肖硕 文九芳

    ·综述·

    基因敲除技术在维生素D受体研究中的应用进展

    肖硕文九芳

    434020 荆州，华中科技大学同济医学院附属荆州医院药剂科(肖硕)；434000 荆州，荆州市第一人民医院药剂科(文九芳)

    【摘要】基因敲除技术是一种新的生物遗传工程技术，在生物和医学领域的应用日趋广泛。维生素D通过维生素D受体的介导发挥多种生理作用，借助维生素D受体的基因敲除技术可更清楚地研究维生素D的多种生理功能，为以后的生物研究提供新的方向与方法。该文就基因敲除技术应用于维生素D受体后对机体肠道功能、抗肿瘤功能、心血管功能方面影响的研究进展作一综述。

    【关键词】基因敲除技术；维生素D；维生素D受体

    基因敲除技术是一种新型分子生物学遗传技术，它针对某个功能未知或者未明确的基因序列来改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失，屏蔽这部分功能，并进一步研究其对生物体造成的影响，从而推测出该基因的生物学功能[1]。维生素D与维生素D受体(VDR)是近年来儿科、心血管科、消化科研究的热门因子，维生素D在机体骨代谢之外的多种生物学功能已日益引起人们的重视，其功能的实现离不开VDR的介导。VDR是一种细胞内类固醇/甲状腺激素受体，维生素D的多种生理功能均通过其活性成分1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2-D3]与VDR结合介导调节生物体内的靶基因转录而实现。因此，深入研究VDR对明确维生素D的各种生理功能及其在生物医学上的作用有重要价值。传统的VDR研究基点在于VDR基因存在单个碱基突变，即单核苷酸多态性(SNP)，通过多聚酶链-限制性内切酶特异性酶切进行功能识别，研究其基因多态性。近年来，基因敲除技术发展逐渐成熟，对生物体内的VDR进行基因敲除有助于更清楚地研究其功能，对临床有重要意义。

    一、基因敲除技术的原理与特点

    基因敲除和基因嵌入技术是上世纪80年代末出现的最新外源DNA导入技术[2]。基因敲除技术类似于基因的同源重组，将外源DNA与受体细胞基因中序列相同或类似的基因发生同源重组，代替受体细胞基因组中该序列，整合入受体细胞的基因组中，属于外源基因在体内的定点整合,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术[3]。除了同源重组外，基因的插入突变和RNA干扰(RNAi)技术同样可以达到基因屏蔽的目的。基因敲除技术克服了基因随机整合的盲目性与随机性，是一种理想的改造生物遗传物质的方法，为我们提供了全新的研究手段。目前，基因敲除技术在生物医学上的应用主要在于动物模型的建立 ......