李苗 付冰冰 吴霞 胡泽昆 孙晓鹏

    ·临床研究论著·

    系统性红斑狼疮与肠道菌群的相关研究

    李苗 付冰冰 吴霞 胡泽昆 孙晓鹏

    目的 探讨SLE与肠道菌群、炎症因子及疾病活动度之间的关系，以及经糖皮质激素(激素)联合羟氯喹治疗后三者的变化及其治疗作用机制。方法 选择25名健康体检者(正常对照组)及30例初诊SLE患者(SLE组)，后者接受为期3个月的激素联合羟氯喹治疗，分别收集正常对照组及SLE组患者治疗前后的粪便标本，应用SYBR Green I实时荧光定量PCR对大肠埃希菌、双歧杆菌、乳酸杆菌定量，同时应用ELISA法对外周血中IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平进行检测， 并行SLE疾病活动指数(SLEDAI)评价SLE患者的病情活动程度。结果 与正常对照组相比，治疗前SLE患者大肠埃希菌数较多(P0.05)；SLE患者SLEDAI评分降低(P对象与方法

    一、研究对象

    选取2014年1月至2014年12月佳木斯大学附属第一医院风湿免疫科门诊及住院部初诊SLE患者30例为SLE组，纳入标准：①年龄18～55岁；②符合美国风湿病学会1982年诊断标准，确诊为SLE。排除标准：①近4周内曾应用抗生素或微生物制剂；②近期有肠道手术史；③药物依从性差及不配合患者。其中男2例、女28例，年龄19～54岁、中位年龄26岁。另选择同期在我院行健康体检的25名健康人为正常对照组，该25人与30例SLE患者的性别构成、年龄比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。本研究的各个程序均符合医院伦理委员会所制定的伦理学标准，所有入组者均签署知情同意书。

    二、治疗方法

    所选取的初诊患者均根据2010年中华医学会SLE诊断及治疗指南规范治疗：联合使用激素和羟氯喹，剂量为泼尼松0.5～1 mg/(kg·d),或甲泼尼龙40～60 mg/d，持续应用1周，之后依据患者病情调整剂量，同时使用羟氯喹0.2～0.4 g/d。

    三、检测方法

    1. 主要试剂及仪器

    主要试剂包括日本Takara 2倍浓缩的实时定量PCR扩增的预混和溶液，Taq DNA 聚合酶，普通PCR产物纯化试剂盒，粪便基因组DNA提取试剂盒。主要仪器有美国Bio-Rad核酸蛋白检测仪，德国Biometra温度梯度PCR仪，北京六一电脑三恒多用电泳仪，上海领成Tocan凝胶成像分析仪，美国ABI 7300实时荧光定量PCR仪。

    2. 粪便标本采集及检测

    分别收集正常对照组和SLE组患者在治疗前及治疗3个月的粪便标本 ......