多发性硬化脑苷酯抗体检测
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作者：林艾羽 吴秀丽 慕容慎行 许国英 林嘉友
单位：林艾羽(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；吴秀丽(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；慕容慎行(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；许国英(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；林嘉友(中国医学科学院)
关键词：
脑与神经疾病杂志000223 脑苷酯是一种髓鞘成分，存在于神经元表面，调节多种神经过程。在脱髓鞘的情况下，CSF中各种抗体增加，也包括脑苷酯抗体[1]。为了进一步探讨MS的自身免疫机制，我们检测了MS患者血清和CSF脑苷酯抗体。
资料和方法 1.一般资料 实验组20例，均来自我科住院确诊的MS病人，符合Poster等的诊断标准[2]；男9例，女11例，年龄21～54岁，平均34岁，病程6月～9年，平均17.1月。临床主要表现为视力障碍，肢体麻木无力，行走不稳。辅助检查包括诱发电位、CT或MRI。对照组血清采自15例健康成人，脑脊髓液取自非神经系统疾病的外科手术行腰麻的病人。实验组和对照组成员分别抽取1ml脑脊髓液；抽取2ml外周血，离心后取其上清液，均保存于-20℃。
, 百拇医药
2.方法 采用改良Marcus法[3]。将脑苷酯(10ug/50ul)包被于聚苯乙每孔包被50ul，4℃过夜，晾干；用1%BSA-PBS封闭，每孔100ul，封闭4～6小时；用0.15MPBS洗3×5’(简称洗3次)；加1∶80稀释待测血清，4℃过夜。洗3次；加结合物MAH-IG-HRPO(1∶2000稀释)，置4℃6小时，洗3次；加底物液：底物缓冲液10ml，邻苯二胺(OPD)4mg，30%HO216ul，室温放置15’2MHSO4每孔20ul终止反应；于492nm测定OD值。
3.统计学检验 采用t检验，以大于X+2SD为阳性标准。
结 果 1.在血清检验中，20例MS患者脑苷酯抗体阳性14例(阳性率70%)；在脑脊液中，20例MS患者脑苷酯抗体阳性14例(阳性率70%)。
2.经统计学检验，以上两组两种抗体的水平在MS组和对照组间差异均有显著性意义。
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讨 论 MS患者体内同时存在着细胞免疫异常和体液免疫异常，MS病人的外周血对脑组织抗原(MBP、神经节苷酯、脑苷酯)有特异性细胞免疫应答。
n(个)
脑苷酯抗体(OD)
P值
MS组
血清
19
0.7930±0.3960
P<0.01
CSF
19
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0.6985±0.1838
P<0.01
HC组
血清
15
0.4213±0.1397
CSF
15
0.3393±0.1290
本研究旨从体液免疫角度出发，了解在急性期MS病人血清及CSF中除MBP抗体、神经节苷酯抗体外，脑苷酯抗体的存在情况。本研究对20例急性期MS病人的CSF及血清脑苷酯抗体进行了检测并与对照组相比较，以大于对照组X+2SD为阳性标准，结果显示患者组CSF及血清中此二抗体均有70%的阳性率。说明此抗体同MBP抗体、神经节苷酯抗体一样，在急性期对反应病情的活动有一定帮助，进一步对MS的可能发病机制作出了阐明，该病的发病可能由于感染等原因，使得针对自身组分的MBP、神经节苷酯、脑苷酯等自身免疫机制被激活，体液免疫和细胞免疫共同参与的免疫应答过程，选择性地攻击中枢神经白质，导致一系列的病理变化和临床过程。
, 百拇医药
本实验通过对MS血清及脑脊液脑苷酯抗体的检测，补充说明了髓鞘脂质抗体在脱髓鞘活动期同样参与MS的发病过程。CSF中这些抗体的存在反应了神经系统的体液免疫状态，乃神经系统炎性脱髓鞘疾病的机理。早年发现MSCSFIgG增高，Toutellotte通过计算发现其鞘内IgG合成增高证明MS病人神经系统有体液免疫学异常。关于脑脊液抗体的来源以及与血清抗体的关系，人们提出了中枢神经系统内部本身可以合成免疫球蛋白的说法[4]是因为MS病人外周产生特异性抗体的免疫活性B细胞可以通过遭破坏的血脑屏障，进入中枢神经系统产生特异性抗体。 参考文献
1 许贤豪. 神经免疫学. 第1版. 北京医科大学. 中国协和医 科大学联合出版社， 1995；10∶177-182.
2 Poster CM. Patty DW, Scheiberg L, et al. New diagnostic criteria for multiple sclerosis:guidelines for research protocols. Ann Neural. 1983; 13∶227.
3 Marcus DM, Latte N, Hsi BP, Gillard BK Measurement and significance o f antibodies against GM1 ganglioside. Neuroimmuno, 1989 Dec; 25(2-3)∶255-9.
4 楚兰等. 24小时鞘内IgG合成率检测的临床意义. 卒中和神经疾病， 1998， 9( 4).
(1999-07-10 收稿), 百拇医药
单位：林艾羽(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；吴秀丽(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；慕容慎行(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；许国英(350005 福建医科大学附属第一医院神经内科)；林嘉友(中国医学科学院)
关键词：
脑与神经疾病杂志000223 脑苷酯是一种髓鞘成分，存在于神经元表面，调节多种神经过程。在脱髓鞘的情况下，CSF中各种抗体增加，也包括脑苷酯抗体[1]。为了进一步探讨MS的自身免疫机制，我们检测了MS患者血清和CSF脑苷酯抗体。
资料和方法 1.一般资料 实验组20例，均来自我科住院确诊的MS病人，符合Poster等的诊断标准[2]；男9例，女11例，年龄21～54岁，平均34岁，病程6月～9年，平均17.1月。临床主要表现为视力障碍，肢体麻木无力，行走不稳。辅助检查包括诱发电位、CT或MRI。对照组血清采自15例健康成人，脑脊髓液取自非神经系统疾病的外科手术行腰麻的病人。实验组和对照组成员分别抽取1ml脑脊髓液；抽取2ml外周血，离心后取其上清液，均保存于-20℃。
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2.方法 采用改良Marcus法[3]。将脑苷酯(10ug/50ul)包被于聚苯乙每孔包被50ul，4℃过夜，晾干；用1%BSA-PBS封闭，每孔100ul，封闭4～6小时；用0.15MPBS洗3×5’(简称洗3次)；加1∶80稀释待测血清，4℃过夜。洗3次；加结合物MAH-IG-HRPO(1∶2000稀释)，置4℃6小时，洗3次；加底物液：底物缓冲液10ml，邻苯二胺(OPD)4mg，30%HO216ul，室温放置15’2MHSO4每孔20ul终止反应；于492nm测定OD值。
3.统计学检验 采用t检验，以大于X+2SD为阳性标准。
结 果 1.在血清检验中，20例MS患者脑苷酯抗体阳性14例(阳性率70%)；在脑脊液中，20例MS患者脑苷酯抗体阳性14例(阳性率70%)。
2.经统计学检验，以上两组两种抗体的水平在MS组和对照组间差异均有显著性意义。
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讨 论 MS患者体内同时存在着细胞免疫异常和体液免疫异常，MS病人的外周血对脑组织抗原(MBP、神经节苷酯、脑苷酯)有特异性细胞免疫应答。
n(个)
脑苷酯抗体(OD)
P值
MS组
血清
19
0.7930±0.3960
P<0.01
CSF
19
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0.6985±0.1838
P<0.01
HC组
血清
15
0.4213±0.1397
CSF
15
0.3393±0.1290
本研究旨从体液免疫角度出发，了解在急性期MS病人血清及CSF中除MBP抗体、神经节苷酯抗体外，脑苷酯抗体的存在情况。本研究对20例急性期MS病人的CSF及血清脑苷酯抗体进行了检测并与对照组相比较，以大于对照组X+2SD为阳性标准，结果显示患者组CSF及血清中此二抗体均有70%的阳性率。说明此抗体同MBP抗体、神经节苷酯抗体一样，在急性期对反应病情的活动有一定帮助，进一步对MS的可能发病机制作出了阐明，该病的发病可能由于感染等原因，使得针对自身组分的MBP、神经节苷酯、脑苷酯等自身免疫机制被激活，体液免疫和细胞免疫共同参与的免疫应答过程，选择性地攻击中枢神经白质，导致一系列的病理变化和临床过程。
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本实验通过对MS血清及脑脊液脑苷酯抗体的检测，补充说明了髓鞘脂质抗体在脱髓鞘活动期同样参与MS的发病过程。CSF中这些抗体的存在反应了神经系统的体液免疫状态，乃神经系统炎性脱髓鞘疾病的机理。早年发现MSCSFIgG增高，Toutellotte通过计算发现其鞘内IgG合成增高证明MS病人神经系统有体液免疫学异常。关于脑脊液抗体的来源以及与血清抗体的关系，人们提出了中枢神经系统内部本身可以合成免疫球蛋白的说法[4]是因为MS病人外周产生特异性抗体的免疫活性B细胞可以通过遭破坏的血脑屏障，进入中枢神经系统产生特异性抗体。 参考文献
1 许贤豪. 神经免疫学. 第1版. 北京医科大学. 中国协和医 科大学联合出版社， 1995；10∶177-182.
2 Poster CM. Patty DW, Scheiberg L, et al. New diagnostic criteria for multiple sclerosis:guidelines for research protocols. Ann Neural. 1983; 13∶227.
3 Marcus DM, Latte N, Hsi BP, Gillard BK Measurement and significance o f antibodies against GM1 ganglioside. Neuroimmuno, 1989 Dec; 25(2-3)∶255-9.
4 楚兰等. 24小时鞘内IgG合成率检测的临床意义. 卒中和神经疾病， 1998， 9( 4).
(1999-07-10 收稿), 百拇医药