甘油蛋白等渗混封液封制钩虫卵永久标本初探
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作者:李辉
单位:广西中医学院寄生虫教研室 南宁 530001
关键词:钩虫卵;标本;甘油蛋白
广西中医学院学报000148 中图分类号 R383.13
蠕虫卵永久封片标本,常规方法对大部分的虫卵封存都得到满意的结果,唯独钩虫卵制作永久封片易于出现卵壳变形,内部结构靠边,结构模糊,失去自然状态的弊病,制作难度大。为满足我校学生实习的需要,1987年起,笔者试用文献介绍的方法如甘油明胶封片法、虫胶圈封法、凡士林圈封法、洪氏虫卵封片法[1~4]制作永久钩虫卵封片标本,经过历年观察,上述方法制片效果不够理想。为寻求操作简便,省时省事,效果较好,而且保存期长的制片方法,在洪氏虫卵封片的基础上作一些改进,设计了本题的方法。从1988年起,学生用的实验标本大部分按此法做成。效果比较满意,现将制作要求介绍如下。
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1 材料与方法
1.1 甘油蛋白等渗混封液(下称混封液)配制及使用
甲液:甘油10ml,甲醛40ml,鸡蛋白50ml,先将蛋白拌匀,加入甲醛拌匀,最后加入甘油,然后用棉花纱布过滤,置冰箱10℃保存备用。
乙液:生理盐水(氯化钠0.85%)50ml,临用时配制,使用时甲乙两液为2∶1比例充分混合使用。
1.2 制作方法
取10%甲醛固定的虫卵液滴于18mm×18mm大盖片上,待水分挥发,粪渣呈湿润状态,加细沙(过280目筛、水洗、沉淀、烤干、砂粒大小直径45~60μm)少许,滴上一滴混封液,用竹签拌匀,盖上9mm×9mm的小盖片(注意混封液用量要适当,勿使溢出为度),反转大盖片,使小盖片朝下,封置于事先加有中性树胶的载片上,这时小盖片包埋在大盖片与载片的树胶之中,平放于托板置室温或37℃温箱中待干固。
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2 结果与讨论
用本法所制封片,卵壳不变形,内部结构清晰,操作手续简便,省时、省事,经过八年使用观察效果满意,与用其它方法同批制作的标本相比,优于其它方法的制片,结果详见表1。
表1 五种方法制备蠕虫卵封片标本的优缺点比较 方法
适用范围
混封液
制片前处理
结果
卵壳
内部结构
制片过程
甘油明胶封片法
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蠕虫卵
甘油明胶液
脱水、透明蒸发共12天
正常
清晰自然
繁锁、期长
虫胶圈封制片法
蠕虫卵
甘油虫胶液
浓缩、蒸发6天
部分变形
易变黑色
简单、期长
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凡士林圈封制片法
蠕虫卵
虫卵保存液
-
正常
易变黑色
简单、省时省事
洪氏虫卵封片法
蠕虫卵临时封片
甘油、鸡蛋白甲醛混合液
-
部分变形
欠清晰
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简单、省时省事
甘油蛋白钠盐液封存法
蠕虫卵
甘油、鸡蛋白、甲醛、氯化钠
载片蒸发15分钟
正常
清晰自然
简单、省时省事
参考文献
[1] 杨文远.寄生虫标本采集保存及制用技术.武汉医学院学报.1983,(10):51
[2] 缪 峰.制作蠕虫卵玻片标本的一种方法.临床检验杂志.1985,3(4):193
[3] 缪 峰.制作蠕虫卵永久性玻片的一种新方法.生物学通报.1985,(9):40
[4] 宋宗臣.寄生虫卵长期玻片标本的制作方法.动物学杂志.1982,(1):39
收稿日期:1999-10-21, 百拇医药
单位:广西中医学院寄生虫教研室 南宁 530001
关键词:钩虫卵;标本;甘油蛋白
广西中医学院学报000148 中图分类号 R383.13
蠕虫卵永久封片标本,常规方法对大部分的虫卵封存都得到满意的结果,唯独钩虫卵制作永久封片易于出现卵壳变形,内部结构靠边,结构模糊,失去自然状态的弊病,制作难度大。为满足我校学生实习的需要,1987年起,笔者试用文献介绍的方法如甘油明胶封片法、虫胶圈封法、凡士林圈封法、洪氏虫卵封片法[1~4]制作永久钩虫卵封片标本,经过历年观察,上述方法制片效果不够理想。为寻求操作简便,省时省事,效果较好,而且保存期长的制片方法,在洪氏虫卵封片的基础上作一些改进,设计了本题的方法。从1988年起,学生用的实验标本大部分按此法做成。效果比较满意,现将制作要求介绍如下。
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1 材料与方法
1.1 甘油蛋白等渗混封液(下称混封液)配制及使用
甲液:甘油10ml,甲醛40ml,鸡蛋白50ml,先将蛋白拌匀,加入甲醛拌匀,最后加入甘油,然后用棉花纱布过滤,置冰箱10℃保存备用。
乙液:生理盐水(氯化钠0.85%)50ml,临用时配制,使用时甲乙两液为2∶1比例充分混合使用。
1.2 制作方法
取10%甲醛固定的虫卵液滴于18mm×18mm大盖片上,待水分挥发,粪渣呈湿润状态,加细沙(过280目筛、水洗、沉淀、烤干、砂粒大小直径45~60μm)少许,滴上一滴混封液,用竹签拌匀,盖上9mm×9mm的小盖片(注意混封液用量要适当,勿使溢出为度),反转大盖片,使小盖片朝下,封置于事先加有中性树胶的载片上,这时小盖片包埋在大盖片与载片的树胶之中,平放于托板置室温或37℃温箱中待干固。
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2 结果与讨论
用本法所制封片,卵壳不变形,内部结构清晰,操作手续简便,省时、省事,经过八年使用观察效果满意,与用其它方法同批制作的标本相比,优于其它方法的制片,结果详见表1。
表1 五种方法制备蠕虫卵封片标本的优缺点比较 方法
适用范围
混封液
制片前处理
结果
卵壳
内部结构
制片过程
甘油明胶封片法
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蠕虫卵
甘油明胶液
脱水、透明蒸发共12天
正常
清晰自然
繁锁、期长
虫胶圈封制片法
蠕虫卵
甘油虫胶液
浓缩、蒸发6天
部分变形
易变黑色
简单、期长
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凡士林圈封制片法
蠕虫卵
虫卵保存液
-
正常
易变黑色
简单、省时省事
洪氏虫卵封片法
蠕虫卵临时封片
甘油、鸡蛋白甲醛混合液
-
部分变形
欠清晰
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简单、省时省事
甘油蛋白钠盐液封存法
蠕虫卵
甘油、鸡蛋白、甲醛、氯化钠
载片蒸发15分钟
正常
清晰自然
简单、省时省事
参考文献
[1] 杨文远.寄生虫标本采集保存及制用技术.武汉医学院学报.1983,(10):51
[2] 缪 峰.制作蠕虫卵玻片标本的一种方法.临床检验杂志.1985,3(4):193
[3] 缪 峰.制作蠕虫卵永久性玻片的一种新方法.生物学通报.1985,(9):40
[4] 宋宗臣.寄生虫卵长期玻片标本的制作方法.动物学杂志.1982,(1):39
收稿日期:1999-10-21, 百拇医药