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编号:650641
EBV-DNA拷贝数和EBERs原位表达在鼻NK/T细胞淋巴瘤诊断中的一致性研究
http://www.100md.com 2014年8月22日 新医学 2014年第5期
原位杂交,石蜡,材料与方法,免疫组织化学,实时定量PCR检测EBV-DNA拷贝数,原位杂交检测地高辛标记EBV编码的小RNA(EBERs)的表达,统计学处理,结果,鼻NKTCL患
     邓玲 邵建永 张旭 汤涛 邵琼 李银珍

    NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)于2001年WHO正式纳入恶性淋巴瘤的病理新分型,属于结外非霍奇金淋巴瘤中一种独立的临床病理疾病,主要分为鼻NKTCL和结外鼻型NKTCL[1]。鼻NKTCL因绝大部分好发于鼻腔而得名。此型淋巴瘤具有独特的免疫表型、特殊的组织形态以及生物学行为,其发病具有地域特色,亚洲地区为高发区,大部分集中在中国南部,罕见于欧美国家。其临床进展快,具有高度侵袭性,临床预后差。在临床病理诊断中,由于组织中有大量的炎症细胞浸润、大片坏死以及不典型增生常常导致误诊和(或)诊断延迟[2]。为提高鼻NKTCL的诊断率,本研究针对我院诊断的50例鼻腔NKTCL的临床资料回顾性分析,并采用免疫组织化学技术检测相关抗原的表达,实时定量PCR检测EBV-DNA 拷贝数以及原位杂交技术检测EBV编码的RNA。综合组织形态学,分子标记物表达情况,提高我们对本病的认识。

    材料与方法

    一、材 料

    收集我院2010年1月至2011年10月诊治的鼻NKTCL 50例。其中男40例,女10例,年龄12~72岁,中位年龄49岁。所有标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,经免疫组织化学检测CD3, CD45RO, CD20, CD56, CD79a,TIA1,Granzyme B确定肿瘤细胞的免疫表型(由病理科技术员完成)。根据2001年WHO关于淋巴造血组织肿瘤分类鼻NK/T细胞淋巴瘤的诊断标准,依据组织形态学、临床特征以及上述提及的免疫组织化学结果,由经验丰富的2位病理医生共同诊断为鼻NKTCL。

    二、免疫组织化学

    常规石蜡切片,4~5 μm。切片脱蜡至水。pH 8.0的EDTA 高压抗原修复后至室温冷却。3%过氧化氢封闭10 min以降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 ......

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