慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞Kv1.3, Kv2.1, Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时表达变化的影响
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作者：洪志刚 孔炜 王迪浔
单位：同济医科大学卫生部呼吸疾病重点实验室病理生理室，湖北 武汉 430030
关键词：
中国病理生理杂志0010319
我们的研究发现肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上某些钾通道基因也是缺氧反应基因，急性缺氧可使其表达发生改变。慢性缺氧对PASMC中Kv1.3、 Kv2.1、 Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时基因表达变化的影响，尚无文献报道，本文就此进行研究。目的和方法：用半定量RT-PCR方法研究慢性连代缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞(PASMC)Kv1.3、Kv2.1、Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时表达变化的影响。大鼠肺内动脉平滑肌细胞的培养及急、慢性缺氧方法采用本室建立的方法。实验分组：原代培养的平滑肌细胞分别在常氧和缺氧状态下培养至第6代，然后再将其各分为两组，即：N常氧组，NH常氧培养后急性缺氧6 h组，CH慢性缺氧培养后复氧12 h组，CHH慢性缺氧培养后复氧12 h再急性缺氧6 h组。引物序列：Kv1.3 上游引物5’-GCACCTCTCCTCTTCAGCAG、下游引物5’-GGCACAGAATGGCAATCGTA； Kv2.1上游引物5’-AGGCCGAACTGTGTCTACTC、下游引物5’-GTCCTCTGCACCCTCCTAAC； Kv3.1上游引物5’-CGAGTTCCTGCTGCTTATCA、下游引物5’-TGGTGTGGAGAGTTTACGAC。结果：①正常及慢性缺氧鼠PASMC中均有Kv1.3、Kv2.1、Kv3.1基因表达；②急性缺氧可使PASMC中Kv2.1、Kv3.1 mRNA表达明显上调，其mRNA分别由0.646±0.092、0.782±0.104升高到1.059±0.134、0.985±0.116(P<0.01)；③慢性缺氧后复氧12 h再急性缺氧6 h，PASMC Kv2.1 mRNA、Kv3.1 mRNA水平均降低，其中Kv2.1 mRNA由1.008±0.117下降到0.649±0.097，差异有极显著(P<0.01)。结论：Kv2.1、Kv3.1基因可能是缺氧反应基因，慢性缺氧可使PASMC Kv2.1、Kv3.1钾通道基因急性缺氧后表达上调转变为下调，可能因而降低其在HPV中的作用。, 百拇医药
单位：同济医科大学卫生部呼吸疾病重点实验室病理生理室，湖北 武汉 430030
关键词：
中国病理生理杂志0010319
我们的研究发现肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上某些钾通道基因也是缺氧反应基因，急性缺氧可使其表达发生改变。慢性缺氧对PASMC中Kv1.3、 Kv2.1、 Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时基因表达变化的影响，尚无文献报道，本文就此进行研究。目的和方法：用半定量RT-PCR方法研究慢性连代缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞(PASMC)Kv1.3、Kv2.1、Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时表达变化的影响。大鼠肺内动脉平滑肌细胞的培养及急、慢性缺氧方法采用本室建立的方法。实验分组：原代培养的平滑肌细胞分别在常氧和缺氧状态下培养至第6代，然后再将其各分为两组，即：N常氧组，NH常氧培养后急性缺氧6 h组，CH慢性缺氧培养后复氧12 h组，CHH慢性缺氧培养后复氧12 h再急性缺氧6 h组。引物序列：Kv1.3 上游引物5’-GCACCTCTCCTCTTCAGCAG、下游引物5’-GGCACAGAATGGCAATCGTA； Kv2.1上游引物5’-AGGCCGAACTGTGTCTACTC、下游引物5’-GTCCTCTGCACCCTCCTAAC； Kv3.1上游引物5’-CGAGTTCCTGCTGCTTATCA、下游引物5’-TGGTGTGGAGAGTTTACGAC。结果：①正常及慢性缺氧鼠PASMC中均有Kv1.3、Kv2.1、Kv3.1基因表达；②急性缺氧可使PASMC中Kv2.1、Kv3.1 mRNA表达明显上调，其mRNA分别由0.646±0.092、0.782±0.104升高到1.059±0.134、0.985±0.116(P<0.01)；③慢性缺氧后复氧12 h再急性缺氧6 h，PASMC Kv2.1 mRNA、Kv3.1 mRNA水平均降低，其中Kv2.1 mRNA由1.008±0.117下降到0.649±0.097，差异有极显著(P<0.01)。结论：Kv2.1、Kv3.1基因可能是缺氧反应基因，慢性缺氧可使PASMC Kv2.1、Kv3.1钾通道基因急性缺氧后表达上调转变为下调，可能因而降低其在HPV中的作用。, 百拇医药