作者单位：510080 广州，中山大学附属第一医院妇产科

    不明原因复发性自然流产患者蜕膜组织中miR-21和miR-31的表达及其与FOXP3的相关性研究

    方利元李珠玉李银广李婕侯文汇游泽山

    【摘要】目的研究微小核糖核酸-21(miR-21)、miR-31和叉头样转录因子P3(FOXP3)在不明原因复发性自然流产(URSA)患者蜕膜中的表达情况，探讨miR-21、miR-31与FOXP3之间的相关性。方法运用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法测定miR-21、miR-31及FOXP3在URSA患者及正常对照组蜕膜组织中的表达情况，并分析miR-21、miR-31的表达与FOXP3表达的相关性。 结果FOXP3、miR-21在URSA组中的表达均明显低于正常对照组(P均0.05)。蜕膜组织中miR-21，miR-31的表达与FOXP3的表达相关(P均

    表1 miR-21、miR-31及内参

    4. FOXP3蛋白表达水平的检测

    采用蛋白免疫印迹法。细胞裂解液提取蜕膜组织全蛋白。取10 μl蛋白溶液在酶标仪(THERMO，美国)上定量。配好分离胶和浓缩胶后上样。电泳至标记物中目的条带分子量已完全分开后转膜。牛奶封闭，加一抗(1∶1 000)4℃摇床过夜，TBST缓冲液洗涤后二抗(1∶2 500)常温孵育2 h。ECL显色，胶片曝光压片。利用Image J软件对条带进行灰度分析处理，用FOXP3蛋白的条带与GAPDH条带的灰度比作为样本的表达强度。

    四、统计学处理

    结果

    一、绒毛染色体检查结果

    44例RSA患者中，绒毛染色体正常28例(即URSA，占64%)，绒毛染色体异常16例(占36%) ......