朱斌 周坚 陈芳 黎丽红 叶志海 夏鲁全

    基础研究论著

    正常产妇羊水、血浆蛋白质指纹图谱分析的研究

    朱斌 周坚 陈芳 黎丽红 叶志海 夏鲁全

    目的比对羊水、血浆蛋白质指纹图谱，寻找羊水特异性表达蛋白，为产科学的临床研究提供分子依据。方法应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪采用4种不同原理的蛋白芯片检测了12名正常足月产妇的羊水、血浆蛋白质指纹图谱。结果羊水和血浆标本分别测得蛋白信号(信噪比大于3)150个和250个。4种芯片检出羊水特异性蛋白30个，相对分子质量为11 198、12705 Da的蛋白是比较确定的羊水特异性蛋白。结论羊水中存在特异性表达蛋白，其在妊娠相关生理、病理学中可能起重要作用。

    羊水；血浆；蛋白质指纹图谱

    羊水对于胎儿的发育至关重要，羊水中蛋白可能与妊娠相关性疾病发生有关[1]。羊水和孕妇血浆中的蛋白质谱研究是寻找标志物的重要途径。表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是随着蛋白组学兴起而出现的新技术，是一种基于蛋白质芯片和质谱技术的蛋白质指纹图谱分析平台[2-7]。为寻找羊水特异性标志蛋白，本研究采用SELDI-TOF-MS分析12例正常足月产妇的羊水和血浆蛋白质组学，绘制并比对羊水和血浆蛋白质指纹图谱，旨在为产科学领域的研究提供可能的分子依据。

    材料与方法

    一、标本来源

    选择产检正常、足月择期行剖宫产的12例产妇为研究对象。术中行羊膜腔穿刺获得羊水标本，同时静脉穿刺采集静脉血5 ml，肝素抗凝，分离血浆后与羊水标本置-80℃冻存备用。

    二、主要仪器与试剂

    采用PBSⅡc型SELD1-TOF-MS质谱仪，WCX2离子交换型、IMC3金属螯合型、50反相型和Goldchip型蛋白芯片均为美国Liphergen公司产品，实验用水和试剂全部采用美国Sigma公司产品。

    三、方法

    血浆和羊水标本均采用相同的实验方法，共完成12对样品的检测。为保证检测的完整性和全面性，使样品中不同性质的蛋白质均被吸附而可检测，本研究采用4种不同原理的蛋白芯片，即WCX2离子交换型、IMC3金属螯合型、H50反相型和Goldchip型蛋白芯片 ......