亓翠玲 李斌 杨扬 叶杰 王丽京 黄韧

    P-选择素是选择素家族的重要成员，主要在活化的血小板和血管内皮细胞上表达，可以通过与单核细胞、中性粒细胞表面的P-选择素配体结合，从而介导活化血小板或内皮细胞与中性粒细胞、单核细胞黏附，因而P-选择素在血栓形成和炎症中发挥重要作用[1-3]。P-选择素还可与肿瘤细胞表面的配体结合介导肿瘤细胞与血小板及内皮细胞的黏附，从而促进肿瘤转移，但P-选择素对于黑色素瘤肺转移的作用尚未见报道，本研究利用P-选择素敲除小鼠观察P-选择素对黑色素瘤细胞肺转移的作用。

    材料与方法

    一、肿瘤细胞和实验动物

    B16黑色素瘤细胞株购于上海细胞生物研究所，常规培养于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中。P-选择素敲除的小鼠 (P-sel-/-)购自Jackson lab(小鼠背景为C57)，6～8周龄。C57小鼠，购自广东省医学实验动物中心，6～8周龄，在无特定病原体(SPF)条件下饲养。

    二、肺转移模型建立

    1.实验动物分组和建模

    P-选择素敲除雌性小鼠(16只)为实验组，以C57雌性小鼠(15只)作为对照组。取对数生长期B16F10细胞，经胰酶消化后用无血清培养液重悬收集细胞，用无菌PBS调整细胞密度。用台盼蓝染细胞确定活细胞数在95%以上，于每只小鼠尾静脉注射1×105个(0.2 ml)细胞 ......