水杉总黄酮对肾性高血压大鼠左室肥厚的作用△
作者：刘惟莞 曾加雄 石明健 杨晓茹 糜留西 郑庆安 卢云英 王红英
单位：武汉大学医学系药理学教研室 430071
关键词：木杉总黄酮；高血压；左室肥厚
中草药001119
摘 要 目的：研究水杉总黄酮对肾性高血压大鼠左室肥厚的预防 作用。方法：二肾一夹法建立大鼠肾性高血压心肌肥厚模型，术后第4周，不同剂量的水杉 总黄酮ig给药，持续5周。结果：水杉总黄酮(400， 40 mg/kg.d)能显著降低 HW/BW、LVW/ BW、心肌纤维直径、左心室肌 Ca2+含量，对大鼠收缩压无显著性影响。结论：水 杉总黄酮对肾性高血压大鼠左室肥厚有预防作用，机制可能与钙拮抗作用有关。
Effects of Total Flavone of Metasequoia glyptostroboide s on Left Ventricular
, http://www.100md.com
Hypertrophy in Renovascular Hypertensive Rats
Liu Weiwan Zeng Jiaxiong Shi Mingjian Yang Xiaoru Lu Yunying and Wang Hongying
(Department of Medicine, Wuhan University Wuhan 430071
Mi Liuxi and Zheng Qing'an
(Wuhan Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences)
Abstract The effects of total flavone of Metasequo ia glyptostroboides Hu et Cheng (TFM) on left ventricular hypertrophy in rat were investigated. Left ventricular hypertrophy of rat was induced by renova s cular hypertension, and then treated by ig TFM for five weeks. Results showed t hat TFM (400,40 mg/kg/d) markedly reduced HW/BW, LVW/BW, left ventricular Ca 2+content and myofibril diameter, but without effect on systolic blood pressur e (SBP). In conclusion, TFM can prevent left ventricular hypertrophy in renovas c ular hypertensive rats. The mechanism of action may be related to its calcium a ntagonistic properties.
, 百拇医药
Key words total flavone of Metasepuoia glyptostroboi des Hu et Cheng hypertension left ventricular hypertrophy
左室肥厚(LVH)是心血管系统疾病的一项独立危险因素[1]。心脏机械负 荷过重和许多非血流动力学因素的刺激均可诱发LVH。现已发现α-甲基多巴、血管紧张素 转化酶抑制剂、钙离子拮抗剂等均有不同程度的防止左室肥厚作用。水杉总黄酮(total fla vones of Metasequosia, glyptostroboides TFM)是从古老的杉属植物水 杉中提取的活性成分，对其初步 药理学研究表明，TFM具有抗心肌缺血和抗心律失常作用。我们通过建立肾性高血压大鼠左 室肥厚模型，研究TFM对其作用。
1 材料与方法
1.1 动物：Sprague-Dawley雄性大鼠，体重150～200 g，湖北医科大学实验动物中心提供 。
, 百拇医药
1.2 仪器与试剂：HX-Ⅱ型小动物血压测量器(尾套检压计)，湖南医科大学监制；日立18 0 -80型原子吸收分光光度计，日本产；测微尺，上海第三光学仪器厂。TFM，是从杉属植物 水 杉中提取的总黄酮(含量为32%)，浅褐色粉剂，易溶于水，中国科学院武汉植物研究所提供 ；依那普利(enalapril, Ena)，常州制药厂，批号961027；其余试剂为市售分析纯产品。
1.3 模型的建立与分组：参照文献[2]，用一内径为0.3 mm的环形金属夹钳夹左 肾动脉起始段，对侧肾脏不触及(二肾一夹法)。假手术组除不钳夹肾动脉外，其余过程相同 。术后加强护理并 im 青霉素预防感染。术前 1 d 及术后每周的同一时间测定大鼠清醒状 态下血压(用尾套检压计)，术后3周内收缩压 ≥20 kPa (即150 mmHg)者(假手术组除外 )纳入 实验。术后第4周将大鼠随机分为6组：TFM 高、中、低剂量组和阳性药物对照组分别 ig TF M 4，40，400 mg/(kg.d) 和Ena 6 mg/(kg.d)；左室肥厚(LVH)组和假手术(SO)组均 ig 等体积生理盐水。持续给药5周。
, 百拇医药
1.4 实验指标测定：术后第8周末将动物称体重后，断头处死，称取心脏重量和左心室重 量。并于每组随机送一标本作组织学检查：从左心室壁取一小块心肌组织，10%福尔马林固 定，常规石蜡包埋，制成4 μm 厚的普通切片，HE染色，镜下放大400倍，测量20根肌纤维 的直径作为该组动物心肌纤维直径的大小。
左心室肌钙离子含量的测定：组织处理参照Daly等[3]的方法，用原子吸收分光光度计测定。含量以每克干重心肌组织所含的微摩尔数(μ mol/g*d*w)表示。
1.5 统计分析：全部数据以
±s表示，两组间差 异比较用组间t检验进行显著性测定。
2 结果
2.1 对大鼠收缩压的影响：术后LVH组大鼠血压逐渐升高，至第8周末，与SO组比有显著差 异(P<0.01)。术后第4周开始给药后，Ena组大鼠血压明显降低，至第8 周 末与LVH相比有显著差异(P<0.01)，但仍然比SO组大鼠血压高( P<0.01)。第8周末TFM组大鼠血压与LVH组比，未有明显下降(P <0.05)。结果见图1。
, 百拇医药
图1 TFM对大鼠收缩压的影响
2.2 对心肌重量参数影响：LVH组大鼠的HW(心重)、HW/BW(心重/体重)、LVW(左心重)、LV W/BW显著高于SO组(P<0.01)；而与LVH组比，TFM 40，4 00 mg/( k g.d) 组和Ena 组大鼠的上述指标皆显著降低(P<0.01)。结果见表1。 与SO组相比：**P<0.01； 与LVH组相比： ##P<0.01
2.3 对左心室肌钙离子含量的影响：与SO组比，LVH组大鼠左心室肌Ca2+含量增加19.87%(P<0.01)；TFM组和Ena 组大鼠左心室肌Ca2+含量比LVH组分别降低14.08%和11.05%，皆有显著意义(P<0.05及P<0.01)。结果见表2。
2.4 对心肌纤维直径的影响：由图2可见，LVH组大鼠的心肌纤维直径比SO组明显增大([ WTBX P<0.01)；与LVH相比，TFM 40，400 mg/(kg*d)组和Ena组大鼠的心肌纤维 直径皆明显缩小(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
Ena673.22±0.36##
与SO组相比：**P<0.01
与LVH组相比：#P<0.05 ##P<0. 01
图2 TFM对心肌纤维直径的影响
本研究通过缩窄左肾动脉建立肾性高血压大鼠左室肥厚模型，其HW、HW/BW、LVW、LVW/BW、 心肌纤维直径皆比假手术组增大，而TFM 40，400 mg/(k*d)组和Ena组的上述指标皆明显比 左室肥厚组缩小，说明两药对肾性高血压大鼠左室肥厚均有预防作用。而且本实验发现TFM 并不明显地降低大鼠血压，提示TFM抑制肾性高血压左室肥厚的机制并非通过降低心脏的机 械负荷而产生的。
, 百拇医药
许多文献[4～6]认为，Ca2+超负荷是心肌肥厚发生机制的重要环节。实验中 测定了心肌组织Ca2+含量，发现肥厚心肌组织Ca2+含量显著增高，结果与上述 报道相符。而TFM可使心肌组织Ca2+含量明显降低，我室以前研究亦证明TFM对心肌细 胞 钙离子通道有阻断作用，提示这可能是TFM防止肾性高血压左室肥厚的作用机制之一。依那 普利亦可降低心肌组织Ca2+含量，这可能与其抑制血管紧张素Ⅱ的产生而防止Ca 2+超负荷有关[7，8]。
本研究结果表明，TFM可在不明显降低血压的情况下，防止肾性高血压大鼠左室肥厚的发生 ，机制可能与其对心肌细胞的钙拮抗作用有关，但至于其它方面的详细作用机制尚有待进一 步的探讨。
Address： Liu Weiwan, Medical Department of Wuhan University, Wuhan
, 百拇医药
国家自然科学基金资助项目，项目号39770088
刘惟莞 女，现任武汉大学医学系药理学教研室教授，主要从事心血管药理的研究。目前 承担国家自然科学基金《古老树种心脑血管疾病活性成分研究》、《重要资源植物杉科植物 特征成分和活性研究》及中科院资源与环境“九五”重大项目《治疗数种重要疾病新天然药 物研究与开发》和省、市科委等课题5项。
中科院武汉植物研究所
参 考 文 献
1，Weber J R, Pa P. Am Heart J,1988,116(1):272
2，Kuwajima I, Kardon M B, Pegram B L, et al. Hypertensi on, 1982, 4(3pt 2):113
, http://www.100md.com
3，Dlay M J, Elz J S, Nayler W G. Circ Res, 1987,61(3):560
4，Marban E, Koretsune Y. Hypertension, 1990,9(4):225
5，章友华，徐守春.中国循环杂志，1994，9(4)：225
6，Sun L, Rao M R, Wang J X. Acta Pharmacologica Sinica, 1997,18(3):251
7，Baker K M, Singer H A. Circ Res, 1998,62(6):896
8，Endoh M, Blinks J R. Circ Res, 1988,62(2):247
(2000-01-19收稿), http://www.100md.com
单位：武汉大学医学系药理学教研室 430071
关键词：木杉总黄酮；高血压；左室肥厚
中草药001119
摘 要 目的：研究水杉总黄酮对肾性高血压大鼠左室肥厚的预防 作用。方法：二肾一夹法建立大鼠肾性高血压心肌肥厚模型，术后第4周，不同剂量的水杉 总黄酮ig给药，持续5周。结果：水杉总黄酮(400， 40 mg/kg.d)能显著降低 HW/BW、LVW/ BW、心肌纤维直径、左心室肌 Ca2+含量，对大鼠收缩压无显著性影响。结论：水 杉总黄酮对肾性高血压大鼠左室肥厚有预防作用，机制可能与钙拮抗作用有关。
Effects of Total Flavone of Metasequoia glyptostroboide s on Left Ventricular
, http://www.100md.com
Hypertrophy in Renovascular Hypertensive Rats
Liu Weiwan Zeng Jiaxiong Shi Mingjian Yang Xiaoru Lu Yunying and Wang Hongying
(Department of Medicine, Wuhan University Wuhan 430071
Mi Liuxi and Zheng Qing'an
(Wuhan Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences)
Abstract The effects of total flavone of Metasequo ia glyptostroboides Hu et Cheng (TFM) on left ventricular hypertrophy in rat were investigated. Left ventricular hypertrophy of rat was induced by renova s cular hypertension, and then treated by ig TFM for five weeks. Results showed t hat TFM (400,40 mg/kg/d) markedly reduced HW/BW, LVW/BW, left ventricular Ca 2+content and myofibril diameter, but without effect on systolic blood pressur e (SBP). In conclusion, TFM can prevent left ventricular hypertrophy in renovas c ular hypertensive rats. The mechanism of action may be related to its calcium a ntagonistic properties.
, 百拇医药
Key words total flavone of Metasepuoia glyptostroboi des Hu et Cheng hypertension left ventricular hypertrophy
左室肥厚(LVH)是心血管系统疾病的一项独立危险因素[1]。心脏机械负 荷过重和许多非血流动力学因素的刺激均可诱发LVH。现已发现α-甲基多巴、血管紧张素 转化酶抑制剂、钙离子拮抗剂等均有不同程度的防止左室肥厚作用。水杉总黄酮(total fla vones of Metasequosia, glyptostroboides TFM)是从古老的杉属植物水 杉中提取的活性成分，对其初步 药理学研究表明，TFM具有抗心肌缺血和抗心律失常作用。我们通过建立肾性高血压大鼠左 室肥厚模型，研究TFM对其作用。
1 材料与方法
1.1 动物：Sprague-Dawley雄性大鼠，体重150～200 g，湖北医科大学实验动物中心提供 。
, 百拇医药
1.2 仪器与试剂：HX-Ⅱ型小动物血压测量器(尾套检压计)，湖南医科大学监制；日立18 0 -80型原子吸收分光光度计，日本产；测微尺，上海第三光学仪器厂。TFM，是从杉属植物 水 杉中提取的总黄酮(含量为32%)，浅褐色粉剂，易溶于水，中国科学院武汉植物研究所提供 ；依那普利(enalapril, Ena)，常州制药厂，批号961027；其余试剂为市售分析纯产品。
1.3 模型的建立与分组：参照文献[2]，用一内径为0.3 mm的环形金属夹钳夹左 肾动脉起始段，对侧肾脏不触及(二肾一夹法)。假手术组除不钳夹肾动脉外，其余过程相同 。术后加强护理并 im 青霉素预防感染。术前 1 d 及术后每周的同一时间测定大鼠清醒状 态下血压(用尾套检压计)，术后3周内收缩压 ≥20 kPa (即150 mmHg)者(假手术组除外 )纳入 实验。术后第4周将大鼠随机分为6组：TFM 高、中、低剂量组和阳性药物对照组分别 ig TF M 4，40，400 mg/(kg.d) 和Ena 6 mg/(kg.d)；左室肥厚(LVH)组和假手术(SO)组均 ig 等体积生理盐水。持续给药5周。
, 百拇医药
1.4 实验指标测定：术后第8周末将动物称体重后，断头处死，称取心脏重量和左心室重 量。并于每组随机送一标本作组织学检查：从左心室壁取一小块心肌组织，10%福尔马林固 定，常规石蜡包埋，制成4 μm 厚的普通切片，HE染色，镜下放大400倍，测量20根肌纤维 的直径作为该组动物心肌纤维直径的大小。
左心室肌钙离子含量的测定：组织处理参照Daly等[3]的方法，用原子吸收分光光度计测定。含量以每克干重心肌组织所含的微摩尔数(μ mol/g*d*w)表示。
1.5 统计分析：全部数据以
±s表示，两组间差 异比较用组间t检验进行显著性测定。2 结果
2.1 对大鼠收缩压的影响：术后LVH组大鼠血压逐渐升高，至第8周末，与SO组比有显著差 异(P<0.01)。术后第4周开始给药后，Ena组大鼠血压明显降低，至第8 周 末与LVH相比有显著差异(P<0.01)，但仍然比SO组大鼠血压高( P<0.01)。第8周末TFM组大鼠血压与LVH组比，未有明显下降(P <0.05)。结果见图1。
, 百拇医药
图1 TFM对大鼠收缩压的影响
2.2 对心肌重量参数影响：LVH组大鼠的HW(心重)、HW/BW(心重/体重)、LVW(左心重)、LV W/BW显著高于SO组(P<0.01)；而与LVH组比，TFM 40，4 00 mg/( k g.d) 组和Ena 组大鼠的上述指标皆显著降低(P<0.01)。结果见表1。 与SO组相比：**P<0.01； 与LVH组相比： ##P<0.01
2.3 对左心室肌钙离子含量的影响：与SO组比，LVH组大鼠左心室肌Ca2+含量增加19.87%(P<0.01)；TFM组和Ena 组大鼠左心室肌Ca2+含量比LVH组分别降低14.08%和11.05%，皆有显著意义(P<0.05及P<0.01)。结果见表2。
2.4 对心肌纤维直径的影响：由图2可见，LVH组大鼠的心肌纤维直径比SO组明显增大([ WTBX P<0.01)；与LVH相比，TFM 40，400 mg/(kg*d)组和Ena组大鼠的心肌纤维 直径皆明显缩小(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
Ena673.22±0.36##
与SO组相比：**P<0.01
与LVH组相比：#P<0.05 ##P<0. 01
图2 TFM对心肌纤维直径的影响
本研究通过缩窄左肾动脉建立肾性高血压大鼠左室肥厚模型，其HW、HW/BW、LVW、LVW/BW、 心肌纤维直径皆比假手术组增大，而TFM 40，400 mg/(k*d)组和Ena组的上述指标皆明显比 左室肥厚组缩小，说明两药对肾性高血压大鼠左室肥厚均有预防作用。而且本实验发现TFM 并不明显地降低大鼠血压，提示TFM抑制肾性高血压左室肥厚的机制并非通过降低心脏的机 械负荷而产生的。
, 百拇医药
许多文献[4～6]认为，Ca2+超负荷是心肌肥厚发生机制的重要环节。实验中 测定了心肌组织Ca2+含量，发现肥厚心肌组织Ca2+含量显著增高，结果与上述 报道相符。而TFM可使心肌组织Ca2+含量明显降低，我室以前研究亦证明TFM对心肌细 胞 钙离子通道有阻断作用，提示这可能是TFM防止肾性高血压左室肥厚的作用机制之一。依那 普利亦可降低心肌组织Ca2+含量，这可能与其抑制血管紧张素Ⅱ的产生而防止Ca 2+超负荷有关[7，8]。
本研究结果表明，TFM可在不明显降低血压的情况下，防止肾性高血压大鼠左室肥厚的发生 ，机制可能与其对心肌细胞的钙拮抗作用有关，但至于其它方面的详细作用机制尚有待进一 步的探讨。
Address： Liu Weiwan, Medical Department of Wuhan University, Wuhan
, 百拇医药
国家自然科学基金资助项目，项目号39770088
刘惟莞 女，现任武汉大学医学系药理学教研室教授，主要从事心血管药理的研究。目前 承担国家自然科学基金《古老树种心脑血管疾病活性成分研究》、《重要资源植物杉科植物 特征成分和活性研究》及中科院资源与环境“九五”重大项目《治疗数种重要疾病新天然药 物研究与开发》和省、市科委等课题5项。
中科院武汉植物研究所
参 考 文 献
1，Weber J R, Pa P. Am Heart J,1988,116(1):272
2，Kuwajima I, Kardon M B, Pegram B L, et al. Hypertensi on, 1982, 4(3pt 2):113
, http://www.100md.com
3，Dlay M J, Elz J S, Nayler W G. Circ Res, 1987,61(3):560
4，Marban E, Koretsune Y. Hypertension, 1990,9(4):225
5，章友华，徐守春.中国循环杂志，1994，9(4)：225
6，Sun L, Rao M R, Wang J X. Acta Pharmacologica Sinica, 1997,18(3):251
7，Baker K M, Singer H A. Circ Res, 1998,62(6):896
8，Endoh M, Blinks J R. Circ Res, 1988,62(2):247
(2000-01-19收稿), http://www.100md.com