血清结核杆菌抗体对结核病的诊断意义
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作者：陈俊娣
单位：南京医科大学第一附属医院呼吸科，南京 210029
关键词：分支杆菌；非典型性；抗体；腺苷脱氨酶
南京医科大学学报000523
摘 要 目的 早期诊断结核病。方法 应用以脂阿拉伯甘露糖(LAM)为抗原的ELISA法检测893例患者，并对115例结核病患者同时进行了腺苷脱氨酶(ADA)测定。结果 在各类结核病患者中，该试验的敏感性和特异性分别为70.6%、91.3%。结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水/血清ADA两种测定结果的符合率为73%。结论 结核抗体测定对结核病有一定参考价值。同时进行胸腔积液、腹水/血清ADA比值测定对结核病的诊断意义更大。
中图号 R52
, http://www.100md.com 近年来结核病在全球范围内发病率有逐渐上升趋势，因此及早诊断结核病对治疗和预防至关重要。1976年Hassan等[1]建立ELISA检测结核分支杆菌抗体，并证明对结核病的临床诊断有一定参考价值，可作为结核病血清学辅助诊断指标之一。我们应用以脂阿拉伯甘露糖(LAM)为抗原的ELISA法检测893例患者，并对其中的115例结核病患者同时进行腺苷脱氨酶(ADA)测定，探讨其关系及临床意义。
1 临床资料
1.1 一般资料
各类结核病患者115例，男性65例，女性50例，年龄19～71岁；其中，肺结核98例(原发性肺结核4例，浸润型肺结核6例，结核性胸膜炎88例)。肺结核诊断根据痰结核分支杆菌——BACTEC培养检查、X线检查以及临床症状和体征。结核性胸膜炎诊断根据X线和胸腔积液检查。肺外结核17例中，5例肾结核根据尿液检查等诊断，8例结核性腹膜炎根据腹水常规及临床治疗有效而确诊，4例淋巴结核经淋巴结活检病理诊断。对照组：为非结核病患者778例，其中肺炎255例，急、慢性支气管炎346例，支气管扩张63例，支气管肺癌41例，泌尿系感染49例，慢性结肠炎24例，以上病例均经临床相关检查而确诊。
, 百拇医药
1.2 方法
结核分支杆菌抗体检查，采用美国DynaGen公司生产的结明(Myco Dot,TM)结核病快捷诊断试剂盒，应用以LAM为抗原的ELISA法进行结核分支杆菌抗体检测，按说明书规定方法操作。
ADA按氨试剂法，以1 ml血清在37℃条件下温育1 h产生1 μg氨的酶量为1个酶活性单位。正常人血清ADA活力(
±s)为25 U。
2 结 果
结核病与非结核病受检者血清结核分支杆菌抗体检测结果的比较，见表1。
表1 血清结核分支杆菌抗体检测结果 分组
例数
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抗体阳性例数
阳性率(%)
P值
结核病组
对照组
115
778
84
59
73.0
7.5
<0.01
结核病人血清结核抗体与ADA测定结果比较见表2。表2 115例结核病人血清结核抗体与ADA结果比较 (例) 组别
, 百拇医药
ADA
合计
+
-
结核抗体+
72
15
87
-
24
4
28
合计
96
, http://www.100md.com
19
115
表2示两种测定方法结果的符合率为66%(χ2=0.021,P>0.75)。
结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水/血清ADA结果比较见表3。表3 结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水/血清ADA比值比较 (例) 组别
ADA
合计
+
-
结核抗体+
69
10
, http://www.100md.com
79
-
16
3
19
合计
85
13
98
表3示两种测定结果的符合率为73%(χ2=0.045,P>0.05)。
3 讨 论
结核病血清学诊断的历史由来已久，但因其敏感性不高、特异性不强等缺陷而被中断。近年来随着结核分支杆菌数种特异性抗原的发现与纯化，实验技术的不断发展，利用ELISA法测定患者血清中结核抗体来诊断活动性结核成为可能，其灵敏度和特异性都高于以往的诊断方法。1976年Hassan等[1]证明了用ELISA法对结核病的诊断有一定参考价值。以后有关这方面的报道较多。但由于各作者使用的包被抗原不同，报道的结果差异较大[2]。我们采用纯化的LAM作为抗原，这种抗原是分支杆菌细胞壁的重要组成，属特异性抗原，具有较强的免疫原性，特异性为91.3%[3]。
, http://www.100md.com
因为人群中感染结核分支杆菌十分普遍，健康人体内也会携带低度水平的结核抗体，所以对试剂要求较高，灵敏度既不能太高，也不能太低，灵敏度太高，能检出任何水平抗体，就会增加假阳性率，反之，灵敏度过低，某些较低水平抗体的结核病患者就有可能被漏诊。我们所用LAM抗原纯度达到97%，具有较高免疫原性，特异性较强，从我们检测的893例来看，该试剂的灵敏度为70.6%，特异性为91.3%，结核组与对照组有显著性差异(P<0.05)，这与国内其他作者临床报告相一致[3]。
115例结核病患者在进行结核抗体测定的同时进行了ADA测定。Piras等[4]首先报告了在结核性胸腔积液中ADA明显增高。ADA测定对结核性胸膜炎、腹膜炎特异性敏感性均很高，对结核性与非结核性胸腔积液鉴别诊断意义很大[5]。本文实验结果表明，血清结核抗体与血清ADA两种方法结果一致率为66%。本文对98例结核性胸膜炎、腹膜炎患者做了血清、胸腔积液、腹水ADA测定，并进行胸腔积液、腹水/血清ADA比值的测定，若比值在1.2以上，定为阳性结果，然后以胸腔积液、腹水/血清ADA比值再与血清结核抗体水平测定比较，两者的一致率为73%。本文认为胸腔积液、腹水/血清ADA比值的测定比单纯血清测定对结核病的诊断意义更大。
, 百拇医药
参考文献
1，Hassan E, Parsons ER, Johnson GD. The detection of antibodies to mycobacterium tuberculosis by microplate enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Tubercle, 1976,57:67
2，Danial TM. The rapid diagnosis of tuberculosis: Laboratory techniques applicable in developing country settings. Rev Infect Dis, 1989,11(Suppl):47
3，马 王 与，高薇薇，赵丰增.快速酶联免疫吸附法检测血清脂阿拉伯甘露糖-IgG对肺结核的诊断价值.中华结核和呼吸杂志，1996，19(1)：41
4，Piras MA, Gakis C, Budroni M. Adenosine deaminase activity in pleural effusions: an aid to ditterential diagnosis. Brit Med J, 1978,2:1751
5 陈俊娣.胸水与血清腺苷脱氨酶活性109例临床鉴别诊断分析.南京医学院学报，1995，15(2)：432
(1999-11-05收稿), http://www.100md.com
单位：南京医科大学第一附属医院呼吸科，南京 210029
关键词：分支杆菌；非典型性；抗体；腺苷脱氨酶
南京医科大学学报000523
摘 要 目的 早期诊断结核病。方法 应用以脂阿拉伯甘露糖(LAM)为抗原的ELISA法检测893例患者，并对115例结核病患者同时进行了腺苷脱氨酶(ADA)测定。结果 在各类结核病患者中，该试验的敏感性和特异性分别为70.6%、91.3%。结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水/血清ADA两种测定结果的符合率为73%。结论 结核抗体测定对结核病有一定参考价值。同时进行胸腔积液、腹水/血清ADA比值测定对结核病的诊断意义更大。
中图号 R52
, http://www.100md.com 近年来结核病在全球范围内发病率有逐渐上升趋势，因此及早诊断结核病对治疗和预防至关重要。1976年Hassan等[1]建立ELISA检测结核分支杆菌抗体，并证明对结核病的临床诊断有一定参考价值，可作为结核病血清学辅助诊断指标之一。我们应用以脂阿拉伯甘露糖(LAM)为抗原的ELISA法检测893例患者，并对其中的115例结核病患者同时进行腺苷脱氨酶(ADA)测定，探讨其关系及临床意义。
1 临床资料
1.1 一般资料
各类结核病患者115例，男性65例，女性50例，年龄19～71岁；其中，肺结核98例(原发性肺结核4例，浸润型肺结核6例，结核性胸膜炎88例)。肺结核诊断根据痰结核分支杆菌——BACTEC培养检查、X线检查以及临床症状和体征。结核性胸膜炎诊断根据X线和胸腔积液检查。肺外结核17例中，5例肾结核根据尿液检查等诊断，8例结核性腹膜炎根据腹水常规及临床治疗有效而确诊，4例淋巴结核经淋巴结活检病理诊断。对照组：为非结核病患者778例，其中肺炎255例，急、慢性支气管炎346例，支气管扩张63例，支气管肺癌41例，泌尿系感染49例，慢性结肠炎24例，以上病例均经临床相关检查而确诊。
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1.2 方法
结核分支杆菌抗体检查，采用美国DynaGen公司生产的结明(Myco Dot,TM)结核病快捷诊断试剂盒，应用以LAM为抗原的ELISA法进行结核分支杆菌抗体检测，按说明书规定方法操作。
ADA按氨试剂法，以1 ml血清在37℃条件下温育1 h产生1 μg氨的酶量为1个酶活性单位。正常人血清ADA活力(
±s)为25 U。2 结 果
结核病与非结核病受检者血清结核分支杆菌抗体检测结果的比较，见表1。
表1 血清结核分支杆菌抗体检测结果 分组
例数
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抗体阳性例数
阳性率(%)
P值
结核病组
对照组
115
778
84
59
73.0
7.5
<0.01
结核病人血清结核抗体与ADA测定结果比较见表2。表2 115例结核病人血清结核抗体与ADA结果比较 (例) 组别
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ADA
合计
+
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结核抗体+
72
15
87
-
24
4
28
合计
96
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19
115
表2示两种测定方法结果的符合率为66%(χ2=0.021,P>0.75)。
结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水/血清ADA结果比较见表3。表3 结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水/血清ADA比值比较 (例) 组别
ADA
合计
+
-
结核抗体+
69
10
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79
-
16
3
19
合计
85
13
98
表3示两种测定结果的符合率为73%(χ2=0.045,P>0.05)。
3 讨 论
结核病血清学诊断的历史由来已久，但因其敏感性不高、特异性不强等缺陷而被中断。近年来随着结核分支杆菌数种特异性抗原的发现与纯化，实验技术的不断发展，利用ELISA法测定患者血清中结核抗体来诊断活动性结核成为可能，其灵敏度和特异性都高于以往的诊断方法。1976年Hassan等[1]证明了用ELISA法对结核病的诊断有一定参考价值。以后有关这方面的报道较多。但由于各作者使用的包被抗原不同，报道的结果差异较大[2]。我们采用纯化的LAM作为抗原，这种抗原是分支杆菌细胞壁的重要组成，属特异性抗原，具有较强的免疫原性，特异性为91.3%[3]。
, http://www.100md.com
因为人群中感染结核分支杆菌十分普遍，健康人体内也会携带低度水平的结核抗体，所以对试剂要求较高，灵敏度既不能太高，也不能太低，灵敏度太高，能检出任何水平抗体，就会增加假阳性率，反之，灵敏度过低，某些较低水平抗体的结核病患者就有可能被漏诊。我们所用LAM抗原纯度达到97%，具有较高免疫原性，特异性较强，从我们检测的893例来看，该试剂的灵敏度为70.6%，特异性为91.3%，结核组与对照组有显著性差异(P<0.05)，这与国内其他作者临床报告相一致[3]。
115例结核病患者在进行结核抗体测定的同时进行了ADA测定。Piras等[4]首先报告了在结核性胸腔积液中ADA明显增高。ADA测定对结核性胸膜炎、腹膜炎特异性敏感性均很高，对结核性与非结核性胸腔积液鉴别诊断意义很大[5]。本文实验结果表明，血清结核抗体与血清ADA两种方法结果一致率为66%。本文对98例结核性胸膜炎、腹膜炎患者做了血清、胸腔积液、腹水ADA测定，并进行胸腔积液、腹水/血清ADA比值的测定，若比值在1.2以上，定为阳性结果，然后以胸腔积液、腹水/血清ADA比值再与血清结核抗体水平测定比较，两者的一致率为73%。本文认为胸腔积液、腹水/血清ADA比值的测定比单纯血清测定对结核病的诊断意义更大。
, 百拇医药
参考文献
1，Hassan E, Parsons ER, Johnson GD. The detection of antibodies to mycobacterium tuberculosis by microplate enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Tubercle, 1976,57:67
2，Danial TM. The rapid diagnosis of tuberculosis: Laboratory techniques applicable in developing country settings. Rev Infect Dis, 1989,11(Suppl):47
3，马 王 与，高薇薇，赵丰增.快速酶联免疫吸附法检测血清脂阿拉伯甘露糖-IgG对肺结核的诊断价值.中华结核和呼吸杂志，1996，19(1)：41
4，Piras MA, Gakis C, Budroni M. Adenosine deaminase activity in pleural effusions: an aid to ditterential diagnosis. Brit Med J, 1978,2:1751
5 陈俊娣.胸水与血清腺苷脱氨酶活性109例临床鉴别诊断分析.南京医学院学报，1995，15(2)：432
(1999-11-05收稿), http://www.100md.com