田黎 崔巍 孙红

    四君子汤含药血清抑制甲状腺癌侧群细胞生长的实验研究

    田黎崔巍孙红

    710000 西安，西安市北方医院老年科(田黎)；710043 西安，西安交通大学医学院第一附属医院内分泌科(崔巍)，肿瘤科(孙红)

    【摘要】目的评估四君子汤含药血清对甲状腺癌细胞株(KMH-2和8305C)生长的抑制作用。方法SD大鼠模型制备四君子汤含药血清；MTT试验检测四君子汤含药血清对甲状腺癌细胞株KMH-2和8305C体外增殖的影响；Annexin V/PI双染法检测四君子汤含药血清对KMH-2和8305C细胞凋亡的影响；流式细胞仪技术筛选和鉴定KMH-2和8305C的侧群细胞；并采用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cytochrome C和Caspase-3的表达水平变化。结果四君子汤含药血清显著抑制KMH-2和8305C细胞增殖和诱导细胞凋亡；KMH-2和8305C细胞中存在一定比例侧群细胞(1.45±0.01)%和(1.75±0.01)%，侧群细胞中ALDH、CD44和ABCG2蛋白表达水平较高；四君子汤含药血清可以上调Bax、下调Bcl-2、促进Cytochrome C释放，激活Caspase-3介导的细胞凋亡途径。结论四君子汤含药血清对甲状腺癌细胞中侧群细胞生长有抑制作用，而且这种抑制作用主要是通过诱导细胞凋亡产生。

    【关键词】四君子汤含药血清; 甲状腺癌; 侧群细胞; 细胞凋亡

    目前一些中国传统医药在治疗肿瘤上取得令人瞩目的疗效，得到国际上的认可和接受，如三氧化砷、靛玉红、苦参碱等[1-3]。四君子汤作为补脾益气的代表方剂临床主要应用于消化性胃溃疡以及脾虚体弱等疾病的治疗。近年一些研究发现四君子汤对于多种实体肿瘤具有一定的疗效[4]。有研究表明四君子汤能够有效抑制胃癌细胞株SGC-7901接种于裸鼠形成荷瘤的生长[5]。另有研究显示四君子汤还可以调控内分泌系统，如机体内血清T3、甲状腺素(T4)、TSH、下丘脑促甲状腺激素释放激素(TRH)的分泌水平[5]。众所周知，甲状腺癌发病与TSH、TRH等激素分泌异常具有密切关系[6-7]。目前关于四君子汤在甲状腺癌治疗中的作用尚未见报道，因此本研究检测四君子汤含药血清对甲状腺癌细胞株KMH-2和8305C生长和凋亡的影响，希望为甲状腺癌辅助治疗提供一种新的治疗策略。

    材料与方法

    一、药物制备

    四君子汤含药血清采用SD大鼠模型提取，先将四君子汤熬制成汤剂，详细步骤参考文献[8]。24只SD大鼠常规饲养于SPF级动物房 ......