张乐石 李志方 刘力学 薛伟宁 樊双义

    基础研究论著

    内吗啡肽在大鼠视网膜上的表达

    张乐石 李志方 刘力学 薛伟宁 樊双义

    目的 探讨内吗啡肽在视网膜的分布，内吗啡肽和μ阿片受体在视网膜的共存关系。方法 成年雄性SD大鼠12只，分为2组，一组为正常对照组(n＝6)，另一组建立高眼压模型(高眼压模型组，n＝6)。运用免疫组织化学方法观察内吗啡肽1(EM-1)、内吗啡肽2(EM-2)和μ阿片受体在视网膜中的分布和共存，并利用高眼压模型观察高眼压对EM-2在视网膜表达的影响。结果视网膜无EM-1分布；EM-2主要分布于视网膜节细胞层；EM-2与NeuN、μ阿片受体在视网膜节细胞层共存；高眼压模型大鼠视网膜节细胞层内单位面积表达EM-2的细胞数明显少于正常大鼠(0.8± 0.1个/mm3vs.4.6±0.8个/mm3)，差异有统计学意义(t＝3.88，P<0.05)。结论 EM-2分布在视网膜节细胞层，与μ阿片受体共存，在高眼压状态下，EM-2的表达减少。

    内吗啡肽；视网膜；高眼压；分布

    内吗啡肽是内源性阿片肽家族的一个成员，是1997年Zadina等[1]在牛脑中发现，对μ阿片受体具有高选择性的、强效的内源性配体。内吗啡肽是一个四肽，氨基酸残基序列为Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2 或Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2，分别命名为内吗啡肽1 (EM-1)和内吗啡肽2(EM-2)[2]。内吗啡肽在镇痛、心血管功能调节、呼吸功能调节以及消化功能调节都具有一定的作用，近期有文献报道在肠神经系统中发现内吗啡肽能神经元的分布，但内吗啡肽在视网膜的分布尚未见报道。脊椎动物的视网膜是一个复杂的、具有重要感知功能的组织，钙结合蛋白D-28k、钙视网膜蛋白、一氧化氮合酶等表达于哺乳动物视网膜，近期有文献报道内源性阿片肽家族的另一成员——脑啡肽在视网膜有表达，并与感光关系密切[3]。本文拟研究内吗啡肽在视网膜的分布，现将结果报告如下。

    材料与方法

    一、材料

    成年雄性SD大鼠12只，购自第四军医大学实验动物中心，分为2组，每组6只大鼠，一组为正常对照组，另一组建立高眼压模型。药品与试剂：兔抗EM-1多克隆抗体(1∶200 Abcam)；兔抗EM-2多克隆抗体(1∶200 Abcam)；小鼠抗NeuN多克隆抗体(1∶500 millipore)；生物素标记的驴抗兔多克隆抗体(1∶500 chemion)；Alexa594标记的羊抗小鼠多克隆抗体(1∶500 Invitrogen)；FITC标记的生物素(1∶1 000 Vector) ......