及粘膜下层有大量炎细胞浸润，粘膜厚度变薄。肝郁脾虚组与单纯溃疡组比较，结肠粘膜病理变化严重。治疗组在醋酸灌注结肠后第6天，大鼠结肠粘膜充血水肿明显减轻，炎性渗出物减少，溃疡缩小甚至愈合，结肠断面病理切片显示粘膜基本恢复正常，腺体生长，杯状细胞仍有轻度萎缩现象，仍有少量炎性细胞浸润。
3 讨论
, 百拇医药
溃疡性结肠炎属祖国医学“久泻、久痢”的范畴，临床上以脾虚证居多。然而，脾属土，肝属木，土虚易受木乘，肝郁多犯脾胃，故临床上本病多见脾虚而兼肝郁者很。西医学多认为机体免疫机制的异常在本病的发病过程中占有重要的位置。此外，也与遗传因素、精神紧张因素和胃肠功能的紊乱具有密切的关系。而后两个因素正与中医学的脾气虚弱、肝郁气滞密切相关。本实验根据溃疡性结肠炎肝郁脾虚证病人情志不和，肝气横逆犯脾，脾失健运，清浊不分，混杂而下的病机，在复制大鼠肝郁证模型的基础上加用醋酸灌注大鼠结肠，造成结肠溃疡，从而建立大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型。已知，醋酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的病理特点表现为结肠粘膜水肿、坏死、炎细胞浸润和溃疡的急性炎症反应[1]。本实验发现，通过在中医肝郁证模型的基础上叠加醋酸灌注所建立的大鼠溃疡性结肠炎肝郁脾虚证模型与单纯性醋酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎模型相比较，具有以下特征：体重下降、粪便溏泄明显、免疫器官萎缩、免疫功能下降；体内去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺等儿茶酚胺类激素分泌增加，肾上腺重量增加、血液粘度升高和血红蛋白减少、白细胞升高；还具有结肠粘膜充血水肿明显，糜烂出现严重，结肠粘膜溃疡指数增加、甚至出现结肠穿孔，溃疡表面布满脓苔，溃疡形成程度明显较单纯用醋酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎模型为重等特征。由此可以说明，中医肝郁因素或西医学所称的精神刺激因素的加入，可通过精神—神经体液—免疫网络，影响炎症的过程和活动性，从而加重溃疡性结肠炎的病变。
, 百拇医药
作者简介：顾立刚，男，46岁，副研究生，硕士学位导师
* 国家中医药管理局重点课题(No.950489)；国家教委博士点课题资助
参考文献
[1]陈小野主编.实用中医证候动物模型学.北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1993.172～174
[2]Elson C.O,Sartor R.B,Tennyson G.S,et al.Experimental models of inflammatory b owel disease. Gastroenterology, 1995,109:1344～1367
[3]赵益业，刘承才.肝郁证的免疫学探讨.山东中医药大学学报，1997，21(1)：28～32
收稿日期：1998-04-22, 百拇医药