基底细胞癌中细胞凋亡和细胞增殖的关系
http://www.100md.com
37c医学网
作者：田园旭 冯德云 罗春华
单位：田园旭(湖南省益阳市第二人民医院病理科(413001))；冯德云(湖南医科大学湘雅医院病理科(长沙 410008))；罗春华(湖南省益阳市第二人民医院病理科(413001))
关键词：基底细胞癌；细胞凋亡；细胞增殖
中国现代医学杂志000226 分类号 R392.1
本文利用原位末端转移酶法和免疫组织化学技术分别检测基底细胞癌(BS)中细胞凋亡和细胞增殖与BS发生及其生物学行为的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
收集本院和湘雅医院病理科1995～1999年活检BS标本41例，意外死亡病人的正常皮肤组织8例。所有组织均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片。所有BS病例均经病理确诊，其中实体型36例，色素型2例，角化型1例，硬化型2例。男27例，女14例，平均年龄58.6岁(42～79岁)。
, http://www.100md.com
原位细胞凋亡检测试剂盒系美国Oncor Technical Assistance Co产品；抗PCNA抗体及SP免疫组织化学检测试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。
1.2 方法
凋亡细胞原位检测按冯德云等[1]介绍的方法进行。PCNA免疫组化染色：切片脱蜡至水→2%H2O2阻断内源性过氧化物酶20min→0.1%胰酶于37℃消化30min→微波修复抗原5min(1mM乙二胺四乙酸钠液，pH5.4)→然后按SP法进行。
取小鼠小肠粘膜上皮细胞作细胞凋亡检测阳性对照；用PBS分别代替TdT工作液或抗地高辛抗体作细胞凋亡检测阴性对照。用PBS代替抗PCNA抗体作SP法阴性对照；肝细胞癌组织作PCNA蛋白阳性对照。
结果评估：细胞凋亡和PCNA阳性细胞密度计数参照孙保存[2]的方法进行。
, 百拇医药
统计学处理：采用t检验和相关分析。
2 结果
2.1 BS和正常皮肤组织中凋亡细胞和PCNA阳性细胞的形态及分布
PCNA阳性产物位于胞核，阳性细胞体积较大，核大，有时可见核分裂象，其在BS组织中呈弥漫或簇状分布，而在正常皮肤组织中呈点彩状分布于基底层和棘细胞层；凋亡细胞经ISTdT技术标记，阳性信号均位于胞核；BS中凋亡细胞呈弥漫状分布，正常皮肤组织中则呈散在分布于角化层和棘细胞层之间。
2.2 BS和正常皮肤组织中凋亡细胞和PCNA阳性细胞密度
BS组织中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度均明显高于正常皮肤组织；BS各组织学亚型之间凋亡细胞和PCNA阳性细胞密度之间无明显差异；统计学分析显示BS和组织中BS组织中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度呈线性正相关(r＝0.4236)。
, http://www.100md.com
附表 正常皮肤和BS组织中凋亡细胞和PCNA阳性细胞密度 (
±s，阳性细胞数0.1024m2) 组 别
例数
凋亡细胞
PCNA阳性细胞
正常皮肤
8
7±2
11±4
BS
41
34±6
, 百拇医药
79±12
3 讨论
BS是起源于表皮角朊细胞的低度恶性肿瘤,肿块主要发生在体表的暴露部位,其病变进展缓慢,极少转移,但易复发,对这些特殊的生物学行为尚缺乏令人信服的解释。细胞凋亡是机体的一种保护机制,清除有基因损伤的细胞,具有抗瘤作用[1]。本文结果显示BS组织中凋亡细胞密度明显高于正常皮肤组织,这可能是该瘤进展缓慢,呈低度恶性的原因之一。
细胞增殖和细胞凋亡的相对比例可以决定肿瘤的生长速度[2]。随着肿瘤的进展，大多数肿瘤细胞增殖和细胞凋亡之间呈负相关，即肿瘤细胞分化愈差，其细胞凋亡愈少，细胞增殖愈显著，细胞积聚速度明显增加，生长加快[1，2]。Wang等[4]在研究食管癌的细胞增殖和细胞凋亡时发现，癌变早期出现细胞凋亡，随着病变进展细胞凋亡和细胞增殖指数均明显增高，并认为高增殖细胞更易发生凋亡。笔者发现BS中细胞凋亡和细胞增殖十分显著，且呈明显正相关，结果与Wang等[4]的基本一致，提示在BS的发生发展中既有明显的细胞增殖又有显著的细胞凋亡，这两方面可能控制着BS的发生和发展，一方面凋亡增多使肿瘤生长缓慢和极少发生转移，另一方面细胞增殖显著可能是该肿瘤容易复发的主要原因。
, http://www.100md.com
参考文献
1 冯德云，郑 晖，沈 明，等.bcl-2和p53蛋白表达对肝硬变和肝细胞癌中细胞增殖和凋亡的调节.湖南医科大学学报，1999；24(4)：325～328
2 孙保存，赵秀兰，惠 京，等.大肠癌及其癌前病变中细胞凋亡和细胞增殖间关系的原位观察.中华医学杂志，1996；76(11)：848～851
3 皋岚湘，丁华野，邓永江，等.乳腺癌组织中bcl-2、p53和c-cerbB-2蛋白表达的相互关系及意义.中华病理学杂志，1996；25(3)：165～168
4 Wang LD,Zhou Q,Yang WC,et al.Apoptosis and cell proliferation in esophageal precancerous and cancerous lesions:study of a high-risk population in northern China.Anticancer Res,1999；19(1A):369～374
收稿日期：1999-11-20, http://www.100md.com
单位：田园旭(湖南省益阳市第二人民医院病理科(413001))；冯德云(湖南医科大学湘雅医院病理科(长沙 410008))；罗春华(湖南省益阳市第二人民医院病理科(413001))
关键词：基底细胞癌；细胞凋亡；细胞增殖
中国现代医学杂志000226 分类号 R392.1
本文利用原位末端转移酶法和免疫组织化学技术分别检测基底细胞癌(BS)中细胞凋亡和细胞增殖与BS发生及其生物学行为的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
收集本院和湘雅医院病理科1995～1999年活检BS标本41例，意外死亡病人的正常皮肤组织8例。所有组织均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片。所有BS病例均经病理确诊，其中实体型36例，色素型2例，角化型1例，硬化型2例。男27例，女14例，平均年龄58.6岁(42～79岁)。
, http://www.100md.com
原位细胞凋亡检测试剂盒系美国Oncor Technical Assistance Co产品；抗PCNA抗体及SP免疫组织化学检测试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。
1.2 方法
凋亡细胞原位检测按冯德云等[1]介绍的方法进行。PCNA免疫组化染色：切片脱蜡至水→2%H2O2阻断内源性过氧化物酶20min→0.1%胰酶于37℃消化30min→微波修复抗原5min(1mM乙二胺四乙酸钠液，pH5.4)→然后按SP法进行。
取小鼠小肠粘膜上皮细胞作细胞凋亡检测阳性对照；用PBS分别代替TdT工作液或抗地高辛抗体作细胞凋亡检测阴性对照。用PBS代替抗PCNA抗体作SP法阴性对照；肝细胞癌组织作PCNA蛋白阳性对照。
结果评估：细胞凋亡和PCNA阳性细胞密度计数参照孙保存[2]的方法进行。
, 百拇医药
统计学处理：采用t检验和相关分析。
2 结果
2.1 BS和正常皮肤组织中凋亡细胞和PCNA阳性细胞的形态及分布
PCNA阳性产物位于胞核，阳性细胞体积较大，核大，有时可见核分裂象，其在BS组织中呈弥漫或簇状分布，而在正常皮肤组织中呈点彩状分布于基底层和棘细胞层；凋亡细胞经ISTdT技术标记，阳性信号均位于胞核；BS中凋亡细胞呈弥漫状分布，正常皮肤组织中则呈散在分布于角化层和棘细胞层之间。
2.2 BS和正常皮肤组织中凋亡细胞和PCNA阳性细胞密度
BS组织中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度均明显高于正常皮肤组织；BS各组织学亚型之间凋亡细胞和PCNA阳性细胞密度之间无明显差异；统计学分析显示BS和组织中BS组织中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度呈线性正相关(r＝0.4236)。
, http://www.100md.com
附表 正常皮肤和BS组织中凋亡细胞和PCNA阳性细胞密度 (
±s，阳性细胞数0.1024m2) 组 别例数
凋亡细胞
PCNA阳性细胞
正常皮肤
8
7±2
11±4
BS
41
34±6
, 百拇医药
79±12
3 讨论
BS是起源于表皮角朊细胞的低度恶性肿瘤,肿块主要发生在体表的暴露部位,其病变进展缓慢,极少转移,但易复发,对这些特殊的生物学行为尚缺乏令人信服的解释。细胞凋亡是机体的一种保护机制,清除有基因损伤的细胞,具有抗瘤作用[1]。本文结果显示BS组织中凋亡细胞密度明显高于正常皮肤组织,这可能是该瘤进展缓慢,呈低度恶性的原因之一。
细胞增殖和细胞凋亡的相对比例可以决定肿瘤的生长速度[2]。随着肿瘤的进展，大多数肿瘤细胞增殖和细胞凋亡之间呈负相关，即肿瘤细胞分化愈差，其细胞凋亡愈少，细胞增殖愈显著，细胞积聚速度明显增加，生长加快[1，2]。Wang等[4]在研究食管癌的细胞增殖和细胞凋亡时发现，癌变早期出现细胞凋亡，随着病变进展细胞凋亡和细胞增殖指数均明显增高，并认为高增殖细胞更易发生凋亡。笔者发现BS中细胞凋亡和细胞增殖十分显著，且呈明显正相关，结果与Wang等[4]的基本一致，提示在BS的发生发展中既有明显的细胞增殖又有显著的细胞凋亡，这两方面可能控制着BS的发生和发展，一方面凋亡增多使肿瘤生长缓慢和极少发生转移，另一方面细胞增殖显著可能是该肿瘤容易复发的主要原因。
, http://www.100md.com
参考文献
1 冯德云，郑 晖，沈 明，等.bcl-2和p53蛋白表达对肝硬变和肝细胞癌中细胞增殖和凋亡的调节.湖南医科大学学报，1999；24(4)：325～328
2 孙保存，赵秀兰，惠 京，等.大肠癌及其癌前病变中细胞凋亡和细胞增殖间关系的原位观察.中华医学杂志，1996；76(11)：848～851
3 皋岚湘，丁华野，邓永江，等.乳腺癌组织中bcl-2、p53和c-cerbB-2蛋白表达的相互关系及意义.中华病理学杂志，1996；25(3)：165～168
4 Wang LD,Zhou Q,Yang WC,et al.Apoptosis and cell proliferation in esophageal precancerous and cancerous lesions:study of a high-risk population in northern China.Anticancer Res,1999；19(1A):369～374
收稿日期：1999-11-20, http://www.100md.com