张曦 金欧 黄红月 侯成成 古洁若

    SLE是一种全身多脏器受累的慢性自身免疫性疾病，其主要特征为内源性核酸类物质对免疫系统的慢性激活[1]。也就是说，SLE患者循环免疫复合物中的DNA/RNA分别被Toll样受体9/7(TLR-9/7)识别后，激活相应的免疫细胞，诱导IFN-α等多种细胞因子的产生[1]。越来越多的研究发现，IFN-α的高表达在SLE的发病中起关键性作用，IFN-α与自身抗体的产生及疾病活动性相关[2]。虽然具体机制尚不清楚，但目前大多数专家认为羟氯喹可阻断TLR识别核酸类物质，从而在SLE的治疗中发挥重要作用。本研究旨在评估羟氯喹是否能够有效抑制因TLR-9激活所致的IFN-α的高表达，现报告如下。

    材料与方法

    一、实验材料

    本研究所使用的健康志愿者的PBMC均是通过蔗糖密度梯度离心法从人外周血白膜中分离所得，分离好的外周血单个核细胞(PBMC)洗涤2次后，使用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基悬浮培养待用。本研究中所用到的白膜由广州血液中心免费提供。

    二、主要试剂及仪器

    1.主要试剂

    包括：人外周血淋巴细胞分离液(天津灏洋生物制剂公司)，RPMI 1640细胞培养基、胎牛血清(Hyclone，美国)，Trizol总RNA 抽提试剂、ODN 2216(Invitrogen，美国)，随机引物逆转录制备模板DNA试剂盒及荧光实时定量PCR系列试剂盒(TakaRa，日本)，氯仿、异丙醇、无水乙醇(广州东征公司)，焦碳酸二乙酯、羟氯喹(Sigma，美国)。

    2.主要仪器

    包括：SW-CJ-1FD超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)，HF151恒温培养箱(力新仪器有限公司) ......