5-氨基水杨酸片剂的抗炎镇痛作用
作者：明亮 曹明成 张艳
单位：明亮 张艳(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)；曹明成(安徽省医学科技实业公司，合肥 230022)
关键词：氨基水杨酸类；药理学；炎症；药物疗法；疼痛；药物疗法；镇痛
安徽医科大学学报000308摘要 目的 研究5-氨基水杨酸(5-ASA)的主要药效学。方法 镇痛试验采用小鼠热板法及扭体法；抗炎试验采用小鼠耳片法、蛋清诱导大鼠足肿胀模型。 结果 5-ASA片剂3种剂量(75、150及300 mg.kg-1,ig×3 d)对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀度及蛋清诱导的大鼠踝关节肿胀度均有明显抑制作用；以上剂量还可明显抑制小鼠扭体反应，大剂量还可延长小鼠热板的舔足反应潜伏期。结论 5-ASA片剂有明显的抗炎镇痛作用。
自由词 抗炎
, http://www.100md.com
中图分类号 R971.01
文献标识码 A 文章编号 1000-1492(2000)03-0186-03
Study on anti-inflammatory and analgesic effects of 5-ASA
Ming Liang, Cao Mingcheng, Zhang Yan
(Dept of Pharmacology, Anhui Medical University, Hefei 230032)
Abstract Objective To study the anti-inflammatory and analgesic effects of 5-ASA. Methods Hot-plate and writhing test were applied to observe analgesic effect in mice.The models of the ear swilling of mice and paw edema of rats were adopted to assay anti-inflammatory effect. Results 5-ASA(ig,75,150 and 300 mg.kg-1,for 3 d)significantly reduced the ear swelling of mice and the paw edema of rats and also decreased the writhing. 5-ASA at the dose of 300 mg.kg-1 ig,prolonged pain latency on hot-plate reaction. Conclusion 5-ASA has anti-inflammatary and analgesic effect.
, 百拇医药
MesH aminosalicylic acids/pharmacol;inflammation/therapy;pain/therapy;analgesi mice; rats
Free words anti-inflammatory agents
临床应用柳氮磺吡啶(Sulfasalazine,SASP) 治疗炎症性肠疾病(inflammatory bowel disease,IBD)已有半个多世纪。因其不良反应较多，从80年代起，SASP已逐渐被美沙拉嗪缓释剂(mesalazine,5-ASA的通用名)所取代。5-ASA(5-氨基水杨酸)是SASP中治疗IBD的有效成分〔1～3〕。本试验旨在研究5-ASA的抗炎及镇痛作用，为进一步制备溃疡性结肠炎模型奠定基础。
1 材料与方法
1.1 动物 昆明种小鼠，体重(20±2) g,小鼠镇痛(热板法)均用♀性小鼠，其它模型♀♂各半；SD大鼠，♂，体重200～220 g，购自安徽医科大学实验动物中心(皖医实动准第01号)。
, http://www.100md.com
1.2 药品与试剂 5-ASA片剂，由安徽省医药科技实业公司提供，批号981108，用时以蒸馏水稀释；二甲苯，蚌埠化学试剂厂产品，批号940389；松节油，江西资溪制药厂产品，批号89-03-18；酒石酸锑钾，上海协心化学制造厂产品，批号009-58-04-28。
1.3 仪器 FA1004电子秤，上海天平仪器厂产品；大鼠容量测量仪，本室自制；GS-501型超级恒温水浴，重庆试验设备厂生产。
1.4 方法〔4～6〕
1.4.1 小鼠耳片法 按表1分组，5-ASA片剂分为3个剂量组，即75、150、300 mg.kg-1,ig×3 d,最后一次用药1 h后，用分析纯的二甲苯(每鼠0.02 ml)均匀涂于小白鼠左耳前后两面致炎，右耳为对照。4 h后将小鼠处死，沿耳廓基线剪下两耳，用7 mm打孔器制备小鼠耳片并立即在电子秤上称重。用鼠左耳片重量减去右耳片重量即为肿胀度，作为炎症指标。
, 百拇医药
1.4.2 蛋清诱导大鼠足肿胀模型 分组及用药同1.4.1，最后一次用药1 h后，于大鼠左后足sc纯蛋清每只0.1 ml致炎，致炎前和致炎后30 min、1 h、3 h分别用足爪容量测定仪测定大鼠足爪容积，测算致炎前后容积之差，以肿胀度作为炎症指标。
1.4.3 小鼠热板法 分组及用药同1.4.1，最后一次用药后1 h，将小鼠分别置于(55±0.5)℃水浴锅的金属板上，以小鼠舔后足为疼痛反应信号，以痛反应潜伏期作为疼痛指标。
1.4.4 小鼠扭体法 分组及用药同1.4.1， 最后一次用药后1 h，ip 0.5 g.L-1的酒石酸锑钾，每只0.2 ml，立即观察15 min内小鼠扭体反应的次数。
1.4.5 大鼠松节油气囊肉芽增生模型 5-ASA分为3个剂量组，即25、50、100 mg.kg-1,ig×10 d。正式用药前，在大鼠背肩胛区sc 20 ml空气形成气囊，并向内注入消毒致炎剂纯松节油1 ml，24 h后抽出囊内空气。第10天用药1 h后处死大鼠，剥离囊壁肉芽肿，用NS漂洗干净后，置80℃烤箱烘烤6 h，称其干重，并作为反应慢性炎症程度的指标。
, http://www.100md.com
1.5 统计方法 方差分析(Newman-Keuls法)。
2 结果
2.1 5-ASA对二甲苯及蛋清分别诱导的小鼠耳肿胀和踝关节肿胀的影响 表1的结果显示出，5-ASA对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀及蛋清诱导的大鼠踝关节肿胀均有明显的抑制作用。
表1 5-ASA对二甲苯及蛋清分别诱导的小鼠耳肿胀及大鼠踝关节肿胀的影响(
±s) 组别
剂量
(mg.kg-1)
耳肿胀度
(mg)
, 百拇医药
踝关节肿胀(ml)
0.5 h
1 h
3 h
对照组
-
10.4±2.56
1.0±0.25
1.46±0.32
1.13±0.29
消炎痛
9
4.0±2.28**
, 百拇医药
0.83±0.34
1.03±0.33**
1.06±0.35
5-ASA
75
6.2±2.82**
0.95±0.28
0.97±0.22**
1.17±0.32
150
4.6±2.28**
, 百拇医药
0.97±0.14
0.84±0.17**
1.14±0.14
300
3.9±1.70**
0.73±0.10
0.65±0.32**
0.76±0.10**
小鼠每组10只，大鼠每组8只。与对照组比较：*P<0.05，**P<0.012.2 5-ASA对小鼠热板疼痛的影响 表2的结果表明，5-ASA大剂量组(300 mg.kg-1)具有延长小鼠痛反应潜伏期，提高小鼠痛阈的作用。
, 百拇医药
表2 5-ASA对小鼠镇痛(热板法)作用的影响(±s,n=10) 组别
剂量(mg.kg-1)
痛反应潜伏期
(s)
痛阈提高率
(%)
对照组
-
21.2±7.48
7.07
, 百拇医药
消炎痛
9
36.1±6.04*
68.69
5-ASA
75
23.3±9.09
16.50
150
27.2±8.53
45.45
300
, http://www.100md.com 33.1±3.92*
81.86
与对照组比：*P<0.052.3 5-ASA对小鼠扭体疼痛的影响 从表3的结果可看出，5-ASA可明显减少小鼠15 min内的扭体次数，呈现较强的镇痛作用。
表3 5-ASA对小鼠镇痛(扭体法)作用的影响(±s,n=10) 组别
剂量(mg.kg-1)
15 min
扭体次数
抑制率
, 百拇医药
(%)
对照组
-
40.9±16.54
-
消炎痛
9
11.4±6.65**
72.12
5-ASA
75
22.9±8.25**
, 百拇医药
44.0
150
19.1±7.21**
53.30
300
19.0±7.45**
53.54
与对照组比较：**P<0.01
2.4 5-ASA对大鼠松节油气囊肉芽增生模型的影响 表4结果显示5-ASA对大鼠松节油气囊肉芽增生均有程度不同的抑制作用。
3 讨论
, 百拇医药
临床上，IBD主要包括Crohn病及溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis),为病因未明的肠道炎症性疾病。从以上动物实验结果可观察到，5-ASA具有很强的抗炎作用，可能是其减少LTB4的增高,并抑制肠内巨噬细胞移向LTB4,由此巨噬细胞向炎症区迁移减少；此外，5-ASA可抑制 由黄嘌呤氧化酶或白细胞介导的氧自由基形成，从而使炎症得到限制〔1〕。另外，由于5-ASA拮抗PG的作用，还可出现明显的镇痛作用，这对缓解炎症性肠疾病的腹痛症状是大有益处的。下一步的研究应该是进一步观察5-ASA对溃疡性结肠炎模型的治疗效果。
表4 5-ASA对大鼠松节油气囊肉芽增生的影响(±s) 组别
n
剂量
, 百拇医药 (mg.kg-1)
肉芽肿干重
(g)
对照组
9
-
1.02±0.24
消炎痛
8
4.5
0.53±0.16**
5-ASA
, 百拇医药
8
25
0.80±0.27
50
0.57±0.31**
100
0.50±0.18**
与对照组比较：**P<0.01作者简介：明亮，女，53岁，教授
参考文献
1，徐耀传， 王国良. 美沙拉嗪缓释剂治疗炎症性肠疾病现状. 新药与临床， 1996；15(6):362～364
, 百拇医药
2，耿宝琴节译. 用于慢性炎症性肠病的新5-氨基水杨酸类药物. 国外医药 合成药、生化药、制剂分册， 1989；10(6):334～737
3，Allgayer H. Sulfasalazine and 5-ASA compounds. Gastroenterol Clin North Am， 1992；21(3)643～658
4，徐叔云， 卞如濂， 陈修主编. 药理实验方法学. 第2版， 北京：人民卫生出版社， 1991:643、693～741
5，陈奇主编. 中药药理研究方法学. 第1版， 北京：人民卫生出版社， 1994:6 238～6 240
6，中华人民共和国卫生部药政管理局主编. 新药(西药)临床前研究指导原则汇编(药学、药理学、毒理学)， 1993:116～128
2000-12-10收稿，2000-03-15修回, 百拇医药
单位：明亮 张艳(安徽医科大学药理学教研室，合肥 230032)；曹明成(安徽省医学科技实业公司，合肥 230022)
关键词：氨基水杨酸类；药理学；炎症；药物疗法；疼痛；药物疗法；镇痛
安徽医科大学学报000308摘要 目的 研究5-氨基水杨酸(5-ASA)的主要药效学。方法 镇痛试验采用小鼠热板法及扭体法；抗炎试验采用小鼠耳片法、蛋清诱导大鼠足肿胀模型。 结果 5-ASA片剂3种剂量(75、150及300 mg.kg-1,ig×3 d)对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀度及蛋清诱导的大鼠踝关节肿胀度均有明显抑制作用；以上剂量还可明显抑制小鼠扭体反应，大剂量还可延长小鼠热板的舔足反应潜伏期。结论 5-ASA片剂有明显的抗炎镇痛作用。
自由词 抗炎
, http://www.100md.com
中图分类号 R971.01
文献标识码 A 文章编号 1000-1492(2000)03-0186-03
Study on anti-inflammatory and analgesic effects of 5-ASA
Ming Liang, Cao Mingcheng, Zhang Yan
(Dept of Pharmacology, Anhui Medical University, Hefei 230032)
Abstract Objective To study the anti-inflammatory and analgesic effects of 5-ASA. Methods Hot-plate and writhing test were applied to observe analgesic effect in mice.The models of the ear swilling of mice and paw edema of rats were adopted to assay anti-inflammatory effect. Results 5-ASA(ig,75,150 and 300 mg.kg-1,for 3 d)significantly reduced the ear swelling of mice and the paw edema of rats and also decreased the writhing. 5-ASA at the dose of 300 mg.kg-1 ig,prolonged pain latency on hot-plate reaction. Conclusion 5-ASA has anti-inflammatary and analgesic effect.
, 百拇医药
MesH aminosalicylic acids/pharmacol;inflammation/therapy;pain/therapy;analgesi mice; rats
Free words anti-inflammatory agents
临床应用柳氮磺吡啶(Sulfasalazine,SASP) 治疗炎症性肠疾病(inflammatory bowel disease,IBD)已有半个多世纪。因其不良反应较多，从80年代起，SASP已逐渐被美沙拉嗪缓释剂(mesalazine,5-ASA的通用名)所取代。5-ASA(5-氨基水杨酸)是SASP中治疗IBD的有效成分〔1～3〕。本试验旨在研究5-ASA的抗炎及镇痛作用，为进一步制备溃疡性结肠炎模型奠定基础。
1 材料与方法
1.1 动物 昆明种小鼠，体重(20±2) g,小鼠镇痛(热板法)均用♀性小鼠，其它模型♀♂各半；SD大鼠，♂，体重200～220 g，购自安徽医科大学实验动物中心(皖医实动准第01号)。
, http://www.100md.com
1.2 药品与试剂 5-ASA片剂，由安徽省医药科技实业公司提供，批号981108，用时以蒸馏水稀释；二甲苯，蚌埠化学试剂厂产品，批号940389；松节油，江西资溪制药厂产品，批号89-03-18；酒石酸锑钾，上海协心化学制造厂产品，批号009-58-04-28。
1.3 仪器 FA1004电子秤，上海天平仪器厂产品；大鼠容量测量仪，本室自制；GS-501型超级恒温水浴，重庆试验设备厂生产。
1.4 方法〔4～6〕
1.4.1 小鼠耳片法 按表1分组，5-ASA片剂分为3个剂量组，即75、150、300 mg.kg-1,ig×3 d,最后一次用药1 h后，用分析纯的二甲苯(每鼠0.02 ml)均匀涂于小白鼠左耳前后两面致炎，右耳为对照。4 h后将小鼠处死，沿耳廓基线剪下两耳，用7 mm打孔器制备小鼠耳片并立即在电子秤上称重。用鼠左耳片重量减去右耳片重量即为肿胀度，作为炎症指标。
, 百拇医药
1.4.2 蛋清诱导大鼠足肿胀模型 分组及用药同1.4.1，最后一次用药1 h后，于大鼠左后足sc纯蛋清每只0.1 ml致炎，致炎前和致炎后30 min、1 h、3 h分别用足爪容量测定仪测定大鼠足爪容积，测算致炎前后容积之差，以肿胀度作为炎症指标。
1.4.3 小鼠热板法 分组及用药同1.4.1，最后一次用药后1 h，将小鼠分别置于(55±0.5)℃水浴锅的金属板上，以小鼠舔后足为疼痛反应信号，以痛反应潜伏期作为疼痛指标。
1.4.4 小鼠扭体法 分组及用药同1.4.1， 最后一次用药后1 h，ip 0.5 g.L-1的酒石酸锑钾，每只0.2 ml，立即观察15 min内小鼠扭体反应的次数。
1.4.5 大鼠松节油气囊肉芽增生模型 5-ASA分为3个剂量组，即25、50、100 mg.kg-1,ig×10 d。正式用药前，在大鼠背肩胛区sc 20 ml空气形成气囊，并向内注入消毒致炎剂纯松节油1 ml，24 h后抽出囊内空气。第10天用药1 h后处死大鼠，剥离囊壁肉芽肿，用NS漂洗干净后，置80℃烤箱烘烤6 h，称其干重，并作为反应慢性炎症程度的指标。
, http://www.100md.com
1.5 统计方法 方差分析(Newman-Keuls法)。
2 结果
2.1 5-ASA对二甲苯及蛋清分别诱导的小鼠耳肿胀和踝关节肿胀的影响 表1的结果显示出，5-ASA对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀及蛋清诱导的大鼠踝关节肿胀均有明显的抑制作用。
表1 5-ASA对二甲苯及蛋清分别诱导的小鼠耳肿胀及大鼠踝关节肿胀的影响(
±s) 组别剂量
(mg.kg-1)
耳肿胀度
(mg)
, 百拇医药
踝关节肿胀(ml)
0.5 h
1 h
3 h
对照组
-
10.4±2.56
1.0±0.25
1.46±0.32
1.13±0.29
消炎痛
9
4.0±2.28**
, 百拇医药
0.83±0.34
1.03±0.33**
1.06±0.35
5-ASA
75
6.2±2.82**
0.95±0.28
0.97±0.22**
1.17±0.32
150
4.6±2.28**
, 百拇医药
0.97±0.14
0.84±0.17**
1.14±0.14
300
3.9±1.70**
0.73±0.10
0.65±0.32**
0.76±0.10**
小鼠每组10只，大鼠每组8只。与对照组比较：*P<0.05，**P<0.012.2 5-ASA对小鼠热板疼痛的影响 表2的结果表明，5-ASA大剂量组(300 mg.kg-1)具有延长小鼠痛反应潜伏期，提高小鼠痛阈的作用。
, 百拇医药
表2 5-ASA对小鼠镇痛(热板法)作用的影响(
±s,n=10) 组别剂量(mg.kg-1)
痛反应潜伏期
(s)
痛阈提高率
(%)
对照组
-
21.2±7.48
7.07
, 百拇医药
消炎痛
9
36.1±6.04*
68.69
5-ASA
75
23.3±9.09
16.50
150
27.2±8.53
45.45
300
, http://www.100md.com 33.1±3.92*
81.86
与对照组比：*P<0.052.3 5-ASA对小鼠扭体疼痛的影响 从表3的结果可看出，5-ASA可明显减少小鼠15 min内的扭体次数，呈现较强的镇痛作用。
表3 5-ASA对小鼠镇痛(扭体法)作用的影响(
±s,n=10) 组别剂量(mg.kg-1)
15 min
扭体次数
抑制率
, 百拇医药
(%)
对照组
-
40.9±16.54
-
消炎痛
9
11.4±6.65**
72.12
5-ASA
75
22.9±8.25**
, 百拇医药
44.0
150
19.1±7.21**
53.30
300
19.0±7.45**
53.54
与对照组比较：**P<0.01
2.4 5-ASA对大鼠松节油气囊肉芽增生模型的影响 表4结果显示5-ASA对大鼠松节油气囊肉芽增生均有程度不同的抑制作用。
3 讨论
, 百拇医药
临床上，IBD主要包括Crohn病及溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis),为病因未明的肠道炎症性疾病。从以上动物实验结果可观察到，5-ASA具有很强的抗炎作用，可能是其减少LTB4的增高,并抑制肠内巨噬细胞移向LTB4,由此巨噬细胞向炎症区迁移减少；此外，5-ASA可抑制 由黄嘌呤氧化酶或白细胞介导的氧自由基形成，从而使炎症得到限制〔1〕。另外，由于5-ASA拮抗PG的作用，还可出现明显的镇痛作用，这对缓解炎症性肠疾病的腹痛症状是大有益处的。下一步的研究应该是进一步观察5-ASA对溃疡性结肠炎模型的治疗效果。
表4 5-ASA对大鼠松节油气囊肉芽增生的影响(
±s) 组别n
剂量
, 百拇医药 (mg.kg-1)
肉芽肿干重
(g)
对照组
9
-
1.02±0.24
消炎痛
8
4.5
0.53±0.16**
5-ASA
, 百拇医药
8
25
0.80±0.27
50
0.57±0.31**
100
0.50±0.18**
与对照组比较：**P<0.01作者简介：明亮，女，53岁，教授
参考文献
1，徐耀传， 王国良. 美沙拉嗪缓释剂治疗炎症性肠疾病现状. 新药与临床， 1996；15(6):362～364
, 百拇医药
2，耿宝琴节译. 用于慢性炎症性肠病的新5-氨基水杨酸类药物. 国外医药 合成药、生化药、制剂分册， 1989；10(6):334～737
3，Allgayer H. Sulfasalazine and 5-ASA compounds. Gastroenterol Clin North Am， 1992；21(3)643～658
4，徐叔云， 卞如濂， 陈修主编. 药理实验方法学. 第2版， 北京：人民卫生出版社， 1991:643、693～741
5，陈奇主编. 中药药理研究方法学. 第1版， 北京：人民卫生出版社， 1994:6 238～6 240
6，中华人民共和国卫生部药政管理局主编. 新药(西药)临床前研究指导原则汇编(药学、药理学、毒理学)， 1993:116～128
2000-12-10收稿，2000-03-15修回, 百拇医药