10种中药有效成分抑制口腔主要致病菌比较
作者：徐竺婷 李鸣宇
单位：徐竺婷(上海 200332 上海市第八医院中医科)；李鸣宇(上海 200011 上海第二医科大学附属第九人民医院口腔研究所)
关键词：茶多酚；中药；龋病；牙周病；致病菌；口腔保健品
中国现代应用药学000409 摘要 目的：为评价常见中药对口腔主要致病菌作用及其作为口腔保健 用药的可能性。方法：从文献报导中有抗致龋作用的中草药中选择出10 种中药或天然植物进行10种有代表性的口腔致病菌的药敏试验。结果： 茶多酚和鞣酸具有较强的抑菌和杀菌作用。结论：初步认为茶多酚和鞣 酸更适合作为预防和治疗口腔疾病的保健用药。
Comparison of inhibitions to oral bacteria among 10 Chinese herbs
, 百拇医药
Xu Zhuting(Xu ZT)，Li Mingyu(Li MY)
(Shanghai 8th Hosp ital，Shanghai 200332)
ABSTRACT OBJECTIVE：In or der to evaluate the possibility of Chinese herbs as a new drug for preventing ca ries and periodontitis，the effects of ten extracts of Chinese herbs，including te a polyphenol，tannic acid，magnolol，chlorogenic acid，emodin，alpinetin，gentiopicrin ，et al，on the growth of bacteria，which were known as pathogens of ca ries and periodontitis were determined.METHODS:Sensitive test of bac teria were carried out by dilution method.RESULTS:It indicated that the tea polyphenol and tannic acid could inhibit the bacteria growth more obviou sly than other herbs.CONCLUSION:Tea polyphenol and tannic acid will probably be a relatively ideal natural agent for oral care product which both de creases incidence of caries and periodontitis and maintains the balance of oral ecology system.
, http://www.100md.com
KEY WORDS tea polyphenol，tannic acid，caries，period ontitis，bacteria
目前我国的人均患龋率为40%，其中儿童患龋率为80%，青年人患龋率为6 0%～70%，老年人患龋率为52%，牙龈炎和牙周炎患病率为70%，单靠门诊治疗难以完成。找 出预防控制这些疾病的有效措施是当前的紧迫任务。这些疾病都是多因素引起的细菌性疾病 ，其致病菌是人口腔中的常在菌，在健康状态时各微生物在种类和数量上构成一定的生理组 合。当菌群失调时某种致病性较强的病菌过度繁衍引起疾病。长期使用广谱抗菌素和化学合 成药在清除致病菌的同时将破坏口腔的微生态平衡。开发能控制而不是消灭致病菌或消除特 异致病机制的药物具有重要意义。有较强抗菌作用的天然物质具有良好的应用前景。
有关 中药的应用研究已有一些报导。如本实验室曾对厚朴进行过抑菌，生物毒性等系统研究 [1]。以后国内还有黄芩、金银花、红花等研究和应用[2～9]。这些研究有以 下特点：①从基础到应用的系统研究很少；②有一些加有中草药的口腔保健品制剂往往是制 成成品后做了一些临床效果观察等研究。③某种单一中草药的抑菌、抗菌斑或抑葡糖基转移 酶的报导较多。基于这种背景，本研究组计划对可应用于口腔保健品中的中草药进行横向比 较和筛选，在此基础上进行从基础到应用的系统研究，研制出某种既能有效地控制菌斑，又 能增强宿主防御能力的中药制剂。本研究是该课题的第一步：常见有效中药对致龋菌作用比 较实验。
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材料和方法
细菌培养 选用国际标准菌株及本实验室分离菌 株。采用胰蛋白酶消化大豆培养基(Trypticase soy broth，TSB)。厌氧培养18h(90% N2，5% CO2 37℃)2～3d。
药品 ①茶多酚(杭州中科天然植物技术公司)；②川芎嗪(川芎有效成 分)；③龙胆苦甙(龙胆草有效成分)；④绿原酸(金银花有效成分)；⑤厚朴酚；⑥山姜素 ；⑦大黄素；⑧连翘甙；⑨鞣酸(上海华美大药房)；⑩植酸(上海油脂二厂)。以上药品除茶 多酚、鞣酸和植物酸外均购自上海药品检验所东方药品科技实业公司。药品原液均为20mg/m l，除厚朴酚、山姜素和大黄素外水溶性良好。对以上3种水溶性差者，先加少量酒精溶解， 再溶解于水，并设相同溶剂对照。
常见有效中药对致龋菌作用比较实验 保存之细菌复苏 ，经生化鉴定后接种于相应琼脂平板。挑取琼脂表面的单个菌落混悬于相应液体培养基中(1 个直径1mm菌落/ml)培养，培养相应时间后使菌液浓度呈105-6CFU/ml。MIC测定：用 无菌微量加样器吸取呈梯度稀释的各种药品50μl于无菌96孔微孔板中，再加入等量菌液， 混和。放置适宜培养条件下孵育，需O2菌24h，其它48h后观察结果。肉眼观察无细菌生长 的最低药物浓度为MIC。MBC测定：用无菌接种环挑取肉眼观察无细菌生长的微孔板中培养物 ，划线接种于相应平板。适当条件下培养后观察，无细菌生长的最低药物浓度为MBC。阳性 对照：不加各种药品，只加菌液和等量液体培养基。阴性对照：不加菌液，只加各种药品和 等量液体培养基。
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结 果
实验结果汇总于表1。从整体上分析，在所选 的10种药品中茶多酚和鞣酸具有较强的抑菌和杀菌作用。详细分析：对于变链菌，茶多酚和 鞣酸较敏感；对于乳杆菌和粘性放线菌，茶多酚及鞣酸和厚朴酚较敏感；对于坏死梭杆菌、 牙龈卟啉菌，鞣酸、茶多酚和厚朴酚较敏感。
Table 1 A comparative study of antimicrobial sensit ive test of Chinese herbs on oral pathogenic bacteria/mg.ml-1
茶多酚
川芎嗪
植 酸
鞣酸(五倍子)
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厚朴酚
龙胆苦苷
(龙胆草 )
绿原酸
(金银花)
山姜素
大黄素
连翘甙
MIC
MBC
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MBC
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粘放菌
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乳杆菌
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口链菌
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变形链球菌
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茸毛链球菌
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戈氏菌
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奈瑟氏菌(临床分离)
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牙龈卟啉菌
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韦荣氏菌(临床分离)
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坏死梭杆菌
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讨 论
龋病和牙周病都属细菌感染性疾病，致病菌是人口腔中的常在菌 ，在健康状态时各微生物在种类和数量上构成一定的生理组合。当菌群失调时某种致病性较 强的病菌过度繁衍引起疾病。长期使用广谱抗菌素和化学合成药在清除致病菌的同时将破坏 口腔的微生态平衡。开发能控制而不是消灭致病菌或消除特异致病机制的药物具有重要意义 。有较强抗菌作用的天然物质具有良好的应用前景。
本研究是从文献报导中有抗致龋菌、 抗菌斑或抗GTF作用，或者已被加入声称有防龋或牙周病作用的口腔保健品中的中草药，选 择出茶多酚、川芎嗪(川芎有效成分)、龙胆苦甙(龙胆草有效成分)、绿原酸(金银花有效成 分)、厚朴酚、山姜素、大黄素、连翘甙、鞣酸和植酸等10味中药或天然植物进行实验。为 了增加其可比性，应用其精制的有效成分，并设定相同的原液浓度:20mg/ml。选择了10种有 代表性的口腔致病菌进行药敏试验。结果发现，对于变链菌，茶多酚和鞣酸较敏感；对于乳 杆菌和粘性放线菌，茶多酚及鞣酸和厚朴酚较敏感；对于坏死梭杆菌、牙龈卟啉菌，鞣酸、 茶多酚和厚朴酚较敏感。总之，有所选的10种药品中茶多酚和鞣酸具有较强的抑菌和杀菌作 用。
, 百拇医药
茶多酚(teapolyphenol)为茶叶的主要成分，约占茶干重的25%[10]，主要构 成为儿茶素、表儿茶素、没食子酰表儿茶素、没食子酰表没食子儿茶素等[11]。主 要药效表现在降血脂、降血糖、防治高血压和抗动脉粥样硬化，抗肿瘤、抗突变、防止癌症 ，抗菌消炎，抗衰老、抗过敏等作用。目前，在食品保鲜饮料、调味品方面开始有一些应用 ；在医疗保健方面除少数实验进入临床外，多数研究还停留在动物实验和药理研究水平，有 待深入广泛的开发利用。鞣酸(Tannic acid)又称单宁酸或没食子鞣酸，分子结构为C76 H52O46，是五倍子等植物的有效成分。有关两者作为口腔保健用药的可能性 研究尚未见报道。本研究通过10种中药或天然植物对10种有代表性的口腔致病菌药敏试验的 横向比较，证实了在抑菌方面茶多酚和鞣酸优于其他药物，为其临床应用提供了基线资料。 依据本研究结果，茶多酚浓度的达到2mg/ml、鞣酸浓度的达到1.5mg/ml的用药结果一般就可 起到防病保健作用。进一步的应用前研究应包括临床药理研究，使用剂型的制备，应用的实 用性。安全性评估，包括牙硬组织微硬度测定，对牙周膜纤维细胞影响的检测等。
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参考文献
[1]乌爱菊，邵家玉，刘正，等.中药厚朴的防龋研 究.口腔医学，1993，3(3)∶115.
[2]朱莲娜，等.金银花含片抑制牙菌斑及唾液中变 形链球菌的临床观察.广东牙病防治杂志，1995，5(2)∶96.
[4]凌匀启，等.中药红花对葡糖基转移酶抑制作用 .华西口腔医学杂志，1988，(6)∶201.
[5]李鸣宇，刘正.茶多酚对口腔及咽喉主要致病菌 作用的体外实验.上海第二医科大学学报，1999，19(1)∶41.
[9]李兴春等.吉林省中草药对变形链球菌抑菌的研 究.口腔医学纵横，1987，3(2)∶65.
[10]陈为钧，万圣勤.茶多酚主要药效概况.中草药，1993， 24∶493.
[11]于新蕊，曲军，从月珠.茶叶的化学成份及药理作用研 究进展.中草药，1995，26∶219.
收稿日期：1999-06-17, 百拇医药
单位：徐竺婷(上海 200332 上海市第八医院中医科)；李鸣宇(上海 200011 上海第二医科大学附属第九人民医院口腔研究所)
关键词：茶多酚；中药；龋病；牙周病；致病菌；口腔保健品
中国现代应用药学000409 摘要 目的：为评价常见中药对口腔主要致病菌作用及其作为口腔保健 用药的可能性。方法：从文献报导中有抗致龋作用的中草药中选择出10 种中药或天然植物进行10种有代表性的口腔致病菌的药敏试验。结果： 茶多酚和鞣酸具有较强的抑菌和杀菌作用。结论：初步认为茶多酚和鞣 酸更适合作为预防和治疗口腔疾病的保健用药。
Comparison of inhibitions to oral bacteria among 10 Chinese herbs
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Xu Zhuting(Xu ZT)，Li Mingyu(Li MY)
(Shanghai 8th Hosp ital，Shanghai 200332)
ABSTRACT OBJECTIVE：In or der to evaluate the possibility of Chinese herbs as a new drug for preventing ca ries and periodontitis，the effects of ten extracts of Chinese herbs，including te a polyphenol，tannic acid，magnolol，chlorogenic acid，emodin，alpinetin，gentiopicrin ，et al，on the growth of bacteria，which were known as pathogens of ca ries and periodontitis were determined.METHODS:Sensitive test of bac teria were carried out by dilution method.RESULTS:It indicated that the tea polyphenol and tannic acid could inhibit the bacteria growth more obviou sly than other herbs.CONCLUSION:Tea polyphenol and tannic acid will probably be a relatively ideal natural agent for oral care product which both de creases incidence of caries and periodontitis and maintains the balance of oral ecology system.
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KEY WORDS tea polyphenol，tannic acid，caries，period ontitis，bacteria
目前我国的人均患龋率为40%，其中儿童患龋率为80%，青年人患龋率为6 0%～70%，老年人患龋率为52%，牙龈炎和牙周炎患病率为70%，单靠门诊治疗难以完成。找 出预防控制这些疾病的有效措施是当前的紧迫任务。这些疾病都是多因素引起的细菌性疾病 ，其致病菌是人口腔中的常在菌，在健康状态时各微生物在种类和数量上构成一定的生理组 合。当菌群失调时某种致病性较强的病菌过度繁衍引起疾病。长期使用广谱抗菌素和化学合 成药在清除致病菌的同时将破坏口腔的微生态平衡。开发能控制而不是消灭致病菌或消除特 异致病机制的药物具有重要意义。有较强抗菌作用的天然物质具有良好的应用前景。
有关 中药的应用研究已有一些报导。如本实验室曾对厚朴进行过抑菌，生物毒性等系统研究 [1]。以后国内还有黄芩、金银花、红花等研究和应用[2～9]。这些研究有以 下特点：①从基础到应用的系统研究很少；②有一些加有中草药的口腔保健品制剂往往是制 成成品后做了一些临床效果观察等研究。③某种单一中草药的抑菌、抗菌斑或抑葡糖基转移 酶的报导较多。基于这种背景，本研究组计划对可应用于口腔保健品中的中草药进行横向比 较和筛选，在此基础上进行从基础到应用的系统研究，研制出某种既能有效地控制菌斑，又 能增强宿主防御能力的中药制剂。本研究是该课题的第一步：常见有效中药对致龋菌作用比 较实验。
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材料和方法
细菌培养 选用国际标准菌株及本实验室分离菌 株。采用胰蛋白酶消化大豆培养基(Trypticase soy broth，TSB)。厌氧培养18h(90% N2，5% CO2 37℃)2～3d。
药品 ①茶多酚(杭州中科天然植物技术公司)；②川芎嗪(川芎有效成 分)；③龙胆苦甙(龙胆草有效成分)；④绿原酸(金银花有效成分)；⑤厚朴酚；⑥山姜素 ；⑦大黄素；⑧连翘甙；⑨鞣酸(上海华美大药房)；⑩植酸(上海油脂二厂)。以上药品除茶 多酚、鞣酸和植物酸外均购自上海药品检验所东方药品科技实业公司。药品原液均为20mg/m l，除厚朴酚、山姜素和大黄素外水溶性良好。对以上3种水溶性差者，先加少量酒精溶解， 再溶解于水，并设相同溶剂对照。
常见有效中药对致龋菌作用比较实验 保存之细菌复苏 ，经生化鉴定后接种于相应琼脂平板。挑取琼脂表面的单个菌落混悬于相应液体培养基中(1 个直径1mm菌落/ml)培养，培养相应时间后使菌液浓度呈105-6CFU/ml。MIC测定：用 无菌微量加样器吸取呈梯度稀释的各种药品50μl于无菌96孔微孔板中，再加入等量菌液， 混和。放置适宜培养条件下孵育，需O2菌24h，其它48h后观察结果。肉眼观察无细菌生长 的最低药物浓度为MIC。MBC测定：用无菌接种环挑取肉眼观察无细菌生长的微孔板中培养物 ，划线接种于相应平板。适当条件下培养后观察，无细菌生长的最低药物浓度为MBC。阳性 对照：不加各种药品，只加菌液和等量液体培养基。阴性对照：不加菌液，只加各种药品和 等量液体培养基。
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结 果
实验结果汇总于表1。从整体上分析，在所选 的10种药品中茶多酚和鞣酸具有较强的抑菌和杀菌作用。详细分析：对于变链菌，茶多酚和 鞣酸较敏感；对于乳杆菌和粘性放线菌，茶多酚及鞣酸和厚朴酚较敏感；对于坏死梭杆菌、 牙龈卟啉菌，鞣酸、茶多酚和厚朴酚较敏感。
Table 1 A comparative study of antimicrobial sensit ive test of Chinese herbs on oral pathogenic bacteria/mg.ml-1
茶多酚
川芎嗪
植 酸
鞣酸(五倍子)
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厚朴酚
龙胆苦苷
(龙胆草 )
绿原酸
(金银花)
山姜素
大黄素
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口链菌
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变形链球菌
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奈瑟氏菌(临床分离)
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龋病和牙周病都属细菌感染性疾病，致病菌是人口腔中的常在菌 ，在健康状态时各微生物在种类和数量上构成一定的生理组合。当菌群失调时某种致病性较 强的病菌过度繁衍引起疾病。长期使用广谱抗菌素和化学合成药在清除致病菌的同时将破坏 口腔的微生态平衡。开发能控制而不是消灭致病菌或消除特异致病机制的药物具有重要意义 。有较强抗菌作用的天然物质具有良好的应用前景。
本研究是从文献报导中有抗致龋菌、 抗菌斑或抗GTF作用，或者已被加入声称有防龋或牙周病作用的口腔保健品中的中草药，选 择出茶多酚、川芎嗪(川芎有效成分)、龙胆苦甙(龙胆草有效成分)、绿原酸(金银花有效成 分)、厚朴酚、山姜素、大黄素、连翘甙、鞣酸和植酸等10味中药或天然植物进行实验。为 了增加其可比性，应用其精制的有效成分，并设定相同的原液浓度:20mg/ml。选择了10种有 代表性的口腔致病菌进行药敏试验。结果发现，对于变链菌，茶多酚和鞣酸较敏感；对于乳 杆菌和粘性放线菌，茶多酚及鞣酸和厚朴酚较敏感；对于坏死梭杆菌、牙龈卟啉菌，鞣酸、 茶多酚和厚朴酚较敏感。总之，有所选的10种药品中茶多酚和鞣酸具有较强的抑菌和杀菌作 用。
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茶多酚(teapolyphenol)为茶叶的主要成分，约占茶干重的25%[10]，主要构 成为儿茶素、表儿茶素、没食子酰表儿茶素、没食子酰表没食子儿茶素等[11]。主 要药效表现在降血脂、降血糖、防治高血压和抗动脉粥样硬化，抗肿瘤、抗突变、防止癌症 ，抗菌消炎，抗衰老、抗过敏等作用。目前，在食品保鲜饮料、调味品方面开始有一些应用 ；在医疗保健方面除少数实验进入临床外，多数研究还停留在动物实验和药理研究水平，有 待深入广泛的开发利用。鞣酸(Tannic acid)又称单宁酸或没食子鞣酸，分子结构为C76 H52O46，是五倍子等植物的有效成分。有关两者作为口腔保健用药的可能性 研究尚未见报道。本研究通过10种中药或天然植物对10种有代表性的口腔致病菌药敏试验的 横向比较，证实了在抑菌方面茶多酚和鞣酸优于其他药物，为其临床应用提供了基线资料。 依据本研究结果，茶多酚浓度的达到2mg/ml、鞣酸浓度的达到1.5mg/ml的用药结果一般就可 起到防病保健作用。进一步的应用前研究应包括临床药理研究，使用剂型的制备，应用的实 用性。安全性评估，包括牙硬组织微硬度测定，对牙周膜纤维细胞影响的检测等。
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参考文献
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收稿日期：1999-06-17, 百拇医药