冯扬 赖重媛 陈静燕 古力切木·艾麦尔 廖松洁

    神经病理性疼痛(NP)是由体感神经系统疾病或病理损伤所直接导致的疼痛，在全球范围内的患病率是6.9%～10.0%[1-2]。NP对患者的身心健康产生不容忽视的不良影响[3]。由于NP的发生机制未知领域众多，导致目前临床疗效尚不理想。因此，对参与NP发生机制的更深入研究极具临床和科研价值。自噬是细胞内降解长寿蛋白与细胞器的一条主要通路，是近年来的研究热点，在神经病学领域，自噬与帕金森病、老年痴呆、肌肉病及脑血管疾病密切相关，而在以NP为表现的有关周围神经病的研究中，自噬也成为了新的研究方向[4-8]。最近研究显示在不同的NP模型中，脊髓的自噬改变虽然不完全相同，但抑制自噬后大鼠疼痛加重，提示增强自噬可以成为治疗NP的新方向[9]。不少文献报道NP中脊髓背角不同神经细胞自噬水平的改变可能参与其发生与发展[10-12]。而在经典的周围神经病理性疼痛模型即坐骨神经压迫模型(CCI)中，以坐骨神经探讨自噬的相关改变较少，笔者见目前国内文献尚无报道。因此，为了提高对NP中坐骨神经自噬发生的认识，笔者观察了大鼠慢性神经压迫后坐骨神经自噬水平的表达，并进一步观察坐骨神经内不同神经细胞的自噬形态。

    材料与方法

    一、实验动物

    采用36只体质量250～280 g、8周龄的成年雄性Sprague-Dawley大鼠(广东省医学动物中心，许可证号：SCXK粤2013-0011)作为实验动物。大鼠置于SPF级动物房中饲养，12 h光照，自由饮水进食，本研究中的实验动物均按照中山大学实验动物福利和伦理规范进行饲养和实验。

    二、材 料

    小动物手术器械购于深圳市瑞沃德生命科技有限公司；触觉测量套件购于Ugo Basile中国分公司；生理盐水、电镜固定液购于中山大学附属第一医院；dylight 488标记的山羊抗兔二抗免疫球蛋白G(1∶800，Jackson Immuno Reseach公司)；兔抗大鼠LC3抗体(1∶1 000，CST公司)；兔抗大鼠P62抗体(1∶500，CST公司)；HRP标记抗兔IgG二抗(1∶2 000，CST公司)。

    三、方 法

    1.动物分组

    采用随机数字表法将36只大鼠分为假手术组(Sham组)和坐骨神经结扎组(CCI组)各18只 ......