荧光PCR法考核尿道灌注治疗非淋菌性尿道炎的疗效
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作者：郭利君 颜东文 何传峰
单位：甘肃省人民医院 兰州 730000
关键词：
华西医学000271
[中图分类号]R693+.3 [文献标识码]D
[文章编号]1002-0179(2000)02-0231-01
非淋菌性尿道炎(NUG)约70%由沙眼衣原体(Chamydia)及T-菌株支原体引起。不少病人全身用药治疗周期长，效果不佳。我院应用荧光PCP技术(中山医科大学达安基因诊断中心)，以其灵敏性及特异性的优势确诊后施行尿道灌注治疗。现将具体操作方法及其疗效报告如下。
1 材料与方法
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1.1 病例选择： 对所有就诊的男性尿道炎病人(无年龄区分)皆进行荧光PCR检查：①淋球菌(NGH)检查；②沙眼衣原体(CT)检查；③解脲支原体(UU)检查。
荧光PCR检查的标本采集及处理：取男性尿道分泌物置于无菌玻璃管，加入1ml无菌生理盐水，摇匀，12000转/min离心5分钟，去上清液，再加无菌生理盐水洗涤一次。沉淀直接加50μlDNA提取液充分混匀，沸水浴10分钟，10000r/min离心5分钟，取上清液2μl做PCR。
荧光PCR检测：将上述处理的样品加入到试剂盒中已配制好的PCR反应管中，同时设置阴性对照和阳性定量梯度对照，放入ABI7700型荧光PCR仪进行循环，扩增位点均为高度保守序列。反应条件：93℃45秒～60℃120秒，70℃60秒。共做40个循环，反应结束后，电脑将通过荧光分光光度计自动得出结果(试剂盒ABI7700、仪器均由中山医科大学达安基因诊断中心提供)。
, 百拇医药
选择那些有尿道刺痒伴尿痛或排尿不畅症状，CT和/或UU(+)，NGH(-)的病人150例作为研究对象。
1.2 分组：对前来就诊的病人选中后依次编号1～150号。按所编号数随机分三组，各50例。
第一组：服药组，口服福爱力红霉素(澳大利亚福尔丁大药厂)0.5克，每日三次，10天一个疗程。
第二组：灌注组，5ml 1%乳糖红霉素灌入尿道后保留30分钟，之后再灌入5ml 5%地塞米松保留30分钟，早晚各一次，10天一个疗程。
第三组：对照组(安慰组)，尿道灌注生理盐水5ml保留30分钟后再灌注生理盐水5ml保留30分钟，早晚各一次，10天为一个疗程。
以上三组治疗期间禁止同房，皆在治疗结束后3天初查治疗结果。无效者一周后进行第二个疗程治疗。
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1.3 观察指标
①治愈：CT和/或UU检查阴性，临床症状完全消失。一月后复查无反复。
②好转：CT和/或UU检查阴性或阳性症状部分消失。
③无效：治疗前后多种指标无改变。
1.4 灌注方法
用5ml一次性注射器吸取药液，以乳头插入尿道外口持续加压将药液缓慢注入尿道，然后在冠状沟处置一阴茎夹，防止药液外溢。
2 结果
三组病人经过1～2个疗程治疗，服药组治愈31例，好转3例，无效15例。灌注组治愈41例，好转5例，无效4例。对照组治愈4例，好转2例，无效44例。灌注组与服药组和对照组比较有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
本研究采用FQ-PCR对病原体进行检测。FQ-PCR采用荧光标记的探针杂交检测PCR扩增产物，代替以往的凝胶电泳，进一步提高了检测的特异性；同时实现了反应体系全封闭和操作全自动，减少了污染，提高了效率。
中山医科大学达安基因诊断中心在国内率先推出针对病原体检测的FQ-PCR试剂盒。我院与该中心合作用FQ-PCR对引起非淋菌性尿道炎常见病原体CT和UU作出准确的检测，以此作为考核尿道灌注治疗前后效果的指标之一。
衣原体和/或支原体性尿道炎其临床症状以尿道刺痒、尿急、尿痛或排尿困难为主。体格检查时可发现尿道内少量粘液性或水样粘液性透明液体，尤其晨起时尿道外口有分泌物粘着。在治疗上国内外目前皆以口服抗生素类药物为主。最早人们发现四环素及红霉素可有效地抑制沙眼衣原体和解脲脲原体，因而选用上述两种药物作为首选药物。近年来，鉴于四环素及红霉素的毒副作用大，人们又研制出其它新药。国外已有许多文献报道了口服阿奇霉素治疗衣(支)原体性尿道炎可以取得满意的疗效。日本学者Yuri-K等报告了用氧氟沙星治疗衣原体性尿道炎也可以获得较好的疗效。国内除采用与国外相近似的疗法外，还采用中药治疗，即采用清热利湿法治疗衣(支)原体性尿道炎。由于本病易复发，经常用红霉素、四环素及氧氟沙星等药物治疗可以引起肝功能、胃肠道及肾功能的损害，而且也加重了患者的经济负担，约有1/3病人病史较长，尿道粘膜损害较重，全身用药后虽尿道分泌物衣原体和/或支原体检查已转阴，但尿道炎的症状不消失，再继续治疗无明显疗效。因本病病原体常寄生于尿道粘膜上皮，故主要在局部尿道造成尿道粘膜上皮的增生性炎症。基于此，1996年吴怡兴报告了用四环素、乳糖红霉素作灌注治疗非淋菌性尿道炎，取得了良好的治疗效果且无副作用。我院目前采取尿道灌注对衣(支)原体有效的抗生素和激素类药物治疗以达到杀灭病菌并消除病菌所造成的炎性反应的效果。这种方法避免了全身用药的毒副作用，又提高了对该类病人的治愈率，可对经久不愈的顽固病例反复治疗，大部分病人无明显不良反应，少数病人灌注后有尿道刺激症状，停药后即渐消逝。所用药物价格低廉减轻了患者的经济负担，从而获得了良好的社会效益。
(收稿日期：1999-11-04), 百拇医药
单位：甘肃省人民医院 兰州 730000
关键词：
华西医学000271
[中图分类号]R693+.3 [文献标识码]D
[文章编号]1002-0179(2000)02-0231-01
非淋菌性尿道炎(NUG)约70%由沙眼衣原体(Chamydia)及T-菌株支原体引起。不少病人全身用药治疗周期长，效果不佳。我院应用荧光PCP技术(中山医科大学达安基因诊断中心)，以其灵敏性及特异性的优势确诊后施行尿道灌注治疗。现将具体操作方法及其疗效报告如下。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1 病例选择： 对所有就诊的男性尿道炎病人(无年龄区分)皆进行荧光PCR检查：①淋球菌(NGH)检查；②沙眼衣原体(CT)检查；③解脲支原体(UU)检查。
荧光PCR检查的标本采集及处理：取男性尿道分泌物置于无菌玻璃管，加入1ml无菌生理盐水，摇匀，12000转/min离心5分钟，去上清液，再加无菌生理盐水洗涤一次。沉淀直接加50μlDNA提取液充分混匀，沸水浴10分钟，10000r/min离心5分钟，取上清液2μl做PCR。
荧光PCR检测：将上述处理的样品加入到试剂盒中已配制好的PCR反应管中，同时设置阴性对照和阳性定量梯度对照，放入ABI7700型荧光PCR仪进行循环，扩增位点均为高度保守序列。反应条件：93℃45秒～60℃120秒，70℃60秒。共做40个循环，反应结束后，电脑将通过荧光分光光度计自动得出结果(试剂盒ABI7700、仪器均由中山医科大学达安基因诊断中心提供)。
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选择那些有尿道刺痒伴尿痛或排尿不畅症状，CT和/或UU(+)，NGH(-)的病人150例作为研究对象。
1.2 分组：对前来就诊的病人选中后依次编号1～150号。按所编号数随机分三组，各50例。
第一组：服药组，口服福爱力红霉素(澳大利亚福尔丁大药厂)0.5克，每日三次，10天一个疗程。
第二组：灌注组，5ml 1%乳糖红霉素灌入尿道后保留30分钟，之后再灌入5ml 5%地塞米松保留30分钟，早晚各一次，10天一个疗程。
第三组：对照组(安慰组)，尿道灌注生理盐水5ml保留30分钟后再灌注生理盐水5ml保留30分钟，早晚各一次，10天为一个疗程。
以上三组治疗期间禁止同房，皆在治疗结束后3天初查治疗结果。无效者一周后进行第二个疗程治疗。
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1.3 观察指标
①治愈：CT和/或UU检查阴性，临床症状完全消失。一月后复查无反复。
②好转：CT和/或UU检查阴性或阳性症状部分消失。
③无效：治疗前后多种指标无改变。
1.4 灌注方法
用5ml一次性注射器吸取药液，以乳头插入尿道外口持续加压将药液缓慢注入尿道，然后在冠状沟处置一阴茎夹，防止药液外溢。
2 结果
三组病人经过1～2个疗程治疗，服药组治愈31例，好转3例，无效15例。灌注组治愈41例，好转5例，无效4例。对照组治愈4例，好转2例，无效44例。灌注组与服药组和对照组比较有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。
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3 讨论
本研究采用FQ-PCR对病原体进行检测。FQ-PCR采用荧光标记的探针杂交检测PCR扩增产物，代替以往的凝胶电泳，进一步提高了检测的特异性；同时实现了反应体系全封闭和操作全自动，减少了污染，提高了效率。
中山医科大学达安基因诊断中心在国内率先推出针对病原体检测的FQ-PCR试剂盒。我院与该中心合作用FQ-PCR对引起非淋菌性尿道炎常见病原体CT和UU作出准确的检测，以此作为考核尿道灌注治疗前后效果的指标之一。
衣原体和/或支原体性尿道炎其临床症状以尿道刺痒、尿急、尿痛或排尿困难为主。体格检查时可发现尿道内少量粘液性或水样粘液性透明液体，尤其晨起时尿道外口有分泌物粘着。在治疗上国内外目前皆以口服抗生素类药物为主。最早人们发现四环素及红霉素可有效地抑制沙眼衣原体和解脲脲原体，因而选用上述两种药物作为首选药物。近年来，鉴于四环素及红霉素的毒副作用大，人们又研制出其它新药。国外已有许多文献报道了口服阿奇霉素治疗衣(支)原体性尿道炎可以取得满意的疗效。日本学者Yuri-K等报告了用氧氟沙星治疗衣原体性尿道炎也可以获得较好的疗效。国内除采用与国外相近似的疗法外，还采用中药治疗，即采用清热利湿法治疗衣(支)原体性尿道炎。由于本病易复发，经常用红霉素、四环素及氧氟沙星等药物治疗可以引起肝功能、胃肠道及肾功能的损害，而且也加重了患者的经济负担，约有1/3病人病史较长，尿道粘膜损害较重，全身用药后虽尿道分泌物衣原体和/或支原体检查已转阴，但尿道炎的症状不消失，再继续治疗无明显疗效。因本病病原体常寄生于尿道粘膜上皮，故主要在局部尿道造成尿道粘膜上皮的增生性炎症。基于此，1996年吴怡兴报告了用四环素、乳糖红霉素作灌注治疗非淋菌性尿道炎，取得了良好的治疗效果且无副作用。我院目前采取尿道灌注对衣(支)原体有效的抗生素和激素类药物治疗以达到杀灭病菌并消除病菌所造成的炎性反应的效果。这种方法避免了全身用药的毒副作用，又提高了对该类病人的治愈率，可对经久不愈的顽固病例反复治疗，大部分病人无明显不良反应，少数病人灌注后有尿道刺激症状，停药后即渐消逝。所用药物价格低廉减轻了患者的经济负担，从而获得了良好的社会效益。
(收稿日期：1999-11-04), 百拇医药