何卉欣 蒋梦萍 刘慧玲 江洁 尉秀清

    阻断TLR4信号通路对结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤生长和凋亡的影响

    何卉欣 蒋梦萍 刘慧玲 江洁 尉秀清

    目的研究阻断Toll样受体4(TLR4)信号通路对小鼠结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤生长和凋亡的影响。方法 建立结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤模型，12只鼠成瘤后随机分成实验组及对照组，分别腹腔内注射TLR4信号通路阻断剂CLI-095(3 mg/kg)和相同公斤体积的二甲基亚砜(DMSO)，并测定种植瘤的生长曲线；种植瘤石蜡包埋切片作苏木素-伊红染色观察病理组织学改变，TUNEL法检测瘤组织凋亡情况，蛋白免疫印迹法检测TLR4、cleaved caspase-3等蛋白表达。结果在实验结束时，实验组瘤体体积为(2.39±0.32)cm3，对照组瘤体体积为(1.77±0.25)cm3，实验组瘤体显著大于对照组(t＝3.817，P＝0.004)。实验组肿瘤细胞排列较致密，仅有局部坏死；对照组肿瘤细胞密度较低、排列散乱，坏死显著。实验组癌组织凋亡指数为(9.86±2.80)%，明显低于对照组的(22.57±4.93)%，t＝-7.091，P<0.001。2组癌组织TLR4蛋白的表达无显著差异，实验组cleaved caspase-3蛋白的表达显著低于对照组。结论阻断TLR4信号通路，可以抑制结肠癌细胞株CT26种植瘤细胞的凋亡，从而有利于肿瘤生长。

    结肠癌；TLR4；细胞凋亡；种植瘤

    基础研究论著

    结肠癌是目前世界第三大常见恶性肿瘤，也是中国最常见的肿瘤及肿瘤相关死亡原因，但目前关于结肠癌的病因及其发病机制仍未完全明了[1-2]。新近研究表明，先天性免疫在结肠癌发病机制中起了非常重要的作用[3]。Toll样受体4(TLR4)是一种非常重要的先天性免疫受体，其配体为外源性的脂多糖及内源性的热休克蛋白60等，不仅在免疫细胞上表达，近年来发现在多种肿瘤细胞上也有表达并表达上调，如结直肠癌、胃癌、乳腺癌、肝细胞等[4-7]。TLR4在结肠癌中的具体作用及作用机制仍未明确，本研究拟用TLR4信号通路阻断剂CLI-095腹腔注射于小鼠结肠癌细胞CT26裸鼠种植瘤模型，观察其对种植瘤的生长和凋亡的影响，以期初步明确TLR4在结肠癌中的生物学作用，并探讨其可能的作用机制[8]。

    材料与方法

    一、实验细胞株及实验动物

    1.实验细胞株

    小鼠结肠癌细胞CT26购于中国科学院上海生命科学院细胞资源中心。

    无特定病原体(SPF)级BALB/c Nude裸鼠12只 ......